INTRODUCCIN AL ESTUDIO DE LA CLULA

NIVELES DE ORGANIZACIN
Fig. 1.1. Niveles de organizacion de la materia
A los seres vivos se los define por sus
caractersticas, una de stas es su
organizacin. Esta organizacin biolgica
representa el patrn complejo que nos
muestra el camino que ha seguido la
evolucin, desde formas sencillas a otras
ms complejas.
Los seres vivos estn formados por
materia. La materia est formada por
elementos (92 elementos naturales, como
el Cloro, por ejemplo) y se caracteriza por
poseer
determinadas
propiedades
intensivas, tales como el punto de fusin,
punto de ebullicin, conductividad elctrica,
etc. Los elementos estn formados por
tomos. Un tomo es la porcin ms
pequea de un elemento que conserva sus
propiedades qumicas. Las investigaciones
de los fsicos han descubierto un variado
nmero de partculas subatmicas (Nivel
Subatmico),
para
nuestros
fines
mencionaremos slo tres : protones,
neutrones y electrones. Los protones son
partculas
con
carga
positiva;
los
electrones, en cambio, tienen carga
negativa y masa muy pequea; los
neutrones son partculas neutras, sin carga,
y su masa es casi idntica a la de los
protones; los protones y neutrones forman
casi toda la masa de un tomo y se
localizan en el ncleo atmico. Si
combinamos un protn y un electrn se
forma un tomo de Hidrgeno, entidad con
propiedades diferentes a las de un protn y
un
electrn
(Nivel
Atmico).
Si
combinamos tomos de Hidrgeno entre s
obtenemos Hidrgeno molecular (H2), que
es un gas incoloro; si, en cambio,
combinamos el H2 con Oxgeno, otro gas,
obtenemos agua, una molcula (Nivel
Molecular) cuyas propiedades todos
conocemos y que no son las mismas que
1

las del H2 y el O2 y que tambin difieren de las propiedades de las partculas subatmicas y
de los tomos que stas forman.
La vida surgi a partir de tomos y molculas.
Si combinamos molculas entre s, formamos grandes y complejas molculas: las
macromolculas, como las protenas y los cidos nucleicos (Nivel Macromolecular). Estas
macromolculas constituyen la materia prima que forman los virus (Nivel Prebitico o
Supramolecular) y las clulas (Nivel Celular). En el Nivel Subcelular mltiples molculas
se ensamblan y dan lugar a estructuras especializadas como los organoides (mitocondrias,
cloroplastos, etc). Podemos decir que la vida aparece como propiedad definitoria en el Nivel
Celular, o de otro modo, la clula es la porcin ms sencilla de la materia viva que es capaz
de realizar todas las funciones imprescindibles para la vida.
En la mayor parte de los individuos pluricelulares, las clulas se organizan de acuerdo a sus
caractersticas y funciones conformando tejidos como el conectivo, muscular, epitelial,
nervioso (Nivel Tisular). Los tejidos estn ordenados en estructuras funcionales,
denominadas rganos como el corazn y los pulmones en los animales, o las hojas y las
races en las plantas. Las funciones biolgicas bsicas se llevan a cabo por un sistema o
aparato, que es una asociacin coordinada de tejidos y rganos. Los organismos o
individuos pluricelulares estn formados por sistemas que actan en forma coordinada y
rigurosa.
Existen otros niveles de organizacin biolgica, adems de los nombrados anteriormente,
donde las propiedades provienen de la relacin entre los organismos. Por ejemplo, el Nivel
de organizacin POBLACIN rene a todos los individuos de una misma especie que viven
en un mismo lugar, en el mismo tiempo, y que comparten el mismo hbitat. Estas
poblaciones interactan de distinta manera con otras poblaciones del lugar constituyendo
una COMUNIDAD, por ejemplo la poblacin de seres humanos de la ciudad de Buenos
Aires y el conurbano, aprovecha para alimentarse a las distintas poblaciones de animales y
plantas de la zona y se halla parasitada por las mismas poblaciones de parsitos
intestinales.
Esta comunidad comparte el mismo lugar fsico que presenta caractersticas particulares. La
unin de estos factores fsicos con los factores biolgicos constituyen los ECOSISTEMAS.
Todos los ecosistemas de la Tierra estn relacionados, directa o indirectamente. Es por ello
que un cambio drstico o continuo de alguno de ellos indefectiblemente acarrear cambios
en los restantes. Del mantenimiento de un equilibrio entre los distintos ecosistemas,
depende la vida en el planeta.
Tabla 1.1- Niveles de Organizacin
1. Nivel Subatmico
2. Nivel Atmico
3. Nivel Molecular (Monosacridos, Aminocidos, Nucletidos, etc.)
4. Nivel Macromolecular (Polisacridos, Protenas, Acidos nucleicos,
Lpidos complejos, etc. )
5. Nivel Prebitico o Supramacromolecular (Virus )
6. Nivel Subcelular (Organoides: Mitocondrias, Cloroplastos, Ribosomas,
etc.)
7. NIVEL CELULAR {Clula Procarionte, Clula Eucarionte) Individuos
Unicelulares: Bacterias, Algas unicelulares, Levaduras, Protozoos, etc.
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8. Nivel Tisular (Tejidos: Conectivo, Epitelial, Muscular, etc.)

9. Organos (Corazn. Pulmones. Estmago, etc.)
10. Sistemas y Aparatos (Aparato Circulatorio, Sistema digestivo, etc. )
11. Organismos( Individuos Pluricelulares, Animales y Vegetales
Superiores).
12. Poblacin
13. Comunidad.
14. Ecosistema
15. Universo
Durante el desarrollo de nuestra materia, nos ocuparemos de los niveles de organizacin
ms sencilla y haremos hincapi en el Nivel Celular de Organizacin.
ORGANIZACIN CELULAR
TEORA CELULAR
La clula es la unidad de vida ms pequea. Es la unidad anatmica y fisiolgica de todos
los seres vivos. Dos cientficos alemanes el botnico Mattias Schleiden (1804-1881) y el
zologo Theodor Schwann (1810-1882) fueron los primeros en sealar que "Los cuerpos de
las plantas y de los animales estn compuestos por clulas y por productos celulares"
enunciando el postulado inicial de la Teora Celular
Posteriormente, Rudolph Virchow (1821-1902) amplio la Teora Celular y afirm: "Todas las
clulas proceden de otra preexistente". Por lo tanto, las clulas no surgen por generacin
espontnea a partir de materia inanimada.
Otra importante conclusin de la Teora Celular afirma que todas las clulas actuales, tienen
un origen comn. La evidencia ms importante, sobre el origen comn de todas las formas
celulares, radica en las similitudes bsicas de sus estructuras y principalmente de su
composicin molecular.
Tabla 1.2 Postulados de la Teora Celular
1- Todos los seres vivos estn formados por clulas y productos celulares
(unidad anatmica)
2- Las funciones de un ser vivo son el resultado de la interaccin de las clulas
que lo componen (unidad fisiolgica)
3- Toda clula slo puede tener origen en una clula progenitora.
4- Toda clula tiene la informacin hereditaria de el organismo del cual forma
parte, y esta informacin pasa de una clula progenitora a una clula hija.

CARACTERSTICAS DE LAS CLULAS

Todas las clulas estn cubiertas por una membrana externa, llamada membrana
plasmtica, que las separa de otras clulas y del medio circundante con el cual
intercambian materia y energa. Este intercambio esta altamente regulado y es selectivo.
De esta forma la membrana plasmtica debe actuar no slo como limite celular sino tambin
como barrera selectiva. Por lo tanto la clula, mantiene una composicin qumica muy
ordenada y diferente a la del entorno.
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Todas las clulas poseen un metabolismo o conjunto de reacciones qumicas, que

posibilitan el mantenimiento de la vida. Este metabolismo para sustentarse necesita de una o
ms fuentes de energa. Las clulas, necesitan de distintivos tipos de molculas energticas:
* Monedas energticas, como el ATP
* Molculas combustibles, como la glucosa o los cidos grasos
* Molculas de reserva de energa, como el glucgeno o el almidn
Dentro de las reacciones para obtener e interconvertir diferentes forma de energa, son muy
importantes las reacciones de oxido-reduccin o reacciones REDOX. En este tipo de
reacciones es esencial la participacin de las coenzimas de oxido-reduccin, como el NAD+
y el FAD.
Todas las clulas, almacenan en forma de ADN, cido desoxirribonucleico, a informacin
necesaria para controlar sus actividades (reproduccin, metabolismo), y para establecer su
propia estructura. El ADN, es un polmero formado por una secuencia lineal, de monmeros,
llamados nucletidos. Esta secuencia de nucletidos, especifica una secuencia de
aminocidos (estructura primaria de una protena). La especificidad de la secuencia de
aminocidos determinada por la secuencia de bases del ADN esta regida por el cdigo
gentico. La secuencia de bases del ADN, que codifica una protena, es un GEN. Las
protenas, son molculas que llevan a cabo gran parte de las funciones celulares. Muchas
protenas son enzimas, molculas encargadas de dirigir y regular el metabolismo celular. Las
enzimas aceleran las reacciones qumicas, hacindolas compatibles con la vida. De esta
manera las enzimas, dirigen la sntesis y degradacin de todas las molculas biolgicas,
incluidos lpidos, glcidos, protenas y los mismos cidos nucleicos. De esta forma, el ADN al
almacenar la estructura de las enzimas y otras protenas reguladoras, ejerce el control del
metabolismo celular.
El ADN utiliza un segundo cido nucleico, el ARN, cido ribonucleico, como intermediario. A
partir de la secuencia de bases del ADN, que codifica una protena, se sintetiza una
secuencia de bases de ARN. Este proceso es llamado transcripcin. EL cido ribonucleico
encargado de transportar la informacin, recibe la denominacin de ARN mensajero. Este
ARN mensajero, porta la informacin necesaria para la sntesis de protenas, proceso
llamado traduccin, el cual tiene lugar en el citoplasma con la intervencin de dicho ARNm,
los ribosomas y el ARNt que porta los aminocidos.
Las clulas para perpetuarse necesitan reproducirse. Esto significa que la informacin
almacenada en el ADN debe duplicarse para poder ser transmitida a las clulas hijas. El
ADN tiene la excepcional caracterstica de ser una molcula capaz de autorreplicarse, es
decir de generar una copia de si misma. Este proceso es llamado duplicacin o
replicacin.
DIMENSIONES DE LAS CLULAS
Por qu son tan pequeas las clulas? Las clulas deben captar alimento y otros
materiales a travs de su membrana plasmtica y deben eliminar los productos de desecho,
generados en las distintas reacciones metablicas rpidamente antes de que estos se
acumulen hasta niveles txicos para la supervivencia celular. Por lo tanto, las clulas son
pequeas, de modo que en ellas las molculas recorren distancias cortas, lo que acelera las
actividades celulares.
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Adems, a mayor superficie celular, mayor es el transporte de molculas a travs de la

