PRCTICA # 4

COLORACIN DE WRIGHT

I.

Introduccin

Mara, A. (2010), afirma que esta Tincin es un conjunto de procesos que

conducen a la coloracin de las estructuras. Esto tiene por objeto el
aumentar el contraste entre esas estructuras y el medio que las rodea, y
permite por tanto que las clulas sean visualizadas microscpicamente con
mayor
facilidad.
La tincin de wright cuyo colorante est compuesto de azul de metileno
(que tie de color azul las partes acidas de las clulas) y eosina (que tie
las partes alcalinas) disueltos en metanol (que permite la fijacin de las
clulas), adicionando a la preparacin buffer de fosfatos (que rehidrata a
las clulas despus de la exposicin con metanol). Rodak (2004).
La naturaleza cida o bsica de las estructuras celulares determina su
avidez por los componentes del colorante policromtico de Wright; es as
como los cidos nucleicos se tien con azul B que es el bsico y la
hemoglobina con la eosina Y que es cida. Otras estructuras se tien por
una combinacin de ambos y se denominan neutrfilos. MIALE (1985).
Esta coloracin es conocida tambin como policromtica debido a que
produce varios colores. Es una solucin de alcohol metlico de un colorante
cido (eosina) y otro bsico (azul de metileno). El alcohol sirve como un
fijador del frotis sanguneo al portaobjetos. El amortiguador, que consiste
en una solucin tamponada, mantiene el pH del colorante y favorece la
mejor absorcin por los diferentes componentes celulares.
Esto explica que las estructuras basfilas se tian de color azul mientras
que los competente acidfilas adquieren un color rosado. La diferente
afinidad de ciertas granulaciones citoplasmticas por dichos colorantes
permite clasificar a los leucocitos polimorfonucleares en 3 grupos (ver
figura 2):
-

Granulocitos eosinfilos, en los que la granulacin especfica contiene

sustancias de carcter bsicos que fijan los colorantes cidos y se tien
de color rojo-naranja.
Granulocitos basfilos, en los que la granulacin especfica posee
sustancias de carcter cido que fijan los colorantes bsicos y se tien
de color azul oscuro.
Granulocitos neutrfilos, en los que la granulacin especfica posee
compuestos de carcter neutro por lo que fijan ambos colorantes
simultneamente, de ah que se tien de color pardo.

El objetivo de la prctica es conocer los fundamentos y realizar la

coloracin de Wright, para poder estudiar satisfactoriamente los frotis
sanguneos. Tambin reconocer los componentes sanguneos de la sangre
(leucocitos, hemates, plaquetas.)

II.

Material y Mtodos
MATERIALES
Rejilla horizontal o soporte de
tincin.
02 lminas portaobjetos.
01 lanceta.
02 laminillas cubreobjetos
Tela nans.
01 mechero
Colorante de Wright

EQUIPOS
01 microscopio

Muestra de sangre perifrica.

Agua destilada.
01 gotero de plstico.

Mtodos

Obtener la muestra de sangre con la lanceta del dedo anular de la

mano, previamente limpiada.
Realizar el frotis de sangre perifrica.
Colocar el frotis secado al aire sobre una rejilla o cubeta de tincin
con la sangre hacia arriba (ver figura 1)
Cubrir completamente el portaobjetos (frotis) con el colorante de
Wright gota a gota. Por cada 1 gota de colorante 2 gotas de agua
destilada.
Dejarlo que permanezca en el frotis aproximadamente de 8-10
minutos, para fijar los glbulos sanguneos. El colorante deber
cubrir completamente el portaobjetos, pero no debe derramarse por
los bordes.
Esperar la formacin de brillo metlico.
Lavar con agua en el chorro cuidadosamente hasta que la extensin
presente un aspecto rosado-morado al examinarlo a simple vista.
Limpiar el dorso del portaobjetos con una gasa o algodn
humedecido en alcohol para eliminar cualquier resto de colorante.
Secar al aire y observar con el microscopio con el objetivo de
inmersin.

III. Resultados:

Los eritrocitos se observarn de color naranja o rosado.

El
citoplasma de los linfocitos presentar varias tonalidades azulesmoradas.
Los grnulos de los eosinfilos son de color morado intenso.
Los grnulos de los basfilos prpura azulado muy oscuro. Los
grnulos de los neutrfilos se aprecian de color lila, bastante finos.

IV. Comentario

V.

Conclusiones

1. Se realiz la coloracin de Wright,

satisfactoriamente los frotis sanguneos.
2.

para

poder

estudiar

Se reconoci componentes de la sangre (leucocitos, plaquetas y

hemates).

VI.

Referencias Bibliogrficas

ALVITES, M. (2010). VIROLOGA MEDICA. 3 ed. McGraw Hill

Interamericana. Mxico, D.F.

MIALE, Jhon B. (1985) HEMATOLOGA MEDICINA DE LABORATORIO.

8a ed. Revet Company. 8a ed. Madrid, Espaa.

- RODAK, B, (2004). HEMATOLOGA: FUNDAMENTOS Y APLICACIONES

CLNICAS. 2 ed. Medica panamericana. Buenos aires, Argentina. 884p.

VII.Anexos

Figura
1.

Figura 1. Tincin de Wright manual de frotis sanguneo.

Fuente: Rodak, B, (2004). Hematologa: fundamentos y aplicaciones
clnicas. 2 ed. Medica panamericana. Buenos aires, Argentina. 884p.

Figura 2. Glbulos blancos teidos con la coloracin de Wright.

Fuente: Rodak, B, (2004). Hematologa: fundamentos y aplicaciones
clnicas. 2 ed. Medica panamericana. Buenos aires, Argentina. 884p.

AO DE LA CONSOLIDACIN DEL MAR DE

GRAU
UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS
ESCUELA ACADMICA DE CIENCIAS BIOLGICAS
ALUMNO:

PROFESORES:

MESA:

 CICLO:

2016