Universidades de Alcal, Complutense y S Pablo-CEU

Doctorado Interuniversitario QUIMICA MEDICA

Metodologas qumicas en el descubrimiento

de nuevos frmacos
RESOLUCION
Juan Jos Vaquero
1

FUENTES DE MOLECULAS QUIRALES

Fermentacin
Fermentacin

QUIRALES

CEP

AQUIRALES

Sntesis
Sntesis
asimtrica
asimtrica

Aislamiento de
de
Aislamiento
fuentes naturales
naturales
fuentes
Semisntesis
Semisntesis

FUENTES DE MOLECULAS QUIRALES

RESOLUCIN
X
B
X

X
B

(-)
B

A
(+)

(-)

B
A
(+)

FUENTES DE MOLECULAS QUIRALES

RESOLUCIN

Directa: Reacciones
enantiodiferenciadoras
X
B
X

X
B

A
(-)

(-)
B
X

A
(+)
Y

B
A
(+)

Va formacin de
diastereomeros:Reacciones
diasterereodiferenciadoras
4

RESOLUCION
RACEMICOS

RESOLUCIN
DIRECTA
RESOLUCION
CROMATOGRAFICA

RESOLUCIN VIA
FORMACIN DE
DIASTEREOMEROS

RESOLUCIN
CINETICA

CRISTALIZACION
Quimica

Enzimatica

CROMATOGRAFICA

CRISTALIZACIN

Recproca

Cristalizacion
simultanea

Resolucion
reciproca

Cristalizaciontransformacion
asimtrica inducida

Purificacion de enantiomeros
parcialmente resueltos

Clsica
Transformacin
inducida

RESOLUCION
1.RESOLUCION VIA FORMACION DE DIASTEREOISOMEROS
1.1. RESOLUCIN POR CRISTALIZACION

+
Racmico
(+)/(-)

R1
R

Separacin
Diastereomeros
(CRISTALIZACIN)

Mezcla
diastereomeros

R2

= CEP
6

RESOLUCION
1.RESOLUCION VIA FORMACION DE DIASTEREOISOMEROS
1.1.1. RESOLUCIN CLASICA
Mezcla
diastereomeros

R1

Racmico
(+)/(-)

Diagrama de fase para mezclas diastereomericas que forman eutctico

T

M
p

E
1:1

M
1:1

Eutectico desfavorable

E
n

Eutectico favorable

p=diastereisomero formado por los dos enatiomeros con el mismo signo de rotacin
n=diatereoisomero formado por dos enantiomeros con signos opuestos de rotacin

RESOLUCION
1.RESOLUCION VIA FORMACION DE DIASTEREOISOMEROS
1.1.1. RESOLUCIN CLASICA
CAPACIDAD DE RESOLUCION : EL PARAMETRO S DE FOGASSY

Kp-Kn
K x t ==
1/2Co

S
1/2Co-Kn
S=

1/2Co
1/2Kp-Kn

S=

Kn

Kp

1/2Co

1/2

Co

RESOLUCION
1.RESOLUCION VIA FORMACION DE DIASTEREOISOMEROS
1.1.1. CRISTALIZACIN CLASICA
Estadstica de disolventes empleados en la separacin de diastereoisomeros
(820 resoluciones)