membrana, siendo importante para la continuidad de los procesos metablicos la
proporcin superficie celular sobre volumen celular. Supongamos una clula de forma
cbica, cuanto ms grande es, su superficie crece proporcionalmente lado x lado, es decir a
la segunda potencia de la longitud de un lado, en cambio el volumen celular aumenta
proporcionalmente a la tercera potencia. Por lo tanto, el volumen celular aumenta ms que
su superficie a medida que la clula crece, determinando el limite superior al tamao de la
clula en cuestin. Est clula slo podr iniciar el proceso de divisin celular (previa
duplicacin de su ADN) o perecer.
Por otra parte, debemos recordar que en las clulas el material Gentico (localizado en el
ncleo, en clulas eucariontes), posee un rea limitada de influencia sobre el citoplasma
circundante, que es el que incrementa marcadamente su tamao durante el crecimiento
celular, siendo otra limitante del tamao celular la relacin ncleo/citoplasma.
CLULAS EUCARIOTAS Y PROCARIOTAS
CARACTERSTICAS PRINCIPALES
Todas las clulas se parecen y responden a un patrn comn por ms diversas que sean.
Las clulas de organismos pluricelulares son diferentes en su funcin, por ser distintas
estructuralmente, pero todas concuerdan con un patrn comn. Por ejemplo, aquellas
especializadas en la sntesis de lpidos, tendrn mayor desarrollo del retculo
endoplasmtico liso y sern distintas de las neuronas especializadas en la transmisin del
impulso nervioso, cuya especializacin es tan grande que pierden su capacidad de
reproducirse.
A pesar de las semejanzas y diferencias entre las clulas y que todas cumplen con los
postulados de la Teora Celular, se distinguen dos grandes tipos de clulas:
PROCARIOTAS (sin ncleo verdadero) y EUCARIOTAS (con ncleo).
Tabla 1.3 Principales caractersticas comunes entre clulas eucariotas y
procariotas
1.- En ambos tipos celulares el ADN es el material gentico.
2.- Ambos tipos celulares poseen membranas plasmticas como lmite celular.
3.- Poseen ribosomas para la sntesis proteica.
4.- Poseen un metabolismo bsico similar
5.- Ambos tipos celulares son muy diversos en formas y estructuras.
Los eucariontes son organismos cuyas clulas poseen un sistema de endomembranas
(membranas internas) muy desarrollado. Estas membranas internas forman y delimitan
organelos donde se llevan a cabo numerosos procesos celulares. De hecho l ms
sobresaliente de estos organelos es el ncleo, donde se localiza el ADN. Justamente, el
trmino eucarionte, significa ncleo verdadero (eu: verdadero, carion: ncleo). Por lo tanto,
las clulas eucariontes, poseen diversos compartimentos internos, rodeados por
membranas. De esta forma es ms eficiente reunir a los sustratos y sus enzimas, en una
pequea parte del volumen celular total. Adems de conseguirse una mayor velocidad, las
membranas favorecen la aparicin de estructuras reguladoras que orientan el flujo de
molculas y su posterior conversin en otros productos. Ciertos procesos como la
fotosntesis y la cadena respiratoria estn altamente organizados gracias a la localizacin de
las enzimas en diferentes estructuras de membrana. Por otra parte, las membranas tambin
5

impiden la aparicin de sustratos en forma inespecfica en distintas regiones de la clula, ya

que actan como barrera selectiva. En cuanto al tamao, podemos decir que en promedio
una clula eucarionte es diez veces mayor que una clula procarionte. En cuanto al material
gentico, podemos decir que el ADN eucariota posee una organizacin mucho ms compleja
que el ADN procarionte.
Las clulas procariontes carecen de ncleo y generalmente son mucho menores que las
clulas eucariontes. El ADN de las clulas procariontes no est rodeado por una membrana,
pero puede estar limitado a determinadas regiones denominadas nucleoides. Las clulas
procariontes, al igual que las clulas eucariontes, poseen una membrana plasmtica, pero
carecen de membranas internas, que formen organelos. Sin embargo, debemos precisar que
en algunas clulas procariontes, la membrana plasmtica forma laminillas fotosintticas.
Las clulas procariontes poseen una caracterstica nica, una pared de peptidoglicanos, un
gran polmero de glcidos y aminocidos.
Tabla 1.4- Caractersticas Diferenciales entre el Modelo Celular Procaritico y
Eucaritico
Caracterstica
Clula Procaritica
Clula Eucaritica
Ncleo
No posee membrana
Posee membrana nuclear
nuclear
Cromosomas
Un nico cromosoma
Posee uno o ms cromosomas
circular y desnudo
lineales unidos a protenas
(cromatina)
ADN extracromosmico
Puede estar presente
Presente en organelas
como plsmidos
Organelas citoplasmticas
No posee
Mitocondrias y cloroplastos,
(los cloroplastos presentes slo
en clulas vegetales)
Membrana plasmtica
Contiene las enzimas de Semipermeable, sin las
la cadena respiratoria,
funciones de la membrana
tambin puede poseer
procaritica
los pigmentos
fotosintticos
Sistema de
No posee
Presenta REG, REL, Golgi,
endomembranas
lisosomas, vacuolas y
vesculas.
Pared celular
Capa rgida de
No poseen pared de
peptidoglucano (excepto peptidoglucano. Pueden poseer
micoplasmas)
una pared de celulosa o quitina
Esteroles
Ausentes (excepto
Generalmente presentes
micoplasmas)
Citoesqueleto
Ausente
Presente. Formado por
filamentos proteicos.
Exocitosis y Endocitosis
Ausente
Presente
Ribosomas
70 S en el citoplasma
80 S en el retculo
endoplsmico y en el citosol
Divisin
Fisin Binaria (amitosis) Mitosis - Meiosis
Tamao
0,2 a 10 mm
Siempre superior a 6 mm

ESTRUCTURA DE LAS CLULAS PROCARITICAS

Fig. 1.2- Esquema de una ultraescructura de una bacteria idealizada

BACTERIAS, MICOPLASMAS Y ALGAS CIANOFCEAS

Cuadro 1.1- Estructura de una Clula procarita

Las bacterias pueden definirse como organismos unicelulares procariontes que se
reproducen por fisin binaria. Contienen toda su informacin gentica en un nico
cromosoma bacteriano circular. Tambin poseen sistemas productores de energa y
biosintticos necesarios para el crecimiento y la reproduccin. Poseen como caracterstica
particular una pared rgida de peptidoglicanos. Son generalmente de vida libre y poseen
ADN extracromosmico en forma de plsmidos, estos codifican genes de resistencia a
antibiticos o factores "sexuales" como los pili.
Los micoplasmas son las bacterias mas pequeas de vida independiente. Son muy flexibles
y deformables por lo que atraviesan los filtros de esterilizacin. Entre sus caractersticas
principales se encuentran: a) carecen de pared celular, b) en su membrana plasmtica
poseen esteroles, que no son sintetizados por la bacteria sino que son absorbidos del
medio de cultivo o del tejido donde se desarrolla.. Los micoplasmas son resistentes a la
penicilina (carecen de pared de peptidoglucano) y por la misma razn no toman la coloracin
de Gram.
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Las cianobacterias, anteriormente llamadas algas cianofceas (azulverdosas), son bacterias

Gramnegativas. Se encuentran presentes en estanques, lagos, suelo hmedo, cortezas de
rboles, ocanos y algunas en fuentes termales. La mayor parte de las cianobacterias son
auttrofos fotosintticos. Contienen clorofila a, que tambin se encuentra en plantas y
algas. La clorofila a y pigmentos accesorios se localizan en membranas fotosintticas,
llamadas laminas internas o laminillas fotosintticas. Muchas especies de cianobacterias
fijan nitrgeno, este proceso enriquece el suelo.
En la Tabla 1.4 se aprecian las diferencias ms importantes entre las clulas procariotas
(bacterias) y eucariotas

PLSMIDOS
Un plsmido es una molcula de ADN extracromosmico que se replica en forma
autnoma, por lo que al igual que el cromosoma es un replicn. Puede haber hasta 50
copias de un plsmido en una bacteria. Funcionalmente los plsmidos son elementos
genticos accesorios, es decir que la bacteria puede vivir sin ellos. Sin embargo, la
informacin que contienen puede contribuir a la adaptacin de la bacteria al medio y a la
evolucin de la misma. Los plsmidos pueden contener genes que codifican factores de
resistencia a antibiticos (los plsmidos R) y factores de patogenicidad como exotoxinas. La
evolucin bacteriana a travs de los plsmidos es factible, ya que pueden ser
intercambiados entre distintas bacterias (por ejemplo, el plsmido F). Es decir que ciertos
genes pueden transferirse de una bacteria otra mediante el pasaje de plsmidos, a este
mecanismo se lo denomina conjugacin. Para que la conjugacin pueda llevarse a cabo las
dos bacterias deben ponerse en contacto fsico . Esto es posible debido a que una de las
bacterias, posee pili sexuales (pelos) en su envoltura. Estos pili se encuentran codificados
en el mismo plsmido F (plsmido conjugativo). La bacteria que transfiere el plsmido es la
que posee pili y se la denomina F+, la clula receptora es F-.

TRANSPOSONES
Los transposones son elementos genticos movibles, que se encuentran presentes en los
procariontes (aunque tambin en las clulas eucariontes). El descubrimiento de los
transposones se lo debemos a Barbara McClintock. Los transposones son fragmentos de
ADN que se mueven de una localizacin a otra del cromosoma. Esta transposicin es
catalizada por una enzima llamada transposasa. El gen de la transposasa esta incluido
dentro del mismo transposn. Los transposones al ser elementos mviles, dentro del
genoma, pueden provocar mutaciones al insertarse en nuevas regiones del ADN.

PARED CELULAR. BACTERIAS GRAMPOSITIVAS Y GRAMNEGATIVAS

Por fuera de la membrana celular, se encuentra una pared celular rgida de peptidoglicano,
que esta presente en todas las bacterias excepto los micoplasmas. La presencia de la pared
protege a la bacteria de la diferencia de presin osmtica entre el medio interno de la
bacteria y el medio exterior. De no existir la pared la bacteria estallara. Adems la pared
cumple funciones de proteccin como por ejemplo contra sustancias txicas .
8

Existen dos tipos de pared bacteriana que pueden diferenciarse por la Tincin de Gram
(siglo XIX). El primer grupo de bacterias son aquellas capaces de retener el colorante cristal
violeta luego de la decoloracin con alcohol-cetona. Estas bacterias son llamadas
Grampositivas. El segundo grupo esta conformado por aquellas bacterias incapaces de
retener el colorante luego del tratamiento decolorante, por lo tanto son llamadas
Gramnegativas.

