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Cultura Documentos
PRODOTTI
ALIMENTARI
PAOLO CABRAS
CARLO I.G. TUBEROSO
ANALISI DEI
PRODOTTI
ALIMENTARI
GESTIONE DEL LABORATORIO E DEI DATI
TECNICHE STRUMENTALI
BEVANDE
ALIMENTI DI ORIGINE VEGETALE
ALIMENTI DI ORIGINE ANIMALE
SOSTANZE INDESIDERABILI
ISBN 978-88-299-2311-3
Stampato in Italia
2014, by Piccin Nuova Libraria S.p.A. - Padova
www.piccin.it
COLLABORATORI
MARGHERITA ADDIS
ALBERTO ANGIONI
CINZIA BALLABIO
DAVIDE BERTELLI
GIOVANNA CONTARINI
TERENZIO BERTUZZI
CARLA DA PORTO
LUCIANO BODANO
VINCENZO BRANDOLINI
STEFANO BUIATTI
PIERLUIGI CABONI
PAOLO CABRAS
EMANUELE CARPANA
RICCARDO FABBRINI
RICCARDO FLAMINI
MARTA FONTANA
NATALE G. FREGA
VI
COLLABORATORI
AMEDEO PIETRI
FAUSTA GIUFFR
MARIA PLESSI
ALYSSA HIDALGO
ANTONIO IBBA
MONICA LOCATELLI
ANNALISA MAIETTI
MARINELLA MELIS
MASSIMO MOZZON
ANNARITA PANIGHEL
MILENA POVOLO
PATRIZIA RESTANI
MARGHERITA ROSSI
M. FRANCESCA SCINTU
PAOLA TEDESCHI
FABIANO TRAVAGLIA
PAOLO PASSAGHE
SIMONA VARGIU
VII
PREFAZIONE
egli ultimi anni si sviluppata nei consumatori una particolare attenzione verso le
caratteristiche sensoriali, nutrizionali e igienico-sanitarie dei vari prodotti alimentari e la sicurezza alimentare diventata un prerequisito
per valutarne la qualit.
Al fine di garantire la qualit igienico-sanitaria, lUnione Europea ha emesso alcuni regolamenti in base ai quali la responsabilit di
questo parametro attribuita agli operatori del
settore alimentare, dal produttore, al distributore, al venditore che hanno lobbligo di agire
in sinergia per il raggiungimento dellobiettivo
comune di preservare la salute del consumatore. In particolare, il Reg. CE n 178/2002 del
28/01/2002 ha stabilito i principi e i requisiti
generali della legislazione alimentare, istituendo lAutorit Europea per la Sicurezza Alimentare (EFSA, European Food Safety Authority).
Sono state fissate linee guida e procedure atte
a valutare e gestire la sicurezza alimentare,
sia per gli alimenti in senso stretto e per i loro
componenti intrinseci, che per qualsiasi altra
sostanza destinata a entrare a far parte di un
prodotto alimentare, rendendo la rintracciabilit un aspetto fondamentale della qualit in
questo campo.
Questo testo stato concepito con lo scopo di riunire in un unicum le tecniche e le metodologie analitiche pi aggiornate nellanalisi
delle sostanze chimiche responsabili sia della
qualit chimico-nutrizionale degli alimenti che
degli aspetti tossicologici. Gli argomenti trattati
sono stati suddivisi in sei sezioni. Nella prima
sono state riportate le procedure di accreditamento dei laboratori e gli elementi di statistica
necessari per il controllo e la validazione dei
metodi analitici. Nella seconda sezione sono
state descritte le analisi strumentali pi comunemente usate nel controllo analitico degli
alimenti, come le tecniche spettrofotometriche
(UV-Vis, AA, EA), cromatografiche (GC e HPLC)
e lelettroforesi capillare. Seguono le procedure
di controllo degli alimenti suddivisi in bevande
(acqua, vino, aceto, birra e bevande spiritose),
alimenti di origine vegetale (cereali e olio) e
animale (carne, uova, latte, burro, formaggio
e miele). Lultima sezione tratta gli argomenti
relativi a problematiche igienico-sanitarie derivanti dalla presenza di agrofarmaci, micotossine e allergeni.
Il libro, destinato agli studenti delle Facolt
di Agraria, Farmacia e Scienze, rappresenta uno
strumento utile per tutti gli operatori coinvolti
nel controllo di qualit delle produzioni agroalimentari.
Questo libro chiude la trilogia di testi di cui
sono stati gi pubblicati Prodotti Dietetici (F.
