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RESUMEN
BOLAOS B., M. M; RIVILLAS O., C. A.; SUREZ V., S. Identificacin de micorrizas arbusculares
en suelos de la zona cafetera colombiana. Cenicaf 51(4):245-262. 2000
Se evalu la diversidad y cantidad de Micorrizas Arbusculares (MA), asociadas a la rizsfera de plantas de caf
en 28 lotes en produccin en 10 Subestaciones de Cenicaf y se determinaron los niveles de colonizacin en
races y la densidad de esporas/g de suelo. El inculo nativo se increment en Brachiaria decumbens y
Pueraria phaseoloides. En El Cairo, Gigante, Lbano, Buenavista, Pereira y Venecia, se encontraron niveles
de colonizacin entre el 25 y el 48%, resultado asociado con los contenidos de materia orgnica y con el bajo
nivel de fsforo en esos suelos. En Sasaima y en Supa, en suelos Hapludands y Dystropets se encontraron los
mayores niveles, entre el 40 y el 92%, respectivamente. La densidad de esporas/g de suelo fue mayor de 50.
En Naranjal hubo menor cantidad de esporas/g de suelo (11 a 16). Las especies ms frecuentes fueron
Acaulospora mellea y Glomus occultum. La fertilizacin reiterada influy sobre la cantidad y diversidad de
esporas de Micorrizas Arbusculares. En Chinchin se encontraron Entrophospora colombiana, Glomus
manihotis y G. fistulosum. Acaulospora tuberculata y A. scrobiculata se aislaron en El Cairo. A. foveata,
G. invermaium y G. fistulosum se aislaron de suelos con ms del 10% de materia orgnica. G. intraradices
de suelos con 11ppm de P y contenido de materia orgnica del 19% en La Trinidad (Lbano). Glomus
macrocarpum a pH menor que 5,0. Sclerocystis sinuosa junto con Acaulospora appendcula, A. mellea,
Scutellospora sp., Glomus occultum y G. invermaium se identificaron en suelos con 3ppm de fsforo.
Palabras claves: Micorrizas Arbusculares, Coffea arabica, identificacin taxonmica.
ABSTRACT
The amount and diversity of arbuscular mycorrhizal fungi (AMF) associated to the rhizosphere of coffee plants
in 28 plots at 10 Cenicafe experimental stations were evaluated, and the level of root colonization and density
of spores/g of soil were determined. Native inoculum was increased on Brachiaria decumbens and Pueraria
phaseoloides. In El Cairo, Gigante, Libano, Buenavista, Pereira and Venecia localities, colonization levels
found ranged from 25 to 48%, a result associated to the content of organic matter and the low level of
phosphorus in those soils. In Sasaima and Supia, in Hapldands and Dystropets soils, the higest levels were
recorded: 40 and 92%, respectively. Density of spores/g of soil was above 50. The least amount of spores/g
of soil was found in Naranjal (11 to 16). The most common species found were Acaulospora mellea and
Glomus occultum. Repeated fertilization influenced the amount and diversity of AMF. Enthrophospora
colombiana, Glomus manihotis, and G. fistulosum were isolated in Chinchina. Acaulospora tuberculata and
A. scrobiculata were found in El Cairo, whereas A. foveata, G. invermaium, and G. fistulosum were isolated
from soils containing more than 10% organic matter. G. intraradices was isolated from soils with 11 ppm of
P and organic matter content of 19%, in La Trinidad (Libano). Glomus macrocarpum was found in soils with
pH under 5.0, and Sclerocystis sinuosa, Acaulospora appendicula, A. mellea, Scutellospora sp., Glomus
ocultum, and G. invermaium were identified in soils with 3ppm of phosphorus.
Keywords: Arbuscular mycorrhizal fungi, Coffea arabica, taxonomic identification.
*
245
Los trabajos relacionados con la identificacin taxonmica de los hongos micorrcicoarbusculares en las dos ltimas dcadas revelan
un aumento en el nmero de especies reconocidas. En 1975, Gerdemann (12) incluy 31
especies, en 1982, Trappe (39) registr 77 especies, y en la tercera edicin del manual de Schenck
y Prez (28) se incluyen 147 especies de hongos
formadores de micorrizas arbusculares (MA).
La morfologa de las esporas o propgulos
producidos por los hongos son la base para
obtener la identificacin de las especies de MA.
Dentro de las caractersticas que se estudian
estn: la forma, la estructura superficial, la estructura citoplasmtica, el color y el nmero y
grosor de las paredes de las esporas (29).
