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Ano III - Ed.

14 - Mar/Abr/2006 - Circulao Bimestral

INFORMATIVO CEFAR DE MICROBIOLOGIA


ATUALIDADES CIENTFICAS
Escherichia coli
Introduo
A Escherichia coli um dos microrganismos mais versteis encontrados na natureza. De ampla distribuio, normalmente coloniza o trato gastrointestinal de humanos e animais onde faz parte
da ora normal e estabelece uma relao mutuamente benca
com seu hospedeiro. Contudo existem algumas cepas que so extremamente virulentas e capazes de causar doenas graves.
Alm de sua importncia clnica a E. coli tem um papel chave
em muitos laboratrios de biotecnologia, onde empregada como
ferramenta no processo de clonagem.

tam. Estes fatores culminam normalmente em trs principais


manifestaes clnicas: doena entrica/diarrica, infeces do
trato urinrio e menigite/septicemia. Os mecanismos envolvidos
no processo patognico so dois: fatores de adeso e colonizao,
que permitem as cepas patognicas estarem presentes em stios
normalmente no colonizados por E.coli, e produo de toxinas
capazes de interferir em inmeros mecanismos de clulas eucarioticas.
A classicao por patotipos no substitu a classicao antignica, sendo complementar a esta. sabido, por exemplo, que o
sorotipo H157:O7 est relacionado com colite hemorrgica.

Identicao

Alguns patotipos de E.coli

Morfologicamente, as E. coli so bacilos Gram negativos retos de


dimenses entre 1,1-1,5 mm x 2,0-6,0 mm. Podem apresentar cpsula, possuir agelos e serem caracterizados bioquimicamente
segundo a tabela abaixo:

Os patotipos so separados por siglas representativas das manifestaes clnicas causadas pela infeco. Todas as siglas so
originrias do ingls.

Sorogrupos e Sorotipos

E.coli enterohemorrgica (EHEC Enterohaemorrhagic E. coli):


Inicialmente identicada em 1982 como causadora de doenas
em humanos, a EHEC causa diarria sanguinolenta (colite hemorrgica), diarria e sndrome hemoltico urmica. Esse patotipo
de E.coli extremamente virulento, necessitando menos de 100
clulas para infeco e tem seu principal fator de virulncia na
produo de uma toxina, a verocitotoxina, que cliva RNA ribossomal impedindo a sntese protica. Essa toxina tem efeito
tanto nos rins, onde induz inamao e causa destruio do epitlio renal levando sndrome hemotico urmica, quanto no epitlio intestinal, o que pode levar a diarria e a colite hemorrgica.

Prova
Indol
Vermelho de metila
Voges-Proskauer
Citrato
Lisina descaboxilase
ONPG
H2S
Motilidade

Resultado
+
+
+
+
+

Prova
Resultado
Lactose
+
Sorbitol
+
Manitol
+
Adonitol
Celobiose
Presena de Pigmento
Gs a partir de glicose
+

Aps a identicao inicial da espcie, possvel continuar


a classicar as E. coli com base em certas reaes imunolgicas. Tais reaes se baseiam no fato de cada variante expressar
diferentes antgenos em sua superfcie. Esses antgenos so: O
(antgeno do lipopolissacardeo - LPS); H (antgeno agelar) e
K (antgeno capsular). Ao se avaliar qual o antgeno O presente
em dada cepa, pode-se classicar a E. coli em sorogrupos e, at
o momento, mais de 170 sorogrupos j foram identifcados. Da
combinao da identicao do antgeno O com a identicao
do antgeno H e, em alguns casos, o K, pode-se denir sorotipos.
A classicao sorolgica importante, pois sabido que cada
sorogrupo/sorotipo possui caractersticas individuais quanto resposta contra antibiticos ou com relao a patogenicidade.

Patotipos
Alm da classicao antignica das cepas de E. coli, estas podem ser agrupadas quanto aos fatores de virulncia que apresen-

E.coli enteropatognica (EPEC Enteropathogenic E. coli): Foi


o primeiro patotipo a ser identicado. Causa diarria potencialmente fatal em crianas e muito comum em pases em desenvolvimento. A principal caracterstica de desse patotipo causar
um tipo especco de leso no epitlio intestinal, a leso de adeso e apagamento, onde h a destruio das microvilosidades
intestinais e o aparecimento de uma estrutura em forma de pedestal na qual as bactrias se concentram.