LA PARED CELULAR DE LAS BACTERIAS GRAMPOSITIVAS

Fig. 1.3- Esquema de la parecelular de una bacteria Grampositiva

La pared celular de las Grampositivas es ms gruesa que la de los Gramnegativas. Posee
peptidoglicano, cidos teicoicos y lipoteicoicos. El componente fundamental es la murena,
un peptidoglicano que solo se encuentra en los procariontes. La murena consiste en una
cadena lineal de dos azcares alternados N-acetilglucosamina y cido acetilmurmico. A
cada residuo de cido murmico se encuentra unido un tetrapptido compuesto de D- y Laminocidos. Aproximadamente un tercio de los tetrapptidos presentes participan de la
unin lateral entre cadenas adyacentes de murena. La pared celular es biolgicamente
estable, resiste el ataque de las enzimas de los mamferos, excepto de la lisozima que la
degrada. La sntesis de la pared puede ser afectada por antibiticos como la penicilina. Los
cidos teicoicos son el principal determinante antignico de las bacterias Grampositivas y
por lo tanto definen la individualidad inmunolgica de estas bacterias.
9

LA PARED CELULAR DE LAS BACTERIAS GRAMNEGATIVAS

Fig. 1.4- Esquma de la pared celular de una bacteria Gramnegativa

El espesor de la pared celular de una bacteria Gramnegativas es considerablemente menor
que el de una Grampositivas. La cantidad de murena es mucho menor en los
Gramnegativas. Los cidos teicoicos no estn presentes en las bacterias Gramnegativas. A
ambos lados de la fina pared de murena se encuentra un gel periplsmico, que define al
llamado periplasma (antes llamado espacio periplasmtico).
Por fuera del periplasma se encuentra una estructura exclusiva de las Gramnegativas, la
denominada membrana externa. Si bien es estructuralmente similar a una bicapa lipdica,
su composicin es diferente de la de otras membranas biolgicas. Esta bicapa es muy
asimtrica, la semicapa interna esta compuesta por fosfolpidos, pero la semicapa externa
esta compuesta por lipopolisacridos (LPS), altamente txico para el ser humano
(endotoxina).
Para obtener nutrientes las bacterias Gramnegativas, poseen porinas que son protenas que
forman poros en la membrana externa.
CPSULAS
Por fuera de la membrana externa de las Gramnegativas y de la gruesa pared de las
Grampositivas, se encuentra presente, en algunas bacterias, una cpsula o matriz
exopolisacrica, formada por un gel hidroflico. En general esta cpsula o matriz esta
formada por polmeros de azcares. Las cpsulas permiten a las bacterias evadir los
mecanismos de defensa de los organismos pluricelulares, tambin tienen funciones de
adherencia a epitelios permitiendo de esta manera colonizar los tejidos del husped.

10

ESTRUCTURA DE LAS CLULAS EUCARITICAS

Cuadro 1.2- Estructura de una Clula eucarita

Fig.1.5- Esquema de la ultraestructura tridimencional de una clula animal y sus principales

componenetes
Presentan este modelo celular, los organismos de los reinos Protista, Hongos, Plantas y
Animales.
Si bien existe una gran diversidad entre estas clulas, el modelo bsico es similar,
presentando como estructura sobresaliente el ncleo celular.

NCLEO CELULAR
Las diversas partes de una clula eucaritica interactan de forma integrada. Esto es posible
11

porque existe un centro primordial de control: el ncleo celular. Una membrana doble, la
envoltura nuclear (constituida por dos unidades de membrana), controla el transporte, muy
selectivo, de sustancias entre el ncleo y el citoplasma. El pasaje se realiza a travs de los
poros nucleares. La envoltura nuclear posee ribosomas adheridos a la cara citoplasmtica y
una estructura proteica en su parte interna llamada lamina nuclear, que sirve como
esqueleto al ncleo.
En el interior del ncleo, se encuentra el material gentico (ADN) asociado a protenas
bsicas llamadas histonas, formando una estructura fibrilar muy enrollada denominada
cromatina y el nucleolo, sitio de ensamblaje de los ribosomas (estructuras esenciales para la
sntesis de protenas, formados por ARN ribosomal y protena). El ARN ribosmico se
sintetiza en el nucleolo, y las protenas ribosmicas en el citoplasma, para pasar despus al
ncleo y de all al nucleolo, donde se unen al ARN ribosomal para formar los ribosomas.
Tabla 1.5- Caractersticas del Ncleo Celular y sus Componentes
Estructura : Descripcin
Funcin
Ncleo
Celular
Ncleo
Estructura rodeada por una doble Regular la funcin celular.
membrana con poros. Contiene Control
del
metabolismo,
cromatina/cromosomas y nucleolo.
reproduccin (ciclo celular) y
diferenciacin celular.
Envoltura
Estructura formada por dos unidades Continuacin del REG. Posee
Nuclear
de membrana unidas a nivel de los poros que regulan el pasaje entre
poros nucleares.
ncleo y citoplasma
Nucleolo
Cuerpo granular en el ncleo, que Sitio de sntesis del RNA
consiste en ARN y protenas.
ribosmico y de ensamble de los
ribosomas.
Cromatina
ADN asociado a protenas, tanto Empaquetamiento (plegamiento)
estructurales (histonas) como a de ADN. El ADN compone los
protenas regulatorias. La cromatina genes. Funciones regulatorias de
es visible durante la interfase celular
la transcripcin gentica.
Cromosomas ADN asociado a protenas, en estado Contienen los genes que son las
superenrrollado. Visible en forma de unidades de informacin, que
estructuras cilndricas cuando la rigen las funciones y estructura
clula se divide, ya sea en mitosis o celular.
meiosis.
Rodeando al ncleo encontramos el CITOPLASMA, coloide donde predominan como
constituyentes agua, iones, enzimas y donde se encuentran incluidos los organelos
celulares. El citoplasma se encuentra separado del ambiente exterior por la membrana
plasmtica.

MEMBRANA PLASMTICA
Estructuralmente esta compuesta por una bicapa fosfolipdica. El colesterol esta presente en
las clulas animales, pero esta ausente, en general, en plantas, hongos y procariontes (salvo
micoplasmas). La membrana plasmtica tambin contiene mltiples protenas con diversas
funciones. Podemos dividirlas en dos grandes grupos: a) protenas integrales de membrana
y b) protenas perifricas de membrana. Las primeras atraviesan la membrana de lado a
12

lado, mientras que las segundas estn en contacto con la membrana, pero no la atraviesan.
Algunas son enzimas reguladoras, otras receptores hormonales. Existen tambin protenas
transportadoras y canales reguladoras del movimiento de iones y molculas a travs de la
membrana plasmtica, de all su enorme especificidad. Otra funcin importante de la
membrana es la comunicacin intercelular y el reconocimiento de diversos tipos de molcula
(hormonas, virus, anticuerpos, toxinas, etc.) que interactan con ella. En general esta
funcin es llevada acabo por glucoprotenas y glucolpidos, que se encuentran solo en el
lado externo de la membrana plasmtica. Se cree que los glcidos juegan un importante
papel en la adhesin entre clulas. A esta capa, de glucolpidos y glucoprotenas se la
denomina glucoclix.
SISTEMA DE ENDOMEMBRANAS
Este sistema se compone de sistemas membranosos interconectados entre s, como el
retculo endoplalmtico liso o agranular (REL), el retculo endoplasmtico rugoso o granular
(REG) y el aparato de Golgi. Estas estructuras permiten la circulacin de sustancias siempre
dentro de formaciones limitadas por membrana interactuando por medio de vesculas.
Tabla 1.6 - Organizacin del Sistema de endomembranas
Estructura
Descripcin
Funcin
Retculo
Membranas internas en
Sntesis de Protenas destinadas a
endoplasmtico
forma de sacos aplanados y secrecin(exportacin) o a la
rugoso (REG)
tbulos. Con ribosomas
incorporacin de membranas.
adheridos a su superficie
externa. La envoltura nuclear
es parte del REG.
Retculo
Membranas internas donde
Sitio de biosntesis de lpidos y
endoplasmtico liso
predominan los tbulos. Sin
detoxificacin de medicamentos.
(REL)
ribosomas adheridos.
Aparato de Golgi
Pilas de sacos
Modificacin de protenas
membranosos aplanados
(glicosilacin). Empaquetamiento de
(dictiosomas). Funcional y
protenas secretadas. Clasificacin de
estructuralmente polarizado. las protenas que se distribuyen a
membrana plasmtica, secrecin o
lisosomas.
Lisosomas
Vesculas (sacos)
Contienen enzimas hidrolticas, que
membranosas
desdoblan materiales ingeridos,
secreciones y deshechos celulares.
Vacuolas
Sacos membranosos
Transporte de materiales, deshechos
principalmente, en plantas,
y agua.
hongos y algas.

13

ORGANELOS
Tabla 1.7 - Principales organoides membranosos de la clula eucarionte
Estructura
Descripcin
Funcin
Mitocondria
Organelas semiautnomas.
Metabolismo aerbico. Sitio de muchas de
Poseen ADN y ribosomas tipo las reacciones de la respiracin celular. All
procarionte. Una doble
se realizan el ciclo de Krebs, la cadena
membrana les sirve de
respiratoria y la fosforilacin oxidativa. Es
envoltura. La membrana
decir la transformacin de la energa de
interna forma las crestas
lpidos o glucosa (molculas combustibles)
mitocondriales.
en ATP (moneda energtica).
Cloroplasto
Organela semiautnoma.
La clorofila capta la energa luminosa para
Posee ADN y ribosomas tipo
formar ATP y otros compuestos con gran
procarionte. Una doble
cantidad de energa. Estos compuestos
membrana envuelve a los
altamente energticos sirven para
tilacoides. La clorofila, se
sintetizar, glucosa a partir de CO2.
encuentra en las membranas
tilacoidales.
Microcuerpos
Vesculas membranosas que
Sitio de muchas reacciones metablicas.
(Peroxisomas) contienen diversas enzimas
Enzimas que protegen de la toxicidad del
relacionadas con el
oxigeno, por ejemplo la catalasa.
metabolismo del oxigeno y el
perxido de hidrogeno. No
poseen ADN ni ribosomas

RIBOSOMAS Y POLIRRIBOSOMAS
Son estructuras redondeadas que a diferencia de las anteriores, carecen de unidad de
membrana.
Estn constituidos por dos subunidades, mayor y menor separadas entre s. Ambas
subunidades se unen cuando leen una molcula de ARNm. Las subunidades estn
formadas por ARNr y protenas, siendo ensambladas en el nucleolo. Cuando hay varios
ribosomas unidos a una molcula de ARNm, lo denominamos polirribosoma.
La funcin de los ribosomas es sintetizar protenas.