EtOH+otro
Otros
Cloroformo
Eter
Dioxano
Benceno

EtOAc
Agua
Acetona
Alcoholes
Metanol
0

100

200

300

400

Etanol
9

RESOLUCION
1.RESOLUCION VIA FORMACION DE DIASTEREOISOMEROS
1.1.1. CRISTALIZACIN CLASICA

Agentes de resolucin
O
CO2H
H
OH
HO
H
CO2H

CO2H
H
OH
H
H
CO2H

CO2H
CO2H

Acido tartrico Acido mlico

H
CO2H
OH
Acido mandlico

Acido canfrico
H
O

CO2H
Me

Acido fenoxipropionico

SO3H

N
X

Acido canfosulfnico
H

Brucina: X = OMe
Estricnina: X =H

CO2H
Me
Acido hidratpico

H
OH

H
Me
NH2
-Metilbencilamina

H H
Me
H NH2
Anfetamina

H H
Me
HO NHMe
Efedrina

X
N
Quinina: X = OMe
Cinchonidina: X = H

10

RESOLUCION
1.RESOLUCION VIA FORMACION DE DIASTEREOISOMEROS
1.1.1. RESOLUCIN CLASICA
DERIVATIZACIONES PARA RESOLUCION

Amidas

AMINAS: R-NH2

Ureas
Carbamatos
Esteres

Alcoholes: R-OH

Carbonatos
Carbamatos
Esteres

Acidos: R-CO2H

Amidas

11

RESOLUCION
1.RESOLUCION VIA FORMACION DE DIASTEREOISOMEROS
1.1.1. CRISTALIZACIN CLASICA

Propiedades de un buen agente de resolucin

El agente de resolucin debe de ser qumica- y opticamnete
estable en las condiciones de resolucin
Los dos enntiomeros del agente de resolucin deben ser
asequibles y baratos
El agente de resolucin debe ser recuperable despus del
proceso de resolucin y reutilizable
El peso molecular del debe de ser los ms bajo posible.
El centro estereogneo debe de estar lo ms prximo posible
al grupo funcional responsable de las caractersticas fsicas del
compuesto
La sal diastereomrica debe de tener una estructura molecular
rgida
Bases y cidos fuertes generan mejores resultados que los
dbiles
12

RESOLUCION
1.RESOLUCION VIA FORMACION DE DIASTEREOISOMEROS
1.1.1. CRISTALIZACIN CLASICA
O

Ph
H

CO2H

HO2C

OH

Ph

Ph

Ph
N

HO2C

(+)/(-)
O

O
O

Ph
R

Ph

(+)-Efedrina

HO2C

O
O

(-)
O

Ph
N

Ph

Ph

H
S

(-)-BIOTINA

HO2C
CO2H

Ph
N

(+)

13

RESOLUCION
1.RESOLUCION VIA FORMACION DE DIASTEREOISOMEROS
1.1.1. CRISTALIZACIN CLASICA

O2 N

NH2
OH
OH

CO2H

CO2H

Cristalizacion

( _+ )-crisantemico

Br

Deltametrin

Br
O

O
CN

14

RESOLUCION
1.RESOLUCION VIA FORMACION DE DIASTEREOISOMEROS
1.1.2. RESOLUCIN RECPROCA
La idea de que los dos enantiomeros de un agente de resolucin pueden
servir para la resolucin de un racmico fue propuesta por vez primera
en 1896 por Marckwald. Por ejemplo, si un cido racmico se resuelve
con una amina, la amina racmica frecuentemente se resuelve con el
cido (resolucin recproca).

Compuesto
ms insoluble

Racmico
(+)/(-)

+
Siembra

Racmico
(+)/(-)

Compuesto
ms soluble
(lquidos madre)

15

RESOLUCION
1.RESOLUCION VIA FORMACION DE DIASTEREOISOMEROS
1.1.2. RESOLUCIN RECPROCA
OH

H
OH
(dl)-AB

NH2
+

CO2

1. Formacin de la sal
2. Siembra con (d)-AB-(d)-M
3. Cristalizacin

NH
+ 3

OH
Precipita (d)-AB-(d)-M

H
(dl)-M

CO2H
OH

(dl)-AB + (dl)-M

LIQUIDOS
MADRE

Siembra con (l)-AB-(l)-M

OH

H
CO2

LIQUIDOS
MADRE

NH
+ 3

OH
Precipita (l)-AB-(l)-M

etc....

