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Coordinador General
Dr. Emilio Porras Hernndez
Coordinadora Jurdica
Dra. Viviana Adriana Fernndez
Representante Tcnico
Vernica Herrero Ducloux
Mdica Anatomopatloga
Profesionales
Gabinete Anatomopatologa
Jacobo Mathas
Tcnico Histopatolgico y Eviscerador
Gabinete Toxicologa
Gabinete Gentica
ndice
I.
Normas Generales
Artculo
3.
CARCTER
RESERVADO
DE
LOS
ESTUDIOS.
Toda
II.
Procedimiento
Artculo 14. Concluido el estudio de las muestras aceptadas o aceptadas con reserva y
producido el informe, el material pericial se devolver al Cuerpo Mdico Forense y/o
Oficina de Secuestros con la debida cadena de custodia, quedando en resguardo del
gabinete patolgico los tacos, vidrios y copias del informe.
ANEXO I
RECOMENDACIONES
ANEXO II
PRESERVACION DE MUESTRAS
TOXOCOLOGICAS
I-
DOCUMENTACIN
Todo material enviado al laboratorio deber tener, con la mayor claridad posible, todos
los datos que permita orientar la investigacin. Se deber
llenar el formulario
CADENA DE CUSTODIA
La cadena de custodia es el procedimiento que asegura que la muestra que se
procesa en el laboratorio toxicolgico no sea alterada, sustituida, cambiada o
manipulada entre el momento en que sta se recoge hasta el momento en el que finaliza
el anlisis.
Para cumplir con el objetivo es conveniente que el laboratorio cuente con una
normativa escrita para la aplicacin de cada paso de la cadena de custodia y que la
misma sea conocida por quienes intervienen en ella. Dado que desde el inicio hasta el
final del entero proceso la muestra puede ser manipulada por varias personas, la
participacin de las mismas debe quedar debidamente documentada, de manera tal que
si hay una intervencin judicial no se desplome la evidencia. Anexo II Cadena de
custodia
9
II-
ETIQUETADO Y EMBALAJE
III-
MUESTRAS
CANTIDAD
ESTUDIO
CONSERVACIN
Sangre cardaca(*)
30 ml (lado derecho
Colinesterasa
Heladera
Con anticogulante
Alcoholemia
(mximo 2 semanas)
CO
Sangre perifrica
10 ml (vena femoral
Colinesterasa
Heladera
(*)
derecha o izquierda)
Alcoholemia
(mximo 2 semanas)
Con anticogulante
CO
Sangre perifrica
10 ml (vena femoral
LDH
Centrifugar lo antes
(*)
derecha o izquierda)
CPK
posible y separar el
Colinesterasa
suero
Sin anticogulante
El suero Freezer
Orina
Todo lo disponible
Drogas
Heladera , si no se
Alcohol
enva inmediatamente
Freezer
Contenido
Todo lo disponible
Drogas
Heladera , si no se
y separado de cada
Alcohol
enva inmediatamente
ojo
Freezer
Todo lo disponible
Freezer
estomacal
Bilis
Todo lo disponible
Opiceos
Freezer
Cerebro
25-50 grs.
Sustancias
Freezer
11
liposolubles,
drogas
Rin, Hgado,
25-50 grs.
Bazo
Txicos en
Freezer
general
Pulmn
Hisopados (nasal,
Los que se
vaginal, otros)
consideren
Gases
Freezer
Freezer
convenientes
Grasa subcutnea
Piel y grasa
Insecticidas
y/o msculo
adyacente. Msculo
organoclorado
esqueltico (**)
Pelo
Mechn cortado en
la base del crneo
del tamao de un
lpiz. Marcar el
extremo de la raz y
punta. Envolver en
papel metalizado.
(*) Sin Cmara de aire se logra llenando el recipiente hasta el borde asegurando muy
bien su cierre
(**) Para investigar posibles sitios de inyeccin, se debe remitir, adems del posible
lugar de inoculacin, una muestra blanco de grasa y/o msculo alejada del sitio de
inyeccin.
12
RECOMENDACIONES
SANGRE
13
ORINA
Este tipo de muestra es idnea para realizar un estudio de screening en el caso de no
conocer el origen de la intoxicacin. Otra ventaja es que la concertacin del analito
puede ser mayor que en sangre. Adems, en general, la orina est exenta de protenas,
con lo cual se tienen menos interferencias. Es una muestra ms abundante, fcil de
recolectar y de conservar.
