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La muestra del cultivo bacteriano de E.

Coli fue agregado al matraz con caldo


nutritivo, tras haber hecho esto se tom la muestra correspondiente al tiempo cero,
iniciando de esta forma la
Tiempo
Dilucin
Muestra
DO
cuantificacin bacteriana por
t0 11:10
0 min
1.5 mL
1ra muestra 0.106 A
el
mtodo
turbidimtrico
t1 11:40
30 min
1.5 mL
2da muestra 0.101 A
ra
(ptico) se basa en la
t2 12:10
60 min
1.5 mL
3 muestra 0.106 A
t3 12:40
90 min
1.5 mL
4ta muestra 0.103 A
capacidad de las clulas y
t4 13:10
120 min
1.5 mL
5ta muestra 0.100 A
partculas en general de
tTabla
13:30
150 min
1.5 mL
6ta muestra
5
1
absorber y/o dispersar la luz
que incide sobre ellas. Un cultivo celular aparece turbio porque las clulas
dispersan la luz que atraviesa la suspensin. La turbidez es proporcional al
nmero de clulas y puede medirse utilizando un espectrofotmetro. La D.O. del
cultivo es pues proporcional a la densidad celular. Esto es as dentro de ciertos
lmites puesto que a elevadas concentraciones pueden formarse agregados
celulares o producirse un efecto "pantalla" de unas clulas sobre otras.

Como se aprecia en la Tabla 1, las lecturas fueron realizadas por espacio de


tiempo cada 30 min a excepcin de la muestra t 5 en la que slo se tomaron 20 min
de lapso de tiempo.
Para la muestra inicial t0 la densidad ptica tomada fue de 0.106 A, pasados los
primeros 30 min se volvi a tomar una segunda lectura correspondiente a t 1 la cual
arroj un valor de 0.101 A, un valor no esperado para el experimento, ya que la
experiencia en estudios previos, debera haber una multiplicacin bacteriana
mnima correspondiente a la fase de latencia (adecuacin al medio), la lectura
tomada demuestra que el organismo no se est adaptando al medio como debera
de ser, en cambio se induce a que el organismo se encuentra en una fase de
muerte celular. En la muestra t2 la D.O. arroj un valor de 0.106 A, exactamente
igual a la muestra inicial t0, valor que demuestra que la fase exponencial se
alcanz y la pendiente de la curva de dicha fase es muy pronunciada, lo que indica
que la bacteria se replic rpidamente, por lo que la fase de adaptacin fue muy
crtica ya que la pendiente de crecimiento fue negativa, este valor puede
explicarse a que la bacteria en un principio tuvo problemas en adaptarse al medio
(caldo nutritivo), posiblemente al ajuste del metabolismo al Ph del medio. Cuando
las condiciones son muy favorables, Escherichia coli es capaz de replicarse en 20
min. Sin embargo, si E. coli se multiplica en el entorno intestinal, el tiempo de
generacin puede prolongarse hasta 12-24 h. La cintica de crecimiento de las
bacterias es de tipo exponencial ya que, partiendo de un tiempo de generacin
establecido, el nmero de clulas se va duplicando en ese espacio de tiempo, esto
es lo que se ve relejado en la ilustracin 1 donde se muestra un crecimiento
acelerado, una pendiente igual a la fase de latencia, pero positiva.

Curva de crecimiento
0.11
0.11
0.11
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1

30

60

90

120

150
Ilustracin 1

En la muestra correspondiente a t3 tomada pasados hora y media (90 min) el valor


tomado fue de 0.103 A, atravesada ya la fase de multiplicacin logartmica el valor
tomado demuestra que el organismo se encuentra ya en la fase de muerte y lisis
celular omitiendo de esta forma la fase estacionaria donde la multiplicacin de
algunas clulas se equilibra con la muerte de otras. Debido a que en este perodo
se agotan nutrientes esenciales y se acumulan sustancias de desecho aunado el
agotamiento de las reservas y fuentes de energa gener que no hubiese un
equilibrio entre bacteria y medio de cultivo por lo que hubo una entrada drstica a
la muerte celular. La siguiente lectura confirma la muerte celular y degradacin de
la bacteria dando un valor de 0.100 A.
A continuacin, elegiremos dos valores que estn en plena fase exponencial. Para
el clculo del tiempo de generacin utilizaremos la siguiente frmula: