Lpidos y Lipoprotenas

RESUMEN
Los lpidos, a los que suele conocrseles como grasas, son una rica fuente de energa y una forma
eficiente para que el cuerpo almacene exceso de caloras.
cidos grasos
Son simples cadenas lineales de enlaces carbono-hidrgeno (C-H) que terminan con un grupo
carboxilo (-COOH).
Los cidos grasos tienen longitud variable y se pueden clasificar como cidos grasos de cadena
corta (4 a 6 tomos de carbono), media (8 a 12 tomos de carbono) o larga (>12 tomos de
carbono).
Dependiendo del nmero de enlaces dobles C=C, los cidos grasos se pueden clasificar como
saturados (sin enlaces dobles), mono- saturados (un enlace doble) o poliinsaturados (dos o ms
enlaces dobles).
Los enlaces dobles C=C de los cidos grasos tambin pueden ocurrir en la configuracin trans.
Los cidos grasos trans no se curvan y tienen propiedades fsicas similares a las de los cidos
grasos saturados.
Triglicridos
Los triglicridos contienen tres molculas de cidos grasos unidas a una molcula de glicerol por
enlaces de ster.
En contraste, los triglicridos que contienen cidos grasos insaturados cis, con curvas en su
estructura por lo general forman aceites a temperatura ambiente.
Fosfolpidos
Los fosfolpidos son similares en estructura a los triglicridos, excepto que slo tienen dos cidos
grasos esterificados.
Los dos cidos grasos en fosfolipidos tienen por lo regular 14 a 24 tomos de carbono, con un cido
graso saturado y el otro insaturado.
Colesterol
El colesterol es un alcohol esteroideo no saturado que contiene 4 anillos (A, B, C y D) y tiene una
sola cadena lateral C-H similar a un cido graso en sus propiedades fsicas.
El colesterol puede existir tambin en una forma esterificada llamada ster de colesterilo.
Ciertos tejidos, como la glndula suprarrenal, los testculos y los ovarios, pueden convertir una
pequea cantidad de colesterol en hormonas esteroideas, como glucocorticoides, mineralocorticoides y estrgenos.

ESTRUCTURA GENERAL DE LIPOPROTENAS

Como lo indica su nombre, las lipoprotenas estn compuestas de lpidos y protenas, llamadas
apolipoprotenas.
La funcin principal de las lipoprotenas es la entrega de combustible a las clulas perifricas.
Las apolipoprotenas contienen un adorno estructural llamado hlice anfiftica.
La apo A-I, la protena principal en HDL, se emplea con frecuencia como un ndice de la cantidad
del HDL antiaterognico presente en el plasma.
La apo B es una protena grande con un peso molecular de casi 500 kD y es la protena principal en
LDL, VLDL y quilomicrones. La apo B existe en dos formas, apo B-100 y apo B-48.

La apo B-100 se halla en LDL y VLDL.

La apo B-48, se encuentra slo en los quilomicrones.

Hay tres isoformas principales de apo E: apo E2, E3 y E4. Las isoformas apo E afectan el
metabolismo de las lipoprotenas porque difieren en su capacidad para interactuar con el receptor de
LDL.
Se ha demostrado que los individuos con la isoforma apo E4 tienen mayor riesgo de desarrollar
enfermedad de Alzheimer.
Quilomicrones
Los quilomicrones, que contienen apo B-48, son las partculas de lipoprotena ms grandes y menos
densas.
Una vez que entran a la circulacin, las lipasas hidrolizan rpido a los triglicridos y steres de
colesterilo en los quilomicrones y, en pocas horas, se transforman en partculas de quilomicrn
remanentes, que son captadas por receptores remanentes en el hgado.
Lipoprotenas de muy baja densidad
El hgado produce VLDL, y contiene apo B-100, apo E y apo Cs; como los quilomicrones, las
lipoprotenas de muy baja densidad tambin son ricas en triglicridos. Son las portadoras
principales de triglicridos endgenos.
Lipoprotenas de baja densidad
La LDL contiene apo B-100 y apo E y es ms rica en colesterol que otras lipoprotenas que
contienen apo-B.
Lipoprotena (a)
Las Lp(a) son partculas parecidas a las LDL, cada una con una molcula de apo (a) enlazada a apo
B-100 mediante un enlace de disulfuro. Se considera que las concentraciones altas de Lp(a)
confieren mayor riesgo para cardiopata coronaria prematura y accidente cerebrovascular.

