4322 - Completo - Farmacognosia - TP - Debenedetti

Facultad de Ciencias Exactas y
Naturales
Farmacognosia
Gua de Trabajos
Prcticos
Autoras:
Dra. Silvia Debenedetti
Dra. Erica Wilson
Lunes a viernes de 9 a 21 h.
Torre Universitaria, Zabala 1837, primer nivel inferior.
C1426DQG - CABA
Telfono: 4788-5400, internos 5002 y 2122.
Email: fasciculos@ub.edu.ar
www.ub.edu.ar
Facultad de Ciencias
Exactas y Naturales
Gua de Trabajos Prcticos-FARMACOGNOSIA
FARMACOGNOSIA
Gua de trabajos prcticos
Carrera de Farmacia
3 Ao Plan 2012 y plan 2008 transicin 2012.
Profesoras:
Dra. Silvia Debenedetti.

Dra. Erica Wilson
FARMACOGNOSIA F. DE CIENCIAS EXACTAS Y NATURALES UNIVERSIDAD DE BELGRANO

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Exactas y Naturales
CONSIDERACIONES GENERALES SOBRE LOS TRABAJOS PRCTICOS DE

FARMACOGNOSIA.
OBJETIVO:
- Que el alumno se familiarice con el manejo de las drogas vegetales y sus preparados:
polvos, extractos secos y lquidos,etc.
- Que pueda disear procedimientos de extraccin, mtodos cromatogrficos, realizarlas
y detectar los puntos a mejorar a partir de los resultados obtenidos.
UNIDADES:
1. EXTRACCIN
2. AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN (TLC/HPLC)
3. CONTROL DE CALIDAD
BIBIOGRAFA:
Libros que se detallan a continuacin se pueden consultar en la biblioteca o en la Ctedra
virtual:
-Sharapin, N. (2000).Fundamentos de Tecnologa de Productos Fitoteraputicos. Ed. R. Pinzn
CAB-CYTED. Bogot, Colombia (Site de Farmacognosia)
-Dewick P.M. (2004). Medicinal Natural products, a biosynthetic approach.2 Ed. John Wiley &
Sons, Ltd. (Site de Farmacognosia)
-World Health Organization "Quality Control Methods for Medicinal Plant Materials" cap. 13.
(1998) (Site de Farmacognosia)
-Elementos de fitoqumica y de farmacognosia. Bruneton, Jean. 1991. xvii, 594 p.
Solicitar por: 041349.
-Farmacognosia. Evans, William Charles. 1991. 901 p. Solicitar por: 041361.
-Farmacognosia : fitoqumica, plantas medicinales. Bruneton, Jean. 2001.1099 p.
Solicitar por: 056588
Monografas de plantas medicinales- Publicacin de la OMS (ingls) Se los puede encontrar en
el site de Farmacognosia.
-WHO monographs on selected medicinal plants. Volume 1 (1999)
Adems se sugiere la consulta en los siguientes sitios:
http://www.rain-tree.com/plants.htm
Sitio con muy buenas monografas gratis (ingls)
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Exactas y Naturales
http://www.herbphoto.com/education/index.html
Sitio con algunas monografas gratis (del listado hay algunas que estn, otras se pagan)
http://barcelonacomenius.googlepages.com/whomedicinalplantsbooks
Hay tres volmenes con monografas de plantas medicinales- Publicacin de la OMS (ingls)
http://farmacia.udea.edu.co/~ff/
La Universidad de Antioquia, Colombia
http://www.profitocoop.com.ar
Si se registran tienen acceso a algunas monografas oficiales. Es gratis.
http://www.salutia.com.ar/Sitio/Sp/Servicios/Vademecum/Farmacopea_Argentina/sp_Vademe
cum_Farmacopea_Index.htm Farmacopea Argentina
Farmacopea Argentina http://www.anmat.gov.ar/webanmat/fna/octava_edicion.asp
Farmacopea internacional http://apps.who.int/phint/en/p/docf/
Farmacopea Brasileira http://www.anvisa.gov.br/hotsite/cd_farmacopeia/index.htm
La Ctedra cuenta con un sitio de FARMACOGNOSIA en la web donde se ponen a disposicin de
los alumnos:
-el material didctico utilizado en las clases tericas y prcticas (presentaciones powerpoint y
Guias de Problemas y de Trabajos Prcticos)
-Links de consulta
-Libros y artculos cientficos

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Exactas y Naturales
RECORDATORIO DE NORMAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO

TODA PERSONA QUE TRABAJA EN UN LABORATORIO DE QUIMICA ESTA OBLIGADA
A APRENDER Y OBSERVAR LAS REGLAS DE SEGURIDAD
Recordar que la mayora de los accidentes en los laboratorios qumicos son el resultado del
descuido o distraccin, falta de criterio o fatiga del accidentado o de alguna de las personas
cercanas.
El estudiante debe adquirir los hbitos de trabajo de manera de realizar las actividades en el
laboratorio con la mxima seguridad para l y sus compaeros.
Cuales son los accidentes ms frecuentes?
Las causas ms comunes de accidente en el laboratorio son
Heridas
Quemaduras
Proyecciones en los ojos.

