UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO

COLEGIO DE CIENCIAS Y HUMANIDADES

REA DE CIENCIAS EXPERIMENTALES
PLANTEL NAUCALPAN

EXTRACCIN DE ADN

BIOLOGA I

TERCERA UNIDAD
CMO SE TRANSMITE Y MODIFICA LA INFORMACIN GENTICA EN LOS SISTEMAS VIVOS?

Aprendizajes

Describe la tecnologa del ADN recombinante y sus aplicaciones.

Aplica habilidades y actitudes, al disear y llevar a cabo investigaciones
documentales y experimentales que contribuyan a la comprensin de la transmisin
y modificacin de las caractersticas hereditarias.
Comunica de forma oral y escrita la informacin derivada de las actividades
realizadas.

DISE: BIL. MA. ELENA DVILA CASTILLO

2003

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Tema II. La ingeniera gentica y sus aplicaciones.

Aspectos generales de la tecnologa del ADN recombinante.
Nombre:________________________________________________grupo____
EXTRACCIN DE ADN

I. INTRODUCCIN
El cido desoxirribonucleico (ADN), es el material gentico de todos los organismos
vivos y de casi todos los virus. Es el ADN quien lleva la informacin necesaria para dirigir
la sntesis de protenas y la duplicacin de la misma molcula. Esta biomolcula fue
detectada en el ncleo celular por el investigador F. Miesher en 1869, y desde los aos
cuarenta O. Avery y sus colaborados descubrieron que el material gentico est
formado de ADN.
En las ltimas dcadas, la Biologa se ha enriquecido con una variedad de tcnicas que
han permitido la posibilidad de entender con mayor precisin, estructuras, funciones,
mecanismos o fenmenos de los sistemas vivos.
La manipulacin del ADN, es uno de los ejemplos ms espectaculares del avance de la
aplicacin de una serie de herramientas, que anteriormente no se contemplaban en el
campo cientfico y que en la actualidad, se usan de manera rutinaria para desarrollar
una amplia variedad de estudios genticos.
Para estudiar el ADN es imprescindible aislarlo e identificarlo. Existen diferentes
mtodos de aislamiento, dependiendo del tipo de estudios o investigacin que se quiera
realizar. Sin embargo todos comparten el hecho de que, debido a que la molcula se
encuentra al interior de estructuras membranosas y est asociada con protenas, se
requiere usar sustancias adecuadas para obtener al ADN de la forma ms purificada
posible.
La tcnica utilizada en esta actividad experimental, se basa por un lado, en el principio
de que el componente fundamental de las membranas plasmtica y nuclear, son los
lpidos, por lo cual se utiliza un detergente (surfactante) para romper estas estructuras y
permitir la salida del ADN. Por otro lado, el ADN de vegetales y animales se encuentra
asociado a protenas de tipo histona, por lo tanto, al agregarle alcohol se precipitan las
protenas y de esta forma se obtiene al ADN como una estructura ms pura. Finalmente,
se conoce que el ADN es una molcula de carcter cido, lo que le permite ser
identificada con colorantes especficos como el anaranjado de acridina.

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II. OBJETIVOS

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 Efectuar la tcnica de extraccin y aislamiento de ADN en hgado de pollo y en

chcharos para visualizar el aspecto real de este tipo de cido nucleico.

 Diferenciar entre el Modelo del ADN propuesto por Waston y Crick y el aspecto
real del cido desoxirribonucleico extrado por esta tcnica.

 Comprender que esta tcnica, es slo el inicio de otras que se aplican en el

mbito cientfico para resolver problemas de gentica humana y mejoramiento de

razas y variedades.

 Profundizar la comprensin de conceptos relacionados con la Ingeniera gentica

y sus aplicaciones y promover el desarrollo de habilidades y destrezas.

III. MATERIAL Y EQUIPO

(Si se utiliza dos veces el mismo material, cuidar que est limpio)

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1
1
1
1

probetas graduadas de 50 ml.

varilla de vidrio.
portaobjetos.
cubreobjetos.
vaso de precipitados de 50 ml.
caja de Petri.
gotero.