Protenas de alta densidad

La HDL, la partcula de lipoprotena ms pequea y densa, es sintetizada en el hgado y el intestino.
La HDL discoidal contiene por lo general dos molculas de apo A-I, que forman un anillo alrededor
de una bicapa lipdica central.
Con base en las diferencias de densidad, hay dos tipos principales de HDL esfrica: HDL 2 y HDL3.
La HDL2 tiene mayor tamao y es ms rica en lpido que la HDL3 y puede ser ms eficiente para
entregar lpidos al hgado.
FISIOLOGA Y METABOLISMO DE LAS LIPOPROTENAS
Una forma principal en que las clulas perifricas mantienen su equilibrio de colesterol es la va
inversa de transporte de colesterol.
En
CUADRO 12-3. INTERVALOS DE REFERENCIA PARA LPIDOS EN
ADULTOS
ANALITO
INTERVALO DE REFERENCIA
Colesterol total
140-200 mg/dl
Colesterol HDL
40-75 mg/dl
Colesterol LDL
50-130 mg/dl
Triglicrido
60-150 mg/dl
esta va, el exceso de colesterol de las clulas perifricas es llevado de nuevo al hgado, donde se
puede excretar en la bilis como colesterol libre.
Absorcin de lpidos
Estos lpidos anfifticos en la luz intestinal forman grandes agregados con cidos biliares llamados
micelas.
Una persona promedio ingiere, absorbe y transporta cerca de 60 a 130 g de grasa al da, sobre todo
en la forma de triglicridos.
DISTRIBUCIONES DE LPIDOS Y LIPOPROTENAS EN LA POBLACIN
Los varones y las mujeres muestran una tendencia hacia mayores concentraciones de colesterol
total, colesterol LDL y concentraciones de triglicrido con la edad.

Las concentraciones de colesterol HDL para nios y nias son comparables con las de mujeres
adultas. La incidencia de cardiopata se relaciona de manera firme con la concentracin de
colesterol srico.
Una dieta prudente, baja en grasa y colesterol, con una ingestin calrica ajustada para satisfacer y
mantener el peso corporal ideal, junto con ejercicio regular, puede reducir el riesgo de cardiopata,
accidente cerebrovascular, diabetes y cncer.

CUADRO 12-4. FACTORES Di RIESGO DE CARDIOPATA DETERMINADOS POR LOS

GRUPOS DE TRATAMIENTO DE ADULTOS NCEP
Factores de riesgo positivos
Edad: >45 aos para varones; >55 aos o menopausia prematura para mujeres
Antecedentes familiares de CC prematura
Hbito de fumar actual
Hipertensin (TA >140/90 mmHg o tomar medicamentos antihipertensivos)
Concentracin de colesterol LDL >160 mg/dl (>4.1 mmol/L), con factor de riesgo >1
Concentracin de colesterol LDL >130 mg/dl (3.4 mmol/L), con factores de riesgo >2
Concentracin de colesterol LDL&100 mg/dl (2.6 mmol/L), con CC o riesgo equivalente.
Concentracin de colesterol HDL >40 mg/dl (<1.0 mmol/L)
Diabetes mellitus = equivalente de riesgo de CC
Sndrome metablico (factores de riesgo metablico mltiples)
Factores de riesgo negativos
Concentracin de colesterol HDL >60 mg/dl (>1.6 mmol/L)
Colesterol LDL <100 mg/dl (<2.6 mmol/L)