Dentro de los gneros, las caractersticas
particulares ms importantes de las especies son
la presencia y forma de los esporocarpos y la
unin hifal. En cuanto a la morfologa de los
hongos en la epidermis de la raz de la planta
hospedante, se sabe que no todos los seis gneros forman vesculas (16). Situacin diferente
ocurre con estructuras comunes a todos los
gneros como las hifas y los arbsculos, lo cual
condujo a que Morton citado por Guerrero (16)
revaluara el nombre de Micorrizas VesiculoArbusculares por el de Micorrizas-Arbusculares.
En Colombia se han realizado varios estudios del efecto de la MA en caf. Entre las
especies evaluadas, Glomus manihotis, G.
ocultum, G. macrocarpum y Entrophospora
colombiana favorecieron el crecimiento, peso
seco y absorcin de nutrimentos (1, 11, 20, 21,
24, 26).
Esta investigacin tuvo como propsito
describrir el aislamiento y la identificacin
taxonmica al nivel de especie, de micorrizas
arbusculares asociadas a la rizsfera de plantas
de caf (Coffea arabica) cultivadas en 10
Subestaciones del Centro Nacional de Investigaciones de Caf, Cenicaf, ubicadas en distin-
MATERIALES Y MTODOS
Muestreo de especies nativas de Micorrizas
Arbusculares. Se estim el tamao de muestra,
(n), dentro de la poblacin (N = 39 lotes) de la
siguiente manera:
Z2a*P*Q
___________________
a2
n=
________________________________________________
1+
1
(Z2a * P * Q)
___ * ___________ - 1
N
2
= 28
1
1,962 x 0,5 x 0,5
1 + ___ ( __________________ - 1)
39
(0,1)2
de cinco aos de edad), e incluyeron: caf tradicional (caf con sombra de leguminosas
arbustivas, Inga spp.) y caf tecnificado (var.
Caturra y Colombia) con baja fertilizacin
fosfrica. En total, se seleccionaron para el
muestreo 28 lotes con caf de diferentes edades
y estados de manejo. Se utiliz un diseo de
muestreo de conglomerados con asignacin de
la muestra proporcional al nmero de lotes de
cada Subestacin en la siguiente forma: Albn
(Valle) 2 lotes; J. Villamil (Huila) 2 lotes; La
Trinidad (Tolima) 3 lotes; S/Barbara
(Cundinamarca) 8 lotes, Rafael Escobar (Caldas) 4 lotes; La Sirena (Valle) 1 lote; Paraguaicito
(Quindo) 2 lotes; La Catalina (Risaralda) 1 lote;
El Rosario (Antioquia) 1 lote y Naranjal (Caldas) 4 lotes. En el caso de asociaciones con
leguminosas solamente se hizo muestreo de races de caf.
La unidad de muestreo fue una hectrea,
dentro de la cual se tomaron 30 muestras en
sitios escogidos aleatoriamente. Con relacin a
la planta de caf, el muestreo se hizo entre 0 y
20cm de profundidad y a tres distancias radiales
del tronco: 10, 20 y 50cm. En cada caso se
tomaron tres submuestras para formar una sola
muestra compuesta , de la cual se utilizaron 100g
de suelo y 20g de races (peso fresco).
Las muestras de races y de suelos se mezclaron por separado y se extrajo una muestra representativa de 3.000g de suelo y 600g de races
(peso fresco). stas permanecieron en nevera
hasta su procesamiento para determinar el porcentaje de colonizacin. Se realizaron anlisis
de caracterizacin qumica de los 28 suelos
muestreados siguiendo las metodologas del laboratorio de Qumica Agrcola de Cenicaf (5).
Incremento de MA nativas. Las MA colectadas en campo se incrementaron en un invernadero en Cenicaf, situado a una altitud de
1310msnm, con temperatura mxima de 25C,
temperatura mnima de 16,5C, brillo solar de
1963 horas/ao, precipitacin anual de 2.520mm/
247
Clasificacin
y manejo
de suelos
ecolgica
FONDESA
Hapludands
bmh pm
Huila
CRISTALINA
Dystropepts
bh pm
Tolima
LBANO
Melanudands
bh pm
Sasaima
C/marca
CHINCHIN
Hapludands
bh pm
Supia
Caldas
GUAMAL
Dystropept
bh t
La Sirena
Sevilla
Valle
CHINCHIN
Dystrands
bh pm
Paraguaicito
Buenavista
Quindo
MONTENEGRO
Hapludands
bmh pm
La Catalina
Pereira
R/ralda
CHINCHIN
Melanudands
bh pm
El Rosario
Venecia
Antioquia
VENECIA
Dystrands
bh pm
Naranjal
Chinchin
Caldas
CHINCHIN
Acrudoxic Melanudands
bmh pm
Localidad
Municipio
Departamento
Alban
El Cairo
Valle
J. Villamil
Gigante
La Trinidad
Libano
Sta. Brbara
R. Escobar
Unidades de uso
Lluvia
(mm/ao)
Evaporacin
(mm/ao)
Temperatura (C)
Media
Mxima Mnima
Brillo solar
(Horas/ao)
Humedad
relativa (%)
Venecia
Chinchin
Supa
Sasaima
Gigante
Buenavista
Pereira
Lbano
Sevilla
El Cairo
2524
2687
1906
2591
1318
2100
1978
2101
1961
1430
1125
1137
1245
1063
1045
1217
1210
900
1004
985
19,9
20,7
21,4
20,3
19,6
21,3
21,6
19,9
19,7
19,5
2153
1825
1861
1607
1314
1825
1606
1560
1361
1553
74
78
76
80
77
77
79
82
80
80
24,6
26,8
26,9
26,1
24,1
28,1
26,9
24,2
25,5
24,9
15,6
16,3
16,8
15,6
16,1
16,8
17,3
16,1
15,0
15,9
Fuente: Federacin Nacional de Cafeteros de Colombia. Cenicaf. Archivos de datos climatolgicos de la Disciplina
de Agroclimatologa. 1986 - 1993. Chinchin - Colombia.
