UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DO RIO DE JANEIRO

INSTITUTO DE BIOLOGIA
DEPARTAMENTO DE CINCIAS FISIOLGICAS
DISCIPLINA: IB 302 Biofsica
PROFESSORES: Jairo Pinheiro, Michelle Marassi e Norma Almeida.
ROTEIRO DE AULA PRTICA

ASSUNTO: Vidrarias
A rotina de um profissional da rea Biomdica requer a preparao de solues de
caractersticas e usos variados, indo desde a preparao de solues de lcool e formol para
preservao de espcimes at a preparao de medicamentos injetveis. Por esta razo
necessrio conhecer os diferentes tipos de vidrarias para preparar as mais variadas solues,
assim como os procedimentos envolvidos na sua preparao.
MATERIAL: pipeta graduada pipeta volumtrica micropipeta ponteiras para
micropipetas tubos de ensaio tubo de ensaio com tampa de rosca pegador de
tubos tubos de centrfuga tubos Eppendorf pissete balo volumtrico
basto de vidro funil de vidro proveta bquer graduado bquer sem
graduao erlenmeyer graduado erlenmeyer sem graduao esptula - placa de
Petri vidro de relgio.

PROCEDIMENTO:
Identificar corretamente todas as vidrarias e materiais apresentados durante a aula.
Saber a funo de cada vidraria e material de laboratrio.
Comparar a preciso das diferentes vidrarias.

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INSTITUTO DE BIOLOGIA
DEPARTAMENTO DE CINCIAS FISIOLGICAS
DISCIPLINA: IB 302 Biofsica
PROFESSORES: Jairo Pinheiro, Michelle Marassi e Norma Almeida.

ROTEIRO DE AULA PRTICA

ASSUNTO: Preparao de solues I
FUNDAMENTO TERICO
Definio: Misturas homogneas de 2 ou mais substncias puras onde o componente em
maior quantidade o solvente e o que est em menor quantidade o soluto.
Recordando alguns conceitos:
Mol ou molcula grama = PM em gramas.
Nmero de moles (ou de molculas) = massa da substncia (g)/Mol
Expresses da concentrao das solues:
Porcentagem em peso (%p/p) gramas de soluto em 100g de soluo.
Porcentagem em volume (%v/v) mililitros de soluto em 100ml de soluo.
Porcentagem em peso por volume (%p/v) gramas de soluto em 100ml de soluo.
Molaridade nmero de moles de soluto em 1 litro de soluo.
M = massa/Mol
1litro
M = massa/PM(g)
1litro
M = massa/ PM(g)
V(l)
M = massa
PM(g) x V(l)

PROCEDIMENTO PRTICO
Material necessrio: gua destilada, NaCl, sacarose, balana analtica, vidro de relgio,
esptulas, 2 bqueres de 250ml, 2 bales volumtricos de 100ml, 1 balo volumtrico de
250ml, 1 proveta de 250ml, 1 basto de vidro, 1 pipeta graduada de 10ml.
Procedimento:
1. Preparar 100ml de uma soluo 6% de NaCl (PM=58,5).
2. A partir da soluo acima, preparar 100ml de uma soluo 0,6% de NaCl.
3. Preparar 250ml de uma soluo 0,3% de sacarose (PM=342).

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DISCIPLINA: IB 302 Biofsica
PROFESSORES: Jairo Pinheiro, Michelle Marassi e Norma Almeida.

ROTEIRO DE AULA PRTICA

ASSUNTO: Preparao de solues II
FUNDAMENTO TERICO
Definio: Misturas homogneas de 2 ou mais substncias puras onde o componente em
maior quantidade o solvente e o que est em menor quantidade o soluto.
Recordando alguns conceitos:
Mol ou molcula grama = PM em gramas.
Nmero de moles (ou de molculas) = massa da substncia (g)/Mol
Expresses da concentrao das solues:
Porcentagem em peso (%p/p) gramas de soluto em 100g de soluo.
Porcentagem em volume (%v/v) mililitros de soluto em 100ml de soluo.
Porcentagem em peso por volume (%p/v) gramas de soluto em 100ml de soluo.
Molaridade nmero de moles de soluto em 1 litro de soluo.
M = massa/Mol
1litro
M = massa/PM(g)
1litro
M = massa/ PM(g)
V(l)
M = massa
PM(g) x V(l)