E.coli enterotoxignica (ETEC Enterotoxigenic E.coli): Causadora da chamada Diarria dos Viajantes, essa E.coli produz uma
srie de enterotoxinas as quais levam ao aumento da motilidade
intestinal e assim diarria. Essas enterotoxinas podem ser classicadas em dois grandes grupos: as termolbeis, estrutural e
funcionalmente relacionadas com a clera toxina produzida por
Vibrio cholerae, e as termoestveis. Cada cepa de ETEC tem uma
produo diferenciada dessas toxinas, podendo produzir ambas

ou uma delas apenas.


Existem estudos que comprovam que as toxinas termoestveis de
ETEC podem inibir a proliferao de clulas de cncer de clon.
J havia sido observado que em regies onde a prevalncia de
ETEC alta na populao, as taxas de incidncia de cncer de
clon so baixas, colaborando com tal observao. Este indcio
importante no s como a possibilidade de estudo de uma ferramenta no combate ao cncer mas tambm como um exemplo da
complexidade da interao dos microorganismos com o ser humano.
E.coli enteroagregativa (EAEC Enteroaggregative E. coli):
A EAEC est relacionada com diarria persistente em crianas
e adultos, tanto em paises desenvolvidos quanto em pases em
desenvolvimento. Este patotipo capaz de produzir uma srie
de enterotoxinas e citotoxinas capazes de causar danos leves mas
signicativos mucosa intestinal; porm achados histolgicos
mostram que tais microorganismos so capazes de formar uma
densa camada de clulas arrumadas como um muro de tijolos sobre o epitlio. O papel exato dessa organizao no processo patolgico ainda no totalmente claro.
E.coli enteroinvasiva (EIEC Enteroinvasive E.coli): Existe uma
relao prxima entre as EICE e as Shigella ssp. Vrios estudos
demonstraram que essas duas espcies so praticamente indistinguveis, sendo que apenas alguns testes bioqumicos as separam.
A patologia relacionada com a infeco por cada espcie tambm
semelhante: a infeco por Shigella est relacionada com vrios
graus de disenteria, enquanto a EIEC causa colite inamatria invasiva e raramente disenteria. Os fatores de virulncia associados
com ambas s espcies so semelhantes, assim como o mecanismo de patogenicidade.
E.coli uropatognica (UPEC Uropathogenic E.coli): O trato
genito urinrio um lugar comum de infeco por patgenos e
muitas E.coli so isoladas nesses casos. Essas bactrias so capazes de causar cistite e pielonefrite aguda e so distintas dos comensais encontrados no clon. Os mecanismos de virulncia ainda no so totalmente esclarecidos, sendo que dentro das UPEC
h uma variedade de fatores expressos por cada cepa pertencente
a esse patotipo. sabido, porm, que estas cepas podem produzir
fatores de adeso, que permite a colonizao de hospedeiros imunocompetentes, assim como toxinas.
E.coli associada a meningite e septicemia (MNEC Meningitis/
sepsis-associated E. coli): O patotipo MNEC reconhecidamente
a causa mais comum de meningite neonatal por Gram-negativos e
apresenta uma taxa de mortalidade entre 15 e 40%. A transmisso
dessas cepas hematognica e a probabilidade de desenvolvimento de uma dada patologia est associada com a contagem de
clulas na corrente sangnea. Indivduos com contagens maiores
que 103 UFC/ml tm uma chance maior de desenvolver meningite, por exemplo. Novamente o mecanismo de patogenicidade
ainda no totalmente esclarecido, porm, sabe-se que essas bactrias so capazes de atravessar a barreira hemato-enceflica sem
diculdades ou danos a esta.

Referncias
DOWNES, F.P.; KEITH, I. Compendium of methods for the
microbiological examination of foods. 4th edition. Washington: American Public Health Association. 2001. Cap. 35, p. 331
341.
HOLT, J.G. et al. Facultatively anaerobic gram-negative rods In:

Bergeys Manual of Determinative Bacteriology. 9th edition. Baltimore: Williams & Wilkings. 1994. p. 175 290.
KAPER, J.B.; NATARO, J. P.; MOBLEY, H. L. T. Pathogenic
Escherichia coli. Nature Review Microbiology, v.2, n.2, p.123
140, fevereiro, 2004
KONEMAN, E. W et al. Enterobacteriacea In: Diagnstico microbiolgico Texto e Atlas colorido. 5 edio. Rio de Janeiro:
Editora Medica e Cientca. 2001. Cap. 4, p. 177 261.

