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NOTES THORIQUES
Dr. RACHID SALGHI : Professeur Habilit lEcole Nationale des Sciences Appliques dAgadir
1.
2.
3.
4.
5.
6.
1.
2.
Introduction
Les constituants chimiques, prsents dans les aliments ou dans les matires premires
utilises pour leur fabrication, sont trs diversifis et se retrouvent en concentrations
variables selon les aliments. Les principaux constituants alimentaires sont:
- leau
- les protines
- les lipides
- les glucides
- les minraux
Dans les laboratoires dindustries alimentaires, il est parfois ncessaire, pour diverses
raisons, de faire lanalyse de certains de ces constituants alimentaires. Dans le cadre
de ce cours, nous nous limiterons aux analyses physicochimiques considres comme
les analyses de base, soient:
- la teneur en eau
- la teneur en solides totaux
- la teneur en protines
- la teneur en lipides
- la teneur en glucides
- la teneur en cendres
- lacidit totale titrable
- lacidit volatile
Chapitre 1
Mthodes de prparation et de prlvement des chantillons
La prparation de lchantillon et le prlvement de la portion servant lanalyse sont
les deux premires tapes dune analyse physico-chimique.
Ces tapes sont
importantes pour la russite dune analyse, car lexactitude du rsultat en dpend. Les
techniques qui seront utilises lors de ces tapes devront permettre de respecter le
principe suivant:
Laliquote prlev pour lanalyse doit tre le plus reprsentatif possible du lot
CHANE DE PRLVEMENT
LOT
CHANTILLON
SOUS-CHANTILLON
ALIQUOTE (analyse
physico-chimique)
Lot:
Aliquote:
appel parfois la prise dessai, cest la portion de lchantillon ou du souschantillon utilise pour une analyse physico-chimique.
Pour les laits crus, chauffer lchantillon 38 C, mlanger par inversion ou par
o
transvidage entre deux contenants, ramener la temprature 20 C, mlanger de
nouveau et prlever immdiatement laliquote.
Beurre et margarine
o
3) Boissons gazeuses
Enlever le CO2 par brassage dans un grand erlenmeyer. Brasser lentement au dbut
puis vigoureusement pour expulser tout le gaz. Si ncessaire, filtrer dgaze pour
enlever les matires en suspension. Prlever laliquote.
4) Aliments base de crales (Cereal foods)
Pain
Peser le pain frais. Couper en tranches de 2 3 cm dpaisseur et laisser scher sur un
papier dans une chambre tide pendant 15 20 heures. Peser les tranches sches.
Broyer les tranches de pain pour obtenir des particules qui traversent un tamis de 20
mesh.
Conserver les particules dans un rcipient ferm hermtiquement. Bien
mlanger avant de prlever laliquote.
5) Sucres et produits sucrs (Sugars and sugar products)
Miel
Si lchantillon est liquide, bien mlanger avant de prlever laliquote.
Si lchantillon est solide ou liquide avec dbut de cristallisation, chauffer dans un baino
o
marie 60 C pendant 30 minutes, puis 65 C pour liqufier compltement le miel.
Bien mlanger avant de prlever laliquote.
Sirop drable
o
Instruments de prlvement:
- pipette
- seringue jetable en plastique
- compte-gouttes jetable
- nacelle jetable, bcher
- cuillre gradue,
- pincette en mtal
- spatule
- papier-filtre
- etc ...
En conclusion, la technique utilise pour le prlvement de laliquote dpend de
plusieurs facteurs:
- la nature de lchantillon
- ses caractristiques physiques (viscosit, produit hygroscopique, etc)
- le rcipient dans lequel il sera plac
- la suite du protocole exprimental
- etc ...
Chapitre 2
Mthodes danalyses physico-chimiques
La recherche dune mthode danalyse physico-chimique se fait normalement en
consultant les manuels danalyse publis priodiquement par des organismes
internationaux, dont les principaux sont:
- lAOAC: Association of Official Analytical Chemists
Cet organisme publie tous les 4 ou 5 ans une version rvise du manuel Official Methods of Analysis. Ce manuel contient plusieurs milliers de mthodes danalyses physicochimiques applicables au domaine alimentaire.
- la FIL: Fdration Internationale de Laiterie
Cet organisme publie des mthodes, appeles normes, pour lanalyse des
produits laitiers.
On retrouve deux types de mthodes danalyse, les mthodes officielles et les mthodes
de rfrence.
Mthode officielle
Une mthode officielle est une mthode analytique accepte et recommande par les
organismes internationaux qui en ont valu les caractristiques de performance
(prcision, exactitude, etc ...) par des tudes collaboratives impliquant plusieurs
laboratoires travers le monde.