PROCEDIMENTO PRTICO
Material necessrio: gua destilada, NaCl, sacarose, Balana analtica, Folha de alumnio,
esptulas, 2 bqueres de 250ml, 2 bales volumtricos de 100ml, 1 balo volumtrico de
500ml, 1 proveta de 250ml, 1 basto de vidro, 1 pipeta graduada de 5ml, 2 pipetas
graduadas de 10ml
Procedimento:
1. Preparar 100ml de uma soluo 0,3M de NaCl (PM=58,5).
2. A partir da soluo acima, preparar 100ml de uma soluo 0,03M de NaCl.
3. Preparar 500ml de uma soluo 0,1M de sacarose (PM=342).

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DISCIPLINA: IB 302 Biofsica
PROFESSORES: Jairo Pinheiro, Michelle Marassi e Norma Almeida.
ROTEIRO DE AULA PRTICA

ASSUNTO: Osmose
As clulas biolgicas quando colocadas em solues de diferentes concentraes,
podem sofrer perturbaes osmticas, permanecendo com seu volume inalterado, inchar at
arrebentar ou murcharem por compresso.
De acordo com o comportamento das clulas, o meio onde estas so colocadas
ento classificado em hipotnico, isotnico ou hipertnico.
MATERIAL: sangue tubos de ensaio pipetas graduadas solues de NaCl 0,9% e
NaCl 4% - gua destilada tubos de centrfuga centrfuga de bancada.

PROCEDIMENTO:
Tubos
1
2
3

gua dest. NaCl 0,9%

10 ml
10 ml
-

NaCl 4%
10 ml
-

Sangue
0,5 ml
0,5 ml
0,5 ml

1 Misturar o contedo de cada tubo por uma inverso suave e esperar 10 minutos.
2 Centrifugar os tubos a 4000 rpm.
3 Decantar o contedo de cada tubo e observar as caractersticas do precipitado.

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ASSUNTO: Dilise
Membranas semipermeveis podem separar concentraes distintas de um mesmo
soluto ou de solutos diferentes, neste caso normalmente um soluto no difusvel, ou no
dialisvel naquele sistema de transporte.
O processo de dilise ocorre nos sistemas biolgicos, sendo de extrema importncia.
o que observamos, por exemplo, nos capilares que compem o glomrulo renal, onde
pequenas partculas, como sdio, potssio, uria e gua, conseguem atravessar livremente a
membrana do capilar, passando para o interior da cpsula de Bowman, porm as
macromolculas, como as protenas plasmticas no conseguem atravessar a membrana dos
capilares. Neste exemplo, a seleo se d predominantemente pelo tamanho da espcie a
ser transportada, mas outros fatores, como gradientes de presso e eltrico, presena de
carga na espcie a ser transportada e nos canais, temperatura, tempo e forma da partcula
podem influenciar o processo de dilise.
MATERIAL: soluo de AgNO3 (5%) soluo de amido soluo de NaCl (5%)
soluo de Lugol papel celofane pipetas tubos de ensaio bquer
de 500 ml barbantes.
PROCEDIMENTO:
1 Umedecer previamente o papel celofane em gua destilada.
2 Fazer, com o papel celofane, um saquinho, amarrando-o na extremidade inferior da
pipeta de 10 ml. Esvaziar o saquinho e verificar se h vazamentos.
3 Adicionar, atravs da extremidade livre da pipeta, 10 ml de soluo de NaCl e 10 ml da
soluo de amido.
4 Colocar gua destilada no bquer em quantidade suficiente para cobrir a parte do saco
de celofane que contm a mistura das duas solues.
5 Deixar o sistema em repouso por 15 min. e proceder de acordo com o quadro abaixo.
Reagentes/Tubos
1
2
3
4
5
6
gua
1 ml
1 ml
Sol. amido
1 ml
Sol. NaCl
1 ml
gua do bquer
1 ml
1ml
Lugol
1 gota
1 gota
1 gota
AgNO3
1 gota
1 gota
1 gota
6- Interpretar os resultados obtidos.

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ASSUNTO: Determinao de pH
O termo pH foi proposto por Srensen para designar o potencial de hidrognio inico em
um determinado meio, sendo matematicamente expresso por uma funo logartmica devido aos
baixos valores da concentrao de on hidrognio, quando comparado com outros ons.
H diferentes mtodos para determinao do pH em um meio, variando a sua praticidade e
preciso, o que os torna mais ou menos adequados a diferentes situaes, dependendo de nosso
objetivo.
MATERIAL: solues de pH desconhecido pipetas graduadas estantes para tubos
tubos de ensaio papel indicador de pH indicador universal de Bgen
potencimetro tampes de calibrao pH 4,0 e 7,0.
PROCEDIMENTO:
1 Enumerar os tubos de ensaio.
2 Transferir 1 ml da soluo 1 para o tubo 1, 1 ml da soluo 2 para o tubo 2 e 1 ml da soluo 3
para o tubo 3.
3 Acrescentar 1 gota do indicador universal de Bgen em cada tubo.
4 Observar a colorao desenvolvida em cada tubo e comparar com a tabela abaixo para
determinar o pH de cada soluo e anote no quadro abaixo.
INDICADOR UNIVERSAL DE BGEN
Cor
Reao
pH aproximado
Vermelho
Muito cida
2
Alaranjado
cida
4
Amarela
Fracamente cida
6
Verde
Fracamente alcalina
8
Azul
Alcalina
10
5 Com o auxlio do papel indicador, determinar o pH das solues 1, 2 e 3, contidas em cada um
dos tubos e anote no quadro abaixo.
6 Determinar o pH das solues 1, 2 e 3 contidas em cada tubo com o auxlio do potencimetro e
anotar os valores observados no quadro abaixo.
7 Comparar os resultados.
pH
Amostra Indicador universal
Papel indicador Potencimetro
1
2
3

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ASSUNTO: Capacidade Tamponante dos Lquidos Biolgicos
Os seres vivos so extremamente sensveis s variaes do pH do seu meio interno.
O controle fsico do pH feito atravs de misturas reguladoras chamadas Tampes. O
tampo recolhe prtons quando h excesso ou fornece prtons quando h falta. O tampo
no impede mudanas de pH, mas atenua consideravelmente essas mudanas.
MATERIAL: solues de HCl e NaOH pipetas graduadas basto de vidro

bquer - papel indicador de pH gua destilada urina

PROCEDIMENTO:

1 Identificar 1 bquer para gua destilada e outro para urina.

2 Pipetar 25ml de gua destilada e 25ml de urina no bquer identificado.
3 Medir o pH da gua e da urina utilizando a fita indicadora de pH.
4 Pipetar volumes crescentes (0,5; 1; 1,5 ml) de HCl e NaOH no bquer com gua
destilada e com urina. Cada grupo ficar responsvel por um volume.
5 Misturar com o basto de vidro.
6 Medir o pH com a fita indicadora de pH e anotar no quadro abaixo.
7 Construir um grfico com a curva da gua e da urina. Analisar e discutir os resultados.
pH da gua destilada =
25 ml
Grupo 1
Grupo 2
Grupo 3
Grupo 4
Grupo 5
Grupo 6

pH da urina =
HCl
NaOH

gua destilada
Urina
gua destilada
Urina
gua destilada
Urina

0,5 ml
0,5 ml
1 ml
1 ml
1,5 ml
1,5 ml

gua destilada
Urina
gua destilada
Urina
gua destilada
Urina

0,5 ml
0,5 ml
1 ml
1 ml
1,5 ml
1,5 ml

pH

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ASSUNTO: Medida indireta da presso arterial

A medida da presso arterial sistmica pode ser realizada por mtodo direto ou
indireto. A medida direta da presso arterial obtida de forma invasiva, mediante a
introduo de um cateter em artria perifrica, o que permite sua quantificao
continuamente, batimento a batimento. A medida indireta da presso arterial pode ser
efetuada, utilizando-se diversas tcnicas, sendo aquela realizada com o esfigmomanmetro
de coluna de mercrio ou aneride, a mais utilizada na prtica clnica diria. Este
equipamento foi desenvolvido, inicialmente, pelo mdico italiano Riva Rocci, em 1896, e
aperfeioado, no que tange ao mtodo de medida, por Nikolas Korotkoff, no incio do
sculo XX. A padronizao da tcnica de medida, ento estabelecida, permanece
praticamente inalterada desde ento. Este autor verificou que, ao desinflar o manguito que
oclua totalmente a artria, diferentes tipos de sons eram perceptveis com o estetoscpio, o
que correspondia a diferentes graus de obstruo parcial da artria.
Os rudos ou fases de Korotkoff podem ser detectados na maioria dos indivduos se
o procedimento de medida for executado dentro do rigor estabelecido para tal tcnica. So
cinco as fases:
Fase I- Corresponde ao aparecimento do primeiro som, ao qual se seguem batidas
progressivamente mais fortes, bem distintas e de alta frequncia. Correlaciona-se com o
nvel da presso sistlica.
Fase II- Neste momento, o som adquire caracterstica de zumbido e sopro, podendo
ocorrer sons de baixa frequncia, que eventualmente determinam o hiato auscultatrio.
Fase III- Sons ntidos e intensos.
Fase IV- Abafamento dos sons, correspondendo ao momento prximo ao
desaparecimento deles.
Fase V- Desaparecimento total dos sons. Correlaciona-se com a presso diastlica.
MATERIAL: Manguito esfigmomanmetro estetoscpio algodo lcool.