16

RESOLUCION
1.RESOLUCION VIA FORMACION DE DIASTEREOISOMEROS
1.1.3. EPIMERIZACIN INDUCIDA
En aquellos casos frecuentes- en los que slo interesa uno de los dos enantiomeros para
conseguir un rendimiento superior al 50% se puede recurrir a la epimerizacin espontnea o
inducida del diastereisomero que queda en disolucin. El proceso global se denomina
cristalizacin-transformacin asimtrica inducida o interconversin de diastereosmeros.
Me

N
Me
N
N

Precipita la sal de la amina S

NH3

SO3H

SO3

H
+

NH2
Me

N
(+)

Me

pKa=20

Ar-CHO

pKa=10

Ar

NH2

Amina R
DISOLUCIN

Me
N

Resolucin
Resolucin
Rendimiento:92%
Rendimiento:92%

H
NH2

-Ar-CHO

Me

N
N

Ar

17

RESOLUCION
1.RESOLUCION VIA FORMACION DE DIASTEREOISOMEROS
1.2. RESOLUCIN CROMATOGRFICA
El desarrollo de la cromatografa en columna y las tcnicas analticas instrumentales de
separacin (p.e. HPLC) permiti llevar a cabo la separacin de diastereoisomeros en aquellos
casos en que estos no eran slidos o sindolo no eran fcilmente separables por cristalizacin.
Inicialmente se utilizaron fases estacionarias aquirales pero el desarrollo de fases quirales
para la resolucin directa de racematos tambin ha propiciado el empleo de este tipo de fases
para la separacin de mezclas diastereomricas.
RR SR

EN COLUMNA

CROMATOGRAFIA

Separacion via
formacion de
diastereoisomeros

ANALITICA

Separacion via
formacion de
diastereoisomeros

INSTRUMENTAL

PREPARATIVA

Separacion
directa

FEQ*
R

18

RESOLUCION
2.RESOLUCION DIRECTA
2.1. RESOLUCIN CROMATOGRFICA
RR SR
Separacion via
formacion de
diastereoisomeros

EN COLUMNA

CROMATOGRAFIA

Separacion via
formacion de
diastereoisomeros

ANALITICA

INSTRUMENTAL

CG, HPLC, MPLC

Separacion
directa

PREPARATIVA

FEQ*
R

SEPARACION DIRECTA:
Enlaces por puente de hidrogeno
Atracciones dipolares
Atracciones y repulsiones hidrofobicas
Atracciones y repulsiones estericas
Complejos de transferencia de carga

19

RESOLUCION
2.RESOLUCION DIRECTA
2.1. RESOLUCIN CROMATOGRFICA
COOPERATIVA: conjunto de subunidades actuando de forma tal
que consigan el "reconocimiento quiral "
FASES ESTACIONARIAS QUIRALES
COOPERATIVAS

INDEPENDIENTE : molecula capaz de conseguir por si misma el

" reconicimiento quiral"

monomero de polimerizacion
compuesto enantiomericamente puro
POLIMERIZACION

INDEPENDIENTES

DESPOLIMERIZACION SELECTIVA

c
A
A

C C

20

10

RESOLUCION
2.RESOLUCION DIRECTA
2.2. CRISTALIZACION

(+)

Racmicos

Estructura
cristalina

(-)

85-90%
Racematos

(+)

(-)

(+)

(-)

10-15%

(+)

Conglomerados

(-)

Estructura
cristalina

En un conglomerado la mezcla 1:1 se comporta como un

eutctico porque cada enantiomero baja el punto de
fusin del otro. Los conglomerados pueden resolverse
por cristalizacin directa.