Las heridas en general son causadas por manipulacin de material de vidrio rajado o roto.
Las quemaduras por el contacto con lcalis o cidos, las llamas, la combustin de lquidos
inflamables, derrame de lquidos calientes y explosiones.
Las proyecciones en general se producen por salpicaduras o por calentamiento de sustancias
lquidas o slidas.
Siempre existe el peligro de intoxicacin cuando se manipulan sustancias qumicas pues
muchas son txicas o tienen riesgos biolgicos.
Usted debe saber:
1-Su localizacin.
2-Accesos a fuentes de agua, gas y desages
3-Dnde estn los matafuegos
4-Donde est la ducha de emergencia y lavaojos
5-Dnde estn las distintas puertas de salida.
Que elementos necesita Ud. para trabajar con seguridad?
1-Guardapolvo para no llevar ni traer contaminantes del medio ambiente, como barrera de
contencin de las proyecciones o salpicaduras de elementos corrosivos. No debe colocarse
nada encima de l.
2-Guantes para proteger las manos en caso que se usen elementos custicos.
3-Anteojos para proteger los ojos de las proyecciones, salpicaduras o radiaciones.
4-Propipetas para evitar respirar los vapores y la posible ingestin de distintas sustancias.
JAMS PIPETEE NADA CON LA BOCA.
5-Barbijo para evitar la penetracin de polvos a las vas respiratorias.

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Exactas y Naturales
Qu cuidados debe tener Ud. para trabajar?

1-Usar todos los elementos de seguridad en todo momento en que est realizando una
experiencia.
2-NO DEBE FUMAR EN EL LABORATORIO
3-NO DEBE COMER NI BEBER EN EL LABORATORIO
4-No deambule por el laboratorio
5-Debe trabajar con el cabello recogido.
6-No debe usar pulseras ni colgantes.
7-Cuando en alguna etapa de la experiencia puedan producirse vapores irritantes o txicos
realice su trabajo bajo una campana.
8-Nunca trabaje solo o sin supervisin en el laboratorio.
9-No realice experiencias no indicadas en la gua.
10-No use material de vidrio rajado o roto.
11-Arroje los slidos (papeles, fsforos, etc) en el tacho de basura.
13-Consulte antes de arrojar lquidos por el desage.
14-Cuando caliente NO dirija la boca del tubo u otro elemento hacia su rostro o el de sus
compaeros.
15-Consulte si tiene que deshacerse de algn producto qumico.
16-Sea precavido al trasvasar lquidos, evite que se derrame sobre el exterior del envase. En
este caso, lmpielo con una servilleta de papel o un trapo rejilla.
17-Cuando finalice su trabajo deje todo el material limpio y ordenado, las mesadas limpias y
controle que las llaves de gas estn cerradas y los equipos elctricos apagados.

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UNIDAD TEMTICA EXTRACCIN
PREGUNTAS ORIENTATIVAS SOBRE EXTRACCIN

Lectura orientativa: Captulo Extraccin de Materias primas vegetales de Elizabeth Valverde
Macedo Dos Santos (libro Fundamentos de Tecnologa de productos Fitofarmacuticos de
Nicolai Sharapin, 2000)
1-Que entiende por extracto de una droga vegetal?
2-Como se clasifican los extractos segn su consistencia?
3-Que operaciones incluye la fabricacin de un extracto o el aislamiento de un principio activo a
partir de material vegetal?
4-Cual es el objetivo de la molienda?
5-En que se basa la eleccin del solvente de extraccin?
6-Ordene los siguientes solventes en orden creciente de polaridad (constante dielctrica)
Tolueno
Hexano
Etanol
Cloroformo
Metanol
Butanol
Acetato de etilo
Eter etlico
Agua
Benceno
Cloruro de metileno
Propanol
7-Qu aspectos se deben tener en cuenta en una industria fitofarmacutica para la eleccin
del solvente de extraccin?
8-Que solventes empleara para extraer la mayor cantidad de metabolitos presentes en una
droga vegetal?
9-En que se basara para la eleccin del solvente de extraccin de los grupos fitoqumicos
mencionados en la pregunta 2)? Indique para cada uno de ellos el solvente ms apropiado.

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Exactas y Naturales
10Que variables se tienen que tener en cuenta en un proceso extractivo? Fundamente
brevemente.
11-Mencione las diferentes tcnicas de extraccin. Clasifique las tcnicas mencionadas segn
extracciones solido-lquido o lquido-lquido y segn sean procesos en frio o en caliente.
12-Que tipo de extracto es una tintura? Que proceso de extraccin se utiliza para la obtencin
de tinturas?
13- Si el mdico le recomienda a un paciente tomar una infusin de manzanilla. Como le
describira la tcnica de preparacin?. Como le explicara la diferencia con una decoccin?
12- Que procesos conoce para la concentracin y el secado de extractos?
13 La HEPATALGINA tiene la siguiente formulacin
Cada 100 mL contiene:
Alcoholaturo de Alcachofa (1:1,75)
(Cynara scolymus)......
Tintura de boldo (concentrado 2/1)....
Alcoholaturo de Daucus Carota (1:1).
Mentol.....
46,228 mL
7,544 mL
46,228 mL
0,152 g
Que es un alcoholaturo?
Que significa la relacin que se encuentra entre parntesis en los extractos?