ao y humedad relativa del 80% (7). Se utilizaron 56 cultivos trampa, correspondientes a 2 por
cada suelo muestreado. Como plantas
hospedantes se utilizaron Brachiaria decumbens
y Pueraria phaseoloides (micotrficas obligadas) (Figura 1).
Se utiliz como sustrato una capa de 50g de
suelo nativo dispuesto entre dos capas del mismo suelo esterilizado. Con el propsito de conservar las caractersticas qumicas, los suelos
para cada cultivo trampa se tomaron de las
diferentes localidades estudiadas y se mezclaron
248
249
RESULTADOS Y DISCUSIN
Muestreo de especies nativas de MA. El mtodo de muestreo para suelos y para races propuesto en este estudio permiti colectar gran
parte de la poblacin de MA nativas asociadas a
251
TABLA 3. Anlisis qumico y textura de los suelos de las diferentes localidades estudiadas.
Lote* pH
MO
Ca
Mg
Al
me/100 g de suelo
1,28
1,62
0,44
0,22
0,46
1,46
0,38
0,91
0,91
0,34
0,34
0,45
0,45
0,41
0,41
0,13
0,39
0,47
0,61
0,81
0,71
0,60
0,85
0,44
0,28
0,45
0,80
0,89
13,8
3,0
2,4
1,5
5,4
5,4
4,0
4,5
4,5
2,9
2,9
2,5
2,5
1,2
1,2
0,9
1,1
1,7
1,8
4,3
2,2
6,3
6,7
1,4
0,6
0,9
2,9
2,9
%
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
5,0
4,5
4,6
4,6
4,6
4,7
4,7
5,2
5,2
5,0
5,0
5,1
5,1
4,7
4,7
4,2
4,4
4,3
4,6
4,9
4,7
5,0
5,4
4,4
4,3
4,5
4,9
4,6
0,51
0,38
0,18
0,16
0,78
0,71
0,69
0,86
0,86
0,74
0,74
0,75
0,75
0,75
0,75
0,18
0,28
0,52
0,61
0,57
0,38
0,47
0,67
0,54
0,56
0,42
0,53
0,47
12,8
13,0
5,1
4,0
19,0
16,2
17,5
21,0
21,0
17,2
17,2
18,7
18,7
19,1
19,1
7,9
10,3
13,4
16,2
10,0
8,5
12,0
12,8
10,6
11,9
8,7
13,8
12,7
2,7
1,0
0,6
0,4
1,4
1,2
0,9
1,5
1,5
0,7
0,7
0,7
0,7
0,4
0,4
0,1
0,2
0,6
0,4
1,2
0,6
1,0
1,3
0,7
0,3
0,5
1,7
1,7
0,1
3,0
0,6
0,8
0,9
1,1
1,2
0,6
0,6
0,9
0,9
0,7
0,7
2,0
2,0
4,3
2,9
2,9
3,0
0,7
1,8
0,4
0,2
1,3
1,5
0,9
2,1
5,0
CIC
Fe
25
27
9
8
9
38
36
38
38
36
36
34
34
33
33
15
21
31
34
22
19
20
25
21
22
18
21
25
119
250
64
89
23
26
11
4
4
5
5
5
5
12
12
41
13
12
28
37
90
27
6
121
38
46
33
67
540
1050
440
408
460
230
180
225
225
131
131
177
177
128
128
297
258
265
303
240
353
150
126
318
180
147
149
334
Mn
ppm
137
22
207
222
19
33
19
29
29
5
5
11
11
12
12
30
31
51
40
39
34
31
25
9
9
8
26
35
Zn
30
40
5
6
25
12
11
11
11
9
9
9
9
9
9
5
7
8
14
13
18
9
12
5
5
4
7
7
Cu
10
19
27
2
4
2
9
2
2
1
1
0
0
0
0
12
1
9
1
2
39
14
6
7
7
15
6
2
Textura
F
FA
FarA
ArA
FA
FA
FA
FA
FA
FA
FA
AF
AF
FA
FA
FArA
FA
FA
FA
FArA
FArA
FArA
FArA
FArA
FArA
FArA
FAr
Ar
252
253
Figura 3. Densidad de
esporas de Micorrizas
Arbusculares por gramo
de suelo, en las distintas
localidades.