Evangelisti e P. Restani) e Chimica degli Alimenti (A. Martelli e P. Cabras). Alla sua stesura sono
stati chiamati esperti nazionali con competenze
nel controllo chimico-tossicologico dei diversi
settori dellindustria alimentare. A tutti loro va
il ringraziamento per aver accettato lincarico e
portato a termine limpegno assunto.
P. CABRAS
C.I.G. TUBEROSO
IX
PERSONALE
INDICE GENERALE
PARTE I
GESTIONE DEL LABORATORIO
E DEI DATI
1. ACCREDITAMENTO DI UN
LABORATORIO PER IL CONTROLLO
DEI PRODOTTI ALIMENTARI . . . . . . . . 3
R. Fabbrini e F. Giuffr
Introduzione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1. Programma per lAssicurazione
della Qualit PAQ . . . . . . . . . . . . .
1.1. Considerazioni generali . . . . . . . . .
1.2. Struttura del manuale della qualit . .
2. Personale . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
2.1. Considerazioni generali . . . . . . . . .
2.2. Personale del laboratorio
(qualifiche e responsabilit) . . . . . . .
2.3. Formazione ed aggiornamento
del personale . . . . . . . . . . . . . . . .
2.4. Registrazione del personale . . . . . . .
2.5. Documentazione . . . . . . . . . . . . . .
3. Laboratorio . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
3.1. Considerazioni generali . . . . . . . . .
3.2. Requisiti generali . . . . . . . . . . . . .
3.3. Archivio centrale . . . . . . . . . . . . . .
3.4. Documentazione . . . . . . . . . . . . . .
4. Campioni . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
4.1. Considerazioni generali . . . . . . . . .
4.2. Campionamento . . . . . . . . . . . . . .
4.3. Ricezione, codificazione
e registrazione dei campioni. . . . . . .
4.4. Conservazione del campione in prova
4.5. Aliquota in prova. . . . . . . . . . . . . .
4.6. Archiviazione post-analisi
dei campioni in prova . . . . . . . . . . .
4.7. Smaltimento dei campioni in prova . .
4.8. Documentazione . . . . . . . . . . . . . .
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13
5. Materiali di laboratorio . . . . . . . . . .
5.1. Considerazioni generali . . . . . . .
5.2. Materiali standard . . . . . . . . . . .
5.3. Materiali standard di laboratorio .
5.4. Materiali di riferimento . . . . . . .
5.5. Materiali di riferimento certificati .
5.6. Criteri per lacquisto dei materiali .
5.7. Registrazione, conservazione
e scadenza dei materiali . . . . . . .
5.8. Smaltimento materiali . . . . . . . .
5.9. Documentazione . . . . . . . . . . . .
6. Apparecchiature . . . . . . . . . . . . . .
6.1. Considerazioni generali . . . . . . .
6.2. Criteri per lacquisto . . . . . . . . .
6.3. Manutenzione e taratura . . . . . . .
6.4. Registrazioni . . . . . . . . . . . . . .
6.5. Limitazioni duso. . . . . . . . . . . .
6.6. Documentazione . . . . . . . . . . . .
7. Metodi di prova e procedure . . . . . . .
7.1. Considerazioni generali . . . . . . .
7.2. Parametri di qualit
di un metodo di prova . . . . . . . . .
7.3. Valutazione di un metodo di prova
7.4. Controllo di qualit
di un metodo di prova . . . . . . . . .
7.5. Documentazione . . . . . . . . . . . .
8. Controllo di qualit. . . . . . . . . . . . .
8.1. Considerazioni generali . . . . . . .
8.2. Valutazione dellaccuratezza
e della precisione . . . . . . . . . . . .
8.3. Carte di controllo . . . . . . . . . . .
8.4. Documentazione . . . . . . . . . . . .
9. Registrazione e archiviazione
dei risultati delle prove . . . . . . . .
9.1. Considerazioni generali . . . . . . .
9.2. Registrazione delle prove . . . . . .
9.3. Rapporto di prova finale . . . . . . .
9.4. Documentazione . . . . . . . . . . . .
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INDICE GENERALE
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31
2. ANALISI STATISTICA
NEL CONTROLLO DI QUALIT
DEI METODI ANALITICI . . . . . . . . . . 33
V.L. Garau e S. Vargiu
Introduzione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1. Campionamento . . . . . . . . . . . . . . . .
2. Statistica delle misure ripetute . . . . . . .
2.1 Misure ed errori analitici . . . . . . . . .
2.2 Stime del valore centrale
e della dispersione . . . . . . . . . . . . .
2.2.1 Media e deviazione standard . . . .
2.3 Distribuzione statistica dei risultati
di una misura . . . . . . . . . . . . . . . .