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Exactas y Naturales
TRABAJO PRCTICO N 1 - MTODOS DE EXTRACCIN

Conocimientos previos:
Estructuras de los principales carotenoides a extraer.
Solubilidad de los mismos.
Propuesta de solventes posibles para utilizar basado en polaridad, punto de ebullicin y
toxicidad de los mismos.
1. Objetivo
-
Familiarizarse con la metodologa de trabajo que se utiliza para la extraccin y aislamiento

de compuestos a partir de material vegetal
Utilizando un ejemplo concreto usarn los siguientes mtodos de extraccin: sonicacin,
reflujo, Soxhlet, extraccin con agitacin mecnica.
Tambin se familiarizarn con el uso del evaporador rotatorio y dems equipamiento de
laboratorio que utilizarn durante el cuatrimestre.
Elegirn un solvente de extraccin de acuerdo a las caractersticas de la muestra.
Se compararn los resultados obtenidos con los diferentes mtodos de extraccin por un
lado y con los distintos solventes elegidos por cada alumno.
2.Material vegetal:
Frutos de Capsicum annum desecados y molidos a polvo fino.
3.Mtodos:
- Reflujo.
-Ultrasonido a temperatura ambiente
-Soxhlet
Agitacin mecnica a temperatura ambiente
4.Procedimiento:
Se pesan 2 g de la droga vegetal y se coloca en el recipiente adecuado de acuerdo al
mtodo a utilizar. Se agregan 150 ml de solvente y se extrae durante 60 minutos (Soxhlet,
reflujo), 10 minutos (ultrasonido) y 30 minutos (agitacin mecnica).
Luego de transcurrido el tiempo preestablecido, se filtra el contenido del recipiente por
Buchner , se lleva a sequedad y se pesa.
5. Puesta en comn e informe.
Se compararn los rendimientos de los extractos obtenidos con el mismo solvente y
distintos mtodos de extraccin, discutiendo la eficiencia de cada uno de ello. Se
compararn los extractos obtenidos segn el solvente empleado, discutiendo las
semejanzas/diferencias y los posibles motivos de las mismas.
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Exactas y Naturales
TRABAJO PRCTICO N 2 /3 - EXTRACCIN DE ANTRAQUINONAS

- Conocimientos previos: composicin qumica de las drogas a utilizar; estructuras de los
derivados hidroxiantracnicos a extraer; propiedades qumicas de las mismas.
1-OBJETIVO
-Disear un procedimiento que permita obtener antraquinonas libres, monoglicosidadas y
diglicosidadas en 3 fracciones separadas .
2.MATERIAL VEGETAL
Polvo de Cscara sagrada.
Aloe
3.MTODO
Cada equipo (2 alumnos) elaborar un esquema de extraccin que utilizar con una de las
drogas. El esquema ser discutido con el profesor/ayudante previo a la realizacin de la
actividad.
Se trabajar con 1 g de droga y aproximadamente 50 ml de solvente en el caso de la
Cscara sagrada y con 0,5 g en el caso del Aloe.
La presencia de los grupos fitoqumicos extrados se verificar mediante las reacciones de
caracterizacin que se describen en el punto 4.
Se reservarn 2 ml de cada fraccin en viales de color caramelo identificados con el
nombre de los alumnos y su contenido para su anlisis por TLC en otro prctico.
4.REACCIONES DE CARACTERIZACIN
4.1 Antraquinonas libres
4.1.1 Reaccin de Borntragger directa (Antraquinonas libres)
Esta reaccin consta de una extraccin con solvente poco polar, seguida del siguiente
procedimiento. En este caso utilizar 3 ml del extracto etreo obtenido anteriormente que
se colocan en un tubo de ensayo.
Agregar 2 ml de una solucin de hidrxido de amonio concentrado, agitar suavemente y
observar la coloracin de la fase acuosa.
4.1.2. Reacciones sobre papel
Tomar el filtrado con un capilar y sembrar en forma puntual sobre papel de testeo 5 a 7
gotas de la solucin, permitiendo que se sequen entre una gota y otra. Realizar las
siguientes bservaciones:
i. Observacin del color a la luz nautural.
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Exactas y Naturales
Exponer el papel a vapores de amonaco: registrar el color.
ii. Observacin con luz UV a 366 nm: registrar el color.
Exponer el papel a vapores de amonaco: registrar el color.
4.2 Glicsidos antraquinnicos
Reaccin de Borntragger indirecta
Consiste en realizar la reaccin de Borntragger directa sobre un extracto o muestra de
droga sometida a un proceso de hidrlisis previa. Se indica el procedimiento segn que se
realice sobre un extracto acuoso/orgnico o sobre la droga vegetal.
Extracto acuoso:
Colocar la muestra en un tubo de ensayo. *Agregar 2 ml de NaOH 10% y calentar a bao
de mara durante 15 minutos. Enfriar y acidificar con HCl 1M, verificando con papel
tornasol. Agregar 2 ml de ter de petrleo y agitar cuidadosamente. Transferir la fase
orgnica con una pipeta pasteur a un tubo de hemlisis y agregar 1 ml de NaOH. Observar
el color de la fase acuosa.
Extracto orgnico:
Colocar aprox. 2 ml de la muestra en un tubo de ensayo. Eliminar el solvente por
evaporacin calentando a bao de mara. Seguir con el procedimiento indicado en el
prrafo anterior a partir del asterisco (*)
Droga vegetal:
Colocar aprox. 1 g de la droga pulverizada en un tubo de ensayo, agregar 2 ml de NaOH
10% y calentar a bao de mara durante 15 minutos. Filtrar y trasvasar el filtrado a otro
tubo de ensayo, acidificar con HCl 1M, verificando con papel tornasol. Agregar 2 ml de
ter de petrleo y agitar cuidadosamente. Transferir la fase orgnica con una pipeta
pasteur a un tubo de hemlisis y agregar 1 ml de NaOH. Observar el color de la fase
acuosa.
Informe
Elaborar el esquema de extraccin utilizado indicando solventes y resultados de las
reacciones de caracterizacin. Indique que otros grupos fitoqumicos pueden estar
presentes en cada una de las fracciones obtenidas.