Mthode de rfrence
Une mthode de rfrence est une mthode officielle reconnue par les organismes
internationaux comme tant la mthode qui donne le rsultat le plus exact, cest--dire
le plus prs de la valeur relle de la concentration dun constituant sous analyse. La
mthode de rfrence donne habituellement les rsultats les plus prcis, par
comparaison avec les autres mthodes danalyse du constituant.
1. Mthodes de dosage de leau et des solides totaux
Les solides totaux sont dfinis comme tant le rsidu dun aliment restant aprs
limination de leau, dans des conditions exprimentales donnes. lexception des
aliments contenant des constituants volatils (alcool, huile essentielle, etc ...), la somme
- crme glace:
- fromage
- crales ou lgumineuses en grain:
% S.T. =
Masse (S.T.)
x 100 =
Masse (chantillon)
% H2O = 100 - % S.T
Conditions de chauffage et de pression:
o
doit tre calibre de faon ce que le rsultat obtenu corresponde celui obtenu avec
la mthode de rfrence. Les variables ajustables sont:
-
M (eau) x 100
M(chantillon)
Pain Lait
Saumon
Pomme
Bacon
Boeuf frais
Poulet cru
Asperge
Cresson
pinard
% cendres
(base
humide)
1,7-2,6
0,7
1,0
0,3
2,7-6,2
0,8-1,0
1,0-1,2
0,7
1,1-1,9
1,5
% cendres
(base sche)
2,6-4,7
5,4
2,7
1,9
3,2-14,1
1,9-3,2
3,0-4,7
10,0
14,9-17,2
20,6
Principe de la mthode
On pse lchantillon. On le sche puis on le pse de nouveau si la teneur en cendres
doit tre dclare sur une base sche. On incinre lchantillon haute temprature,
puis on pse le rsidu, cest--dire les minraux. Le % de cendres totales est calcul
sur une base humide, mais le plus souvent sur une base sche pour plus de
reproductibilit dans les rsultats.
% cendres totales = M(cendres) x 100
(base humide)
M(ch. humide)
% cendres totales = M(cendres) x 100
(base sche)
M(ch. sec)
2.2. Cendres solubles et insolubles dans leau
Les cendres solubles et insolubles dans leau peuvent tre utiles dans certains aliments.
Par exemple, elles servent valuer le contenu en fruits des confitures, ou la quantit
de corps trangers (ajout de sable) dans les pices.
Principe de la mthode
Pour dterminer les cendres insolubles dans leau, on dissout la partie soluble des
cendres totales dans leau chaude quon filtre sur un papier filtre. Le rsidu insoluble sur
le papier filtre est incinr de nouveau pour brler le papier filtre. On pse les cendres
insolubles. Le % de cendres solubles est dduit par calcul.
1) Calculs par rapport lchantillon sec ou humide
% cendres insolubles = M(cendres insolubles) x 100
M(ch. sec ou humide)
% cendres solubles = % cendres totales - % cendres insolubles
2) Calculs par rapport aux cendres totales
% cendres insolubles = M(cendres insolubles) x 100
M(cendres totales)
% cendres solubles = M(cendres solubles) x 100
M(cendres totales)
Facteurs influenant la prcision et lexactitude des rsultats
1. Aliments riches en gras (poissons, fromages) ou en substances volatiles (pices).
- claboussures pendant lincinration (rsultats non reproductibles).
- condition particulire dopration:
2. Aliments riches en sucres (sirops, confitures).
- formation de mousse pendant lincinration
- condition particulire dopration:
3. Incinration incomplte.
- Une incinration sera incomplte si la temprature est trop basse ou si le temps
dincinration est insuffisant. Les cendres doivent tre de couleur blanche ou
grise, occasionnellement de couleur rougetre ou verte. Elles doivent tre libres
de particules de carbone imbrles ou de morceaux liqufis.
Lammoniac est ensuite distille par la vapeur deau et pige dans une solution dacide
borique.
Lammoniac ragit avec lacide borique pour former des sels borates
dammonium:
tape 3: Titrage de lammoniac
Lammoniac sous la forme de borates dammonium est titr directement laide dune
solution standardise dacide, tel HCl ou H2SO4, et dun indicateur:
- On fait un blanc en mettant tous les ractifs sauf lchantillon, pour soustraire lammoniac contenu dans les ractifs de lammoniac contenu dans lchantillon.
Calcul du % de protines dans lchantillon
Le % de protines dans lchantillon est obtenu en multipliant le % dazote par un
facteur F dpendant du type daliment analys.
% protines = % N x F = (VE- VB) x CN x 14,01 x F
M(chantillon)
Le tableau suivant montre les principaux facteurs utiliss avec la mthode Kjeldahl.