No utilizar conservante
VISCERAS
HUMOR VITREO
Se realiza resecando completamente el globo ocular o bien a travs de una puncin del
mismo con aguja y jeringa. Muchas veces se remite humor acuoso y no humor vtreo ya
que la densidad de ste ltimo hace dificultosa la extraccin, por lo tanto debe ponerse
atencin cuando se enva esta matriz.
No utilizar conservante
Para determinacin de Postasio (K) para determinar hora de muerte la muestra no
debe estar hemolizada.
PELO:
IV-
16
V-
1. MANCHAS SECAS
Colillas, armas blancas, monedas, llaves, piedras, ramas, papeles. Recoger por separado
e introducirlas en bolsas de papel o cajas.
17
2. INDICIOS HMEDOS
Ropas, tapiceras, toallas: Introducir por separado en bolsas de papel madera, Trasladar
rpidamente a instalaciones adecuadas, Dejar secar en lugar protegido y sobre una
superficie limpia y envolver en papel (por separado). Guardar en bolsas de papel.
3. INDICIOS LQUIDOS
Sangre
- En gran cantidad: recoger con pipeta de plstico y depositarla en un tubo con EDTA,
refrigerar.
- En pequea cantidad: recoger con hisopo y dejar secar.
- Coagulada: recoger con una cucharita e introducir en tubo o frasco de plstico,
refrigerar.
Semen
- Preservativos con semen lquido: atar e introducir en un frasco de plstico, refrigerar.
- En escasa cantidad: recoger con hisopo y dejar secar.
Lquido amnitico
- 10 ml, que se introducen en un tubo, refrigerar.
Orina
- Recoger con pipeta de plstico desechable y depositarla en un tubo o frasco, refrigerar
o congelar.
4. PELOS
Recolectar cada pelo con pinzas (desechables o bien limpias) y guardarlo en una bolsa
de papel
18
IV- BIBILOGRAFA
19
20
DETERMINAC
IN
MUESTRA
Recoleccin
y
transporte
Ocupacional
Acetona
:
miccin
espontnea
post-jornada
laboral en
tubo
plstico sin
cmara de
aire.
Ambiental:
orina
de
24hs.
(recipiente
plstico de
agua
mineral)
*
de
cido
- Orina
Aminolevulnico 24hs.
(recipiente
urinario
plstico de
agua
mineral)
Ocupacional
*cido
:
miccin
fenilglioxlico
(exposicin
a espontnea
estireno)
post-jornada
laboral
ESTABILID
AD
15 das
freezer
OBSERVACIO
NES
en Si la muestra no
se remite al
laboratorio
dentro de las
24hs., conservar
en freezer
7 das en
heladera
a
4C.
No
superar pH:
10
20 das
heladera
4C
en Suspender
el
a consumo
de
gaseosas
y
ctricos
72hs.
antes
de
la
recoleccin de la
muestra
en Suspender
el
a consumo
de
gaseosas
y
ctricos
72hs.
antes
de
la
recoleccin de la
muestra
Ambiental:
orina
de
24hs.
(recipiente
plstico de
agua
mineral)
Ambiental:
MTODO
21
*cido
mandlico
(exposicin
estireno)
orina
de
24hs.
(recipiente
plstico de
agua
mineral)
Ocupacional 20 das
:
miccin heladera
a espontnea
4C
post-jornada
laboral
Ambiental:
orina
de
24hs.
(recipiente
plstico de
agua
mineral)
DETERMINAC
IN
MUESTRA
Recoleccin
y
transporte
*cido
trans, Ocupacional
:
miccin
trans mucnico
(exposicin
a espontnea
benceno)
post-jornada
laboral
en Suspender
el
a consumo
de
gaseosas
y
ctricos
72hs.
antes
de
la
recoleccin de la
muestra
ESTABILID
AD
OBSERVACIO
NES
4 das en
heladera
a
4C (a pH 2
si se guardara
ms de 4
das)
Suspender
el
consumo
de
gaseosas
y
ctricos
72hs.
antes
de
la
recoleccin de la
muestra
En heladera a
4C o en
freezer:
Indefinido.
Recipiente
de
plstico limpio
con
cierre
hermtico.
No
se
recomienda
vidrio
Ambiental:
orina
de
24hs.
(recipiente
plstico de
agua
mineral)
*Arsnico
Orina
(volumen
mn. 150ml)
de
24hs
(recipiente
plstico de
agua
MTODO
-Colorimtrico:
Vasak -Sedivec
-Absorcin
atmica:
generacin de
hidruros
22
*Anticonvulsiva
ntes:
-Fenobarbital
-Fenitona
-cido valproico
-Carbamacepina
mineral)
Pelos: 1g.
