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2011
3

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602.3:58.086.83:582.4(075.8)
28.59273
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4


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42
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45
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50
51

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5H2O, CoCl2 . 6H2O, FeSO4 . 7H2O, Na2. 2H2O, , 1 HCl 1
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1 , 500 , 100 ,
5 , 1 , 1, 100 , 50 , 25 .
15

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16.5
2. KNO3
19.0
3. CaCl2
3.3
.
4. MgSO4 7H2O
3.7
5. KH2PO4
1.7

:
1. H3BO3
2. MnSO4 . 5H2O
3. ZnSO4 . 7H2O
4. KI
5. Na2MoO4 . 2H2O
6. CuSO4 . 5H2O
7. CoCl2 . 6H2O

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2.5
2.5

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16

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Fe-
5
5
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1

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100
:
2

2
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2

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30
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17

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21

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11. .
12. .

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4.1.


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2. -
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3. ,
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4.
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1 2.
6. .
26

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4.3.

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6.
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27

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31

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4. - .
32

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33

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2. .
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5. ,
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34

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38

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, , , -, , , , , .
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2).
3. W-S-S
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2.

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0,5 % Macerase, 0,1 % Driselase .
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4. -
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5. 710
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39

6. - 4-
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7. , .
8. ,
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9.
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7.2.

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2.
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3.
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4.
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5. ,
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6. , ,
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7. .
8. .
40

 2.
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NH4NO3
KNO3
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MgSO4 7H2O
KH2PO4
KCl
Na2PO4 H2O
(NH4)2SO4
NH4Cl
Fe-
H3BO3
MnCl2 4H2O
ZnSO4 7H2O
CuSO4 5H2O
CoSO4 7H2O
KI
Na2MoO4 2H2O
MnSO4 7H2O

1
6

2,4

W-5

S-1

W-S-S

S-1

S-2

250
2500
900
250

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1900
440
370
170

1900
440
370
170

267
250
6
24
10
0,025
0,025
0,83
0,25

267
250
6
24
10
0,025
0,025
0,83
0,25

100

100
2

100
2

500
10
1
2

0,5
0,05
40
300
0,5
0,5
0,1

0,5
0,05
80
100
0,5
0,5

9000

18400

800

600
300
170
300

150
134
250
3
2
0,025
0,025
0,75
0,25
14
100
1

10
1
0,2

250
6
24
10
0,025
0,025
0,83
0,25

0,1
1
0,2

0,2
0,5

10000
1000

0,5
2500

0,5
2500

54600
1%

34600
1%

7200
250
72800

41

 7.3.

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.
: (. . ), , ,
; ,
in vitro.

1. 60 2-3
W-S-S.
2. 2-3 W-5
W-S-S.
3. 251 .
.
4. ( 810 )
W-S-S,

.
5. , 0,51 ,
ST-1 .
3-4 16- .
6. 1015 - 13
ST 2
251 , 16- 3-4 2530 .

ST-2.
7. 310
ST-3 .
:
;
-;
.

1. ?
2. ?
3. ?
42

4. ?
5.
?
6. ?
7. in vitro?
8. ?
9. ?
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60

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1. . ., . ., . .
// . . LV. 2007.
. 184-211.
2. . . in vitro
. .: -, 1999. 160 .
3. . ., . . -
, - .
.: -, 2000. 464 .
4. . ., . . .
.: . , 1984. 160 .
5. . ., . . :
. : , 2002. 105 .
6. . ., . ., . .
. .: .
, 1980. 488 .
7. . ., . ., . .
. .: . , 1992.
232 .
8. . ., . ., . . .
. : , 1999. 448 .
9. . . //
http://www.biotechnolog.ru/pcell, 2005.
10. . . .
- . .: , 2005. 730 .
11. .. . : -
.-. -, 2003. 228 .
12. . ., . . ,
. : , 2001. 48 .
13. .
: / : . .,
. ., . ., . . - ,
2002. 51 .
14. . ., .., . .
. .: - .-. -, 2001. 212 .

61

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. .
. .

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. .
61077, . , . , 4. . . : 705-24-32

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