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Exactas y Naturales
CUESTIONARIO
1) Adems de Cscara sagrada, Qu otras drogas conoce cuyos principios activos son
derivados de antraquinonas? Nombre cientfico (NC), nombre vulgar (NV) y parte usada de
cada una de ellas.
2) Escriba la frmula de los principales componentes de las drogas mencionadas en (1) e
indique sus principales usos medicinales
3) Durante el TP ud. efectu la separacin de los distintos compuestos hidroxiantracnicos de
cscara sagrada (Rhamnus purshiana DC)
a) Fundamente en que fraccin obtiene las antraquinonas libres de las alonas y de los
cascarsidos presentes en la droga vegetal.
b) Que reacciones de caracterizacin utiliz en cada una de las fracciones? Justifique su
respuesta.
c) Fundamente el mtodo de separacin de O y C hetersidos realizado en el TP

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Exactas y Naturales
TRABAJO PRCTICO N 4- EXTRACCIN DE ALCALOIDES

Conocimientos previos: composicin qumica de la droga a utilizar; conocimiento de los
mtodos de extraccin ; estructura de los principales alcaloides presentes en la droga a utilizar.
1-OBJETIVO
Extraer los alcaloides de una droga vegetal empleando alguno de los mtodos convencionales
de extraccin de alcaloides: medio cido, medio bsico o con solventes.
2-MATERIAL
Quina (Cinchona calisaya- Rubiaceae)
3-MTODO
Se trabajar con 2 g de corteza de quina y se debe llegar a un volumen final de extracto no
mayor a 10 ml de los cuales se utilizarn aproximadamente 2 ml para las reacciones de
caracterizacin, mientras que la muestra restante se guardar en un vial color caramelo
rotulado con el nombre de los alumnos del equipo y la droga, para ser analizado por TLC en
otro trabajo prctico.
4-REACCIONES DE CARACTERIZACIN
4.1 Reaccin de Draggendorff
Colocar unas gotas del extracto de cloruro de metileno en una placa de toque o
portaobjetos. Evaporar el solvente. Agregar una gota del reactivo de Draggendorf y observar
la reaccin. Utilizar como control, una solucin de sulfato de quinina al 0.1%.
Esta reaccin se puede realizar tambin sobre papel, sembrando unas gotas sobre un trozo
de papel de filtro y agregando el reactivo. Una vez seco, se debe lavar con agua,
considerndose positiva la reaccin si se observa una persistencia del color en el papel.
4.2 Reaccin de Mayer
Realizar el mismo procedimiento que el indicado en el prrafo anterior, pero colocando el
extracto y el reactivo de Mayer en un portaobjetos. Observar la reaccin. Esta reaccin no se
puede realizar sobre papel.
Informe
Elaborar el esquema de extraccin utilizado indicando solventes y resultados de las
reacciones de caracterizacin. Indique que otros grupos fitoqumicos pueden estar presentes
en cada una de las fracciones obtenidas.

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Exactas y Naturales
PROBLEMAS DE EXTRACCIN
1) Qu tipo de compuestos podra encontrar en una infusin de una droga vegetal?
2) Y en un extracto hexnico?
3-Ud. necesita extraer los glicsidos flavonoides presentes en los botones florales de Sofora.
a) Describa la metodologa a utilizar.
Cmo hara para comprobar que agot el material vegetal
3-Mencione cual/cuales solventes utilizara para extraer los siguientes compuestos
Acido linoleico
Mentol
Rutina
Soforosa

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Exactas y Naturales
4- Ud. necesita obtener un extracto conteniendo aglucones antraquinnicos a partir de una
planta medicinal cuyo nombre comn es Frngula.
a) Indique Nombre cientfico y parte de la planta que utilizara para la extraccin.
b) Dibue el ncleo fundamental del grupo fitoqumico que necesita extraer.
c) Proponga un mtodo para la obtencin del extracto que contenga estos compuestos a partir
de la droga (indicando solvente de extraccin).
d) Explique como verificara la presencia de dicho grupo fitoqumico (indique nombre de la
reaccin y justificacin).
5) Se procesa una muestra de polvo de droga vegetal de acuerdo al siguiente esquema:
En qu fracciones tendra una reaccin de Draggendroff (+)? Justifique su respuesta.
6. Esquematice un mtodo de extraccin que le permita obtener los siguientes grupos de

compuestos en fracciones separadas:
Esteroides; aminocidos; alcaloides tropnicos.
7.
Disee un mtodo de extraccin y fraccionamiento que le permita separar estos tres

Cmo los caracterizara?