Uas: 1g
Suero
o Heladera 4C
plasma
por 5 das
heparinizad
o
Vol. Mn.:
1ml
-Inmunolgico
*Antidepresivos
trclicos
Suero
o Heladera 4C
plasma
por 5 das
heparinizad
o
Vol. Mn:
1ml
-Inmunolgico
Benzodiacepinas
-Suero
o Heladera 4C
plasma
por 5 das
heparinizad
o.
Vol. Mn:
1ml
-Orina:
nica
miccin
cercana al
momento de
consumo
(no antes de
1hs)
Vol. Mn:
50ml
-Inmunolgico
DETERMINAC
IN
MUESTRA
Recoleccin
y
transporte
Orina:
miccin
nica
cercana al
momento de
consumo
(no antes de
1hs.)
Cannabis
ESTABILID
AD
OBSERVACIO
NES
MTODO
Heladera 4C
por 14 das
Freezer por
4-5 meses
Recipiente
de -TLC
plstico limpio normalizada
con
cierre -Inmunolgico
hermtico
23
Vol.
50ml
Mn:
Cianuro
Sangre
Heladera 4C
entera
heparinizad
a
en
recipiente
de plstico
con cierre
hermtico
sin cmara
de aire.
Vol. Mn:
10ml
*Cloripirifos
Sangre en
jeringa
heparinizad
a
Vol. Mn:
5ml
-Orina de
24hs. Vol.
Mn. 100ml
-Sangre
entera
heparinizad
a en jeringa
descartable
sin aguja y
tapn
plstico.
Vol. Mn.
4ml
-Suero
o
plasma
heparinizad
o en tubo
plstico
tratado con
cido ntrico
al 50%, bien
enjuagado y
tapn
plstico.
Vol. Mn.
*Cobre
15 das
freezer
Remitir
inmediatamente
al laboratorio
-Microdifusin
en Si la muestra no
se remite al
laboratorio
dentro de las
24hs., conservar
en freezer
Heladera 4C
por 15 das
Freezer
indefinida
Recoger
en
recipiente
de
plstico tratado
con cido ntrico
al 50% por lo
menos durante
12hs. El suero o
plasma no deben
estar
hemolizados. Si
se recibe sangre
entera separar el
plasma
del
paquete globular
de inmediato
-Absorcin
atmica:
atomizacin por
llama
24
2ml.
Cocana
-Orina nica
miccin
cercana al
momento de
consumo
(no antes de
1hs.). Vol.
Mn. 20ml.
Heladera 4C
por 13 das
Freezer por
30 das
*Colinesterasa
Eritrocitaria
Sangre
entera
heparinizad
a. En tubo
plstico con
cierre
hermtico
Vol. Mn.
5ml
MUESTRA
Recoleccin
y
transporte
Suero
o
plasma
heparinizad
o. Vol. Mn.
1ml.
Orina
de
24hs.
en
recipiente
de plstico
de
agua
mineral
Vol. Mn.
100ml
Vol. Mn.
50ml
Traer
al Sin hemlisis
laboratorio
dentro de las
6hs.
de
extrada.
Paquete
globular
inestable
DETERMINAC
IN
Colinesterasa
Srica
*Coproporfirina
s
*Cromo
*D-ALA-
Sangre
ESTABILID
AD
Recipiente
de
plstico limpio
con
cierre
hermtico
OBSERVACIO
NES
-Inmunolgico
(FPIA)
-TLC
normalizada
-Mtodo
cintico
MTODO
Heladera 4C Recoger
en
Freezer
2 recipiente
de
meses
plstico tratado
con cido ntrico
al 50% por lo
menos durante
12hs. previo a la
recoleccin de la
muestra
en Remitir
al Nunca colocar en
-Absorcin
atmica:
atomizacin
electrotrmica
25
laboratorio
freezer
dentro de las
2 o 3hs. de
extrada
la
muestra
Suero
o Heladera 4C
*Digoxina
plasma
por 5 das
heparinizad
o.
Vol. Mn.
1ml.
de
Drogas
de Orina: nica Marihuana en Recipiente
miccin
freezer
1 plstico limpio
abuso:
-cocana
cercana al semana.
con
cierre
-anfetaminas
momento de Las
otras hermtico
-opiceos
consumo
cinco, 5 das
-marihuana
(no antes de en heladera a
-barbitricos
1hs.).Vol.
4C
-benzodiacepinas Mn. para el
screening de
las
seis
drogas
150ml. Para
la
investigaci
n individual
30ml.
