ACTIVIDAD ENZIMTICA DE LA AMILASA

INTRUCCION:
Las enzimas son catalizadores biolgicos de naturaleza proteica. Esto significa que
son protenas cuya funcin es acelerar las reacciones bioqumicas. Aunque se
trata de protenas muchas requieren, para ser activas, un componente no proteico
conocido como coenzima o grupo prosttico, segn se encuentre dbil o
firmemente asociado a la matriz proteica. La estructura de este componente no
proteico va a variar desde un ion (Ca2+, Mg2+, Mn2+, y otros) hasta molculas
complejas como NAD+ NADP+ y FAD. En estos casos la actividad enzimtica va a
depender de la presencia simultnea de una porcin proteica (apoenzima) y una
porcin no proteica (coenzima) y el conjunto activo apoenzima ms coenzima, se
conoce como holoenzima.
Una consecuencia del hecho de que las reacciones bioqumicas sean catalizadas
por enzimas es la especificidad de stas hacia el substrato: una enzima cataliza la
transformacin de un solo tipo de molcula o de unos tipos diferentes de molculas
estructuralmente muy relacionadas, la especificidad representa una ventaja para la
clula.
Hay diferentes factores que afectan la actividad de las enzimas. Los factores ms
importantes son: concentracin de enzima, concentracin de ligandos (sustratos,
productos, inhibidores y activadores), pH, fuerza inica y temperatura.
La actividad de las enzimas estn fuertemente afectadas por la temperatura. Hay
dos factores determinantes, el efecto de la temperatura en las constantes de
velocidad de la reaccin y el efecto de la temperatura en la estabilidad de la
enzima. Como es de esperar, un aumento de la temperatura aumenta la velocidad
de la reaccin; sin embargo, sobre cierta temperatura hay inactivacin de la
enzima que lleva a una disminucin en la velocidad. La zona de temperatura en la
cual se observa mayor actividad se conoce como temperatura ptima.
Las reacciones enzimticas se ven notablemente afectada por el pH del medio. En
general, son slo activas en un rango limitado de ste, observndose en la
mayora de los casos una zona de pH ptimo y una disminucin de la actividad a
ambos lados del pH ptimo. El efecto del pH en la actividad enzimtica se debe
fundamentalmente a cambios en el estado de ionizacin de los componentes del
sistema; esto puede darse en la enzima libre, en el complejo E-S o en el sustrato.

1. OBJETIVOS:
Interpreta la accin enzimtica sobre sustratos especficos
Identifica el efecto de la temperatura sobre la velocidad de la reaccin
Determina el efecto del pH sobre la cintica enzimtica.
determina el efecto de activadores e inhibidores sobre la cintica
enzimtica.

2. MATERIALES Y METODO (PROCEDIMIENTO):

Actividad Enzimtica de la -amilasa salival:

La enzima -amilasa, presente en la saliva, inicia la degradacin del almidn, la
principal fuente de carbohidratos de la dieta humana. Esta enzima hidroliza al azar los
enlaces (14) que unen residuos de glucosa en el almidn, a excepcin de los
enlaces cercanos a los extremos y a los puntos de ramificacin de las cadenas. Por la
accin de esta enzima activada por iones cloruro, en la boca la longitud de la cadena
del almidn se reduce de varios miles a unas ocho unidades de glucosa. La alta
concentracin de protones del estmago inactiva la -amilasa salival. La digestin del
almidn contina en el intestino delgado por la accin de la -amilasa pancretica,
como producto se forma una mezcla del disacrido maltosa, el trisacrido maltotriosa y
oligosacridos conocidos como dextrinas que poseen ramificaciones (16).
El almidn y dextrinas complejas al ser tratados con una solucin de yodo dan un
complejo de coloracin azul, mientras que las dextrinas ms simples, la maltotriosa y
maltosa no dan una reaccin positiva. As, la accin de la -amilasa sobre
polisacridos puede ser seguida midiendo la decoloracin del complejo azul hasta
alcanzar el punto acrmico (solucin incolora).
La maltosa y otros carbohidratos reductores producidos en la reaccin pueden ser
detectados por el test de Fehling. Este mtodo es cualitativo, consiste en una solucin
alcalina de Cu2+ que se encuentra formando un complejo con citrato. El in cprico es
reducido a Cu1+ por compuestos reductores con formacin de hidrxido cuproso
amarillo o de xido cuproso rojo. El cambio de coloracin o la formacin de un
precipitado rojo-ladrillo (Cu2O) indican la presencia de un compuesto reductor.

3. RESULTADOS:

Al experimentar con las sustancias apropias nos dio un

resultado positivo de acuerdo a lo establecido en la teora y
lo que se haba planteado desde el principio.
En algunos casos la amilasa salival era muy concentrada y
al ser combinada con el almidn y con los diferentes
reactivos que se estableci en la teora se pudo apreciar
una diferencia en el color ya que al estar muy concentrada
esta sintetizo al reactivo y no lo pinto con el color
esperado.

4. DISCUSIN (ANALISIS DE LOS RESULTADOS):

La repuesta inesperada del color en las soluciones las cuales se
esperaba una desnaturalizacin o una inhibicin, lo cual se debi a la
concentracin de la amilasa de acuerdo al grado con las cuales las
enzimas pudieron sintetizar al producto antes de que se pudieran
desnaturalizar o inhibir lo cual hicieron que el color sea ms transparente
con el reactivo que capta las reacciones que tienen las enzimas o lo que
no puede hacer de acuerdo al reactivo al cual se le suministre, en este
caso con almidn, se lo expuso a diferentes mtodos para su sntesis
con la enzima, o cual eran diferentes factores, temperatura y reactantes
que darn mayor rapidez o inhibirn a la enzima.

5. CONCLUSIONES:
El objetivo y la hiptesis, se complet favorablemente dndonos resultados
positivos de acuerdo a los objetivos planteados en las pruebas y
experimentaciones hechas en la cesin de clase lo cual llevo mucho cuidado y
dedicacin a determinar las propiedades y reacciones que tienen los lpidos y
protenas con ciertas sustancias.

6. BIBLIOGRAFIA:

Fregene, M. Cabal, D. 2004. Regulacin de la biosntesis del almidn en

plantas terrestres. Vol. 25
Bernal, L. / Martnez, E. 2006. UNA NUEVA VISIN DE LA DEGRADACIN
DELALMIDN.Ciencia e investigacin. Vol.15. pg.: 77-90Tofio, A. Romero,
M. y Ceballos, H. 2005.
Efecto del estrs abitico sobre la sntesis y degradacin de almidn. Vol. 36