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Exactas y Naturales
8. Se realiza una extraccin S/L semi-contnua de una droga vegetal, pasando sucesivamente
hexano, cloruro de metileno, acetato de etilo, metanol y agua.
Se realizan los siguientes ensayos de caracterizacin sobre las fracciones obtenidas:
Rojo de metilo, Liebermann-Bouchard, Shinoda, FeCl3, Dragendorff, Fehling, Rosenheim.
Explique en qu fracciones podra esperar reacciones positivas para dichas reacciones y qu
ncleo podra estar caracterizando.
9. Una muestra de polvo de Cscara sagrada se procesa del siguiente modo:
Qu informara acerca del contenido en antraquinonas de esta muestra?

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Exactas y Naturales
10. Una muestra de fololos de Sen se procesa de acuerdo al siguiente esquema:
Sen, fololos + NaOH 10% (80C /20)
Tolueno
Fase tolunica (A) + NaOH 2% Color rojo

Sen (misma muestra) + tolueno Filtrar Extracto tolunico (B)
Extracto tolunico (B) + NaOH 2% Incoloro
Tiene antraquinonas esta muestra?
Sirve para detectar todas las antraquinonas que contiene la muestra?
Justifique su respuesta.
11. Esquematice un mtodo de extraccin y purificacin que le permita obtener compuestos de

los siguientes grupos fitoqumicos por separado:
Carotenoides, glicsidos flavonoides y azcares.
12. Disee un mtodo de extraccin que permita obtener los asiaticsidos de la Centella
(saponinas triterpnicas) , en un estado lo ms purificado posible .

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Exactas y Naturales
13. Esquematice un mtodo de extraccin que le permita obtener los siguientes compuestos en
3 fracciones distintas. Indique qu ensayos realizara para caracterizarlos.
14. Disee un mtodo para obtener arbutina pura de las hojas de Ilex brasiliensis que contiene
aproximadamente 10% (P/P) sobre droga seca.
Arbutina
15. Cmo extraera cido isoclorognico libre de cafena de hojas de t ?
cido isoclorognico

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Exactas y Naturales
16- Se realiza un proceso de extraccin semicontinuo slido lquido a una droga vegetal en
polvo, siguiendo el siguiente esquema de fraccionamiento:
a) Hexano
b) Cloroformo
c) Acetato de etilo
d) Agua
Discuta qu tipo de compuestos podra encontrar en los distintos extractos.
17-Las hojas desecadas de Digital (Digitalis pupurea, Escrofulareaceae) contienen heterpsidos
cardiotnicos y saponinas esteroides.
a) Dibuje la estructura de un hetersido cardiotnico y de una saponina esteroide.
b) Cmo procedera para extraer y purificar los hetersidos cardiotnicos presentes en la droga
vegetal? Esquematice el fraccionamiento y Justifique su respuesta.
c) Como caracterizara la presencia de dicho grupo fitoqumico en la fraccin correspondiente y
como caracterizara la presencia de saponinas en la fraccin de descarte?
d) Existen en el mercado comprimidos con extracto purificado de glicsidos cardiotnicos?
Justifique.
18-El polvo de manzanilla contiene flavonoides libres, flavonoides monoglicosidados y
azcares.
a) Indique Nombre Cientfico (NC) y parte usada de manzanilla (PU).
b) Dibuje el ncleo fundamental de cada uno de los grupos mencionados y proponga una
metodologa para extraerlos (indicando mtodo utilizado y solvente de extraccin)
d) Esquematice como realizara la separacin de los grupos fitoqumicos mencionados
(indicando solventes utilizados)
e) Carcaterice la presencia de dichos grupos fitoqumicos en cada fraccin (indique reacciones
de caracterizacin).
20-Las semillas de Nuez vmica (Strychnos nux-vomica, Loganiaceae) contiene alcaloides, lpidos
y aminocidos.
a) Proponga un mtodo de extraccin que permita separar en tres fracciones los alcaloides, los
lpidos y los aminocidos presentes en esta droga.
b) Cmo caracterizara cada grupo fitoqumico en la fraccin correspondiente?

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Exactas y Naturales
UNIDAD TEMTICA AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN
PREGUNTAS ORIENTATIVAS SOBRE CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA

1) Defina un proceso cromatogrfico
2) Qu fenmenos fsico-qumicos intervienen en una cromatografa?
3) Cmo se clasifican los sistemas croamtogrficos de acuerdo a las fases intervinientes ?
4) Defina los siguientes trminos cromatogrficos: soporte, desarrollo, disolvente, sistema
cromatogrfico, revelador, adsorbente, eluyente, capa, fase estacionaria, fase mvil.
5) Explique los fenmenos de adsorcin y particin
6) Defina Rf , Rx y Rg. En qu casos utiliza cada uno de ellos?
7) Cmo influye la temperatura sobre el Rf?
8) Cmo influye la saturacin de la cuba en un proceso cromatogrfico?
9) Defina los siguientes trminos: resolucin , eficiencia y selectividad.
10) Establezca y discuta la relacin existente entre el dimetro de partcula y la eficiencia de un
sistema cromatogrfico.
11) Qu factores influyen en la resolucin de un sistema cromatogrfico.
12) Qu parmetros mantendra constantes para obtener reproducibilidad de los resultados de
un mtodo cromatogrfico.
13) Qu entiende por revelado de un cromatograma?
14) Que revelador utilizara para
Extracto de cloruro de metileno de Frngula
Extracto acuoso de Ginsennosidos
Aceite esencial de limn
Extracto hidroalcohlico de alcachofa
Extracto hidroalcohlico de Centella
15) Cmo elige la fase mvil y la fase estacionaria en un sistema de adsorcin?
16) Qu entiende por perfil cromatogrfico?
17) Qu entiende por extracto patrn y que por sustancia de referencia?