Sangre en Suero
o Si
se recibe
*Ferremia
tubo seco de plasma
: sangre
entera,
plstico o Heladera 4C separa el plasma
vidrio
por 7das
del
paquete
tratado con
globular
de
cido ntrico
inmediato.
al 25 o 50%
No
debe
y enjuagar
hemolizarse
con
agua
destilada.
.nviar
el
tubo
en
posicin
vertical sin
centrifugar,
tapado con
Parafilm o
tapn
plstico
Sangre
dehidratasa
jeringa
heparinizad
a. Vol. Mn.
5ml
-Inmunolgico
-Inmunolgico
(FPIA)
-TLC
normalizada
-Absorcin
atmica
-Calorimtrico
26
entera
heparinizad
a en jeringa
sin aguja y
con tapn
plstico.Vol
. Mn. 4ml
DETERMINAC MUESTRA
IN
Recoleccin
y
transporte
*Fenoles
Ocupacion
(exposicin
a al: miccin
benceno)
espontnea
post-jornada
laboral
Ambiental:
orina
de
24hs.
en
recipiente
de plstico
de
agua
mineral
Ocupacional
*Hexanodiona
(exposicin a n- :
miccin
hexano)
espontnea
post-jornada
laboral
Ambiental:
orina
de
24hs.
en
recipiente
plstico de
agua
mineral
Ocupacional
*1:
miccin
Hidroxipireno
espontnea
post-jornada
laboral
Ambiental:
orina
de
24hs.
en
recipiente
plstico de
agua
mineral
ESTABILID
AD
OBSERVACIO
NES
1 semana en No
heladera
a recomienda
4C
vidrio
1 mes en
freezer
MTODO
se -Colorimtrico
-Cromatografa
gaseosa (GLCFID)
1 semana en
heladera
a
4C
1 mes en
freezer
4 das en Suspender
la
heladera
a ingesta
de
4C
alimentos
2 semanas en ahumados 48hs.
freezer
antes
de
la
recoleccin de la
muestra
27
Marcha
de
psicofrmacos
(PSF)
o
investigacin
individual:
-antidepresivos
tricclicos
-fenotiazinas
-butirofenonas
-anfetaminas
-carbamacepina
-opiceos
-barbitricos
-benzodiacepinas
*Mercurio
DETERMINAC
IN
Metahemoglobin
a
Orina:
miccin
nica
en
recipiente
de plstico
de
agua
mineral
o
urocultivo.
Vol. Mn.
para marcha
de
PSF
150ml
y
para
investigaci
n individual
50ml.
Orina
de
24hs.
en
recipiente
plstico de
agua
mineral
5 das
heladera
4C
en Recipiente
de -Inmunolgico
a plstico limpio -TLC
con
cierre normalizada
hermtico
Indefinido en Recipiente
de -absorcin
heladera
a plstico limpio atmica
4C o en con
cierre -vapor fro
freezer
hermtico
MUESTRA ESTABILID
Recoleccin
AD
y
transporte
Sangre
Heladera
a
entera
4C
heparinizad
a en tubo
plstico con
cierre
hermtico.
Para
cooximetra
sangre
entera
heparinizad
a en jeringa
descartable
sin aguja y
con tapn
plstico
Vol. Mn.
OBSERVACIO
NES
MTODO
Remitir
al
laboratorio
dentro de las 2hs.
de extrada la
muestra
-Colorimtrico
Espectrofotomt
rico
-Co-oxmetro
28
1ml
Metanol
Monxido
carbono
O-Cresol
(exposicin
tolueno)
Sangre
entera
(anticoagula
nte FNa o
citrato),
suero
o
plasma en
tubo
plstico con
cierre
hermtico
sin
dejar
cmara de
aire
Vol. Mn.
3ml
de Sangre
entera
heparinizad
a en tubo
plstico con
cierre
hermtico
sin
dejar
cmara de
aire.
Para
cooximetra,
sangre
entera
heparinizad
a en jeringa
descartable
sin aguja y
con tapn
plstico
Vol. Mn.
3ml
Ocupacional
a :
miccin
espontnea
post-jornada
laboral
Ambiental:
orina
de
Remitir
refrigerada lo
antes posible
al laboratorio
3 das
heladera
4C
Extraer
la
muestra
desinfectando
con
solucin
jabonosa, yodo
povidona,
etc.