PREVENCIN, DIAGNSTICO Y TRATAMIENTO DE LA ENFERMEDAD

Las enfermedades relacionadas con las concentraciones anormales de lpidos se denominan
dislipidemias.
Muchas dislipidemias, sin importar la causa, se relacionan con CC o arteriosclerosis.
Arteriosclerosis
La arteriosclerosis es la nica causa principal de muerte y discapacidad.
La relacin entre la cardiopata y las anormalidades de lpidos provienen de la sedimentacin de
lpidos, sobre todo en la forma de colesterol esterificado, en las paredes de las arterias. Esta
sedimentacin de lpidos comienza con las capas delgadas llamadas rayas de grasa.
Las rayas de grasa se pueden convertir con el tiempo en placas que bloquean en parte (ocluyen) el
flujo sanguneo. Cuando se forma la placa en las arterias de los brazos o piernas, se llama
enfermedad vascular perifrica (EVP).
Cuando se forma en el corazn, se conoce como enfermedad coronaria (EC), y cuando se forma en
los vasos del cerebro, se llama enfermedad cerebrovascular (ECV).

Los depsitos de lpido en la piel forman ndulos llamados xantomas, que son una pista para
anormalidades genticas.
Hiperlipoproteinemia
Las lipoprotenas son vehculos de transporte complejos para mover colesterol, steres de
colesterilo y triglicridos en la sangre.
Las dislipidemias se pueden subdividir en dos categoras principales: Hiperlipoproteinemias, que
son enfermedades relacionadas con concentraciones altas de lipoprotenas e hipolipoproteinemias,
que se relacionan con concentraciones bajas de lipoprotena.
Las hiperlipoproteinemias se pueden subdividir en hipercolesterolemia, hipertrigliceridemia e
hiperlipidemia combinada con incrementos de colesterol y triglicridos.
Hipercolesterolemia
La hipercolesterolemia es la anormalidad lipdica que guarda una estrecha relacin con la
cardiopata. Una forma de la enfermedad, que se relaciona con anormalidades genticas que
predisponen a los individuos afectados a concentraciones altas de colesterol, se llama
hipercolesterolemia familiar (HF).
Los heterocigotos tienden a tener concentraciones de colesterol total en el intervalo de 300 a 600
mg/dl.
Hipertrigliceridemia
La hipertrigliceridemia puede derivar de anormalidades genticas, conocida como
hipertrigliceridemia familiar, o de causas secundarias, como anormalidades hormonales
relacionadas con el pncreas, glndulas suprarrenales e hipfisis, o de diabetes mellitus o nefrosis.
Los triglicridos estn afectados por varias hormonas, como la insulina pancretica y el glucagn,
la hormona de crecimiento pituitaria, la hormona adrenocorticotrpica (ACTH) y la tirotropina y
la adrenalina y noradrenalina de la mdula suprarrenal del sistema nervioso.
El tratamiento de la hipertrigliceridemia consiste en modificaciones dietticas, aceite de pescado,
frmacos que disminuyen los triglicridos.
Hiperlipoproteinemia combinada
La hiperlipoproteinemia combinada se define por lo general como la presencia de concentraciones
altas de colesterol srico total y triglicridos. Se considera que los individuos que presentan este
sndrome tienen mayor riesgo de CC. En la forma derivada genticamente, llamada
hiperlipoproteinemia combinada familiar (HCF).
Otra forma gentica rara de hiperlipoproteinemia combinada se llama disbetalipoproteinemia
familiar, o hiperlipoproteinemia tipo III.

Incremento de Lp(a)

La Lp(a) es una variante de la LDL con una apoliprotena extra, llamada apo (a); el tamao y las
concentraciones sricas de Lp(a) estn determinadas genticamente.
Hipolipoproteinemia
Las hipolipoproteinemias son anormalidades marcadas por concentraciones reducidas de
lipoprotena. Hay dos categoras principales: hipoalfalipoproteinemia y hipobetalipoproteinemia.
La hipobetalipoproteinemia se relaciona con concentraciones bajas aisladas de colesterol LDL.
Hipoalfalipoproteinemia
La hipoalfalipoproteinemia indica una reduccin aislada de HDL circulante como una
concentracin de colesterol HDL <40 mg/dl. La hipoalfalipoproteinemia transitoria, aguda, puede
verse en casos de estrs fisiolgico grave, como infecciones agudas (sobre todo virales), otras
enfermedades agudas y procedimientos quirrgicos.