PROCEDIMENTO:
A medida da presso arterial tem sua tcnica padronizada e publicada em diversas
diretrizes internacionais. No Brasil, foi publicada, mais recentemente, como parte do III
Consenso Brasileiro de Hipertenso Arterial. Abaixo est transcrita a sequncia de passos a
serem executados para uma medida adequada da presso arterial.
8

1) Explicar o procedimento ao paciente.

2) Certificar-se de que o paciente: no est com a bexiga cheia; no praticou exerccios
fsicos; no ingeriu bebidas alcolicas, caf, alimentos, ou fumou at 30 min antes da
medida.
3) Deixar o paciente descansar por 5 a 10min em ambiente calmo, com temperatura
agradvel.
4) Localizar a artria braquial por palpao.
5) Colocar o manguito firmemente cerca de 2cm a 3cm acima da fossa antecubital,
centralizando a bolsa de borracha sobre a artria braquial. A largura da bolsa de borracha
do manguito deve corresponder a 40% da circunferncia do brao, e seu comprimento
envolver, pelo menos, 80% do brao. Assim, a largura do manguito a ser utilizado estar na
dependncia da circunferncia do brao do paciente.
6) Manter o brao do paciente na altura do corao.
7) Posicionar os olhos no mesmo nvel da coluna de mercrio ou do mostrador do
manmetro aneride.
8) Palpar o pulso radial e inflar o manguito at seu desaparecimento, para a estimativa do
nvel da presso sistlica, desinflar rapidamente e aguardar de 15 a30 seg antes de inflar
novamente.
9) Colocar o estetoscpio nos ouvidos, com a curvatura voltada para a frente.
10) Posicionar a campnula do estetoscpio, suavemente, sobre a artria braquial, na fossa
antecubital, evitando compresso excessiva.
11) Solicitar ao paciente que no fale durante o procedimento de medio.
12) Inflar rapidamente, de 10 mmHg em 10 mmHg, at 10 a 20 mmHg acima do nvel
estimado da presso arterial.
13) Proceder deflao, com velocidade constante inicial de 2 mmHg a 4 mmHg por
segundo, evitando congesto venosa e desconforto para o paciente.
14) Determinar a presso sistlica no momento do aparecimento do primeiro som (fase I de
Korotkoff), que se intensifica com o aumento da velocidade de deflao.
15) Determinar a presso diastlica no desaparecimento do som (fase V de Korotkoff),
exceto em condies especiais. Auscultar cerca de 20 mmHg a 30 mmHg abaixo do ltimo
som, para confirmar seu desaparecimento e, depois, proceder deflao rpida e completa.
Quando os batimentos persistirem at o nvel zero, determinar a presso diastlica no
abafamento dos sons (fase IV de Korotkoff) e anotar o valor final de zero, por exemplo,
136/78/0.
16) Registrar os valores das presses sistlica e diastlica, complementando com a posio
do paciente, o tamanho do manguito e o brao em que foi feita a mensurao. Dever ser
registrado sempre o valor da presso, obtido na escala do manmetro, que varia de 2 mmHg
em 2 mmHg, evitando-se arredondamentos.
17) Esperar 1 a 2 min antes de realizar novas medidas.
18) O paciente deve ser informado sobre os valores da presso arterial e a possvel
necessidade de acompanhamento.
Em caso de dificuldade para auscultar os rudos de Korotkoff, pode-se lanar mo
de uma manobra simples: fechar e abrir a mo do membro em que a presso est sendo
medida, durante alguns segundos.