21

2.RESOLUCION DIRECTA
2.2. CRISTALIZACION

RESOLUCION

Diagrama del punto de fusin de racematos

T

R/S

S
Conglomerado

R/S

S
Racmico

22

11

RESOLUCION

2.RESOLUCION DIRECTA
2.2.1. CRISTALIZACION SIMULTANEA

Siembra
con D

Siembra
con L

D+L

t2

t1

t2
t1>t2

P
Cristalizacin
CN
directa
NHAc
Me

MeO
HO

CN

MeO

NHAc
HO

Me

HO

CO2H

NHAc
HO

Me

Metil-L-dopa (Merck)

23

RESOLUCION
2.RESOLUCION DIRECTA
2.2.1. CRISTALIZACION PREFERENTE

O2N

Se aaden
5 Kg de D
NH2

Se
Seobtiene
obtiene10
10Kg
Kgde
de
cristales
cristalesde
deDD

OH

OH

CONGLOMERADO
31.5 Kg D/L
141 mL HCl
300 mL agua

En
Ensolucin
solucin
10.75
10.75Kg
KgDD
15.75
15.75Kg
KgLL

Se aaden
10 Kg de D/L

Se
Seobtiene
obtiene10
10Kg
Kgde
de
cristales
cristalesde
deLL

En
Ensolucin
solucin
15.75
15.75Kg
KgDD
10.75
10.75Kg
KgLL

Se aaden
10 Kg de D/L

24

12

RESOLUCION
2.RESOLUCION DIRECTA
2.2.1. CRISTALIZACION PREFERENTE
Diagrama de fase para la cristalizacion preferente de D/L-Lisina
p-aminobenceno sulfonato

Isomero D

S
SOBRESATURACION
R

40

Solubilidad

20

T
UNSATURACION

Isomero L

20

40

25

RESOLUCION
2.RESOLUCION DIRECTA
2.2.2. CRISTALIZACION-TRANSFORMACIN ASIMETRICA INDUCIDA
(DESRACEMIZACIN)
Esta tcnica se emplea cuando slo se requiere uno de los dos enantiomeros del
conglomerado recurriendo a la racemizacin in situ del enantiomero que queda en
exceso en disolucin. En algunos casos la racemizacin es espontnea y en otros
inducida.
H

Cl H
Cl

Br
O
F

O
F
(R)

N
RACEMIZACION

Br

Cristalizacin
Preferente

Cristalizacin
Preferente

(S)
Cl H
Cl

>>90%
90%ENANTIOMERO
ENANTIOMEROPURO
PURO

CN

O H

CN

(Epimerizacin
catalizada por FK)

26

13

RESOLUCION
2.RESOLUCION DIRECTA
2.2.3. PURIFICACION DE ENANTIOMEROS PARCIALMENTE RESUELTOS

QA
QB

QR

QA

QR

E
M

Conglomerado

Racmico

27

RESOLUCION
2.RESOLUCION DIRECTA
2.2.3. PURIFICACION DE ENANTIOMEROS PARCIALMENTE RESUELTOS

E
G

G
F

RM

RM

Eutctico
Eutctico(X
(XE=0.5)
E=0.5)

Eutctico
Eutctico(X
(XE=0.6)
E=0.6)

Eutctico
Eutctico(X
(XE=0.85)
E=0.85)

Rendimiento
RendimientoEF/EG
EF/EG==80%
80%

Rendimiento
RendimientoEF/EG
EF/EG==75%
75%

Rendimiento
RendimientoEF/EG
EF/EG==30%
30%

28

14

RESOLUCION
2.RESOLUCION DIRECTA
2.2.3. PURIFICACION DE ENANTIOMEROS PARCIALMENTE RESUELTOS

O
H

Me
CO2H

(R)-Fenoxipropionico
obtenido con un 75-80% ee

R-NH2

100%
100%ee
ee

Recristalizacin

O
H

Me
CO2

+
H3N-R

29

RESOLUCION

2.RESOLUCION DIRECTA
3. RESOLUCION CINETICA

Resolucin cintica es un proceso en el cual uno de los enantiomeros de una mezcla

racmica es transformado en un nuevo compuesto de forma ms rpida que el otro
enantiomero. El producto resultante puede ser otro compuesto quiral o una entidad
aquiral (desde un punto de vista formal esto es irrelevante).
Hasta la introduccin de la catlisis quiral la resolucin cintica era del dominio de
enzimas y microorganismo (biocatlisis).