Anlisis de lpidos y lipoprotenas

Medicin de lpidos
Los lpidos y las lipoprotenas son indicadores importantes de riesgo de CC.
Medicin de colesterol
El diagnstico de lpidos suele comenzar con la medicin de colesterol srico total.
Las lipoprotenas se cuantifican tambin en general con base en su contenido de colesterol.
En el mtodo de referencia actual para colesterol se emplea extraccin con hexano despus de la
hidrolisis con KOH alcohlica seguida de la reaccin con reactivo de color de LiebermannBurchard, que comprende los cidos sulfrico y actico y anhdrido actico.
Mtodo manual de varios pasos con una buena concordancia con el mtodo estndar desarrollado y
aplicado en el U.S National Institute for Standars and Technology, el denominado: mtodo
definitivo por medio de espectrometra de masas con dilucin isotpica.
Los reactivos enzimticos han reemplazado en general a los cidos fuertes empleados en las
reacciones qumicas.
Las enzimas, seleccionadas para especificidad con el analito de inters, proveen cuantificacin
bastante exacta sin la necesidad de extraccin u otros tratamientos previos.
Las lipoprotenas, HDL y a veces LDL, se cuantifican en general con base en su contenido de
colesterol por medio de los mismos reactivos enzimticos. As las mediciones de colesterol total,
LDL y HDL, junto con triglicridos, se pueden completar de manera rutinaria en paneles en
analizadores automatizados discretos o por lotes.
La secuencia de ensayo enzimtico, es la ms comn para medir colesterol. Esta secuencia de
reaccin se emplea por lo general en suero sin un paso de extraccin pero puede estar sujeta a
interferencia. Por ejemplo, la vitamina C y la bilirrubina son agentes reductores que pueden
interferir con la reaccin de color catalizada por peroxidasa.

Medicin de triglicrido

La medicin de triglicrido srico junto con el colesterol es til para detectar ciertos trastornos
genticos y otros tipos de trastornos metablicos, as como para caracterizar el riesgo de desarrollar
enfermedad coronaria.
El valor de triglicrido se emplea tambin por lo comn en la estimacin de colesterol LDL
mediante la ecuacin de Friedewald.
Varias secuencias de reaccin enzimtica estn disponibles para medicin de triglicridos. En todas
se emplean lipasas para separar los cidos grasos del glicerol. El glicerol liberado participa en
cualquiera de las distintas secuencias enzimticas.
Las secuencias enzimticas de reaccin de triglicridos tambin reaccionan con glicerol libre
endgeno, que esta universalmente presente en el suero y constituye una fuente importante de
interferencia.
El glicerol libre endgeno contribuye con una sobrestimacin de triglicridos de 10 a 20 mg/dl.,
cerca de 20% de las muestras tendrn alto contenido de glicerol, con concentraciones incrementadas
en ciertas condiciones como diabetes y hepatopata o por medicaciones basadas en glicerol.
Mtodos de lipoprotena
Hay varios mtodos para la separacin y cuantificacin de lipoprotenas sricas, que aprovechan las
propiedades fsicas como, densidad, tamao, carga y contenido de apolipoprotenas.
El intervalo de densidad observado entre las clases de lipoprotenas es una funcin del contenido
relativo de lpidos y permite el fraccionamiento por ultracentrifugacin.
Las separaciones electroforticas aprovechan las diferencias de carga y tamao.
Los mtodos de precipitacin qumicos comunes, dependen del tamao de partcula, carga y
diferencias en el contenido de apoliprotena.
Se pueden usar anticuerpos especficos para enlazar y separar clases de lipoprotenas.
El mtodo ms comn llamado, ultracentrifugacin preparativa, emplea ajustes de densidad
sucesivos de suero para fraccionar las clases de lipoprotenas mayores y menores.
La ultracentrifugacin, aunque tediosa, cara y tcnicamente demandante, an es un medio til para
la separacin de lipoprotenas para fines cuantitativos y aislamientos preparativos.
Los mtodos electroforticos permiten la separacin y cuantificacin de las principales clases de
lipoprotenas y proveen una representacin visual til para detectar patrones inusuales o variantes.
El gel de agarosa ha sido el medio ms comn para la separacin de lipoprotenas intactas, y provee
una base clara y uso conveniente.
La electroforesis en geles de poliacrilamida se emplea para la separacin de clases de lipoprotenas,
subclases y las apolipoprotenas.
La precipitacin qumica, por lo regular con polianiones, como la heparina y cationes divalentes,
como el manganeso, se puede usar para separar las lipoprotenas, pero son ms comunes para HDL.
La apo B en VLDL y LDL es rica en aminocidos con carga positiva, que de preferencia forma
complejos con polianiones.
En los mtodos inmunoqumicos, usar anticuerpos especficos para epitopos en las
apolipoprotenas, ha sido til en mtodos de investigacin y de rutina.

Mtodos de HDL

Para propsitos de diagnstico rutinario, la HDL ha sido separada casi de forma exclusiva por
precipitacin qumica.
Un problema significativo con mtodos de precipitacin de HDL es la interferencia de
concentraciones altas de triglicrido. Cuando VLDL y quilomicrones ricos en triglicrido estn
presentes, la baja densidad de las lipoprotenas agregadas puede evitar que sedimenten o incluso
causar flotacin durante la centrifugacin. Esta sedimentacin incompleta, indicada por turbiedad o
material compuesto por partculas que flotan en el sobrenadante, da como resultado sobrestimacin
de colesterol HDL. La centrifugacin de alta velocidad reducir la proporcin de sobrenadante
turbio.
Una nueva clase de mtodos directos, es denominada homogneos, que agilizan la cuantificacin de
HDL. Estos ensayos homogneos al parecer son muy precisos y bastante exactos, fueron adoptados
con rapidez y en general reemplazaron a los mtodos de pretratamiento.
El mtodo de referencia aceptado para colesterol HDL es un procedimiento de tres pasos
desarrollado en el CDC. Este mtodo conlleva centrifugacin para eliminar VLDL, precipitacin
con manganeso de heparina desde el lquido subnadante de 1.006 g/ml para eliminar LDL y anlisis
de colesterol sobrenadante mediante el ensayo de Abell-Kendall. Este mtodo es tedioso y caro.
Un mtodo ms simple es un mtodo de comparacin designada, por medio de precipitacin directa
con sulfato de dextrano (50kD) de suero con anlisis de colesterol Alberll-Kendall.
Mtodos para LDL
El mtodo de investigacin ms comn para cuantificacin de colesterol LDL y la base para el
mtodo de refencia ha sido designado betacuantificacin, donde beta se refiere al termino
electrofortico para LDL.
La betacuantificacin combina ultracentrifugacin y precipitacin qumica.
La ultracentrifugacin de suero en la densidad nativa se emplea para hacer flotar VLDL y
quilomicrones para separacin.
La precipitacin qumica se emplea para separar HDL del suero completo o del subnadante
obtenido por ultracentrifugacin.
Un mtodo ms comn que evita la ultracentrifugacin, que se emplea tanto en los laboratorios de
investigacin como los de rutina, es el clculo de Friedewald o betacuantificacin derivada.
Analizadores compactos
Los lpidos y lipoprotenas comunes se pueden medir con sistemas de anlisis compactos diseados
para uso en las pruebas realizadas en el lugar de la atencin.
Consiste en la separacin integrada de HDL y anlisis de colesterol y triglicridos al mismo tiempo
a partir de sangre obtenida por puncin digital.
Mtodos de apolipoprotena
Las lipoprotenas incluyen varios constituyentes protenicos designados apolipoprotenas, que
adems de incrementar la solubilidad.
Tres apolipoprotenas en particular han sido de inters:
-La apo B, la protena principal de LDL y VLDL, es un indicador de concentracin combinada de
LDL y VLDL que se puede medir de manera directa en el suero de inmunoensayo.