CEPAS BACTERIANAS COM CONTAGEM


A Farmacopia Americana (USP 28), como nas anteriores, determina que todos os meios de cultivos usados em controle de
esterilidade de produtos farmacuticos devem ser submetidos a
vericao de sua ecincia no que concerne ao crescimento
microbiolgico de cepas padro.

O teste aplicado tambm em meios de cultivo contendo


Beta Lactamase, a qual destinada a inativar antibacterianos
submetidos ao teste de esterilidade.

Estas cepas devem estar numa concentrao de cerca de 100


unidades formadoras de colnias (UFC) para serem inoculadas em uma pequena poro do lote de cultura preparado e
esterilizado.
A inoculao de determinado organismo controle no deve ter
mais que 5 passagens (repiques) a partir da cepa original. Os
meios comumente usados no controle de esterilidade so: Caldo
de Tioglicolato ou Caldo de Tioglicolato Alternativo e Caldo de
Digesto de Casena e Soja.
As cepas recomendadas pela USP-28 so:

Cepas de Microrganismos Teste Apropriados para Uso no Teste de Promoo de


Crescimento e no Teste de Validao

1- Uma alternativa para o Staphylococcus aureus o Bacillus subtilis (ATCC 6633).


2- Um organismo que pode ser utilizado como alternativa o Micrococcus luteus (Kocuria rhizophila), ATCC 9341.
3- Uma alternativa para Clostridium sporogenes, quando um microrganismo no formador de esporos desejado, o Bacteroides
vulgatus (ATCC 8482).
A CEFAR coloca a disposio dos interessados as referidas
cepas na contagem recomendada, para pronta entrega conforme
listagem abaixo:
Aspergillus niger
Candida albicans
Escherichia coli
Bacillus subtillis
Pseudomonas aeruginosa
Staphylococcus aureus
Clostridium sporogenes
Salmonella typhimurium
Micrococcus luteus
(Kocuria rhizophila)

ATCC 16404
ATCC 10231
ATCC 8739
ATCC 6633
ATCC 9027
ATCC 6538 e 6538P
ATCC 11437
ATCC 14028
ATCC 9341

Apresentao:
Caixa com 10 frascos de liolizado em embalagem especial para
transporte.
Outros organismos, sob encomenda, na mesma contagem
podero ser fornecidos e o prazo de entrega de cerca de 30
dias.
Mais informaes pelo fone (11) 5521- 9244.

PRODUTOS AUXILIARES NA IDENTIFICAO BACTERIANA


(NO FERMENTADORES)

A CEFAR coloca a disposio dos bacteriologistas alm dos meios de cultivo convencionais, mais uma srie de produtos destinados a
identicao dos organismos No Fermentadores (Pseudomonas, Burkholderia, Acinetobacter, Alcaligens etc, etc) atravs das reaes
O/F (oxidao-fermentao).
Os aucares colocados a disposio so:
O/F Glicose
O/F - Maltose
O/F - Lactose
O/F - Manitol
O/F - Frutose
O/F Ramnose etc, etc entre outros
Alm dos aucares, a CEFAR fornece meios para os mesmos ns. Como por exemplo, os meios de Lisina, Arginina e Ornitina (com
cobertura de vaselina).
Para outras provas de no-fermentadores fornece ainda meios para: Motilidade, Crescimento em Mac Conkey, para crescimento em
42C, 37C e 25C, fuso da Gelatina, Uria e tas de Oxidase, etc.
Caixas com 10 ou 25 aconetes.
Caixas com 25 tubos.
Mais informaes pelo fone (11) 5521 9244 (Assessoria Cientca)

Equipamentos
VENDE-SE

Autoclave horizontal para esterilizao por xido de etileno modelo 105G, marca Fabbe-Primar capacidade 360L.

Consulte tambm outros produtos da linha Cefar: discos para antibiograma,


meios de cultivo, laminocultivos gerais e especcos, bactrias - padro,
sistemas para identicao bacteriana, indicadores biolgicos, entre outros.

Jardim Anhangera - SP
04675-902

Assessor Tcnico:
Luis Otvio
C. Kosmiskas
Dr. Vladimir
Netto

REDE DE DISTRIBUIO EM TODO O TERRITRIO NACIONAL

Certificado ISO 9001