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1
1
1
1
1
1

mortero.
bistur.
aguja de diseccin.
balanza digital o granataria.
microscopio de contraste de fases.
coladera fina (traer de su casa).

IV. Material Biolgico

 2 gramos (g) de hgado de pollo o de ternera.
 10 gramos (g) de chcharos.

V. SUSTANCIAS
 10 ml. de agua desionizada o destilada.
 20 ml. de solucin de desoxicolato de sodio (disolver 1 g. de desoxicolato en 60 ml.
de agua destilada o desionizada).

(Nota: Se puede sustituir el desoxicolato por el detergente Roma)

 20 ml. de etanol absoluto o al 95% FRIO (el alcohol debe estar a 4 oC. por lo menos
1 hora antes de iniciar la actividad y permanecer en hielo durante todo el
experimento).
 Colorante Anaranjado de Acridina.

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VI. PROCEDIMIENTO

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1. Cortar un trozo pequeo de hgado con la ayuda de un bistur o desvainar

algunos chcharos.
2. Pesar en una caja de Petri 2 g. de hgado o 10 g. de chcharos.
3. Triturar en un mortero el hgado o los chcharos con agua desionizada o
destilada.
4. Separar el lquido obtenido en cada trituracin en el vaso de precipitados con
ayuda de una coladera.
5. Verter el lquido en una probeta, aadir 20 ml. de solucin de desoxicolato de
sodio (o solucin de detergente Roma) y agitar SUAVEMENTE con la varilla de
vidrio.
6. Incorporar LENTAMENTE el etanol y esperar por lo menos dos minutos para
observar unos filamentos blanquecinos que es el ADN extrado por esta tcnica
(Ver Figura 1), algunos de estos filamentos quedan adheridos a la varilla de
vidrio. AGITAR LENTAMENTE EN FORMA ROTATORIA, SLO SI ES NECESARIO.
7. Tomar una muestra de los filamentos blanquecinos con una aguja de diseccin,
con la varilla de vidrio o con un gotero y colocarlos sobre el portaobjetos.
8. Aadir una gota de anaranjado de acridina y colocar el cubreobjetos.
9. Observar los filamentos del ADN al microscopio con los objetivos 10x y 20x (Ver

Figura 2

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Figura 1. a) ADN de hgado de pollo. b) ADN de chcharo.

Figura 2. Filamentos de ADN (20x)

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10. VII. RESULTADOS Y ANLISIS

 ESQUEMATICE EL PROCEDIMIENTOS QUE UTILIZ PARA EXTRACCIN Y

AISLAMIENTO DEL ADN.

DIBUJE LO OBSERVADO EN EL MICROSCOPIO CON LOS OBJETIVOS DE 10X Y 20X.

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VIII. PREGUNTAS PARA DISCUSIN

1. Para qu se utiliz el desoxicolato de sodio y etanol en esta tcnica?.
2. Cmo se puede determinar que lo que se obtuvo mediante esta tcnica fue ADN

y no protenas u otras sustancias?.

3. Describa e ilustre el experimento de Hershey y Chase (1952), para demostrar que

el ADN era la clave de la herencia.

4. Explique brevemente en qu consiste el Modelo de ADN de Waston y Crick y

cmo contribuy en el desarrollo de la Ingeniera Gentica.

5. Describa los aspectos generales y esquematice cada una de las siguientes

tcnicas:
a)
b)
c)
d)

ADN Recombinante.
Formacin de Organismos Transgnicos.
Clonacin de Organismos
Terapia Gnica

6. Diga algunas ventajas y desventajas (implicaciones bioticas) del Proyecto del

Genoma Humano y de la clonacin de organismos.

IX. CONCLUSIONES

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BIBLIOGRAFA

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Edicin Prentice Hall. Mxico.

Arambarri, G. R., Lpez, M. R., Mdicis V., A., Rodrguez, A. J. y Torres,

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Plantel Naucapan. UNAM.

Mendiola, R. G. 1999. Aislamiento del ADN en Clulas Animales y

Vegetales. Colegio de Ciencias y Humanidades. Plantel Naucapan.
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Editex. Espaa.

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