UNIVERSIDAD DEL MAGDALENA

LABORATORIO DE ENZIMAS

PRESENTADO POR:
GLADIS ANDRADE CARMONA; CRISTEL CASTRO PEZ
MARA MIRANDA PEREA; JORGE MENDEZ QUIONES
CARLOS PEA GUTIRREZ; ANDRS ORTIZ PUERTA

DOCENTE:
MARTA CECILIA HERNNDEZ CUELLO

FECHE DE EXPERIENCIA 21- 09 - 2016

FECHA DE ENTREGA 28 09 - 2016

GRUPO N 2
FACULTAD DE INGENIERA
PROGRAMA DE INGENIERA AGRONMICA
SANTA MARTA D.T.C.H

INTRODUCCIN
Las
clulas
llevan
a
cabo
simultneamente una gran cantidad
de reacciones qumicas necesarias
para la vida. Muchos de los productos
de esas reacciones se necesitan
inmediatamente, y si no fuera por la
participacin de las enzimas, algunas
reacciones no se produciran tan
rpido. Las enzimas, en su mayora
protenas o RNA (riboenzimas), son
catalizadores qumicos que agilizan
una reaccin que envuelve la
formacin o rompimiento de enlaces
qumicos.
La teora cintica qumica establece
que
las
reacciones
qumicas
transcurren molcula a molcula de
modo que una reaccin tal como R
(reactivos) P (productos) tiene
lugar porque una determinada
fraccin de la poblacin de molculas
R, en un instante dado, posee
energa
suficiente
como
para
alcanzar un estado activado llamado
estado de transicin, en el que es
muy fcil que se rompan o se formen
uno o ms enlaces qumicos para
formar los productos P. Es frecuente
confundir el estado de transicin con
un intermediario de reaccin; sin
embargo este estado no es ninguna
especie qumica concreta, sino que
podra definirse con ms exactitud
como un "momento molecular fugaz",
altamente inestable, en el que uno o
ms enlaces qumicos estn muy
prximos a romperse o a formarse.
En la actualidad se considera que,
con la excepcin de un reducido
grupo de molculas de RNA con
propiedades catalticas, los enzimas
son protenas, y como tales, exhiben

todas las propiedades inherentes a

este grupo de biomolculas. Los
pesos moleculares de las protenas
enzimticas oscilan desde unos
12.000 daltons hasta ms de un
milln. En muchos casos, las
cadenas polipeptdicas de la protena
enzimtica son suficientes para que
sta desarrolle su actividad cataltica.
En otros, se hace necesaria la
participacin de un compuesto
qumico adicional, de naturaleza no
proteica, denominado cofactor.
Los enzimas, en cuanto que
protenas, presentan todos los rasgos
estructurales y propiedades qumicas
que caracterizan a esta notable clase
de biomolculas. En efecto, se ha
podido comprobar que los enzimas
pierden su actividad cataltica cuando
sufren desnaturalizacin por efecto
de los mismos agentes que afectan a
las dems protenas; la conformacin
tridimensional nativa intacta de la
protena
enzimtica
resulta
indispensable
para
que
sta
desempee su funcin.
RESUMEN
Como sabemos las enzimas son
protenas
las
cuales
catalizan
reacciones qumicas en los seres
vivos , ya que la reaccin aumenta
notablemente su velocidad, en
condiciones fisiolgicas tienen lugar
reacciones sin catalizar requieren
condiciones extremas de presin ,
temperatura o pH , como actan las
enzimas en la temperatura en el
cambio de color y aparicin de
burbujas, esto se debe a la actividad

enzimtica amilasa y los distintos

comportamientos que tienen las
enzimas en la variacin de la
temperatura
.muchas
de
las
coenzimas son para nosotros los
seres humanos vitaminas , ya que no
se sintetiza y se incorpora a la
dieta .ejemplo la pepsina del
estmago a de actuar en medio cido
y pripsina en jugo pancretico en
medio alcalino.

Enzymes,
regulation,
vitamins,
catalyze, coenzyme, cells, pH

Palabras claves:

2. Preparamos 4
as: al primero
pequea cantidad
papa, al segundo
tubo espinaca y
destilada.

Enzimas,
regulacin,
vitaminas,
catalizar, coenzima, clulas, pH
ABSTRACT
As we know the enzymes are proteins
which catalyze chemical reactions in
living organisms, since the reaction
markedly increases its speed, under
physiological conditions reactions
take place uncatalyzed require
extreme conditions of pressure,
temperature or pH, and the enzymes
act in temperature in the color change
and appearance of bubbles, this is
because the amylase enzyme activity
and the different behaviors with
enzymes in the variation .Many
temperature coenzymes are for us
humans
vitamins,
as
it
not
synthesized
and
the
diet
is
incorporated
.example
stomach
pepsin to act in acid and pripsina in
pancreatic juice in alkaline medium.
Keywords:

PROCIDIMIENTO
1. Maceramos una a una las
muestras escogidas hasta obtener un
macerado
uniforme,
dejamos
pequeos pedazos de las muestras
por si las necesitamos. Luego
agregamos
agua
destilada
y
seguimos macerando y filtramos.
tubos de ensayo,
agregamos una
del macerado de
cebolla, al tercer
al cuarto agua

3. Agregamos de 3 a 4 gotas de
perxido de hidrgeno.
Efecto de la temperatura sobre el
funcionamiento de las enzimas
1. Rotulamos cuatro tubos de ensayo
y calentamos en un bao de agua
hasta 37 C y otro hasta 80C.
2. Aadimos 5 mL de papa a cada
tubo.
3. Mantenemos los tubos a las
siguientes temperaturas:
Tubo 1 = 80 C por 15 minutos
Tubo 2 = 37 C por 15 minutos
Tubo 3 = Temperatura ambiental
Tubo 4 = Hielo por 30 minutos

4. Aadimos 2 mL de perxido de
hidrgeno al tubo 1.

2. Aadimos 3 mL de homogenizado
de cebolla a cada tubo.

5. Medimos el tiempo transcurrido

desde que se aadi el perxido
hasta que se comienzan a producir
burbujas.

3. Aadimos soluciones 3M de HCl o

3M de NaOH a los tubos como se
indica a continuacin, y agitamos
suavemente hasta mezclar:

6. Repetimos con los dems tubos.

Tubo A 3 ml de 3M HCl

El efecto del pH sobre

funcionamiento de las enzimas

el

1. Rotulamos tres tubos de ensayo A,

ByC

Tubo B 3 ml de 3M NaOH
Tubo C control (no cido ni base)
4. Aadimos 3 mL de perxido de
hidrgeno a cada tubo.

RESULTADOS
Tabla N1
Homogenado
Agua
Papa
Cebolla

Reaccin al aadir gotas de perxidos

No reacciono.
Leve efervescencia, pocas burbujas en la parte superior.
Pocas burbujas en la parte superior, reaccin lenta y no
presento efervescencia.

Tabla N2
Efecto de la temperatura sobre el funcionamiento de las enzimas
Homogenado Temperatura Tiempo que tardo en Observaciones
de papa
iniciar la reaccin
Tubo 1
80C
8s
Presenta una reaccin
mnima, burbujas en la
parte superior y en el
centro un precipitado
de color Gris.
Tubo 2
37C
1s
Presenta una reaccin

Tubo 3

Hielo

3s

rpida, y un
precipitado de color
blanco en la parte
inferior del tubo y en la
parte superior burbujas.
Presento poca
reaccin, burbujas en la
parte superior y un
precipitado de color
blanco en la parte
inferior del tubo.

Tabla N3
El efecto del pH sobre el funcionamiento de las enzimas
Homogenado
de cebolla
Tubo A

Tiempo que toma la reaccin

en completarse
49 s.

Tubo B

Instantneo.

Tubo C

No reacciono.

DISCUSIN DE RESULTADOS
Reaccin al
perxidos

aadir

gotas

de

En las muestras de macerado de

papa, cebolla, al aadir perxido de
hidrogeno reaccionaron presentando
burbujas
(desprendimiento
de
oxigeno)
en cada muestra, esto
ocurre porque la catalasa presente en
las muestras es una enzima

Descripcin comparativa de
las reacciones
Presento coloracin rosada,
reaccin rpida con
abundantes burbujas
Presento coloracin amarrillo
intenso, reaccin instantnea,
abundantes burbujas.
No presento cambios.

perteneciente a la categora de las

oxidoreductoras que cataliza la
descomposicin del perxido de
hidrogeno (H2O2) en oxgeno y agua.
La muestra de agua destilada no
reacciono al aadirle perxido de
hidrogeno, debido a que el agua no
tiene enzima.
Efecto de la temperatura sobre el
funcionamiento de las enzimas

La muestra de papa que se someti a

80C presento una reaccin mnima
al aadir perxido de hidrogeno
debido a que en las reacciones
catalizadas por enzimas se produce
un brusco descenso de la actividad
cuando se alcanza una temperatura
critica. Este efecto no es ms que la
desnaturalizacin trmica de la
enzima cuando se alcanza dicha
temperatura.
Muestra de papa a temperatura
ambiente (37C) tuvo una reaccin
positiva presentando desprendimiento
de burbujas, lo cual se debe porque
la enzima tiene un rango de
temperatura ptima, lo cual indica
que a temperatura ambiente no va a
perder su actividad enzimtica, pero
si disminuirla, ya que los choques
intermoleculares van a ser menores.
Muestra de papa sometida a bao de
hielo, al aadirle perxido de
hidrogeno presento poca reaccin,
esto se debe porque las enzimas en
temperaturas bajas se hallan muy
rgidas y cuando se supera un valor
considerable de la actividad cae
bruscamente porque como protena la
enzima
se
desnaturaliza
a
temperaturas bajas.
El efecto del pH sobre
funcionamiento de las enzimas

el

El pH extremos pueden ocasionar la

desnaturalizacin de las enzimas,
debido a que la estructura con estos

cambios es posible modificar las

interacciones inicas que intervienen
en la estabilidad de la enzima en su
estado nativo. Como se present en
la muestra del tubo A y Tubo B el pH
al cual las enzimas adquieren su
mxima actividad es diferente para
cada una de ellas y depende de la
secuencia de aminocidos que las
conforman, por supuesto, tambin
est
relacionado
con
el
microambiente celular en el cual
desarrollan su catlisis.
CUESTIONARIO
Que ocurre con el perxido de
hidrogeno?
Porque hay
burbujas?

