UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE INGENIERIA EN GEOLOGA, MINAS, PETRLEOS Y

AMBIENTAL
QUMICA ANALTICA

CROMATOGRAFA DE GASES

La cromatografa de gases es una tcnica cromatogrfica en la que la muestra se

volatiliza y se inyecta en la cabeza de una columna cromatogrfica. La elucin se
produce por el flujo de una fase mvil de gas inerte. A diferencia de los otros tipos
decromatografa, la fase mvil no interacta con las molculas del analito; su nica
funcin es la de transportar el analito a travs de la columna.

Existen dos tipos de cromatografa de gases (GC): la cromatografa gas-slido

(GSC) y la cromatografa gas-lquido (GLC), siendo esta ltima la que se utiliza ms
ampliamente, y que se puede llamar simplemente cromatografa de gases (GC).

En la GSC la fase estacionaria es slida y la retencin de los analitos en ella se

produce mediante el proceso de adsorcin. Precisamente este proceso de adsorcin,
que no es lineal, es el que ha provocado que este tipo de cromatografa tenga
aplicacin limitada, ya que la retencin del analito sobre la superficie es
semipermanente y se obtienen picos de elucin con colas. Su nica aplicacin es la
separacin de especies gaseosas de bajo peso molecular. La GLC utiliza como fase
estacionaria molculas de lquido inmovilizadas sobre la superficie de un slido
inerte.

La GC se lleva a cabo en un cromatgrafo de liquidos. ste consta de diversos

componentes como el gas portador, el sistema de inyeccin de muestra, la columna
(generalmente dentro de un horno), y el detector.

Sistema de inyeccin de muestra

La inyeccin de muestra es un apartado crtico, ya que se debe inyectar una

cantidad adecuada, y debe introducirse de tal forma (como un "tapn de vapor") que
sea rpida para evitar el ensanchamiento de las bandas de salida; este efecto se da
con cantidades elevadas de analito. El mtodo ms utilizado emplea una
microjeringa (de capacidades de varios microlitros) para introducir el analito en una
cmara de vaporizacin instantnea.

La fase estacionaria

Las propiedades necesarias para una fase estacionaria lquida inmovilizada son:

Caractersticas de reparto (factor de capacidad ' y factor de selectividad)

adecuados al analito.

Baja volatilidad, el punto de ebullicin de la fase estacionaria debe ser al

menos 100 C mayor que la mxima temperatura alcanzada en el horno.

Baja reactividad.

Estabilidad trmica, para evitar su descomposicin durante la elucin.

Existen como mucho una docena de disolventes con estas caractersticas.

Para elegir uno, debe tenerse en cuenta la polaridad del analito, ya que a
mayor polaridad del analito, mayor polaridad deber tener la fase
estacionaria.

Aplicaciones

La GC tiene dos importantes campos de aplicacin. Por una parte su capacidad para
separar mezclas orgnicas complejas, compuestos organometlicos y sistemas
bioqumicos. Su otra aplicacin es como mtodo para determinar cuantitativa y
cualitativamente los componentes de la muestra. Para el anlisis cualitativo se suele
emplear el tiempo de retencin, que es nico para cada compuesto dadas unas
determinadas condiciones (mismo gas portador, rampa de temperatura y flujo), o el
volumen de retencin. En aplicaciones cuantitativas, integrando las reas de cada
compuesto o midiendo su altura, con los calibrados adecuados, se obtiene la
concentracin o cantidad presente de cada analito.

Montaje de tcnicas

El montaje de una tcnica analtica de CG es netamente emprica, el perfil de los

analitos que se quiera determinar, la eleccin de la fase mvil, los tiempos de
retencin (elucin) estarn dados exclusivamente por las condiciones particulares
de la columna (fase estacionaria) frente al equipo. Las rampas de temperatura a
seleccionar bien pueden isotrmicas o escalonadas.

La eleccin del gs depender del tipo de detector, la eleccin de la columna (fase

estacionaria) depender de la polaridad de los compuestos a separar, el detector
depender del tipo de compuestos a detectar.

CROMATOGRAFA LQUIDA

La Cromatografa lquida, tambin conocida como Cromatografa de lquidos, es una

tcnica de separacin y no debe confundirse con una tcnica cuantitativa o
cualitativa de anlisis. Es una de las tcnicas analticas ampliamente utilizadas, la
cual permite separar fsicamente los distintos componentes de una solucin por la
adsorcin selectiva de los constituyentes de una mezcla. En toda cromatografa
existe un contacto entre dos fases, una fija que suele llamarse fase estacionaria, y
una mvil (fase mvil) que fluye permanente durante el anlisis, y que en este caso
es un lquido o mezcla de varios lquidos. La fase estacionaria por su parte puede ser
almina, slice o resinas de intercambio inico que se encuentran disponibles en el
mercado. Los intercambiadores inicos son matrices slidas que contienen sitios
activos (tambin llamados grupos ionognicos) con carga electrosttica (positiva o
negativa). De esta forma, la muestra queda retenida sobre el soporte slido por
afinidad

electrosttica.

Dependiendo

de

la

relacin

carga/tamao

unos

constituyentes de la mezcla sern retenidos con mayor fuerza sobre el soporte

slido que otros, es decir sern adsorbidos, lo que provocar su separacin. Las

sustancias que permanecen ms tiempo libres en la fase senil, avanzan ms

rpidamente con el fluir de la misma y las que quedan ms unidas a la fase
estacionaria o retenidas avanzan menos y por tanto tardarn ms en salir o fluir.
ste es el principio fundamental de la cromatografa. Un ejemplo notable es la
cromatografa de intercambio inico. Las columnas ms utilizadas son las de slice.

Mtodo

Abreviatura Mecanismo predominante

Lquido, slido o de adsorcin LSC

Adsorcin sobre la superficie

Lquido

Reparto entre fases lquidas, una mvil y la

LLC

otra estacionaria.
Fase enlazada

BPC

Reparto y / o adsorcin entre las fases mvil

y enlazada.
Afinidad

Uso de la estructura de ligantes inmovilizados para

unir bioselectivamente la protena deseada.

Seleccin de un mtodo de cromatografa lquida

La cromatografa de absorcin opera mejor en la separacin por clases de

compuestos o para la separacin de compuestos isomricos. La tcnica de
cromatografa lquido lquido es mejor para la separacin de homlogos. Los grupos
funcionales que son capaces de formar enlaces de hidrgeno fuertes se retienen
mucho en cromatografa de adsorcin, sin embargo la CLL(Lquido lquido)
proporciona una alternativa para la separacin de estos compuestos, estas sern las
muestras que tienen polaridad media