14

CITOESQUELETO
El citoesqueleto es una red de fibras protenicas. Esta red es dinmica encontrndose en
constante cambio. Sus funciones, son esenciales para las clulas eucariontes y abarcan
motilidad celular, forma, diferenciacin, reproduccin, regulacin, etc.
Tabla 1.8 - Organizacin General del citoesqueleto
Estructura
Descripcin
Microtbulos
Tubos huecos compuestos por
la forma monomrica de la
protena tubulina. (monmero
globular)

Filamentos
de
(microfilamentos)

actina Estructura slida en forma de

huso consistente en la protena
actina. (monmero globular)

Filamentos intermedios

Protenas
filamentosas,
en
forma de tubos. Compuestas
por monmeros fibrosos.

Centrolos

Pares de cilindros huecos,

localizados cerca del centro de
la
clula,
formados
por
microtbulos.

Cilios

Proyecciones
relativamente
cortas que se extienden desde
la
superficie
celular.
Compuestas por microtbulos.

Flagelos

Proyecciones
largas
compuestas por microtbulos.
Cubiertos
por
membrana
plasmtica

Funcin
Sostn estructural, participan
en
el
movimiento
de
organelas y la divisin celular
(aparato
mittico),
componentes
de
cilios,
flagelos y centrolos.
Sostn estructural, participan
en el movimiento de la clula
y sus organelos y en la
divisin celular.
Sostn estructural. Forman
redes que conectan la
membrana plasmtica con la
envoltura nuclear.
El huso mittico se forma
entre los centrolos durante la
divisin de clulas animales,
fija
y
organiza
los
microtbulos. Estn ausentes
en las plantas superiores.
Movimiento
de
algunos
organismos unicelulares. Se
utiliza para mover materiales
en la superficie de algunos
tejidos.
Locomocin
celular
de
espermatozoides y algunos
organismos unicelulares.

Fig. 1.6- Esquema de componentes del citoesqueleto

15

CLULA EUCARITICA ANIMAL Y VEGETAL

Fig. 1.7- Esquemas de una clula vegetal (izquierda) y tridimencional de un cloroplasto con
sus componentes (derecha)

Cuadro 1.3- Modelos bsicos de clula eucarita

Las clulas eucariontes poseen dos modelos estructurales bsicos: a) clulas auttrofas
fotosintticas y b) clulas hetertrofas.
Las clulas auttrofas son aquellas que sintetizan su propio alimento, es decir sus propias
molculas combustibles. En este caso las clulas eucariontes vegetales son clulas
auttrofas fotosintticas, por lo tanto utilizan la luz solar como fuente de energa.
Transforman la energa solar en energa qumica, este proceso es llamado fotosntesis. La
fotosntesis en las clulas vegetales se lleva a cabo en un organelo membranoso llamado
cloroplasto. Dentro del cloroplasto se encuentran sacos membranosos apilados,
denominados tilacoides, en cuyas membranas encontramos el pigmento llamado clorofila,
esencial para la fotosntesis.
Las clulas hetertrofas son aquellas que no sintetizan su propio alimento sino que
necesitan una fuente externa de energa tanto como de materiales de construccin de sus
propias molculas. Las clulas animales (y los hongos), son clulas eucariontes
hetertrofas.
Las clulas animales y las clulas vegetales poseen unas organelas membranosas llamadas
mitocondrias, donde se lleva acabo la respiracin celular. En este proceso son rotos los
enlaces de alta energa de las molculas combustibles orgnicas. Esta energa liberada es
utilizada para la sntesis de las monedas energticas como el ATP. El ATP es esencial para
las diferentes funciones celulares. Para que este proceso se lleve a cabo dentro de las
mitocondrias es necesaria la presencia de oxigeno.
16

Por lo tanto en ambos tipos celulares son necesarias las mitocondrias , para obtener energa
qumica en forma de ATP a partir de las molculas combustibles. Pero es diferente el origen
de las molculas orgnicas utilizadas como combustibles. En el caso de las clulas
vegetales (auttrofas), ellas sintetizan sus propias molculas combustibles en los
cloroplastos, en el proceso de fotosntesis. En cambio las clulas animales (hetertrofas),
necesitan una fuente externa de molculas energticas que sirvan como combustible celular.
Tabla 1.9 - Principales diferencias entre clulas animales y clulas vegetales
Estructura
Clula animal
Clula vegetal
Pared celular
Ausente
Pared celular constituida por
celulosa.
Aparato mittico (Huso
Astral
Anastral
acromtico )
Centrolos
Presente
Ausente
Vacuolas
Vacuolas pequeas
Vacuolas grandes, puede ser
una grande central
Metabolismo
Hetertrofo
Auttrofo
Mitocondrias
Presentes
Presentes
Cloroplastos
Ausentes
Presentes

17

Fig. 1.8- Esquema de la ultraestructura de una clula animal idealizada

18

Fig. 1.9- Esquema de la ultraestructura de una clula vegetal idealizada

19

VIRUS
Hacia fines del siglo pasado se formulo la teora de que cada enfermedad era producida por
un germen especfico. Hasta ese momento los patlogos estaban convencidos de que para
cada enfermedad seria posible encontrar el microorganismo responsable, utilizando las
siguientes tcnicas: a) observacin del germen con la ayuda del microscopio, b) cultivo
sobre un medio nutritivo y c) retencin por filtros. Sin embargo, en 1892, Iwanowski (o
Ivanovsky?) pudo demostrar que el agente productor de la enfermedad del mosaico de
tabaco pasaba a travs de los filtros para bacterias y no poda ni verse ni cultivarse. Luego
en 1898 Beijerinck, determin que la enfermedad del mosaico del tabaco era provocada por
un nuevo agente infeccioso a los que denomino virus filtrables (virus: palabra de origen latino
que significa veneno). Los virus estn ampliamente distribuidos en la naturaleza y afectan a
todo tipo de organismos, tanto del reino animal, vegetal o protista.
CARACTERSTICAS ESTRUCTURALES DE LOS VIRUS
La estructura de los virus esta integrada por dos tipos de macromolculas: cidos nucleicos
y protenas, los que forman las partculas virales o viriones. Bsicamente existen dos tipos
de partculas virales: partculas virales simples (virus desnudo) o partculas virales envueltas
(virus envuelto). El virus desnudo consta de un cido nucleico (genoma) asociado a
protenas y una cubierta proteica o cpside. Por otra parte los virus envueltos aaden a esta
estructura bsica una envoltura lipoproteica de origen celular. La funcin de la cpside es de
servir al cido nucleico como proteccin y vehculo.
Postulado de Lwoff
"nicamente sern considerados virus aquellos agentes infecciosos cuya partcula elemental
contenga un solo tipo de cido nucleico". Es decir poseen ARN o ADN, pero no ambos tipos
de cidos nucleicos funcionales a la vez. Por lo tanto los virus pueden ser ADN o ARN virus.
Debido a la estructura simple de virus, para su multiplicacin dependen en forma absoluta de
la clula husped que infectan. Por lo tanto consideraremos a los virus como parsitos
intracelulares obligados.
REPLICACIN VIRAL
La clula husped, una vez infectada, sintetizar nuevas molculas de cido nucleico viral,
ya que el genoma viral tomara el control de las actividades metablicas de la clula. Bajo
este control, tambin se producirn gran cantidad de protenas virales. De esta manera el
ensamblado de nuevas partculas virales provendr de la asociacin de las nuevas
molculas de cido nucleico viral con las protenas. Este proceso es muy diferente de la
reproduccin celular, tanto de los procariontes como de los eucariontes. Por lo tanto es mas
apropiado hablar de REPLICACION VIRAL.
LOS VIRUS COMO PARSITOS INTRACELULARES
Hasta el momento no se ha podido demostrar que ningn virus aislado pueda utilizar o
almacenar energa mediante procesos similares a la respiracin, tampoco pueden sintetizar
protenas. Es decir no tienen metabolismo propio, dependiendo en forma absoluta del medio
ambiente celular.
El parasitismo de los virus se ejerce a nivel gentico, ya que el genoma viral dentro de la
clula desplaza al genoma de la clula hospedadora del control celular.
20

PROVIRUS
Anteriormente hemos explicado que los virus, infectan las clulas y hacen replicas de si
mismos. Luego abandonan la clula husped y pasan a otra, recomenzando su ciclo. Pero
tambin puede ocurrir que el genoma viral se integre al ADN del husped. Cuando el
genoma viral se integra al genoma celular y se replica junto con este se lo denomina
PROVIRUS. Un provirus puede activarse espontneamente o bien expuesto a diversos
estmulos, una vez activado puede inducir la produccin de virus completos. Los provirus
pueden modificar la morfologa celular y su metabolismo, esto puede deberse a la
produccin de alguna protena viral. Estos cambios en la estructura celular, generalmente
asociados a cambios en la membrana celular, inducidos por un provirus reciben el nombre
de transformacin. En algunos casos estas clulas transformadas por los provirus pueden
ser cancerosas.
LOS VIRUS COMO AGENTES INFECCIOSOS
El parasitismo celular obligado es la causa bsica por la cual un virus puede causar dao. La
relacin que establece un virus y su clula husped es variable. El resultado de la
interaccin depende tanto del virus en cuestin como de la clula husped. Por ejemplo, se
denominan virus citocdicos , a los que como resultado de su multiplicacin, producen una
rpida induccin hacia la muerte celular. Por otra parte se encuentran los virus no
citocdicos, que son aquellos que no provocan la muerte celular. Ejemplos de virus no
citocdicos serian los virus moderados y los virus oncognicos. Los virus moderados son
aquellos que producen partculas virales y no producen la muerte celular. Han llegado con la
clula husped a un estado de equilibrio ms o menos estable. Luego estn los virus
oncognicos, capaces de estimular la divisin celular, estos cambios pueden ser
irreversibles si la clula pierde la capacidad de regular su ciclo celular. Este estado se
denomina transformacin celular.
Los virus no citocdicos pueden causar dos tipos de infecciones:
1- Las infecciones latentes, donde el virus permanece sin manifestarse, alojado en clulas
no productoras. Ante determinados estmulos, estrs, enfermedades, exposicin a la luz
solar, el virus se reactiva, recomenzando la sntesis de cidos nucleicos y protenas virales.
Ejemplos: L Herpes simplex, Varicela zoster.
2- Las infecciones crnicas, donde de una persona enferma siempre es posible obtener
virus infeccioso, aun por periodos muy prolongados de tiempo. Por ejemplo, virus de la
hepatitis B, Epstein-Barr, virus de la rubola.