2.3.1 Distribuzione statistica dei dati:
distribuzione di Gauss. . . . . . . . . . .
2.3.2 Intervallo di fiducia o intervallo
di confidenza . . . . . . . . . . . . . . . .
2.3.3 Limiti di confidenza (o limite
di attendibilit o limite di affidabilit)
2.3.4. Distribuzione delle medie. . . . . .
2.4. Propagazione degli errori casuali . . .
2.5. Presentazione dei risultati:
cifre significative . . . . . . . . . . . . . .
3. Test statistici di significativit . . . . . . . .
3.1. Test di Student: t-test . . . . . . . . . . .
4. Metodi quantitativi nellanalisi
strumentale . . . . . . . . . . . . . . . . .
4.1. Correlazione. . . . . . . . . . . . . . . . .
4.2. Intervallo dinamico e intervallo
lineare. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
4.3. Sensibilit . . . . . . . . . . . . . . . . . .
4.4. Regressione lineare . . . . . . . . . . . .
4.5. Metodo dello standard esterno . . . . .
4.6. Metodo delle aggiunte standard . . . .
4.7. Metodo dello standard interno . . . . .
5. Parametri di qualit dei metodi analitici .
33
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34
36
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62
62
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66
PARTE II
TECNICHE STRUMENTALI
3. SPETTROFOTOMETRIA UVVIS . . . 69
C.I.G. Tuberoso
Introduzione . . . . . . . . . . . . . . . . .
1. La radiazione UV-VIS. . . . . . . . . . .
2. Analisi quantitativa
nella spettrofotometria . . . . . . .
3. Lo spettro e lanalisi qualitativa . . . .
4. Gli spettrofotometri . . . . . . . . . . .
4.1. La lampada . . . . . . . . . . . . . .
4.2. Il monocromatore . . . . . . . . . .
4.3. Le celle (cuvette) . . . . . . . . . . .
4.4. I rivelatori . . . . . . . . . . . . . . .
5. I colorimetri . . . . . . . . . . . . . . . .
6. Applicazioni della spettrofotometria
UV-VIS allanalisi alimentare. . . .
Bibliografia . . . . . . . . . . . . . . . . . .
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4. SPETTROFOTOMETRIA
DI ASSORBIMENTO ATOMICO
ED EMISSIONE ATOMICA . . . . . . . . . 83
L. Bodano
Introduzione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1. Teoria . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1.1. La struttura dellatomo . . . . . . . . . .
1.2. Le tecniche spettroscopiche
e gli spettri . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1.3. Prestazioni e analisi quantitativa in AA .
2. Strumentazione . . . . . . . . . . . . . . . . .
2.1. Spettrometria di Assorbimento
Atomico (AAS). . . . . . . . . . . . . . . .
2.1.1. Spettrometria di assorbimento
atomico a fiamma (AAF) . . . . . . . . .
83
83
83
85
90
91
91
95
XI
INDICE GENERALE
5. ELETTROFORESI . . . . . . . . . . . . 139
V. Brandolini, A. Maietti e P. Tedeschi
Introduzione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 139
1. Principali tipi di elettroforesi . . . . . . . 139
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. 176
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. 179
XII
INDICE GENERALE
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213
PARTE III
BEVANDE
9. LACQUA . . . . . . . . . . . . . . . . . 225
L. Bodano
Introduzione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 225
1. Legislazione . . . . . . . . . . . . . . . . . . 234
2. Campionamento . . . . . . . . . . . . . . . 247
3. Metodi di analisi . . . . . . . . . . . . . . . 248
3.1. Esempi di metodi analitici ISTISAN . 251
3.1.1 Determinazione della durezza totale.
Metodo titrimetrico allEDTA . . . . . 253
3.1.2. Determinazione dei cloruri.
Titolazione argentometrica
con indicatore colorimetrico. . . . . . 256
3.1.3. Determinazione dei cationi calcio,
litio, magnesio, potassio, sodio.
Metodo per cromatografia ionica. . . 259
Bibliografia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 263
INDICE GENERALE
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326
326
2.2. Malto . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
2.3. Luppolo e suoi prodotti . . . . . . . .
2.4. Mosto . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
2.5. Birra. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
3. Metodi analitici . . . . . . . . . . . . . . . .
3.1. Analisi dellorzo . . . . . . . . . . . . .
3.1.1. Umidit . . . . . . . . . . . . . . . .
3.1.2. Azoto totale (proteine):
metodo Kjedahl . . . . . . . . . . . . . .
