ANALISA PROTEIN

1. Cara Kerja
:
a. Membuat Kurva Standard
1. Disiapkan 4 buah tabung reaksi dalam rak tabung
2. Masing-masing tabung diisi dengan sampel dan aquadest dengan rincian :
- Tabung ke-1 : 0 mL standar protein + 4 mL aquadest
- Tabung ke-2 : 1 mL standar protein + 3 mL aquadest
- Tabung ke-3 : 2 mL standar protein + 2 mL aquadest
- Tabung ke-4 : 4 mL standar protein + 0 mL aquadest
2. Ditambahkan 6 mL larutan biuret dan dikocok hingga homogen
3. Disentrifuge pada kecepatan 1800 rpm selama 15 menit, jika lemak masih
ada maka untuk menghilangkan lemak ditambahkan dengan eter sebanyak
2 mL, kemudian dilakukan sentrifuge lagi sampai terbentuk warna bening
dan tidak terdapat lemak.
4. Diinkubasi pada suhu kamar selama 30 menit dan dikocok pada stirer
agar larut homogen
5. Dibaca pada spektrofotometer pada panjang gelombang 540 nm
Dicatat hasilnya dan dihitung kadar protein pada sampel tersebut.

1. Hasil Absorbansi Standar

Ulangan I
Tabung (ml)
0 ml
1 ml
2 ml
4 ml

I
0,074
0,017
0,072
0,137

II
0,037
0,019
0,058
0,126

III
0,066
0,112

Ulangan II
Tabung

II

III

IV

(ml)
0 ml
1 ml
2 ml
4 ml

0,015
0,019
0,056
0,116

0,028
0,018
0,066
0,122

0,002

0,010

0,070
0,140

0,133

2. Hasil absorbansi Pemeriksaan Sampel Kaldu Babi

Sampel
(ml)
1 ml
2 ml

I
0,060
0,236

II

III

IV

0,062
0,250

0,060
0,243

0,23
7

Rata-Rata
0,061
0,2415

Serbuk serum protein yang ditimbang = 100,4mg

100,4mg
100

1,004 mg

Konsentrasi
0 mg
1,004 mg
2,008 mg
4,016 mg

Absorbansi
0,002
0,019
0,064
0,126

Nilai absorbansi dan konsentrasi kemudian dimasukkan kedalam kertas

grafik dan dibuat kurva standar yang selanjutnya digunakan untuk
menghitung konsentrasi sampel. (terlampir)
Selain dengan kurva standar, konsentrasi juga dapat dihitung dengan
perhitungan seperti berikut:
y= ax + b
0,064 = a (2,008) + b
0,126 = a (4,016) + b 0,062 = a (-2,016)

0,062
2,016
=a
a= 0,0309
y= ax + b
0,064 = 0,0309 (2,008) + b
0,064 = 0,0620 + b
- b = 0,062 0,064
-b = - 0,002
b = 0,002

Sampel Kaldu Babi :

Untuk sampel 1 ml
y= ax + b
0,061 = 0,0309 x + 0,002
0,061 0,002 = 0,0309x
0,059 = 0,0309x

0,059
0,0309
= 1,9094 mg/ml
Kadar :

1,909 mg x

100ml
1

= 190,9 mg/100ml

Untuk sampel 2 ml
y= ax + b
0,2415 = 0,0309 x + 0,002
0,2415 0,002 = 0,0309x
0,2395 = 0,0309x

0,2395
0,0309
= 7,7508 mg/2ml
Kadar:

7,7508 mg x

100ml
2

= 387,54 mg/100ml

190,9 387,54
2

Rata-rata kadar protein kaldu babi =

= 289,22 mg/100ml
= 289,22 mg%
= 0,289 g%