21

Fig. 1.10- Virus del Mosaico del Tabaco (ARN virus) y Bacterifago T4 (ADN virus)
MORFOLOGA VIRAL
Los virus poseen gran variedad de formas y tamaos. Por ejemplo los virus que al
microscopio electrnico aparecen aproximadamente esfricos se denominan isomtricos. En
estos virus el cido nucleico esta rodeado por una cpside (caja) proteica. Las subunidades
estructurales que forman la cpside, visibles al microscopio electrnico, se denominan
capsmeros. A su vez los capsmeros estn formados por subunidades proteicas. La
cpside por su naturaleza antignica es la que determina la identidad viral.
El cido nucleico viral no se encuentra desnudo, sino que esta asociado a protenas distintas
de las de la cpside, cuya funcin puede ser estructural (plegado del ADN) o enzimtica
(polimerasa). Al conjunto de cido nucleico y protenas asociadas se lo denomina "core". Por
ultimo diremos que los virus donde la cpside rodea directamente al cido nucleico (es decir
que no hay un "core" evidente), el conjunto de cpside y cido nucleico recibe la
denominacin de nucleocpside.
GENOMA VIRAL
El genoma, que puede encontrase en los distintos tipos de virus, puede sistematizarse de
acuerdo a diversos criterios:
1- Tipo de cido nucleico: ADN o ARN
2- Polaridad o sentido: + o - (aplicado principalmente a los ARN virus)
3- Nmero de cadenas: monocatenario o bicatenario
4- Genoma circular o desnudo
5- Genoma entero o fragmentado
Debemos recordar que las cadenas de un cido nucleico de doble cadena, son de polaridad
(sentido) opuesto. Por convencin se considera que si una tiene sentido + la otra ser -.
De acuerdo a este criterio se considera que un virus es + (o cadena +), cuando su genoma
monocatenario tiene la misma polaridad que un ARNm. Es decir el mismo genoma viral,
puede actuar dentro de la clula como ARNm y llevar a cabo directamente la sntesis de
protenas virales. Los "virus +", pueden infectar con el cido nucleico solo, salvo los
retrovirus que siendo +, necesitan una transcriptasa reversa asociada al genoma para poder
22

infectar. Por el contrario, se denomina "virus -" cuando el genoma no puede actuar
directamente como mensajeros. El ARN - puede actuar como molde, para la sntesis de ARN
+, el ARNm viral.

Fig. 1.11- Esquema y microfotograa electrnica de un Bacterifago

BACTERIFAGOS
Los Bacterifagos son virus especficos de las bacterias. Bacterifagos, significa que se
"alimenta" o multiplica a expensas de bacterias.
Los Bacterifagos que infectan clulas husped, pueden establecer dos tipos de procesos:
1- Ciclo Ltico: en este tipo de ciclo el virus produce inmediatamente gran cantidad de
cidos nucleicos virales y protenas de la cpside. Estos se ensamblan produciendo nuevas
partculas virales que son liberadas al medio al producirse la lisis celular.
2- Ciclo Lisognico: en este ciclo la relacin entre clula husped y virus, puede
prolongase por periodos variables de tiempo. El virus integra su genoma al cromosoma
bacteriano, replicndose conjuntamente el cido nucleico del parsito y el del husped. Un
virus bacteriano integrado al cromosoma se denomina profago. Por lo tanto el profago se
replica junto con el ADN bacteriano. En determinadas circunstancias (por ejemplo ruptura del
ADN bacteriano por luz ultravioleta o agentes qumicos), el profago se activa, y comienza la
produccin de cido nucleico viral y protenas virales, produciendo luego la lisis celular. Las
bacterias que portan profagos se denominan lisognicas. Los Bacterifagos que pueden
integrarse como profagos y que no lisan inmediatamente a las clulas se denominan fagos
atenuados.

23

Fig. 1.12- Esquema del Ciclo Ltico Viral (de multiplicacn) y del Ciclo Lisogenico Viral

LOS VIRUS COMO VECTORES

Los virus pueden servir como vehculos (vectores), para transferir material gentico de una
clula a otra. Este fenmeno se denomina transduccin. Durante el ciclo ltico, el ADN del
husped queda fragmentado y alguno de esos fragmentos puede ser tomado al azar y
quedar dentro de la cpside. De esta forma, cuando el virus infecta una nueva clula,
transporta genes de una antigua clula husped a otra nueva.

VIRUS DE LA INMUNODEFICIENCIA HUMANA (HIV)

El SIDA (sndrome de inmunodeficiencia humana), es una enfermedad infecciosa crnica
producida por el virus HIV. Esta enfermedad esta caracterizada por una deficiencia
inmunolgica progresiva, con la expresin clnica de infecciones oportunistas y/o tumores.
El HIV es un retrovirus. Los retrovirus son virus cuyo material gentico es ARN. Una vez que
el virus ha penetrado en una clula, una enzima llamada retrotranscriptasa, produce ADN a
partir del ARN viral. El ADN recin sintetizado viaja al ncleo y se integra al ADN
24

cromosmico . En este punto la infeccin se ha hecho permanente , y la forma integrada del

virus se denomina provirus. El HIV es un LENTIVIRUS. Por lo tanto su ciclo vital intracelular
(ciclo de infeccin) puede prolongarse por aos. Sus genomas son complejos y sus
mecanismos regulatorios son solo parcialmente conocidos. Los Lentivirus causan
infecciones crnicas.
El sistema inmune del hombre reconoce las protenas del HIV como antgenos y produce
anticuerpos contra ellas. Por lo tanto una persona infectada tendr circulando en sangre
anticuerpos contra las protenas del HIV. En este aspecto se basa el test de diagnstico ms
utilizado en la actualidad: el test de ELISA (inmunoensayo ligado a enzima).

Fig. 1.13- Esquema del Virus de la Inmunideficiencia Hunama (HIV)

El virin del HIV, esta recubierto por una membrana lipdica, por lo tanto se trata de un virus
envuelto. De la membrana sobresalen glicoprotenas: la gp41 y la gp120. La membrana
compuesta por lpidos y protenas recubre el ncleo (core) del virin, formado por las
protenas p28 y p24. En el core se encuentran el ARN del virus y la enzima transcriptasa
inversa.

25

Ciclo Vital Intracelular de un retrovirus

Empieza cuando un virin o partcula vrica , se une a la superficie externa de una clula
susceptible. Este primer estadio del ciclo se lo denomina adsorcin. Luego el virus fusiona
su envoltura lipoproteica con la membrana celular, introduciendo en la clula su
nucleocpside junto con el ARN que constituye su dotacin gentica. En cada partcula viral
se encuentran dos cadenas de ARN vrico. A este proceso se lo conoce como penetracin.
La enzima transcriptasa inversa es una ADN polimerasa que primero produce una copia de
ADN simple cadena que a continuacin se copia a si misma obtenindose ADN doble
cadena. Por lo tanto este ADN doble cadena se obtuvo a partir de ARN. La sntesis del ADN
doble cadena ocurre junto con la degradacin del ARN original. El ADN doble cadena
(provirus), emigra hacia el ncleo y se integra en el propio ADN celular. La integracin de
este ADN doble cadena en el cromosoma del husped es necesaria para la sntesis de
nuevas molculas de ARN, por la ARN polimerasa celular, ya que el virus carece
completamente de la maquinaria metablica necesaria para realizar la transcripcin y la
sntesis de protenas necesarias para la cpside y la misma transcriptasa reversa.

Fig. 1.14- Esquema del Ciclo Vital Intracelular de un Retrovirus

VIRUS DE LA HEPATITIS B (VHB)

La hepatitis B en si misma, es un problema sanitario grave y muy extendido . Pero encierra
una amenaza peor. El virus que la produce es el carcingeno humano ms importante
despus del tabaco. Trescientos millones de personas , la mayora habitantes con escasos
recursos asistenciales, estn crnicamente infectados con el virus y tienen una probabilidad
muy elevada de contraer cncer de hgado. En el tercer mundo, el virus suele transmitirse de
26

madre a hijo, durante el primer mes de vida, y principalmente durante el nacimiento. Si el

pequeo es nia, se convertir probablemente en portadora crnica y transmitir el virus de
la hepatitis B (VHB) a su descendencia cuando alcance la edad frtil. En cambio en los
pases desarrollados su incidencia es mayor en adultos, que por su profesin tienen contacto
directo con la sangre (cirujanos, enfermeras, dentistas), los receptores de sangre u
hemoderivados o personas que reciben tratamientos de dilisis o drogadictos intravenosos.
El virus de la hepatitis B (VHB) es mucho ms contagioso que el HIV.
EXPERIMENTO DE FRENKEL-CONRAT Y SINGER

Fig. 1.15- Esquema del experimento de Frenkel - Conrat y Singer

Este experimento demostr que el ARN es el material gentico del virus del mosaico del
tabaco. Los resultados del experimento son extensibles a otros tipos de virus con genoma a
ADN.

27

VIROIDES
Los viroides son agentes infecciosos que poseen al igual que los virus un solo tipo de cido
nucleico y son parsitos absolutos, pero y esta es la gran diferencia con los virus, carecen
de cpside y envoltura. Por lo tanto los viroides estn constituidos solo por una secuencia de
nucletidos, adems los viroides carecen de informacin para la sntesis de protenas, en
cambio los virus siempre poseen dicha informacin.
PRIONES
Las partculas infecciosas llamadas priones, estn constituidas nicamente por una protena
de aproximadamente 250 aminocidos. Es decir carecen completamente de cidos
nucleicos. Es esta la razn por la cual fue resistida durante mucho tiempo, la hiptesis de
que las protenas por si solas podan ser la causa de enfermedades infecciosas. De acuerdo
al dogma imperante hasta 1980, las enfermedades transmisibles (infecciosas) necesitaban
material gentico, para que la infeccin se asentara en el husped. Hasta ese momento eran
los virus los agentes infecciosos ms pequeos conocidos, y todos ellos poseen ADN o ARN
como material gentico necesario para codificar sus protenas y dirigir la replicacin viral en
el husped.
Pero ahora sabemos que las partculas protenicas infecciosas (priones), pueden ser el
sustrato de diversas enfermedades, hereditarias o contagiosas. Este comportamiento dual
tanto infeccioso como hereditario era desconocido. Posteriormente se descubri que los
priones se multiplican por una va increble y desconocida hasta ese momento: convierten
protenas normales en MOLECULAS INFECCIOSAS, con solo alterar la estructura proteica.
Las encefalopatas espongiformes transmisibles (EET), son las enfermedades degenerativas
del sistema nervioso central que afectan a animales y seres humanos causadas por los
priones. Se denominan espongiformes ya que el cerebro adquiere un aspecto parecido al de
una esponja. Las EET que sufren los seres humanos son el Kuru (o muerte de la risa), la
enfermedad de Creutzfeldt -Jakob (ECJ), el sndrome de Gerstman-Straussler-Scheinker
(GSS) y el insomnio Familiar Fatal (IFF); las EET de animales, incluyen el scrapie (del ingles
to scrape, raspar, por la tendencia de los animales infectados a rasparse contra postes ,
troncos o cercas para combatir la picazn) de ovejas y cabras, la enfermedad de
agotamiento crnico de mulas y ciervos en cautiverio y la encefalitis espongiforme bovina
(EEB), o enfermedad de la vaca loca.
Las EET se caracterizan por su prolongado periodo de incubacin (en el hombre puede
tener un periodo de incubacin de 30 o mas aos), generalmente asociadas a declives
progresivos de las funciones motoras y cognitivas (enfermedad activa), y por su evolucin
inevitablemente fatal. Las EET en el ser humano generalmente aparecen en personas de
edad avanzada.
Aparentemente todas las EET son causadas por el cambio en la estructura de una protena
normalmente presente en las membranas celulares, denominada protena prinica (PrP). La
forma anormal de la PrP se designa PrPsc (scrapie), para diferenciarla de la forma normal
llamada PrPc (celular). La secuencia de aminocidos (estructura primaria) de la PrPc y la
PrPsc es idntica lo que varia es su conformacin (plegamiento en el espacio). De acuerdo a
esta teora la protena alterada (PrPsc), puede unirse a la protena normal (PrPc) y cambiar su
conformacin, transformndola a su vez en una protena alterada. De esta forma se
propagara la enfermedad y se generaran nuevas protenas infecciosas. De esta forma el
pasaje de la forma normal a la patolgica es catalizada por el mismo prin (PrP sc), por lo
28

tanto solo hace falta una pequea cantidad de este para provocar la transformacin de toda
la protena normal, ya que se trata de un fenmeno de crecimiento exponencial.
Recientemente, se ha aceptado que los priones pueden ser transmitidos, posiblemente por
comida, inoculacin directa en el cerebro, piel, msculo o estmago. Por esto la epidemia de
EEB, ocurrida en Gran Bretaa provoco un enorme inters en todo el mundo.
Desafortunadamente han aparecido en ese pas una nueva variedad de la ECJ (casos en
personas mucho mas jvenes que lo usual), lo que probara una relacin causal entre la
EEB y los casos seres humanos. El gobierno britnico tuvo que admitir la posibilidad de que
la aparicin de estos extraos casos de la ECJ hubieran sido provocados al ingerirse carne
vacuna infectada (tejido nervioso).
Al principio habamos hablado de la dualidad de los priones, por un lado partculas
infecciosas y por el otro responsables de enfermedades hereditarias. Esto es naturalmente
confuso. Por ejemplo, ciertas enfermedades prinicas como la GSS, son hereditarias. Esta
enfermedad tiene una herencia autosomal y dominante, lo cual significa que si un padre
desarrolla la enfermedad , los hijos tienen un 50 por ciento de probabilidades de
desarrollarla. La explicacin a estos hechos vino dado por el descubrimiento de mutaciones
gnicas puntuales en la secuencia de nucletidos del gen que codifica la PrP . Estos genes
mutados provocan cambios en la secuencia de aminocidos de la protena PrP. Estos
cambios podran incrementar la probabilidad de la transformacin de la protena PrP mutante
de una forma normal a una anormal patgena. Diferentes mutaciones en el gen provocaran
diferentes protenas mutantes, con mayor o menor tendencia a transformarse en la forma
aberrante patgena. Esto explica tambin las distintas enfermedades prinicas hereditarias,
la ECJ espordica , un 15 por ciento de los casos hereditaria y la GSS autosomal dominante.
Tabla 1.10- Principales Enfermedades causadas por Priones
Enfermedad
Sntomas tpicos
Va de Propagacin
Kuru
Prdida de
Infeccin, probablemente por
coordinacin,
canibalismo
demencia
ECJ
Demencia, prdida De ordinario desconocida
de coordinacin
(espordica)
En un 15 por ciento de los
casos hereditaria, por
mutacin del gen que
determina la protena PrP

EGSS

IFF

Prdida de
coordinacin,
demencia
Trastornos del
Sueo, insomnio
demencia

Raramente por infeccin (por

ejemplo por un transplante u
otro tratamiento medico)
Herencia de una mutacin en
gen de la PrP
Herencia en una mutacin del
gen de la PrP

Distribucin
Nueva Guinea
2600 casos
1 persona por milln
en todo el mundo
100 familias
identificadas (forma
heredada)
Forma infecciosa 80
casos

50 familias
identificadas
9 familias
identificadas

29

TCNICAS DE ESTUDIO DE LA CELULA

UNA COMBINACIN DE MTODOS AYUDA AL ESTUDIO DE LA CLULA
El desarrollo de la biologa celular y molecular se produce en forma paralela a la invencin
de instrumentos y tcnicas biofsicas y bioqumicas que extienden los sentidos a nuevos
lmites y acrecientan el conocimiento de la estructura y funcionamiento de la clula. El
acceso a este tipo de conocimiento resulta dificultoso pues las clulas son pequeas y
transparentes. El ojo humano slo puede discriminar dos puntos separados por ms de 0,1
mm 100 micrmetros (mm). La mayora de las clulas son mucho ms pequeas y se
necesita del microscopio ptico cuyo lmite de resolucin es de 0,2 mm. Para estructuras
ms pequeas, que midan entre 0,4 y 200 nanmetros (nm), se requiere del microscopio
electrnico. Para mayores detalles, consulte la Tabla 1a.2
Como se aprecia, las principales unidades de medida que se emplean corrientemente en
microscopia no son las de uso cotidiano. En la siguiente tabla se expresan aquellas
unidades y sus equivalencias:
Tabla 1.11-Medidas utilizadas en microscopia
Unidad
Smbolo
Equivalencia
metro (m)
Centmetro
cm
0,01 metro
Milmetro

mm

en Utilizacin principal en citologa

0,001m

Micrmetro
Nanmetro

mm
nm

10-6 m
10-9 m

Angstrom

10-10 m

Objetos macroscpicos a simple

vista. Huevos grandes.
Objetos macroscpicos a simple
vista. Clulas muy grandes.
Casi todas las clulas y organelos
grandes.
Microscopia de luz (ptica)
Microscopia electrnica. Organelas
pequeas,
macromolculas
grandes.
Microscopia electrnica. Mtodos de
difraccin de rayos X. Molculas y
tomos.

Por lo tanto: 1m=102 cm=102 mm=103 mm=106 nm=109

Por otra parte, la mayora de los componentes de la clula viva son transparentes debido a
su alto contenido de agua. Al disecarla no presenta un significativo contraste. Entonces la
tincin selectiva de ciertos componentes celulares resuelve el problema del contraste. Sin
embargo la mayora de estas tcnicas conduce a la muerte de la clula y an ms, a
cambios qumicos y morfolgicos que no se encuentran en las clulas activas y en la matriz
extracelular.

30

Cabe destacar que algunos pigmentos del citoplasma y de organoides vegetales pueden
absorber determinadas longitudes de onda1 (l) y no necesitan de previo tratamiento para su
observacin al microscopio ptico.
Para el estudio de la clula viva se emplean tcnicas pticas especiales como, por ejemplo,
la microscopia de contraste de fase o la de interferencia.

Fig. 1.16 Cuadro comparativo de distintos ejemplos de niveles de organizacin a nivel

microscpico.

En el nivel macromolecular, la difraccin de rayos X resulta ser la tcnica ms adecuada

para estudiar la configuracin molecular de protenas, de cidos nucleicos y de algunos
entes prebiticos tales como los virus.
Los compuestos qumicos que constituyen la clula pueden ser detectados, descriptos y
localizados dentro y fuera de la clula mediante mtodos adaptados de la Qumica Analtica.
Las tcnicas aislamiento y separacin especfica de clulas, organelas y macromolculas y
el preparado de cultivos celulares para el estudio detallado son herramientas invalorables
para el avance de la biologa celular y molecular.

La longitud de onda (l) es la distancia entre dos puntos consecutivos que vibran en fase. Siempre que dos puntos
estn separados por una distancia igual a la que recorre la onda en un perodo, o a un mltiplo de ella, los dos puntos
vibrarn en fase.

31

LOS MICROSCOPIOS PROVEEN VENTANAS PARA EL MUNDO DE LA CLULA

Fig. 1.17- Esquema de un Microscopio ptico

El descubrimiento y estudio temprano progres con la invencin y mejora de los
microscopios en el siglo XVII. Los microscopios de varios tipos son an herramientas
indispensables para el estudio de las clulas.
Los microscopios primeramente usados en el Renacimiento tanto como los que son
utilizados en los laboratorios hoy, son microscopios pticos. La luz visible pasa a travs de
la muestra y de las lentes de vidrio por donde la luz es refractada (doblada) de tal manera,
que la imagen del espcimen es amplificada cuando se proyecta en el ojo.
Dos valores importantes en microscopia son el aumento y el poder de resolucin .
Entendemos por aumento a las dimensiones aparentes de los objetos comparados con su
tamao real. El poder de resolucin es la medida de la nitidez de la imagen; es la capacidad
del instrumento para brindar imgenes distintas de dos puntos cercanos.
El microscopio ptico nunca puede resolver detalles menores a 0,2mm, la medida de una
pequea bacteria. Esta resolucin es limitada por la longitud de onda de la luz visible usada
para iluminar la muestra. Los microscopios pticos o de luz pueden aumentar efectivamente
alrededor de 1000 a 1500 veces el tamao de la muestra real; si se incrementase el
aumento la imagen proyectada sera borrosa. La mayora de las mejoras en microscopia de
luz del comienzo de este siglo ha involucrado nuevos mtodos para aumentar el contraste.
Sin estas tcnicas sera imposible para el ojo humano el conocimiento del mundo celular.
La mayora de las organelas son demasiado pequeas para ser visualizadas por la
microscopia de luz. La Biologa Celular avanz rpidamente hace un poco ms de cincuenta
32

aos con la introduccin del microscopio electrnico. En lugar de luz visible, el microscopio
electrnico utiliz un haz de electrones 2a travs de la muestra. El poder de resolucin est
inversamente relacionado con la longitud de onda (l) de la radiacin que un microscopio usa
y un haz de electrones tiene longitudes de onda mucho ms cortas que la luz visible. Para
mayores precisiones al respecto, consulte el cuadro 1.4
Cuadro 1.4- Poder de resolucin del Microscopio
En cualquier tipo de microscopio, el poder de resolucin depende de la longitud de onda (l)
y de la apertura numrica (AN) del objetivo (la capacidad de colectar la luz). As, el lmite de
resolucin, que es la distancia mnima que debe existir entre dos puntos para que puedan
ser discriminados como tales, y responde a la siguiente ecuacin:
Lmite de resolucin=0,61 l /AN
A su vez,
AN = n . seno a
donde, n es el ndice de refraccin del medio que atraviesa el haz y a es el ngulo de
apertura
Ntese que el lmite de resolucin es inversamente proporcional al poder resolutivo del
instrumento, de modo tal que cuanto mayor sea ste, menor ser el lmite de resolucin
conseguido.