Sin contenido de
alcohol
-Colorimtrico
(Williams)
-Cromatografa
gaseosa
(GCFID)
1 semana en
heladera
a
4C
1mes
en
freezer
29
24hs.
en
recipiente
de plstico
de
agua
mineral
Paracetamol o Sangre
heparinizad
Acetaminofeno
a, suero o
plasma
Vol. Mn.
2ml
Sangre en
PCBs
jeringa
heparinizad
a
Vol. Mn.
10ml
DETERMINAC MUESTRA
IN
Recoleccin
y
transporte
Sangre en
*Plag.
Organoclorados jeringa
heparinizad
a
Vol. Mn.
5ml
Orina de
24hs.
en
*Plomo
recipiente
tratado,
provisto por
el
laboratorio
Sangre
entera
hepariniza
da
en
jeringa
descartable,
sin aguja y
con tapn
de plstico
Vol. Mn.
6ml
Sangre en
Salicilato
jeringa
Remitir
refrigerada lo
antes posible
al laboratorio
Tcnica
vlida -Colorimetra.
solo
para Lui y Oka
concentraciones
txicas, no para
valores
teraputicos
1 mes en Se
requiere
heladera
a ayuno no menor
4C
de 8hs.
3 meses o
ms
en
freezer
ESTABILID OBSERVACIO
MTODO
AD
NES
1 mes en Se
requiere
heladera
a ayuno no menor
4C
de 8hs.
3 meses o
ms
en
freezer
7 das
heladera
4C
1 mes
freezer
en
a
7 das
heladera
en En
caso
de -Colorimtrico
a ingesta
nica (Trinder)
en
-Absorcin
atmicaatomizacin por
llama
30
heparinizad 4C
a
Vol. Mn.
5ml
*Superwarfarni
cos
(cuantificacin:
brodifacoum,
bromadiolone y
difenacoum;
investigacin
cualitativa:
warfarina
y
coumatetralyl)
*Talio
Tiocianatos
Suero. Vol.
Mn. 4ml
Sangre en
tubo seco.
Vol. Mn.
10ml
3 das en
heladera
a
4C
Ms de 3 o 4
das
en
freezer
Orina
de
24hs.
en
recipiente
plstico de
agua
mineral
Vol. Mn.
200ml
Orina:
miccin
nica con
3hs.
de
retencin.
Vol. Mn.
30ml
7 das
heladera
4C
1 mes
freezer
en
a
15 das
heladera
4C o
freezer
en Remitir
la
a muestra dentro
en de las 24hs. de
recolectada.
en
-Colorimtrico
-Absorcin
atmica
atomizacin por
llama
31
32
33
34
2. Material Citolgico
Tratndose de lquido se procede a centrifugar con la Centrfuga 80-2B para
la concentracin de las clulas, con el objetivo de facilitar su estudio.
Una vez centrifugado, el sedimento se extiende en un portaobjetos, se fija
con alcohol 96% y se procede a realizar la coloracin y el montaje, segn los
pasos descriptos en el punto 1.f.
Luego, al igual que con el material histolgico, pasa a la sala de microscopa
para su estudio y se elabora el informe.
Segn la necesidad de estudios, el Laboratorio de Investigacin Forense,
cuenta con el equipamiento para realizar coloraciones diferenciales: Tricrmico
de Masson, Pas, Ziehl Nilsen, entre otras.
37
38
ACEPTADO
O
ACEPTADO CON RESERVA
Material
Histolgico
Material
Citolgico
Macroscopa
Centrifugado
Muestra
Deshidratacin e
inclusin en parafina
Fijacin
INFORME
39
40
Muestreo
Esquema de trabajo:
b) alcalinizacin de la muestra y se efectan dos extracciones con ter etlico, y una con
cloroformo. Para muestras complejas se efectan una purificacin mediante cambio de
pH con cido sulfrico y extracciones con ter etlico y cloroformo.
En el caso de los lquidos de lavado y raspado de vestigios, no se efecta el proceso de
extraccin procedindose directamente al corrimiento cromatogrfico descripto en el
punto siguiente.
1.6- Identificaciones.
Efectuado el aislamiento se procede a identificar los txicos orgnicos fijos:
Mtodos Cromatogrficos
ESPECTROFOTOMETRA UV
el estudio de los picos de absorcin mxima ya que muchas drogas varan su absorcin
al UV ( mxima) por cambio de pH.
El barrido UV es poco especfico a menos que la droga problema sea aislada por otro
procedimiento como CCD (cromatografa en capa delgada preparativa, elucin) o por
metodologas que reducen las interferencias espectrales de los lquidos orgnicos y de
otras drogas.
Determinaciones de especie
Tipificacin
46
47
48
49
50
51