Aliment
farine de bl
pain
produits
laitiers
amandes
arachides
noix du Brsil
autres noix
facteur
gnral
Facteur
5,70
5,70
6,38
5,18
5,46
5,46
5,30
6,25
- Pour les aliments dont on ne connat pas la protine principale ou qui sont prpars
avec des ingrdients contenant plusieurs types de protines, on utilise le facteur gnral
de 6,25.
- La valeur du % dazote obtenue par la mthode Kjeldahl nest pas une valeur exacte
du contenu dazote protique dans lchantillon, car lazote des acides amins libres,
des acides nucliques, des sucres amins, etc ..., y est inclus.
- La valeur du % de protines nest pas non plus une valeur exacte, car le facteur utilis
tient compte uniquement de la principale protine contenue dans laliment.
- Lorsquon rapporte les rsultats, on doit indiquer que les valeurs sont obtenues par la
mthode Kjeldahl, en mentionnant le facteur utilis.
Facteurs affectant la prcision et lexactitude des rsultats
1. Erreur sur le volume de HCl pour titrer le blanc.
2. Concentration inexacte de la solution titrante de HCl.
3. Perte dammoniac pendant la distillation.
4. Temps de digestion trop court pour minraliser tout lchantillon.
5. Volume trop petit de HCl requis pour titrer les chantillons.
a) le volume de HCl requis pour titrer les chantillons est denviron 3,5 ml.
b) le volume de HCl requis pour titrer les chantillons est denviron 10 ml.
- les capsules de cellulose sont permables au solvant et la matire grasse qui y est
dissoute. Ces capsules sont jetables.
% lipides = M (lipides) x 100 =
M(chantillon)
Facteurs influenant la prcision et lexactitude des rsultats
1. Temps dextraction de la matire grasse.
Un temps dextraction trop court donne des rsultats inexacts, cest--dire infrieurs aux
rsultats attendus.
2. Grosseur des particules de laliment solide.
Laliment doit tre broy de faon offrir la plus grande surface de contact possible au
solvant extracteur.
3. vaporation incomplte du solvant avant la pese de la matire grasse.
4. Qualit du solvant extracteur.
Les solvants organiques sont rarement purs et contiennent des rsidus huileux non
vaporables. On doit sassurer que la masse de rsidus ninfluence pas le rsultat de
faon significative.
On peut faire un blanc en vaporant la quantit de solvant utilise dans la mthode et
en pesant le rsidu. Un calcul simul permet de vrifier si le rsultat est survalu de
faon significative ou non.
4.2. Mthode Goldfisch
La mthode Goldfisch est une variante (appareillage diffrent) de la mthode Soxhlet.
Cest une mthode gravimtrique utilise pour la dtermination de la matire grasse
dans les aliments solides dshydrats.
Principe de la mthode
Laliment solide est pes et plac dans une capsule de cellulose ou un contenant
poreux dalundum. Lchantillon est extrait en continu par de lther thylique
o
bullition (P.E. 35 C) qui dissout graduellement la matire grasse. Le solvant contenant
la matire grasse retourne dans un bcher plac sous le contenant dalundum. Comme
seul le solvant peut svaporer de nouveau, la matire grasse saccumule dans le
bcher jusqu ce que lextraction soit complte. Une fois lextraction termine, lther
est vapor et la matire grasse pese.
% lipides = M (lipides) x 100 =
M (chantillon)
Facteurs influenant la prcision et lexactitude des rsultats
1. Temps dextraction de la matire grasse.
- voir mthode Soxhlet
2. Grosseur des particules de laliment solide.
- voir mthode Soxhlet
3. Qualit du solvant extracteur.
- voir mthode Soxhlet
4. vaporation incomplte du solvant avant la pese de la matire grasse.
Teneur en gras survalue.
5. Formation de canaux dans lchantillon.
Lther peut occasionnellement former des canaux travers lchantillon et ne passer
que par ces canaux. Le rsultat obtenu est alors infrieur celui attendu.
6. Dtrioration de la capsule dalundum.
cause de son cot relativement lev, la capsule dalundum est rutilisable plusieurs
fois. Ce matriau inorganique sgrne parfois pendant une extraction et de petites
particules tombent dans le bcher, augmentant la masse de matire grasse. Le rsultat
obtenu est alors suprieur celui attendu.
4.3. Mthode Babcock
La mthode Babcock est une mthode officielle utilise pour la dtermination des lipides
dans les produits laitiers. Cette mthode volumtrique est rapide et peu coteuse, mais
moins prcise que la mthode de rfrence Mojonnier. De plus, les rsultats obtenus
par cette mthode sont, en moyenne, lgrement plus levs que ceux obtenus par la
mthode Mojonnier.