Fig. 1.18- Comparacin entre un Microscopio ptico y Electrnico

La mayora de los microscopios electrnicos modernos pueden lograr una resolucin de 0,2
nm, unas 1000 veces mejor que la obtenida con el microscopio ptico.
Los bilogos usan el trmino ultraestructura celular para referirse a la anatoma celular
cuando se resuelve por un microscopio electrnico.
2

Los electrones pueden considerarse como una variedad de radiacin de pequea longitud de onda.

33

Hay dos tipos de microscopio electrnico: el microscopio electrnico de transmisin (MET) y

el microscopio electrnico de barrido (MEB):
El MET permite develar la ultraestructura de las clulas y de la matriz extracelular. El
haz de electrones es desviado por un campo electromagntico (que actuara como lente). En
este tipo de microscopia se requiere que las muestras tengan un grosor de 100 nm.
El MEB es especialmente til para estudios de superficie del espcimen. El haz de
electrones explora la superficie de la muestra la que usualmente se recubre con una pelcula
de oro. El haz excita a los electrones sobre la superficie de la misma muestra y estos
electrones secundarios se recolectan y enfocan sobre una pantalla. Esto forma una imagen
de la topografa del espcimen. Un importante atributo del MEB es su gran profundidad de
campo, la cual resulta en una imagen tridimensional.
El ME revela muchas organelas que son imposibles de resolver con MO. Pero el MO ofrece
muchas ventajas especialmente para el estudio de la clula viva. Una desventaja de ME es
que los mtodos qumicos y fsicos usados para preparar la muestra, no slo matan a las
clulas sino que puedan introducir artefactos, estructuras peculiares vistas en micrografas
que no existe en una clula viva.
La preparacin de la muestra para el MO y el ME resulta similar si se trabaja con las
clulas muertas.
En la tabla 1.12 se comparan los pasos a seguir en ambos tipos de microscopia para la
preparacin de la muestra:
Tabla 1.12 -Tcnicas para Preparar una Muestra en Microscopia ptica y Electrnica
Paso
Microscopia ptica
Microscopia Electrnica
OBTENCIN:
Se
hace
cuidadosamente
con
instrumental adecuado.
FIJACIN: se destina a impedir Pueden
usarse
fijadores Se
realiza
con
la autodegradacin enzimtica qumicos
(formol,
etanol, paraformaldehido, con tetrxido
(autlisis)de
las
clulas metanol o mezclas fijadoras). de osmio o, ltimamente, con
tratando de evitar, en lo posible, Tambin se utilizan mtodos glutaraldehido, en soluciones
la alteracin de las estructuras fsicos como la desecacin, el acuosas de pH neutro y
originales y su autodigestin.
calor seco, el fro o la concentracin salina semejante
congelacin.
al medio. Luego se lava la
pieza y se post-fija con
tetrxido de osmio durante una
hora; el osmio se une a
estructuras
lipoproteicas
(membranas
celulares)
ofreciendo mayor contraste en
la imagen. Esto se conoce
como coloracin o contrastado.
DESHIDRATACIN: retira el Pasajes
sucesivos
por Baos con alcohol o acetona.
agua de las piezas fijadas, para alcoholes de concentracin
que luego puedan ser incluidas creciente.
en un elemento que es
insolubles
en
solventes
acuosos.

34

ACLARACIN

Se realiza para eliminar de la

muestra restos de alcohol y
toda sustancia hidrosoluble. Se
impregna la muestra con un
solvente no acuoso, orgnico y
soluble en parafina, como
xileno, tolueno o benceno.
INCLUSIN
Se incluye el material en
parafina
o
celoidina
previamente calentada, la que
al solidificarse sirve de sostn
de la muestra y posibilita su
corte. Se forma el taco.
CORTE
Es lo suficientemente delgado
como para ser atravesado por
la luz. Esto se logra utilizando
el micrtomo con el que se
realiza cortes uniformes del
tejido a un dado espesor.
REHIDRATACIN
Se retira la parafina con xilol y
se lava con alcoholes de
concentracin creciente. Al ser
los colorantes solubles en agua
resulta indispensable rehidratar
COLORACIN
Las clulas y los tejidos son
coloreados para lograr mayores
contrastes
facilitando
la
observacin. La coloracin de
hematoxilina-eosina es una de
las ms comnmente utilizadas.
Tie el ncleo de azul y el
citoplasma de rosa.
MONTAJE
. El corte se monta sobre un
portaobjetos. El cubreobjetos
El corte se coloca sobre ciertas puede colocarse por encima
para proteger el preparado.
clases de estructuras
Este
puede
conservarse
durante
dcadas
si
el
cubreobjetos se sella.
CONTRASTADO

No requiere

Se utilizan resinas sintticas

tipo epoxi que luego de secarse
se transforman en un material
muy duro, apto para que se le
efecten
cortes
extremadamente delgados.
Debe obtenerse un corte de la
muestra tal que el haz de
electrones logre atravesarla. El
ultramicrtomo realiza cortes de
20 a 100 nm de espesor con
cuchillas de vidrio o diamante.

Estas muestras se montan en

pequeas grillas de cobre

La pieza se impregna en
acetato de uranilo, citrato de
plomo u otras sustancias

35

Las diferencias ms notables de los principales componentes del MO y del ME y sus

caractersticas singulares se especifican en la siguiente tabla.
Tabla 1.13 - Diferencias entre el MO y ME
MICROSCOPIO PTICO
CARACTERSTICA
De interferencia de rayos
luminosos
Simple con aire

1) IMAGEN DADA POR

MECANISMO:
2) TUBO

Luz (fotones)

3) FUENTE

Lentes: Ocular, objetivo y

condensador
Clulas vivas o muertas
Coloreadas o no

4) ELEMENTOS

0,25m

7) LIMITE DE RESOLUCIN

5.500 (trmino medio)

500 X a 1500 X

5) ESTUDIAN
6) OBSERVACIN DE LA
IMAGEN

Carnoy u otros fijadores

8) LONGITUD DE ONDA
9) AUMENTO (el signo X
significa aumento)
10) FIJACIN

Parafina o coloidina

11) INCLUSIN

Con el micrtomo. (cuchilla

de acero). Cortes de 10m

12) CORTES

De vidrio

13) PORTAOBJETO

Nivel microscpico:
ESTRUCTURA

14) NIVEL DE
OBSERVACIN

MICROSCOPIO
ELECTRNICO
De dispersin de electrones
Al vaco con gran diferencia
de potencial
Filamento de tungsteno
(electrones)
Bobinas electromagnticas
Clulas muertas
Distintas tonalidades de gris.
En la actualidad se ven
imgenes "sombreadas"
electrnicamente.
3 a 5 (terico)
10 (en la prctica)
0,056
30.000 X a 1.000.000 X
Bicromato de potasio,
tetrxido de osmio,
formaldehdo.
Acrlicos o resinas de epoxi.
Con ultramicrtomo. (cuchilla
de diamante o vidrio) Cortes
de 100 a 500
Placas de Colodion, aluminio
o berilio.
Nivel submicroscpico
ULTRAESTRUCTURA

36

LAS CLULAS VIVAS PUEDEN SER OBSERVADAS A TRAVS DEL MICROSCOPIO

Se pueden utilizar ingeniosamente las propiedades ondulatorias de la luz aumentando el
contraste de las estructuras transparentes. As surgieron varias clases de microscopios
pticos convirtindose en herramientas destacadas en el estudio de la clula. Ms an, si se
considera la posibilidad de que algunos componentes de la clula puedan perderse o
distorsionarse durante la preparacin de la muestra. En consecuencia, el examen de la
clula viva (sin fijacin ni congelacin) resulta til.
Los microscopio de contraste de fase y de interferencia son sistemas pticos especiales que
logran intensificar la escasa interferencia 3y proporcionan mayor contraste que el obtenido
con un MO comn.
En el microscopio de campo oscuro, el haz luminoso se proyecta oblicuamente y los
sistemas de lentes detectan la luz reflejada por la muestra que se ve como un objeto brillante
contra un fondo oscuro, logrndose un gran relieve de rasgos de la clula que son invisibles
en el MO.
El microscopio de luz polarizada puede proveer datos sobre la estructura a nivel molecular
de las clulas y los tejidos no slo en las clulas vivas sino en preparados post-mortem.
Ciertos componentes celulares y tisulares se comportan peculiarmente cuando la luz
polarizada (luz que gira nicamente en un plano) los atraviesa.
LAS ORGANELAS PUEDEN AISLARSE PARA ESTUDIARLAS MS PROFUNDAMENTE
La descripcin de las diversas organelas dentro de la clula revela poco acerca de su
funcin. La Biologa Celular actual desarrolla la integracin de la Citologa con la Bioqumica,
es decir el estudio de la estructura celular junto con el anlisis de los procesos qumicos de
la vida (metabolismo). El fraccionamiento celular ha sido particularmente importante en esta
ciencia.
El objetivo del fraccionamiento celular es disgregar las clulas separando las organelas
principales de modo que, sus funciones individuales puedan ser estudiadas. El instrumento
usado para fraccionar las clulas es la centrfuga capaz de girar a diversas velocidades. La
ms poderosa, llamada ultracentrfuga puede dar vueltas tan rpidamente como 80000
revoluciones por minuto (RPM) y aplicar fuerzas sobre las partculas de 500000 veces
mayores que la fuerza de la gravedad (500000g).

Interferencia: Es un fenmeno fsico producido entre ondas cuyos "picos" y "valles" no coinciden, es decir no estn en
fase.