kR

Racmico
(+)/(-)

kS

Resolucin
Resolucin cintica
cintica
kkS ==kkR
S

30

15

RESOLUCION
1.RESOLUCION DIRECTA
3. Resolucin cintica
Enantioselective Synthesis of
Cyclopentenones via Rhodium-Catalyzed
Kinetic Resolution and Desymmetrization of
4-Alkynals
Ken Tanaka and Gregory C. Fu
J. Am. Chem. Soc.; 2002; 124(35) pp 10296 10297

Kinetic Resolution of Allylic Alcohols

Using a Chiral Phosphine Catalyst
Edwin Vedejs and James A. MacKay
Org. Lett.; 2001; 3(4) pp 535 - 536;

Novel Catalytic Kinetic Resolution of

Racemic Epoxides to Allylic Alcohols
Arnaud Gayet, Sophie Bertilsson, and Pher G.
Andersson
Org. Lett.; 2002; 4(22) pp 3777 - 3779;
(1) Li-salt of (1S,3R,4R)-3-(pyrrolidinyl)
methyl-2-azabicyclo [2.2.1] heptane 1

31

RESOLUCION
1.RESOLUCION DIRECTA
3. Resolucin cintica
Parallel Kinetic Resolution of 4-Alkynals
Catalyzed by Rh(I)/Tol-BINAP: Synthesis of
Enantioenriched Cyclobutanones and
Cyclopentenones
Ken Tanaka and Gregory C. Fu
J. Am. Chem. Soc.; 2003; 125(27) pp 8078 - 8079;

Dynamic Kinetic Resolution via Asymmetric

Conjugate Reduction: Enantio- and
Diastereoselective Synthesis of 2,4-Dialkyl
Cyclopentanones
Valdas Jurkauskas and Stephen L. Buchwald
J. Am. Chem. Soc.; 2002; 124(12) pp 2892 - 2893

Effective Nonenzymatic Kinetic Resolution of

()-trans-2-Arylcyclohexanols Using 3 Acetoxyetienic Acid, DCC, and DMAP
Masato Matsugi, Yuri Hagimoto, Masatomo Nojima,
and Yasuyuki Kita
Org. Process Res. Dev.; 2003; 7(4) pp 583 - 584;

32

16

RESOLUCION
1.RESOLUCION DIRECTA
3. Resolucin cintica
Highly Enantioselective Dynamic Kinetic Resolution of 1,2-Diarylethanols by a Lipase-Ruthenium Couple
Mahn-Joo Kim,* Yoon Kyung Choi, Sol Kim, Daeho Kim, Kiwon Han, Soo-Byung Ko, and Jaiwook Park*

A practical procedure has been developed for the dynamic kinetic resolution of 1,2-diarylethanols. This
procedure employs a highly enantioselective lipase from Pseudomonas stutzeri (trade name, lipase TL) as the
resolution catalyst and a ruthenium complex as the racemization catalyst. Sixteen 1,2-diarylethanols have been
efficiently resolved to provide their acetyl derivatives with good yields (95-97%) and high enantiomeric
excesses (96-99%).

33

RESOLUCION
1.RESOLUCION DIRECTA
3. Resolucin cintica
Homobenzotetramisole: An Effective Catalyst for Kinetic Resolution of Aryl-Cycloalkanols
Vladimir B. Birman* and Ximin Li

Homobenzotetramisole (HBTM), a ring-expanded analogue of the previously reported

catalyst BTM, displays higher catalytic activity and a different structure-selectivity
profile. It displays good enantioselectivities in kinetic resolution of secondary benzylic
alcohols but is particularly effective for 2-aryl-substituted cycloalkanols

34

17