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Exactas y Naturales
18) En que caso es imprescindible la utilizacin de un extracto patrn y en que caso una
sustancia de referencia?
19) En que casos utiliza fases mviles que contienen con cidos y en que casos se agrega a la
fase mvil una base? Justifique.
20) Cmo hara para identificar la presencia de Quinina en un extracto de Quina
21) Qu criterios se emplean para seleccionar el sistema de revelado de los cromatogramas?.

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Exactas y Naturales
TRABAJO PRCTICO N 5/6: APLICACIN DE CROMATOGRAFA EN CAPA FINA

(TLC) AL ESTUDIO DE PRODUCTOS NATURALES I
1-OBJETIVO
Desarrollar sistemas cromatogrficos para el anlisis cualitativo de extractos vegetales.
Conocimientos previos: estructura de los componentes de inters de los extractos a
analizar; mtodos de revelado a utilizar en cada caso.
2-MATERIAL VEGETAL
Extracto de Capsicum
Extractos de Cscara sagrada y Aloe obtenidos en el TP N 2
Extracto de quina obtenido en el TP N 4
3-MTODO
Se utilizarn Cromatofolios de silicagel como fase estacionaria. La fase mvil ser
seleccionada por cada equipo.
Se realizarn las corridas cromatogrficas y se evaluar la resolucin del sistema
registrando los Rf correspondientes a los compuestos de inters, optimizando el sistema
en base a los resultados obtenidos.
En todos los casos se deber informar las condiciones cromatogrficas utilizadas para
cada prueba realizada, los parmetros cromatogrficos obtenidos (k, y Rs) y la
justificacin de los cambios planteados.
Se utilizarn las siguientes sustancias de referencia:
Cscara sagrada:
-1,8 diantrona
-Alona
Aloe:
-1,8 diantrona
-Alona
Quina:
-Quinina, HCl
-Quinidina HCl
Informe
Realizar un esquema del cromatograma obtenido indicando: Sistema cromatogrfico
utilizado (FM, FE, y revelado)
Tabla de Rfs de las bandas obtenidas en los extractos y sustancias de referencia (color al
UV y con reactivo revelados)

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Exactas y Naturales
TRABAJO PRCTICO N 7: APLICACIN DE CROMATOGRAFA EN CAPA FINA (TLC)

AL ESTUDIO DE PRODUCTOS NATURALES II
1. OBJETIVO
Aplicar la cromatografa en capa fina a la identificacin de extractos de drogas vegetales.
2. MATERIAL VEGETAL
- Extracto de Cscara sagrada
- Extracto de Frngula.
3. MTODO
Fase estacionaria: cromatofolios de silicagel 60 GF 254 Merck, 0,25 mm de espesor
Fase mvil: Acetato de etilo/ metanol/ agua (100:13,5:10)
Siembra: se efecta con capilares a ~0,5 cm del borde inferior (trabajar siempre con
lpiz negro), sembrando:
-
Extracto de cscara sagrada: 10 gotas en banda
Solucin testigo de aloina: 6 gotas
Extracto de frngula: 10 gotas en banda
Observacin a la luz visible y al UV366

Exposicin a vapores de amonaco
AEDBE
Revelado:
4. RESULTADOS:
Registrar los Rf de las manchas observadas en los distintos cromatogramas, en tablas
similares a las siguientes:
a) Observacin a la luz visible (Rf)
Extracto de R.
purshiana.
Extracto de
R.frangula
Solucin testigo
alona
b) Observacin a la luz UV 366 nm (Rf)

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Exactas y Naturales
Extracto de R.
purshiana.
Extracto de
R.frangula
Solucin testigo
alona

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TRABAJO PRCTICO N 8: APLICACIN DE CROMATOGRAFA EN CAPA FINA (TLC)

AL ESTUDIO DE PRODUCTOS NATURALES III
1-OBJETIVO
Identificar un extracto vegetal en un producto terminado.
2-MATERIALES
Extracto de Cscara sagrada
Extracto de Frngula
Comprimidos de Cscara sagrada/Frngula
3.MTODO
Preparacin de solucin muestra
Moler 10 comprimidos a polvo fino y pesar una cantidad de polvo correspondiente a un
comprimido. Colocar en un Erlenmeyer de 100 ml y agregar 20 ml de metanol. Sonicar
por 5 minutos. Filtrar por papel.
Procedimiento
Analizar la muestra siguiendo el mtodo descripto en el TP N 7
4-CONCLUSIONES
Elabore un informe sobre los resultados obtenidos y la identidad del extracto presente
en los comprimidos de acuerdo al ensayo realizado.