254
Figura 4. Colonizacin
de races de plantas de
caf por Micorrizas
Arbusculares, en las
distintas localidades.
tamaos variados, arbsculos y en algunas placas se observaron esporas intra-radicales. Adems se observaron unas estructuras ovaladas y
encadenadas al interior de las clulas (Figura 6).
Los suelos de las localidades ubicadas en los
departamentos del Tolima, Valle, Quindo y
Antioquia estn clasificados en la categora de
orden como Andisoles y los niveles de colonizacin en las races de plantas de caf cultivadas
all estuvieron entre 25 y 45%. Estos estn relacionados con las propiedades fsicas y qumicas
de los suelos y con interacciones entre la biota
del suelo, especficamente con relaciones de
sinergismo entre fijadores de nitrgeno y
endomicorrizas, como se mencion anteriormente. En la Figura 4 se aprecia que los valores
ms bajos en los niveles de colonizacin se
encontraron en Chinchin (Caldas), resultado
que coincide con la reiterada fertilizacin
fosfrica que increment el contenido de este
nutrimento en el suelo. Niveles de 33 a 67ppm de
fsforo y el contenido de materia orgnica del
suelo as lo indican. En esta localidad, uno de los
lotes estudiados contena 8,7% de M.O., y en
estudios realizados por Sieverding y Toro (31)
se encontr correlacin entre la poblacin de
MA y el contenido edfico de materia orgnica.
255
256
257
Sclerocystis sinuossa
G. intraradices
Glomus macrocarpum
A. mellea
G. intraradices
G. occultum
258
relacionar la poblacin de MA con las caractersticas qumicas del suelo, segn Fernndez y
Siqueira citados por Siqueira (33)
Anlisis estadstico. La Tabla de contingencia
propuesta mostr que las especies de MA aisladas e identificadas no pertenecan al mismo
gnero. El anlisis de varianza mostr diferencias altamente significativas en la densidad de
esporas presentes en los suelos estudiados, no
slo en las 10 localidades sino tambin en los 28
lotes.
Los anlisis de correlacin lineal simple
(Pearson) permitieron determinar la baja relacin (0,41641) entre la densidad de esporas/g de
suelo y la colonizacin de races por las MA
(Tabla 5). Lo anterior, posiblemente sea consecuencia de las diferentes pocas en las que se
realizaron los muestreos y del manejo agronmico de los cultivos. De acuerdo con Sieverding
(30), el clima (Tabla 2) y concretamente la
humedad del suelo, tienen gran influencia en las
tasas de colonizacin de las races por las MA.
Pueden existir factores desconocidos en los
ecosistemas naturales como la toxicidad de aluminio, que suprimen o limitan la esporulacin de
estos hongos, ms no la colonizacin (36).
De acuerdo con los resultados anteriores
puede afirmarse que las MA estn asociadas a la
rizosfera de Coffea arabica y por tanto, deben
TABLA 5. Anlisis de correlacin entre densidad de
esporas/g de suelo y colonizacin radical (%).
Localidad
Correlacin
El Cairo
Gigante
Lbano
Sasaima
Supa
Sevilla
Buenavista
Pereira
Venecia
Chinchin
0,01665
0,23037
0,34592
0,05829
0,34022
0,00360
- 0,14584
0,11569
0,01753
- 0,13341
Significancia
0,7974
0,0012
0,0001
0,4182
0,0001
0,9670
0,0801
0,1586
0,8625
0,0926
259
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
AGRADECIMIENTOS
Los autores agradecen la colaboracin del
personal de Experimentacin Regional; Disciplinas de Qumica Agrcola y Fitopatologa de
CENICAFE; a los doctores R. Thomas y I. Rao
del CIAT y al Dr. John Dodd de la Universidad
de Kent (Inglaterra).
LITERATURA CITADA
1.
2.
3.
4.
260
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.
261
growth and root colonization by vesiculararbuscular mycorrhizal fungi. Plant and Soil
76:115-124. 1984.
39.
37.
40.
38.
262