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MATERIAL
PARA EXAME
MICROBIOLGICO
de
Kit
ou
de
Consultar as Normas de Precaues para Isolamento Hospitalar (SES-DF, 2002) e o Mdulo Especial IV:
Exposio de Risco Bio lgico (DGST, 2007), d isponvel www.sade.df.gov.br,
no
link Regional de
Taguatinga/ Controle de Infeco Hospitalar.
3
LA B : Lavado broncoalveolar
4
BEP : Broncoscopia com escovado protegido
Meio de transporte serve para manter a viabilidade das bactrias, porm sem
permit ir a multiplicao. Exemplos de meios especiais: Stuart, Amies, Cary Blair.
Material colhido com swab deve ser processado imediatamente ou imerso em meio
de transporte. O swab conservado em meio de transporte mantido, geralmente,
em temperatura ambiente at o momento do processamento. No ultrapassar o
tempo indicado pelo laboratrio (em geral, 8 horas).
Material em que h suspeita da presena de bactrias mais sensveis s variaes
de temperatura ou de umidade como: Neisseria meningitides, Neisseria
gonorrhoeae, Haemophilus influenzae e Streptococcus pneumoniae devem ser
colhidos em meio de transporte ou no prprio meio de cultura. No refrigerar e
enviar imediatamente ao Laboratrio de Microbiologia.
Material naturalmente rico em flora microbiana (fezes e escarro) ou obtido de stios
de difcil descontaminao (urina, secrees de orofaringe, leses superficiais) deve
ser transportado com os cuidados nec essrios manuteno da proporo da f lora
original. Se o material for mantido temperatura ambiente por perodo superior a
30 minutos, pode ocorrer multiplicao bacteriana (microbiota endgena) e,
conseqentemente, prejudicar o isolamento do agente inf eccioso.
Material clnico proveniente de stios estreis (sangue, lquor, lquido asctico,
sinovial, etc.) deve ser colhido e semeado diretamente em meios de cultura,
transportado temperatura ambiente ao laboratrio e colocado em estufa entre
35 a 37C. Na impossibilidade deste procedimento, coletar o material em frasco
esterilizado e conserv-lo temperatura ambiente, at o momento do
processamento.
amostras
Volume de sangue:
Quanto maior o volume de sangue, por amostra, melhor a recuperao do
microrganismo; porm, necessrio observar a proporo indicada de sangue / meio
de cultura e a idade do paciente.
Mtodo automatizado:
Em adultos 1
0 ml (volumes menores de sangue podem ser utilizados, porm
com diminuio na freqncia de recuperao do agente infeccioso).
Em crianas 1 a 4 ml em frasco peditrico
Em neonatos 0,5 a 1 ml em frasco peditrico
Tcnica de coleta:
necessrio um rigor na execuo da tcnica, uma vez que h possibilidade de
crescimento de contaminantes da pele.
Higienizar as mos (higiene com gua e sabo ou frico com lcool)
Aps a retirada do lacre, desinfetar a tampa do frasco de hemocultura com
lcool 70%
Selecionar um local de puno venosa
Fazer anti-sepsia rigorosa da pele com lcool 70%, em movimentos circulares e
de dentro para fora. Esta rea no dever mais ser tocada com os dedos
Aguardar secar naturalmente (1 a 2 minutos), no soprar, abanar ou enxugar
Calar luvas de procedimento
Coletar assepticamente a quantidade de sangue recomendada
Inocular nos f rascos contendo o meio de cultura (aerbio ou anaerbio) e agitar
levemente (No necessrio trocar a agulha aps a puno desde que no
ocorra contaminao da agulha)
Identif icar cada frasco, anotando nome, registro e horrio da coleta em campo
prprio no rtulo (no usar f ita adesiva e nem danificar o cdigo de barras do
frasco)
Enviar imediatamente o material ao laboratrio (no colocar em geladeira)
Obs:
1) No recomendada a tcnica de coleta a partir de cateteres vasculares, exceto para
fins de comparao com sangue perifrico (mtodo quantitativo ou aferio de p erodo
de crescimento).
2) Puno arterial no traz benefcios quanto ao isolamento de microrganismo.
3.2- Se creo de fe rida cutnea ou cirrgica, abscesso ou fstula
Preferencialmente, coletar material aps lavar a leso com soro f isiolgico e/ou
desbridamento. A secreo pode ser coletada de duas maneiras:
- por aspirao da secreo ou da coleo no-drenada utilizando seringa e
agulha estreis 5 ou somente a seringa (o material deve ser encaminhado
imediatamente ao laboratrio).
- com swab ( a tcnica menos recomendada), tendo o cuidado de imergi-lo no
meio de transporte ou encaminh-lo imediatamente ao laboratrio.
O termo secreo de ferida no apropriado para informar o tipo de material.
Relatar no pedido o stio anatmico e as informaes adicionais (tipo de leso,
secreo superficial ou profunda, fstula, etc.).
O uso da agulha pode ser contra-indicado, neste caso, usar somente a seringa ou um pequeno cateter.
Realizar anti-sepsia do local (pele ntegra). Se leso aberta, fazer limpeza com
soro fisiolgico, de acordo com a tcnica do curativo.
