Escolar Documentos
Profissional Documentos
Cultura Documentos
1. Cara Kerja
:
a. Membuat Kurva Standard
1. Disiapkan 4 buah tabung reaksi dalam rak tabung
2. Masing-masing tabung diisi dengan sampel dan aquadest dengan rincian :
- Tabung ke-1 : 0 mL standar protein + 4 mL aquadest
- Tabung ke-2 : 1 mL standar protein + 3 mL aquadest
- Tabung ke-3 : 2 mL standar protein + 2 mL aquadest
- Tabung ke-4 : 4 mL standar protein + 0 mL aquadest
2. Ditambahkan 6 mL larutan biuret dan dikocok hingga homogen
3. Disentrifuge pada kecepatan 1800 rpm selama 15 menit, jika lemak masih
ada maka untuk menghilangkan lemak ditambahkan dengan eter sebanyak
2 mL, kemudian dilakukan sentrifuge lagi sampai terbentuk warna bening
dan tidak terdapat lemak.
4. Diinkubasi pada suhu kamar selama 30 menit dan dikocok pada stirer
agar larut homogen
5. Dibaca pada spektrofotometer pada panjang gelombang 540 nm
Dicatat hasilnya dan dihitung kadar protein pada sampel tersebut.
I
0,074
0,017
0,072
0,137
II
0,037
0,019
0,058
0,126
III
0,066
0,112
Ulangan II
Tabung
II
III
IV
(ml)
0 ml
1 ml
2 ml
4 ml
0,015
0,019
0,056
0,116
0,028
0,018
0,066
0,122
0,002
0,010
0,070
0,140
0,133
I
0,060
0,236
II
III
IV
0,062
0,250
0,060
0,243
0,23
7
Rata-Rata
0,061
0,2415
100,4mg
100
1,004 mg
Konsentrasi
0 mg
1,004 mg
2,008 mg
4,016 mg
Absorbansi
0,002
0,019
0,064
0,126
0,062
2,016
=a
a= 0,0309
y= ax + b
0,064 = 0,0309 (2,008) + b
0,064 = 0,0620 + b
- b = 0,062 0,064
-b = - 0,002
b = 0,002
0,059
0,0309
= 1,9094 mg/ml
Kadar :
1,909 mg x
100ml
1
= 190,9 mg/100ml
Untuk sampel 2 ml
y= ax + b
0,2415 = 0,0309 x + 0,002
0,2415 0,002 = 0,0309x
0,2395 = 0,0309x
0,2395
0,0309
= 7,7508 mg/2ml
Kadar:
7,7508 mg x
100ml
2
= 387,54 mg/100ml
190,9 387,54
2