UNIVERSIDAD DEL CENTRO DE VERACRUZ

Q.F.B. 7 CUATRIMESTRE

MATERIA:

BACTERIOLOGIA I

PRESENTA:

BERNARDO FELIPE VELEZ

TINCION DE
ZIELH NEELSEN

TRES VALLES; VER.

INTRODUCCION
La tincin de Ziehl-Neelsen es una tcnica de tincin diferencial rpida y
econmica, usada para la identificacin de bacterias cido-alcohol resistentes
(BAAR), como M. tuberculosis o el Phylum Apicomplexa (coccidios intestinales)
entre otros.
Fue descrita por primera vez por dos mdicos alemanes, Franz Ziehl (1859
a1926), un bacterilogo y Friedrich Neelsen (1854 to 1894), un patlogo.

FUNDAMENTO
La propiedad que presentan algunas bacterias de resistir la decoloracin con
cidos fuertes despus de ser coloreadas con solucin de fucsina caliente, permite
reunirlas bajo la denominacin general de bacterias cido resistentes o cidoalcohol resistentes. La cido-alcohol resistencia es la capacidad de incorporar
ciertos colorantes y retenerlos despus de someterlos a la accin de cidos y
alcohol y est determinada por la presencia en la pared celular de los cidos
miclicos que son cidos grasos de cadenas ramificadas de alto peso molecular
(60 a 70 tomos de carbono).

Las micobacterias son bacilos cido-alcohol resistente, corto, ligeramente curvo.

El gnero Mycobacterium, incluido en esta clasificacin, comprende especies
patgenas para el hombre, animales y especies saprfitas. El grado de cidoalcohol resistencia es variable entre las especies de este gnero y est
relacionado muchas veces con las condiciones culturales, no pudiendo utilizarse
esta diferencia para distinguirlos entre s.
Los bacilos cido-alcohol resistentes (BAAR) se observan de color rojo al ser
coloreados con los colorantes para Ziehl Neelsen, mientras que otros grmenes y
clulas toman distintos tonos de azul debido al azul de metileno que se utiliza
como colorante de contraste. La coloracin de Ziehl Neelsen constituye una
tcnica sencilla rpida y econmica, de baja sensibilidad pero es una valiosa
herramienta para detectar los casos de tuberculosis pulmonar.

OBJETIVO

Realizar la tincin de Ziehl-Neelsen a partir de expectoraciones de los

propios alumnos o muestras que hayan llevado al laboratorio.

Visualizar las tinciones de Ziehl-Neelsen positivas.

PRECAUCIONES

Solamente para uso diagnstico in vitro. Uso profesional exclusivo.

No utilizar el producto si al recibirlo su envase est abierto o daado.
No utilizar el producto si existen signos de contaminacin o deterioro, as
como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el producto.
Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y manipularlas
apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad establecidas por el
laboratorio. Evitar la formacin de aerosoles y trabajar con recipientes
cerrados.
Las caractersticas del producto pueden alterarse si no se conserva
apropiadamente.
Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del mismo
segn reglamentaciones vigentes.

MATERIAL, REACTIVOS Y MUESTRA BIOLOGICA

MATERIALES
Portaobjetos

Aplicadores de madera

Mechero

REACTIVOS
Fucsina fenicada

Alcohol acido

Azul de metileno

Aceite de inmersin

MUESTRA BIOLOGICA

Esputo

EQUIPO

Microscopio

METODOLOGIA
1. Anotar os datos del paciente y las caractersticas de las muestras.
Nombre
Edad y sexo
Aspecto
Diagnostico

PACIENTE 1
Juan Antonio Hernndez Prats
64 aos, masculino
Esputo amarillo, mucopurulento con saliva
Tos recurrente

Nombre
Edad y sexo
Aspecto
Diagnostico

PACIENTE 2
Aurora Carrera Gonzales
70 aos, femenino
Esputo verdoso, mucopurulento
Contacto con paciente de TB

Nombre
Edad y sexo
Aspecto
Diagnostico

PACIENTE 3
Francisco Ortiz Rojas
36 aos, masculino
Esputo hialino, con saliva
Tos de ms de dos meses

2. Realizar un frotis de cada muestra

3. Ya que tenemos el frotis de cada muestra preparado, pasaremos a realizar

la tincin de Zielh Neelsen (rotular los frotis)
4. Colocar los frotis sobre un puente de tinciones.

5. Cubrir los frotis con fucsina fenicada por 5 minutos.

Calentar las laminillas por debajo dejando que se emitan vapores y evitando
que el colorante empiece a hervir.

6. Enjuagar las laminillas con abundante agua (dejar que el agua escurra por
las paredes).

7. Secar las laminillas

8. Cubrir las laminillas con alcohol acido por 30 segundos.
9. Lavar con abundante agua y dejarlas escurrir
10. Por ltimo se cubren con azul de metileno durante un minuto.

11. Lavar con abundante agua y escurrir

12. Observar al microscopio en 10x y 100x utilizando en este ltimo aceite de

inmersin.

RESULTADOS
Las muestras que llevamos al ser observadas al microscopio se encontraron
negativas.

Observaciones
Paciente 1: NEGATIVO
Paciente 2: NEGATIVO
Paciente 3: NEGATIVO

10x

100x

ANEXO
Laminilla positiva otorgada por el catedrtico.

BAAR

BAAR

CONCLUSION

La coloracin de Ziehl Neelsen, es el mejor mtodo de coloracin para los bacilos

tubrculos, ya que estos pertenecen al gnero de cido alcohol resistente (BAAR),
donde esta tincin acta sobre la capa de peptidoglicano de la Mycobacterium
tuberculosis tindolas de rojo fucsia, esto gracias a las reacciones fsico- qumico
que produce en dicha bacteria, para su diferenciacin se utiliza el azul de metileno
como contraste.
Para la observacin de los bacilos tuberculosos se emplea la baciloscopia, que es
la tcnica fundamental en toda investigacin bacteriolgica de la tuberculosis, la
cual por su eficacia en cuanto a la deteccin de casos, control de tratamiento, bajo
costo y de rpida ejecucin, es utilizada a nivel mundial dando buenos resultados,
y con muy pocas probabilidades de errores al diagnosticar tuberculosis.

BIBLIOGRAFIA

http://www.britanialab.com/productos/183_inserto_es.pdf
https://es.scribd.com/doc/39054818/Tincion-de-Ziehl-Neelsen
https://es.wikipedia.org/wiki/Tinci%C3%B3n_de_Ziehl-Neelsen
https://es.scribd.com/doc/51863770/PRACTICA-4-ZHIEL-NEELSEN