3.1.3. Peso mille semi . . . . . . . . . . .
3.1.4. Capacit germinativa . . . . . . . .
3.1.5. Energia germinativa . . . . . . . .
3.1.6. Beta-glucani . . . . . . . . . . . . .
3.2. Analisi del malto . . . . . . . . . . . . .
3.2.1. Umidit . . . . . . . . . . . . . . . .
3.2.2. Friabilit . . . . . . . . . . . . . . .
3.2.3. Estratto sul tal quale . . . . . . . .
3.2.4. Azoto totale (proteine) . . . . . .
3.2.5. Azoto solubile . . . . . . . . . . . .
3.2.6. Azoto amminico libero (FAN) . .
3.2.7. Potere diastatico . . . . . . . . . .
3.3. Analisi del luppolo. . . . . . . . . . . .
3.3.1. Umidit . . . . . . . . . . . . . . . .
3.3.2. Alfa- e beta-acidi . . . . . . . . . .
3.3.3. Oli essenziali . . . . . . . . . . . . .
3.3.4. Contenuto di semi . . . . . . . . .
3.4. Analisi del mosto. . . . . . . . . . . . .
3.4.1. Densit relativa . . . . . . . . . . .
3.4.2. Estratto sul tal quale . . . . . . . .
3.4.3. Viscosit . . . . . . . . . . . . . . . .
3.4.4. Colore . . . . . . . . . . . . . . . . .
3.4.5. Fermentescibilit - attenuazione
apparente. . . . . . . . . . . . . . . . . .
3.4.6. Azoto totale. . . . . . . . . . . . . .
3.4.7. Azoto amminico libero (FAN) . .
3.4.8. Polifenoli totali. . . . . . . . . . . .
3.4.9. Zinco . . . . . . . . . . . . . . . . . .
3.4.10. Amaro . . . . . . . . . . . . . . . .
3.4.11. Beta-glucani . . . . . . . . . . . .
3.4.12. pH . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
3.5. Analisi della birra . . . . . . . . . . . .
3.5.1. Alcol etilico . . . . . . . . . . . . . .
3.5.2. Estratto reale. . . . . . . . . . . . .
3.5.3. Attenuazione finale . . . . . . . . .
3.5.4. Carboidrati totali . . . . . . . . . .
3.5.5. Carboidrati fermentescibili . . . .
3.5.6. Grado reale di fermentazione
(RDF) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
XIII
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329
330
331
331
331
331
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344
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349
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350
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358
359
359
362
362
363
364
366
XIV
INDICE GENERALE
3.5.7. Amaro . . . . . . . . . . . . . . . . .
3.5.8. Colore . . . . . . . . . . . . . . . . .
3.5.9. Azoto totale. . . . . . . . . . . . . .
3.5.10. Azoto amminico libero (FAN) .
3.5.11. Polifenoli totali. . . . . . . . . . .
3.5.12. Metalli . . . . . . . . . . . . . . . .
3.5.13. Dichetoni vicinali
(diacetile e 2,3-pentandione) . . . . .
3.5.14. Anidride carbonica . . . . . . . .
3.5.15. Anidride solforosa. . . . . . . . .
3.5.16. Torbidit . . . . . . . . . . . . . .
3.5.17. Predizione della shelf-life . . . .
3.5.18. pH . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
3.5.19. Ossigeno disciolto . . . . . . . . .
3.5.20. Dimetilsolfuro (DMS) e altri
composti volatili presenti nella birra
3.5.21. Proteine sensibili . . . . . . . . .
3.5.22. Torbidit a freddo
(test di Chapon). . . . . . . . . . . . . .
3.5.23. Stabilit della schiuma . . . . . .
Bibliografia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
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368
368
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PARTE IV
ALIMENTI DI ORIGINE VEGETALE
14. CEREALI . . . . . . . . . . . . . . . . 437
M.G. DEgidio
Introduzione . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1. Legislazione . . . . . . . . . . . . . . . . . .
2. Campionamento . . . . . . . . . . . . . . .
3. Metodi analitici . . . . . . . . . . . . . . . .
3.1. Metodi fisici e chimici. . . . . . . . . .
3.1.1. Determinazione della Massa
per ettolitro o Peso ettolitrico . . . . .
3.1.2. Determinazione della massa
di 1000 semi . . . . . . . . . . . . . . . .
3.1.3. Determinazione della vitrosit. .
3.1.4. Determinazione delle difettosit
e impurit . . . . . . . . . . . . . . . . .
3.1.5. Determinazione delle impurit
solide (Filth test) . . . . . . . . . . . . .
3.1.6. Determinazione del contenuto
di umidit . . . . . . . . . . . . . . . . .
3.1.7. Metodo per la determinazione
delle ceneri. . . . . . . . . . . . . . . . .