-La apo A-I, es la mejor protena de HDL, puede medir de forma directa en suero en lugar de la
separacin y anlisis de colesterol HDL.
-La Lp(a), la variante de LDL, que se ha mostrado es un indicador independiente de riesgo de CC,
se determina a veces para tratar a los pacientes. Esta tiene movilidad pre-beta en la electroforesis de
agarosa y puede ser cuantificada por esta tcnica.
Las apolipoprotenas suelen medirse mediante inmunoensayos de varios tipos. Como ELISA,
inmunodifusin radial (IDR) y el radioinmunoesnayo.
Medicin de fosfolpidos
Los fosfolpidos lecitina, lisolecitina y esfingomielina que contienen colina, que explican por lo
menos 90% de los fosfolpidos totales en el suero, se pueden medir mediante una secuencia de
reaccin enzimtica con fosfolipasa D, oxidasa de colina y peroxidasa de rbano.
Medicin de cidos grasos
Los cidos grasos se analizan mediante cromatografa gas-lquido, despus de la extraccin,
hidrolisis alcalina y conversin a steres de metilo de diazometano.
ESTANDARIZACION DE ENSAYOS DE LIPIDOS Y LIPOPROTENAS
Precisin
Es un requisito para la exactitud; un mtodo puede no tener error sistemtico o sesgo global; sin
embargo, si es impreciso, ser inexacto en mediciones individuales.
Los cambios en el estilo de vida que afectan los patrones usuales de dieta, ejercicio, peso y hbitos
de fumar pueden dar como resultado fluctuaciones en los valores observados de colesterol y
triglicridos, y la distribucin de lipoprotenas.
Las condiciones clnicas, diversas enfermedades o las medicaciones empleadas, afectan a las
lipoprotenas circulantes.
Exactitud
Se asegura al demostrar rastreo o acuerdo a travs de la calibracin para el mtodo de referencia
respectivo.
Con el colesterol, el sistema de referencia es avanzado y completo, habiendo servido como modelo
para la estandarizacin de otros analitos de laboratorio.
El mtodo de referencia se ha hecho accesible de manera conveniente a travs de una red de
laboratorios estandarizados, la Red de laboratorios para el mtodo de referencia de colesterol. Esta
red proporciona comparaciones de exactitud con muestras de suero nativo nuevo necesarias para la
transferencia exacta confiable debido a problemas de interaccin analito-matriz en materiales de
referencia procesados.
Interaccin de matriz
En las primeras etapas de estandarizacin de colesterol, que estaban dirigidas hacia fabricantes de
diagnstico y laboratorios rutinarios, se empleaban materiales liofilizados. Estos materiales, hechos
en grandes cantidades, a menudo con adicin artificial de analitos, se analizaban mediante mtodos
definitivos o de referencia, o ambos, y se distribuan de manera amplia para transferencia de
exactitud.

Red de laboratorios para el mtodo de referencia de colesterol del CDC

La red ofrece programas de certificacin formales para colesterol total HDL y LDL. La certificacin
no asegura todos los aspectos de calidad en un sistema reactivo pero asegura principalmente que la
exactitud es fcil de seguir para mtodos de referencia dentro de los lmites aceptados.
Control de calidad
Es importante monitorear la exactitud en la separacin y anlisis de lipoprotenas, y preferible
monitorear colesterol y otras mediciones de lpidos.
Recoleccin de la muestra
El suero recolectado por lo general en tubos al vaco con separador de suero con intensificadores de
coagulacin, ha sido el lquido de eleccin para medicin de lipoprotenas en el laboratorio clnico
rutinario.
El plasma con cido etilendiaminotetracetico (EDTA) era la eleccin tradicional en los laboratorios
de investigacin de lpidos, especialmente para separaciones de lipoprotenas, porque el
anticoagulante incrementa la estabilidad mediante la quelacin de iones metlicos.