Aspirar o material com seringa e agulha estreis ou somente com a seringa
As colees drenadas podem ser aspiradas diretamente na seringa tipo
insulina ou por meio de um pequeno cateter
Quando no houver secreo suficiente, injetar pequena quantidade de
soro fisiolgico estril e aspirar com a mesma seringa
O material deve ser transportado na prpria seringa, com eliminao do ar e
vedao (principalmente nos casos de cultura para anaerbio) ou em frasco
estril.
Anotar o horrio da coleta, identificar o material e encaminhar ao laboratrio
3.4- Urocultura
A urina na bexiga estril, porm, com exceo da coleta suprapbica, todos
os mtodos propiciam a contaminao da urina com a microbiota uretral. A coleta de
urina do jato mdio o mtodo mais utilizado, por no ser invasivo e pela relativa
confiabilidade, quando realizada dentro de tcnica adequada. A presena de piria e de
bactrias ao exame microscpico da urina no-centrifugada corada pelo Gram devem
ser correlacionados.
fazer
Obs: Para a pesquisa de BAAR e cultura para micobactria, recomenda -se: coletar a
primeira urina da manh em trs dias consecutivos (trs amostras). Solicitar sempre a
cultura uma vez que a pesquisa de BAAR fornece, muitas vezes, resultados falso negativos.
3.5- Ponta de Catete r Intravascular
A tcnica de cultura semiquantitativa ( mtodo de Maki ou do rolamento) da
ponta de cateter a mais utilizada para determinar a relao entre colonizao
externa do cateter e sepse. Para pesquisa de colonizao intraluminal, outras tcnicas
so necessrias.
Tcnica de retirada do catete r:
Os mesmos cuidados de anti-sepsia utilizados na introduo do cateter devem
ser adotados no momento da retirada do fragmento do cateter para cultura:
Fazer uma rigorosa anti-sepsia da pele ao redor do cateter
Remover o cateter utilizando uma pina estril, com cuidado para no tocar o
cateter na pele
Assepticamente, com tesoura ou lmina estril, cortar cerca de 5 cm da
extremidade distal do cateter
Colocar o pedao do cateter num frasco estril de boca larga e sem meio de
cultura
Anotar o horrio e identif icar o frasco
Transportar ao laboratrio imediatamente, evitando a excessiva secagem
OBS.: catteres aceitveis para cultura semiquantitativa: central, PVC, Hickman,
Broviac, perifrico, arterial, umbilical, alimentao parenteral e Swan-Ganz.
3.6- Lquidos orgnicos estreis (Pleural, Asctico, Sinovial, bile, etc.)
3.7- Lquor
A puno lombar deve ser feita sob condies estritas de assepsia. Recomenda se que o material seja colhido diretamente no meio de cultura, j que uma demora na
semeadura implica em grande queda das taxas de isolamento de bactrias. Tanto
Neisserias como Haemophilus no resistem s temperaturas baixas, da porque o
lquor para cultura no deve ficar em geladeira.
Fazer anti-sepsia rigorosa da pele
Utilizar o kit especial do LACEN (Antes de iniciar a puno, retirar o kit da
geladeira para que no momento do uso o mesmo esteja temperatura
ambiente)
Obs: Para pesquisa de BAAR ou Cryptococcus (colorao com tinta da China), coletar
pelo menos 3 ml de lquor.
3.8- Escarro
A orientao para a coleta deste material deve ser clara, evitando ao mximo
coletar saliva ou material de vias areas supe riores, preferencialmente a coleta deve
ser feita sob superviso direta da equipe de assistncia.
Coletar pela manh com o paciente em jejum, aps higiene oral (escovar os
dentes sem o uso de pasta dental e fazer gargarejos)
O escarro deve ser coletado aps tosse profunda e depositado diretamente em
frasco esterilizado de boca larga com tampa rosqueada
Encaminhar ao laboratrio por perodo no superior a 30 minutos
Obs: Nos casos de suspeita de infeco por micobactria ou fungo, coletar pelo menos
trs amostras, em dias consecutivos (1 amostra diria). Nos casos de suspeita de
pneumocistose ou quando a expectorao escassa, esta pode ser induzida por meio
de inalao.
3.9- Aspirado traqueal (ou se creo endotraqueal)
O aspirado traqueal realizado em paciente intubado ou traqueostomizado por
meio de sonda de aspirao estril. A cultura desse material, assim como a de escarro
para o diagnstico de pneumonia, muito questionvel quanto sua utilidade. Ainda
que tambm controverso, utiliza-se cultivo de aspirado traqueal com tcnica
quantitativa com o objetivo de melhorar a especificidade.
Tcnica:
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feita
em
situaes
Tcnica
MRSA (Methicillin Resistant Staphylococcus aureus) so cepas de S.aureus resistentes meticilina (na
prtica, a o xacilina o antibitico utilizado no teste de sensibilidade e equivalente meticilina). Esta
resistncia atinge automaticamente todos os antibiticos beta-lactmicos (penicilinas, cefalosporinas,
carbapenems e monobactmicos).
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Se o material escasso, alguns autores recomendam mo lhar o swab em soro fisiolg ico estril.
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