3.1.8. Determinazione del contenuto
in sostanze azotate . . . . . . . . . . . .
3.1.9. Determinazione del contenuto
in amido . . . . . . . . . . . . . . . . . .
3.1.10. Determinazione del contenuto
in grassi totali . . . . . . . . . . . . . . .
3.1.11. Determinazione del contenuto
in steroli . . . . . . . . . . . . . . . . . .
3.1.12. Determinazione dellacidit
libera . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
3.1.13. Determinazione della fibra
dietetica alimentare totale . . . . . . .
437
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INDICE GENERALE
. 505
. 508
. 508
. 508
. 509
. 509
. 509
. 511
XV
XVI
INDICE GENERALE
PARTE V
ALIMENTI DI ORIGINE ANIMALE
16. CARNE . . . . . . . . . . . . . . . . . 581
M.F. Scintu e M. Addis
Introduzione . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1. Legislazione . . . . . . . . . . . . . . . . . .
2. Campionamento, modalit di prelievo e
utilizzazione dei campioni di carne .
2.1. Momento del prelievo. . . . . . . . . .
2.2. Muscoli . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
2.3. Trasporto . . . . . . . . . . . . . . . . .
2.4. Suddivisione e preparazione
delle porzioni da analizzare . . . . . .
3. Metodi analitici . . . . . . . . . . . . . . . .
3.1. Determinazione dellumidit. . . . . .
3.2. Determinazione delle ceneri . . . . .
3.3. Determinazione dellazoto
e delle proteine . . . . . . . . . . . . . .
3.4. Determinazione dei lipidi . . . . . . .
3.4.1. Determinazione dei lipidi grezzi
o estratto etereo . . . . . . . . . . . . .
3.4.2. Determinazione del profilo
degli acidi grassi totali . . . . . . . . .
3.5 Analisi HPLC della vitamina E
e del colesterolo . . . . . . . . . . . . .
Bibliografia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
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INDICE GENERALE
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XVII
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691
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694
695
XVIII
INDICE GENERALE
PARTE VI
SOSTANZE INDESIDERABILI
22. AGROFARMACI (PESTICIDI) . . . . 777
P. Cabras, M. Melis e A. Angioni
Introduzione . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1. Metodi per la determinazione
degli agrofarmaci nelle derrate
alimentari . . . . . . . . . . . . . . . . .
2. Campionamento . . . . . . . . . . . . . . .
3. Preparazione del campione . . . . . . . .
4. Estrazione . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
4.1. Metodo SPE . . . . . . . . . . . . . . . .
4.2. Metodo SPME . . . . . . . . . . . . . . .
4.3. Metodo di dispersione in fase
solida (MSPD) . . . . . . . . . . . . . . .
4.4. Metodo SFE . . . . . . . . . . . . . . . .
4.5. Metodo di microestrazione . . . . . .
4.6. Stir-Bar Sorptive Extraction (SBSE) .
4.7. Microwave-Assisted Extraction
(MAE) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
4.8. Metodo QuEChERS. . . . . . . . . . . .
5. Purificazione. . . . . . . . . . . . . . . . . .
6. Analisi strumentale . . . . . . . . . . . . .
7. Esempi di analisi degli agrofamarci
su derrate alimentari . . . . . . . . . .
7.1. Metodi LLE e SLE. . . . . . . . . . . . .
7.2. Metodo SPE . . . . . . . . . . . . . . . .
7.3. Metodo SPME . . . . . . . . . . . . . . .
7.4. Metodo di dispersione in fase
solida (MSPD) . . . . . . . . . . . . . . .
7.5. Metodo QuEChERS. . . . . . . . . . . .
Bibliografia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
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INDICE GENERALE
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XIX
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834
836
838
C. Ballabio e P. Restani
Introduzione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 847
1. Campionamento . . . . . . . . . . . . . . . 848
2. Metodi analitici . . . . . . . . . . . . . . . . 849
2.1. Tecniche elettroforetiche . . . . . . . 850
2.1.1. Messa a punto di un metodo per
lidentificazione di un allergene
(arachide) come contaminante in farina
di grano tenero mediante SDS-PAGE. 851
2.2. Tecniche immunoelettroforetiche . . 855
2.2.1. Identificazione di proteine di carne
bovina in traccia in carne di pollo/maiale
mediante Immunoblotting . . . . . . . 856
2.3. Tecniche immunochimiche . . . . . . 859
2.3.1. Metodo ELISA Sandwich. . . . . . 860
2.3.2. Metodo ELISA indiretto . . . . . . 864
2.3.3. Metodo ELISA competitivo . . . . 867
Bibliografia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 871