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Exactas y Naturales
1.- Se dispone de un extracto clorofrmico de centella asitica que contiene cido asitico
(triterpeno libre) entre otros compuestos.
a) Describa una tcnica que permita identificar cido asitico (triterpeno libre) en dicho
extracto.
b) Probando distintos sistemas cromatogrficos para identificar cido asitico obtuvo los
siguientes cromatogramas:
Qu sistema le parece ms adecuado? Justifique su respuesta analizando los parmetros de

resolucin que se encuentran afectados en cada uno de los sistemas.
c.- Cmo procedera para obtener 5 mg de cido asitico a partir de un extracto clorofrmico de
centella asitica. Describa la metodologa a emplear detallando los siguientes puntos:
I. Sistema cromatogrfico a emplear.
II. Soluciones a preparar, siembra de las mismas, revelado, etc.
III. Interpretacin del cromatograma y obtencin de la sustancia.
IV. Verificacin de la pureza del cido asitico aislado.
2-Se necesita obtener barbaloina a partir de un extracto de acetato de etilo de aloe
a) Proponga una tcnica que le permita aislar el hetersido antraquinnico barbaloina
b) Se efectu una TLC del extractivo del tem (b) frente a testigo de barbaloina, obtenindose
el siguiente cromatograma:
T= testigo
M= muestra

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Podra utilizar este sistema cromatogrfico para identificar barbaloina en el extracto de loe?
En caso necesario, que modificaciones hara para lograrlo? Justifique su respuesta, indicando
los factores de resolucin (capacidad, eficiencia, selectividad).
c)Que sistema utiliza par su revelado?
3.- Usted debe analizar los alcaloides presentes en un extracto cloruro de metileno
semipurificado de opio.
a) Describa una tcnica que permita identificar morfina (alcaloide) en dicho extracto.
b) Probando distintos sistemas cromatogrficos para identificar morfina, obtuvo el siguiente
cromatograma:
M= Muestra
T=Testigo (morfina)
Podra utilizar este sistema para identificar morfina en el extracto. Justifique su respuesta. En
caso necesario cmo optimizara este sistema?
c.- Usted necesita determinar el porcentaje de morfina presente en un extracto cloruro de
metileno semipurificado de opio. Describa la metodologa a emplear detallando los siguientes
puntos:
I. Sistema cromatogrfico.
II. Soluciones a preparar
III. Siembra de las mismas
IV.Revelado e interpretacin del cromatograma obtenido.
V. Cuantificacin.
4.- Usted debe analizar por cromatografa sobre planos un extracto acetato de etilo
semipurificado de hiprico.
a) Describa una tcnica que le permita comprobar la presencia de hipersido (hetersido
flavonoide) en dicho extracto.
b) Ensayando diversos sistemas cromatogrficos para comprobar la presencia de hipersido en
el extracto, obtuvo los siguientes cromatogramas:

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Que informara acerca del resultado obtenido?.

5.- Se dispone de un extracto clorofrmico de efedra que contiene alcaloides.
a) Describa una tcnica que permita identificar efedrina (alcaloide) en dicho extracto.
b) Probando distintos sistemas cromatogrficos para identificar efedrina, obtuvo los siguientes
cromatogramas:

resolucin que se encuentran afectados en cada uno.
6.- Usted debe analizar por cromatografa sobre planos un extracto acetato de etilo
semipurificado de hojas de Gingko biloba.
a) Describa una sistema cromatogrfico (FM, FE y Revelado) que le permita detectar la rutina
(hetersido flavonoide) presente en dicho extracto.
b) Buscando un sistema adecuado para cuantificar la rutina, obtuvo los siguientes
cromatogramas:
(1)
(2)
(3)

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Cul elegira para dicha determinacin?

Justifique en cada caso (analizando los parmetros que inciden en la resolucin de cada
sistema) su decisin de elegirlo o no para el problema en cuestin.
c.- Usted necesita obtener rutina a partir de un extracto acetato de etilo semipurificado de
hojas de Gingko biloba. Describa la metodologa que empleara para obtener 10 mg de rutina
detallando los siguientes puntos:
I)
II)
III)
IV)
V)
Sistema cromatogrfico.
Soluciones a preparar.
Siembra de las mismas, revelado.
Interpretacin del cromatograma resultante y obtencin de la rutina.
Verificacin de la pureza de la rutina aislada..
7.- Se dispone de un extracto clorofrmico de digital que contiene digitoxina (hetersido

cardiotnico).
a) Describa una tcnica que permita identificar digitoxina en dicho extracto.
b) Probando distintos sistemas cromatogrficos para identificar digitoxina se obtuvo el siguiente
cromatograma:
Podra utilizar este sistema para identificar digitoxina en el extracto clorofrmico de digital?
Justifique su respuesta. En caso necesario cmo optimizara este sistema?

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PROBLEMAS COMBINADOS DE EXTRACCIN Y CROMATOGRAFA

1.- Se dispone de un extracto clorofrmico de centella asitica que contiene cido asitico y
cido madecsico (triterpenos libres) entre otros compuestos.
a) Describa una tcnica que le permita detectar la presencia de cido asitico en dicho extracto.
b) Probando distintos sistemas cromatogrficos para identificar cido asitico obtuvo los
siguientes cromatogramas:

resolucin que se encuentran afectados en cada uno de los sistemas.
2.-Usted debe analizar una muestra de polvo de raz de Ginseng.
Disee la metodologa que utilizara para los siguientes ensayos.
a) Obtencin de un extracto que contenga las saponinas triterpnicas (ginsensidos
considerados como los principios activos), azcares y triterpenos presentes en esta droga
b) Fraccionamiento de dicho extracto en tres fracciones diferentes que contengan estos
grupos fitoqumicos
c) Verificacin de la presencia de los mismos en la fraccin correspondiente.
d) Como hara para verificar la presencia de ginsensido Rg1, en la fraccin de las saponinas.
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3- Proponga una metodologa para:
a) Obtener un extracto que contenga hetersidos flavonoides (principios activos) separados de
los triterpenos y azcares que contienen las hojas de una droga vegetal.
b) Comprobar la presencia de dichos grupos fitoqumicos en las tres fracciones obtenidas.
c) Se sospecha de la presencia de quercetina 3-O-glussido en el extracto. Describa una tcnica
que le permita comprobarlo