37

Fig. 1.19- Esquema del Proceso de Fraccionamiento Celular

El fraccionamiento celular comienza con la homogeneizacin, o sea la ruptura de la clula.
El objetivo es romper las clulas sin daar severamente sus organelas. El homogenato se
centrifuga logrndose la separacin de las partes de la clula en dos fracciones: el pellet que
consiste en las estructuras ms grandes depositadas en el fondo del tubo y el sobrenadante
constituido de partes ms pequeas suspendidas en el lquido por encima del pellet. El
sobrenadante es transvasado a otro tubo y centrifugado otra vez. El proceso es repetido
incrementando la velocidad en cada paso. De esta manera se consigue recolectar
componentes ms pequeos de los sucesivos pellets.
Los detalles de esta marcha se aprecian en la Fig.1.19.
El fraccionamiento celular permite preparar los componentes especficos de la clula tanto
cualitativa como cuantitativamente.
LAS POBLACIONES CELULARES PUEDEN SER SEPARADAS POR EL CITMETRO DE
FLUJO
Este instrumento posee un tubo muy delgado por donde se hacen pasar a las clulas una
tras otra. Un determinado tipo celular emitir fluorescencia, previo tratamiento con
fluorocromo (pigmento fluorescente). Esto permite la discriminacin y, por lo tanto, la
separacin de las clulas as tratadas de acuerdo a la fluorescencia que emitan.
LAS CLULAS VIVAS PUEDEN SER ESTUDIADAS MEDIANTE EL CULTIVO CELULAR
Con el objetivo de preservar toda la informacin que sea posible sobre todos los tipos
celulares, se han desarrollado tcnicas de disociacin de las clulas.

38

En los primeros tiempos, la tcnica consista en colocar un explante de un pequeo trozo de

tejido en un medio compuesto por suero sanguneo, extracto de embriones y solucin salina.
Hoy se conocen los requerimientos nutricios de las clulas eucariontes. Se las mantienen y
hacen crecer en un medio sinttico enriquecido de suero. Se distinguen tres tipos de
cultivos:
Cultivos Primarios se obtienen de los animales o vegetales. El tejido se separa en
condiciones aspticas y se corta en pequeos trozos y se los trata con tripsina (enzima
proteoltica) que disocia los agregados celulares y genera una suspensin de clulas
libres que se cultivan en un medio apropiado.
Cultivos Secundarios se obtienen mediante el tratamiento con tripsina de un cultivo
primario, seguido de un nuevo cultivo en una caja de Petri.
Cultivos de lneas establecidas cuyo crecimiento se prolonga debido a las condiciones
cancerosas de las clulas. Entre las ms usadas se encuentran las clulas HeLa. A pesar
de tales anomalas son muy tiles para el estudio del cncer.
LAS MOLCULAS ORGNICAS SON ESTUDIADAS DENTRO Y FUERA DE LA CLULA
A nivel molecular, los organismos estn formados por relativamente pocos tipos de
compuestos. El agua constituye alrededor del 70% de la mayora de los seres vivos. De los
dems compuestos, los principales son los glcidos, los lpidos, las protenas y los
nucletidos, muchos de ellos combinados para formar los cidos nucleicos, cido
ribonucleicos (ARN) y cido desoxirribonucleico(ADN). Aunque hay muchos otros
compuestos presentes, estas cuatro categoras constituyen la mayora de las molculas
orgnicas de los seres vivos y son los actores de los procesos metablicos. Por lo tanto, su
localizacin y funcin dentro de la clula como un estudio ms detallado fuera de ella se
hace necesario.
Algunos ejemplos de tcnicas para el estudio, la ubicacin y la cuantificacin de molculas
orgnicas se mencionan a continuacin:
RECONSTRUCCIN DE IMGENES A PARTIR DE ELECTROMICROGRAFAS
Las microfotografas electrnicas poco claras de cristales de molculas o estructuras
supramoleculares se colocan en la trayectoria de un haz de rayos lser para obtener un
diagrama de difraccin ptica. Este diagrama es procesado por un programa de
computacin consiguiendo la reconstruccin de las molculas individuales en las fases y
amplitudes correspondientes a un rea de la microfotografa.
DIFRACCIN DE RAYOS X
Este mtodo consiste en el bombardeo de la molcula por un delgado haz de rayos X y
provoca la dispersin (difraccin) de la radiacin a travs de los electrones de los tomos de
la muestra. Este haz disperso debe alcanzar una placa fotogrfica. La estructura molecular
tridimensional se deduce de las posiciones y las intensidades de las manchas registradas en
la placa fotogrfica.

39

LOS MTODOS CITOQUMICOS

Los compuestos qumicos se identifican "in situ" por medio de mtodos citoqumicos.
Este objetivo es cualitativo y cuantitativo y muchas veces persigue el estudio de los cambios
dinmicos producidos en el contenido qumico celular en las distintas etapas del
metabolismo.
Para ello, el compuesto qumico debe ser:
a) inmovilizado en posicin original e,
b) identificado por un procedimiento especfico para el compuesto o para un grupo qumico
caracterstico que posea.
Los mtodos fsicos y reacciones qumicas similares a las implementadas en Qumica
Analtica pero adaptadas a tejidos se usan para llevar a cabo este tipo de identificacin.
LAS DIVERSAS MOLCULAS DE LA CLULA PUEDEN LOCALIZARSE POR LAS
TCNICAS INMUNOHISTOQUMICAS
Cuando los vertebrados superiores, los animales e incluso el hombre, son expuestos a la
actividad de los microorganismos o a molculas ajenas a sus ultraestructuras, ya sea
naturalmente o por inyeccin, aquellos sintetizan anticuerpos. Estos son protenas que
pueden fijarse selectivamente a los materiales extraos que desencadenaron su sntesis.
Por lo tanto, el organismo produce tantos anticuerpos como partculas extraas (antgenos)
son reconocidas. As, se puede obtener una gran variedad de anticuerpos.
Los anticuerpos son herramientas experimentales muy verstiles para reconocer y manipular
clulas y molculas. Si un animal de una especie determinada es inyectado con un
componente celular o molecular de otra especie, el primero logra fabricar anticuerpos
capaces de reconocer y fijar fuertemente aquel componente (el del segundo animal). A estos
anticuerpos se acoplan colorantes fluorescentes que son visibles al MO. De modo similar,
con el M.E. se pueden detectar molculas trazadoras acopladas en anticuerpos. De esta
manera, los componentes celulares y moleculares quedan teidos en forma diferencial por
los anticuerpos que se fijan a ellos.
Como todava no se han presentado los aspectos fundamentales de las molculas
orgnicas, otros mtodos fisicoqumicos de ms fina determinacin, purificacin y
cuantificacin de las biomolculas se mencionarn en las prximas unidades. Como se ver,
dichas tcnicas son de uso corriente en el diagnstico mdico rutinario.

40

CUESTIONARIO DE AUTOEVALUCIN
1.

Cul de los siguientes organoides no forman parte del Sistema de Endomembranas?:

a. envoltura nuclear
b. cloroplasto
c. aparato de Golgi
d. retculo endoplasmtico

2.

Un determinado veneno destruye el citoesqueleto. Cul de las siguientes funciones

sera afectada directamente?:
a. la divisin celular
b. la respiracin celular
c. la fotosntesis
d. la sntesis de protenas

3.
a.
b.
c.
d.

Cul de las siguientes organelas est presente en la clula animal y vegetal?:

cloroplasto
pared celular
mitocondria
centrolos.

a.
b.
c.
d.

Qu organela est presente en una clula procarionte?:

mitocondria
ribosoma
cloroplasto
retculo endoplasmtico

4.

5.

En qu parte de la mitocondria aparecen las crestas?

6.

Qu organela carece de membrana?

7.

En qu parte de la bacteria se realiza la respiracin?

8.

Si Ud. tuviera que argumentar acerca de que los virus son organismos vivos, qu
caractersticas estructurales y funcionales del virus podra utilizar para apoyar su
argumentacin?

9.

Qu tipo de clulas pensara Ud. que alcanzaran el mayor tamao: una clula muy
aplanada o una esfrica? Por qu?

10.
11.

Por qu casi todas las clulas casi siempre son microscpicas?

Cules son las propiedades fundamentales que comparten todas las clulas?
Describa la importancia de cada una de ellas.

41

12.

Compare en un cuadro las diferencias estructurales, funcionales y metablicas entre

las clulas procariontes y eucariontes.

13.

Qu propiedades distinguen a un virus de una bacteria?

14.

Enumere los pasos de la infeccin viral, y describa brevemente cada paso.

15.

Utilizando el Sistema Mtrico Decimal resuelva las equivalencias en metros de: a) 1

nm; b) 1 mm.

16.

Indique el poder de resolucin del: a) M.O.; b)M.E.T.; c)M.E.B.

17.

Cuntas veces son mayores los aumentos del M.E. en relacin a los del M.O.?

18.

A qu es igual el poder de resolucin?:

a. AN / 0.61 x l
b. 0.61 x l / AN
c. 0.61 / AN x l
d. 0.61 x AN /l.

19.

Qu compuesto se usa como fijador en microscopia electrnica? Y en microscopia

ptica?

20. Explique qu tcnicas utilizara para crear suficiente contraste cuando se usa el M.O. y
el M.E.
21.

Qu tipo de microscopios se usan para la observacin de la clulas vivas?

22. Cules son las ventajas de estudiar las clulas con el M.E.T. y el M.E.B.?
23. Cundo utilizara la microscopia de contraste de fase? Por qu?
24. Para qu se utiliza la tcnica de fraccionamiento celular? Qu se obtiene en cada
paso?
25. Qu es un anticuerpo? Por qu es una herramienta til en la investigacin biolgica?
26. Para qu se utiliza la difraccin de rayos X?
27.

Cuando una clula de forma esfrica crece, los mm 2 de superficie de la membrana

plasmtica por mm3 del volumen celular:
a. decrece
b. aumenta
c. se mantiene constante
d. se vuelve ms delgada
42

28. El microscopio de interferencia es:

a. una variante del M.O.
b. una variante del M.E.
c. til cuando se colorea la muestra
d. utilizado para visualizar tomos
29. La ultracentrfuga se emplea en:
a. citometra de flujo
b. b) microscopia electrnica
c. fraccionamiento celular
d. difraccin de rayos
30. Las muestras de clulas vivas o preparados fijados se pueden estudiar indistintamente
con:
a. microscopia electrnica
b. microscopia de interferencia
c. microscopia de luz polarizada
d. difraccin de rayos X.

43

BIBLIOGRAFA

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