desprendimiento

de

Que indican los resultados sobre la

fisiologa de estos organismos?
Como se relacionan la temperatura y
la actividad enzimtica?
R// En una REACCIN ENZIMTICA,
la
TEMPERATURA
es
muy
importante,
ya
que
las
TEMPERATURAS BAJAS inhiben el
sitio activo. Las TEMPERATURAS
ALTAS a ms de 37C desnaturalizan
la parte proteica o Apoenzima. Al
igual que sucede con la mayora de
las
reacciones
qumicas,
las
reacciones enzimticas incrementan
su velocidad con la temperatura. Las
enzimas, al ser protenas, se
desnaturalizan por accin del CALOR

y se inactivan a partir de cierto punto.

La temperatura influye en la actividad
enzimtica.
El
punto
ptimo
representa el mximo de actividad. A
temperaturas bajas, las enzimas se
hallan MUY RGIDAS y cuando se
supera un valor considerable (mayor
de 50) la actividad cae bruscamente
porque, como protena, el enzima se
DESNATURALIZA.
Que le sucede a las enzimas cuando
se
exponen
a
temperaturas
extremas?
R// Incremento de la velocidad con la
temperatura: En general, la velocidad de
la reaccin se incrementa con la
temperatura hasta que un punto mximo
es alcanzado. Este incremento se debe a
que aumenta el nmero de molculas
ricas en energa que pueden pasar la
barrera energtica de estado de
transicin, para formar a los productos.

Decremento de la velocidad con la

temperatura: la elevacin excesiva
de la temperatura del medio que
contiene a las enzimas, resulta en un
decremento de la velocidad como
resultado de la desnaturalizacin, es
decir, la prdida de la estructura
tridimensional de las enzimas.
Como afecta el pH la actividad
enzimtica?
R// Efecto del pH para la
desnaturalizacin de la enzima: pH
extremos pueden ocasionar la

desnaturalizacin de las enzimas,

debido a que la estructura con estos
cambios es posible modificar las
interacciones ionicas que intervienen
en la estabilidad de la enzima en su
estado nativo.
El pH ptimo vara para las
diferentes enzimas: el pH al cual las
enzimas adquieren su mxima
actividad es diferente para cada una
de ellas y depende de la secuencia
de aminocidos que las conforman,
por
supuesto,
tambin
est
relacionado
con
el microambiente celular en el cual
desarrollan su catlisis. Por ejemplo
la pepsina que es una enzima
digestiva que acta en el estmago,
posee un pH ptimo de alrededor de
2 unidades, por el contrario otras
enzimas que actan a pH neutro, se
desnaturalizan a pH alcalino o cido.
De que otras maneras se podra
explorar el funcionamiento de las
enzimas estudiadas en el laboratorio?
Investiga 5 enzimas con los sustratos
respectivos sobre los cuales acta.
R// 1. Maltasa hidroliza la maltosa
(sustrato) en dos unidades de
glucosa
(producto)
Hidrolizar: romper enlaces con
participacin del agua; por lo tanto la
Maltasa es una hidrolasa, se
encuentra en el intestino delgado.

2. Amilasa (hidrolasa): la alfa amilasa

actua sobre los enlaces de las
unidades de glucosa que componen
el almidn. Sustrato el almidn
unidades
libres de glucosa.
3. Catalasa es una oxidasa
descompone
el
perxido
de
hidrgeno en agua y oxgeno
2 H2O2
2H2O + O2
Se encuentra en los glbulos rojos

4. Qumica: la ciencia bsica. M.

D. Reboiras. Editorial rea
Universitaria Madrid 2006 Pag
37.
ANEXOS

4. Fosforilasas enzimas que agregan

grupos fosfato a una molcula
ADP + Pi + energa
ATP
5. Lipasas rompen enlaces steres
grasas
cidos grasos +
glicerol

BIBLIOGRAFIA
1. Bioqumica humana: curso
bsico. Jos M. Macarulla,
Flix M. Goi, Editorial
Revert, Barcelona1994, Pag
40.
2. Principios y aplicaciones de la
fisiologa vegetal: manual de
laboratorio. Jimnez G., Vctor.
Editorial de la Universidad de
Costa Rica.1998, Pag 111.
3. Principios de qumica: los
caminos del descubrimiento.
Front Cover. Peter William
Atkins, Loretta Jones. Ed.
Mdica Panamericana, 2006 Medical - 990 pages. Pag 400.

Reaccin con perxidos.

Efecto de la temperatura en funcin

de las enzimas.

Efecto del pH sobre el funcionamiento

de las enzimas.