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Exactas y Naturales
TRABAJO PRCTICO N 9
ANLISIS CUANTITATIVO DE UN EXTRACTO VEGETAL POR HPLC
1-OBJETIVO
Que el alumno realice un ensayo de cuantificacin siguiendo un procedimiento descripto en
una farmacopea (Farmacopea Espaola 2005).
2-MATERIALES
Comprimidos con extracto de Gingko biloba
Quercetina (sustancia de referencia).
3.MTODO
Se implementar el mtodo segn lo descripto en la monografa adjunta (ver Apndice). Se
trabajar en equipos de 2 alumnos.
4-INFORME
Se elaborar un informe en el cual se detalla el sistema cromatogrfico empleado, la
preparacin de las soluciones, los datos obtenidos y el procesamiento de los mismos.

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Exactas y Naturales
TRABAJO PRCTICO N 10:CONTROL DE CALIDAD

TALLER: ANLISIS DE MONOGRAFAS DE DISTINTOS TIPOS DE PRODUCTOS
BOTNICOS
1. OBJETIVO
Que el alumno pueda interpretar una monografa farmacopeica de un producto botnico,
comprendiendo los distintos tipos de ensayos de identificacin, pureza y valoracin de acuerdo
a las caractersticas de la droga descripta.
2. MATERIALES
Se trabajar con las monografas adjuntadas en el APNDICE y se contestarn las preguntas
correspondientes en cada caso en equipos de 2 personas, luego de lo cual se discutirn las
conclusiones de forma grupal.

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Exactas y Naturales
PROBLEMAS DE CONTROL DE CALIDAD

1) Qu ensayos realizara sobre una droga vegetal para evaluar si:
a) Est contaminada con tierra y/o arena.
b) Tiene un contenido de humedad > 12%.
c) Ha sido adulterada con otra especie semejante.
d) Est agotada en sus principios activos.
e) (Droga aromtica) ha sido desecada a alta temperatura.
2) Enumere los ensayos que realizara sobre los siguientes productos botnicos para
determinar su calidad:
a) Aceite de ricino para cpsulas
b) Cscara sagrada segn Farmacopea Argentina.
c) Cscara sagrada en polvo segn Farmacopea Argentina.
d) Comprimidos de Cscara sagrada segn USP.
e) Extracto seco de Ginkgo con 24 % de glicsidos flavonoides expresados como rutina.
f) Comprimidos de extracto seco de Sen (conteniendo 8% de sennsidos expresados
como sennsido B) y 200 mg de polvo de Regalz.
g) Tisana con 20% de hojas de boldo, 30% de semillas de ans y 50% de tallos de Cola de
caballo.
h) Polvo de belladona con 0.08% de alcaloides totales expresados como hiosciamina.
3) Qu ensayo especfico para su actividad realizara sobre:
a) un extracto de Quillaja saponaria (que contiene saponinas) que se utiliza en un
shampoo de uso veterinario.
b) Una muestra de polvo de semillas de Psillium que se utiliza para un laxante de accin
mecnica.
c) Aceite de almendras de uso cosmtico.
4) Para elaborar un fitoterpico sedante, un laboratorio compra un extracto hidroalcholico de
Passiflora cuyos principios activos son glicsidos flavonoides.
a) Qu ensayos realizara sobre dicho extracto para controlar su calidad?
b) Y sobre el producto terminado?
5) Disee un mtodo de control de calidad para unas gotas colerticas que contienen extracto
hidroalcholico de alcachofa y extracto de boldo.

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Exactas y Naturales
6)Desarrollo un mtodo de control de calidad para comprimidos que contienen extracto seco de
manzanilla y polvo de corteza de frngula.
7) Se desea evaluar el reemplazo de una esencia de lavanda de Egipto (de calidad ptima) por
una de otro origen. Desciba un procedimiento que le permita saber si dicho reemplazo es
factible
8) Cmo procedera para reemplazar un extracto hidroalcholico de Sylibum marianum de un
determinado proveedor (principios activos: flavonoides) por otro de distinto proveedor?
9) Explique qu ensayos realizara sobre unas gotas antiespasmdicas que contienen tintura de
belladona y clorhidrato de papaverina para comprobar si las mismas cumplen cuali y
cuantitativamente con la frmula declarada.

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-APNDICEMONOGRAFAS

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cont..
Contina..

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Facultad de Arquitectura
y Urbanismo
Arquitectura
Forma y
Comunicacin 1A
Ficha N 2
Ctedra:
Arq. Eduardo Garca Lettieri
Lunes a viernes de 9 a 21 h.
Torre Universitaria, Zabala 1837, primer nivel inferior.
C1426DQG - CABA
Telfono: 4788-5400, internos 5002 y 2122.
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www.ub.edu.ar
Arq. Eduardo Garca Lettieri

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Arq. Claudio Alberto Delbene
Arq. Raquel Arce
Arq. Roxana Di Risio
Arq. Juan Duarte

4322 - Completo - Farmacognosia - TP - Debenedetti

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