RESUMO ARTIGO

CULTIVO in vitro DE EMBRIES IMATUROS DE TANGERINEIRA PONC EM

FUNO DO pH E DA CONCENTRAO DE GAR
In vitro CULTURE OF PONC MANDARIN IMMATURE EMBRYOS: pH x AGAR
CONCENTRATION

O artigo trata sobre a cultura de tecidos vegetais, que possui grande

importncia no melhoramento de espcies de citros por proporcionar o
resgate de embries hbridos imaturos, oriundos de cruzamentos
interespecficos (entre duas ou mais espcies diferentes) e intergenricos
(cruzamentos de espcies de dois ou mais gneros diferentes). Uma vez que
muitas vezes so encontradas incompatibilidades em tais cruzamentos, o
que resulta em sementes com embries abortivos.
Os meios de cultura slidos ou semi-slidos normalmente so solidificados
com gar e a consistncia do meio de cultura depende da concentrao
(que pode variar de 0,4 a 1 %) e qualidade de gar utilizada, do pH, do tipo
de explante (material vegetal coletado), da concentrao de sais e da
presena de outras substncias como o carvo ativado, que interferem na
gelificao.
O pH um fator crtico e muito importante do meio de cultura, influenciando
na disponibilidade de nutrientes, fitorreguladores e no grau de solidificao
do gar. Se bem ajustado, o pH pode promover maior e melhor
aproveitamento dos nutrientes pelo explante. Os efeitos do pH podem ser
diretos ou indiretos, influindo, por exemplo, na utilizao das fontes de
nitrognio, importantes para as plantas.
Valores de pH mais baixos (meios de cultura mais cidos) dificultam a
utilizao do amnio, enquanto valores mais altos de pH diminuem a
utilizao do nitrato. Para um crescimento adequado da maioria das
espcies, a faixa de 5 a 6,5 revela o melhor ajuste de pH. Se os nveis de pH
forem inferiores a 4,5 e superiores a 7, poder ocorrer paralisao do
crescimento e do desenvolvimento in vitro. Durante o crescimento das
clulas, o pH do meio de cultura se altera medida que diferentes ons so
absorvidos e os produtos metablicos so excretados para o meio. Assim o
objetivo do artigo foi avaliar a influncia do pH e da concentrao de gar
no cultivo in vitro de embries imaturos de frutos de tangerineira Ponc
A metodologia utilizada foi primeiramente selecionar os frutos de 3 a 4cm
de dimetro, posteriormente a remoo de sementes e tratadas com lcool
(70 %) por cinco minutos e posteriormente em hipoclorito de sdio (2 %),
por 20 minutos, sendo em seguida lavadas trs vezes em gua destilada e
autoclavada. Foram separados os tegumentos das sementes e selecionado
as clulas dos embries com cuidado para no danificar os mesmos .

Os embries foram inoculados individualmente em tubos de ensaio

contendo 15 mL do meio MS, modificado em relao concentrao de gar
(0; 3,5; 7; 10,5 e 14 g.L-1), ajustado aos pHs 3,7; 4,7; 5,7 e 6,7 em todas as
combinaes possveis. Esses tratamentos permaneceram por 48 horas no
escuro e, temperatura de 27 1 C, fotoperodo de 16 horas. O
experimento foi conduzido em delineamento experimental inteiramente
casualizado, em fatorial 5 x 4, com quatro repeties, cada uma constituda
por trs tubos de ensaio. Os dados foram submetidos anlise de varincia
e a comparao dos resultados por meio de regresso polinomial. Aps 60
dias, as plntulas foram avaliadas com base na altura da parte area,
nmero de folhas, massa da parte area fresca e seca, comprimento de
razes, massa das razes frescas e secas.
Os resultados obtidos mostram que a maior altura da parte area de
plntulas foi obtida com pH ajustado em 4,7 e 9,3 g.L-1 de gar. J o pH
ajustado para 3,7 e associado a 7,4 g.L-1 de gar proporcionou maior
nmero de folhas por plntula. Aps atingir uma concentrao mxima de
gar houve reduo no nmero de folhas por explante, sendo que essa
queda ocorreu antes nos pHs mais elevados. Alm disso, o incremento no
nmero de folhas nos meios com pH 5,7 e 6,7 foi pequeno. Quanto s
maiores massas da parte area fresca foram obtidas com pH ajustado para
4,7, 5,7 e 6,7, na ausncia de gar. Quando o pH foi ajustado para 3,7,
associado com 3,7 g.L-1 de gar, obteve-se tambm boa resposta (71,5 cm)
para esta varivel. O mesmo se assemelha a massa da parte area seca,
com maior valor (31,84 mg) obtido na ausncia de gar. O pH 3,7 tendeu a
proporcionar maiores massas secas, e maior comprimento de razes (9,08
cm).
O fato da maioria dos resultados terem sido observados na ausncia ou em
baixas concentraes de gar est relacionado ao potencial osmtico. Ou
seja, altas concentraes de gar, ou meios muito consistentes, podem
limitar a difuso de nutrientes at o explante. Alm disso, meios lquidos so
mais homogneos, visto que no se estabelece um gradiente de nutrientes,
que normalmente ocorre nos meios slidos. Embora para um crescimento
adequado da maioria das espcies o melhor valor de pH esteja entre 5 e 6,5
e que em valores inferiores a 4,5 pode ocorrer paralisao do crescimento e
do desenvolvimento in vitro, esse resultado no foi verificado neste
trabalho. Tal comportamento pode indicar que embries de citros no
encontram dificuldade para se desenvolver em pHs baixos. Sendo assim
conclui-se que a utilizao de meio de cultura lquido e pH cido, entre 3,7 e
5,7, proporciona melhor desenvolvimento de embries de tangerineira
Ponc.