Principe de la mthode
Le produit laitier pes (ou pipett pour le lait) est dissout dans lacide sulfurique dont
laction sert librer la matire grasse qui remonte la surface de la solution. Par
addition deau et centrifugation, la matire grasse est dirige dans la partie gradue du
o
butyromtre. On mesure, une temprature de 57 C, la hauteur dune colonne de gras
sur une chelle gradue en % P/P de matire grasse.
Matriel: - tube Babcock
- centrifugeuse Babcock
o
- bain thermostat 57 C
Particularits de la mthode:
-
Pour les laits crms, on utilise un butyromtre spcial gradu jusqu 0,5% en
divisions de 0,01%. Le prlvement de lchantillon est de 18,0 g (17,6 ml).
Pour les autres produits laitiers liquides (crmes, crmes glaces, etc), on utilise
un butyromtre 0-20% (divisions de 0,25%) ou 0-50% (divisions de 0,5%). Le
prlvement de lchantillon est de 9,0 g. La prcision de lanalyse est de 0,25
% ou 0,5% selon le butyromtre utilis.
Pour les produits laitiers solides, tels les fromages, on utilise un butyromtre Paley 0-20% ou 0-50%. Le prlvement de lchantillon est de 9,0 g. La prcision
de lanalyse est de 0,25% ou 0,5% selon le butyromtre utilis.
3. Prlvement de lchantillon.
Le prlvement de laliquote doit se faire le plus rapidement possible, lorsque
lchantillon perd facilement son humidit.
4.4. Mthode Mojonnier
La mthode Mojonnier est la mthode de rfrence pour la dtermination de la matire
grasse dans les produits laitiers. Cette mthode gravimtrique, une adaptation de la
mthode Rose-Gotlieb, utilise un appareil spcial, lappareil Mojonnier.
Principe de la mthode
Le produit laitier est pes puis dissout dans la phase aqueuse contenant de lhydroxyde
dammonium et de lalcool thylique. La matire grasse est extraite laide dun solvant
organique immiscible avec leau, compos dther thylique et dther de ptrole. La
phase organique est dcante dans un plat, le solvant vapor et la matire grasse
pese.
% lipides =
M (lipides) x 100 =
M (chantillon)
4.
5.
25
re
cat
D-glucose + D-fructose
26
2.
: 4,6 - 236,9 mg
: 5,1 - 253,7 mg
: 5,2 - 245,6 mg
: 7,7 - 342,0 mg
: 6,2 - 405,8 mg
On doit utiliser des colonnes de conversion spcifiques pour les aliments contenant un
mlange de sucre inverti et sucrose ou un mlange de lactose et sucrose.
Dosage indirect du sucrose
Le sucrose, un disaccharide non rducteur, ne peut donc pas tre dos directement par
cette mthode. Cependant, il est possible de le doser indirectement en faisant dabord
une hydrolyse du sucrose, puis en appliquant la mthode sur les produits dhydrolyse.
En effet, lhydrolyse du sucrose donne des quantits gales de D-glucose et de Dfructose.
Facteurs influenant la prcision et lexactitude des rsultats
1.
2.
COOH
|
CH-OH
|
CH2
|
COOH
Ac. malique
M = 134 g/mole
M.E.=
CH2-COOH
COOH
|
|
HO-C-COOH
CH-OH
|
|
CH2-COOH
CH-OH
Ac. citrique
|
M = 192 g/mole
COOH
M.E.=
Ac. tartrique
M = 150 g/mole
M.E.=
Les deux principales analyses tudies sont lacidit totale titrable et lacidit volatile.
6.1. Acidit totale titrable
Principe de la mthode
Laliment est dabord dilu si la concentration dacides organiques est importante. Une
portion de la solution dilue est ensuite titre par une solution standardise de NaOH
0,1N, en prsence dun indicateur. Pour les aliments trop colors (vin rouge, lait au
chocolat, etc), on utilise un pH mtre pour la dtection du point de virage (pH 8,3 pour la
phnolphtaline).
H2CO3
Ac. carbonique
Pour viter une survaluation de lacidit totale, on dgaze leau utilise par
chauffage bullition.
2.
3.
2.
Chapitre 3
Analyse des rsultats
1. Recherche de la valeur attendue
Lorsquon effectue une analyse sur un aliment, le rsultat obtenu devrait tre compar
avec le rsultat attendu, afin dvaluer le degr de fiabilit de lanalyse.
1.1. Tables de composition des aliments
On retrouve dans certains livres sur les aliments des tables donnant la composition
chimique dtaille des aliments:
-
=
o:
(X - M)
N-1
Dautre part, lcart-type M par rapport la moyenne est donne par la relation
suivante:
e
M =
N
N.B.