Ao de la consolidacin del Mar de Grau"

ESPECIALIDAD DE FARMACIA

CURSO

: ANALISIS DEL PROCESO BIOLOGICOS Y QUIMICO

EN EL SER HUMANO

TEMA

ACCIN DE LOS AGENTES FSICOS SOBRE LOS

MICROORGANISMOS

DOCENTE

Q.F. GERARDO BARDALES CHAVEZ

CICLO

II

TURNO

NOCHE

MELO CHARPENTIER ADRIANA

P
ALUMNA

PUCALLPA PERU

2016

DEDICATORIA

Primeramente a Dios por haberme permitido

llegar hasta este punto y haberme dado salud,
ser el manantial de vida y darme lo necesario
para seguir adelante da a da para lograr mis
objetivos, adems de su infinita bondad y
amor.

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INDICE

INTRODUCCION.............................................................................................. 4
ACCIN DE LOS AGENTES FSICOS Y QUMICOS EN LOS MICROORGANISMOS 5
DEFINICIONES IMPORTANTES:........................................................................6
CONDICIONES QUE INFLUYEN EN LA EFICACIA DE UN MICROORGANISMO.....7
MODO DE ACCIN DE LOS ANTIMICROBIANOS:..............................................8
PROCEDIMIENTOS PARA EL CONTROL MICROBIANO:.....................................8
MTODOS FSICOS.......................................................................................... 9
CALOR......................................................................................................... 9
a.

Esterilizacin por vapor (calor hmedo o autoclave):............................9

b.

Pasteurizacin:.................................................................................10

c.

Tindalizacin o esterilizacin fraccionada al vapor:............................10

d.

Calor seco:....................................................................................... 11

e.

Incineracin:..................................................................................... 11

f.

Temperaturas bajas:............................................................................ 11

g.

Desecacin:...................................................................................... 11

FILTRACIN:................................................................................................. 12
a.

Filtros de profundidad:......................................................................12
Filtros de membrana:........................................................................... 12

b.

RADIACIN:.................................................................................................. 12
a.

Ultravioleta:...................................................................................... 12

b.

Ionizante:.......................................................................................... 12

PRUEBA DE DIFUSIN EN AGAR:..................................................................14

Conclusin.................................................................................................... 16
Bibliografa.................................................................................................... 17
ANEXO.......................................................................................................... 18
Grafico 01................................................................................................... 19
Grafico 02................................................................................................... 20

16

INTRODUCCION
Gentes antimicrobianos son aquellos utilizados para destruir o impedir el
crecimiento de los microorganismos. Por su estado pueden ser: lquidos,
slidos o gases y por su naturaleza, fsicos y qumicos.
La eficacia de estos agentes est condicionada por varios factores como son:
la natura-leza y concentracin del mismo, as como la concentracin y
caractersticas de la poblacin microbiana presente, la temperatura, la duracin
del contacto entre el agente y los microorganismos, la naturaleza del material a
descontaminar, particularmente la presencia de material orgnico, y el pH.

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ACCIN DE LOS AGENTES FSICOS Y

QUMICOS EN LOS
MICROORGANISMOS

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DEFINICIONES IMPORTANTES:
-

Muerte

microbiana:

Prdida

irreversible

de

la

capacidad

de

reproducirse.
-

Esterilizacin: Proveniente del latn sterilis incapaz de reproducirse.

Proceso por el cual las clulas vivas, esporas viables, virus y viroides
destruidos o eliminados de un objeto o hbitat.

Desinfeccin:

Destruccin,

eliminacin

inhibicin

de

los

microorganismos que pueden producir enfermedad de una superficie u

objeto. Se mantienen viables las esporas.
-

Germicida: Terminacin _cida del latn que significa destruir. Es un

agente que puede destruir microorganismos patgenos y muchos no
patgenos pero no necesariamente esporas. (Bactericida, fungicida,
viricida)

Terminacin _statico: proveniente del griego statikos que causa

detencin, agente con capacidad de inhibir el crecimiento microbiano,
pero sin matarlos. (Bacteriosttico, fungisttico)

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CONDICIONES QUE INFLUYEN EN LA EFICACIA DE UN

MICROORGANISMO
La destruccin de los microorganismos y la inhibicin del crecimiento no es un
proceso simple, debido a que la eficacia de un agente antimicrobiano es
afectada por 6 factores:
1. Tamao de la poblacin: Debido a que la muerte es exponencial, una
poblacin muy grande requiere de mayor tiempo.
2. Composicin de la poblacin: la eficiencia del antimicrobiano vara
considerablemente con respecto a la naturaleza de los organismos que
son tratados porque su susceptibilidad es distinta. Por ejemplo: las
endosporas bacterianas son ms resistentes que las clulas vegetativas,
las clulas jvenes mueren con mayor facilidad y algunas especies
soportan mejor condiciones adversas.
3. Concentracin o intensidad del agente antimicrobiano: A menudo,
pero no siempre, entre mayor sea la concentracin del agente qumico o
ms intenso agente fsico, ms rpidamente se destruyen los
microorganismos. Pero generalmente la eficiencia no est relacionada
con la concentracin o intensidad. (alcohol)
4. Tiempo de exposicin: cuanto ms tiempo se exponga una poblacin a
un determinado agente, ms organismos se destruirn.
5. Temperatura: A menudo, un aumento en la temperatura aumenta la
actividad de un agente qumico.
6. Entorno: la poblacin que se quiere destruir no se encuentra aislada,
est rodeada de diversos factores ambientales que pueden protegerla o
facilitar su destruccin. Por ejemplo: el calor es ms efectivo en un
medio cido, la materia orgnica les da proteccin contra el calor y los
desinfectantes qumicos.

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MODO DE ACCIN DE LOS ANTIMICROBIANOS:

Alteracin de la permeabilidad de la membrana citoplasmtica

Dao a la pared celular o inhibicin de la sntesis de sus componentes

Alteracin del estado fsico qumico de las protenas y cidos nucleicos,

o inhiben su sntesis

Inhibicin enzimtica

PROCEDIMIENTOS PARA EL CONTROL MICROBIANO:

Mtodos fsicos

Mtodos qumicos

Agentes Antimicrobianos

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MTODOS FSICOS
Los mtodos fsicos se utilizan a menudo para lograr la descontaminacin, la
desinfeccin y la esterilizacin microbiana.

CALOR
La exposicin al agua en ebullicin durante 10 minutos es suficiente para
destruir clulas vegetativas, pero no es suficiente para destruir endosporas. No
esteriliza.
La eficacia del calor como agente antimicrobiano, se puede expresar como el
Tiempo de muerte trmico (TMT), que se define como el tiempo ms corto
necesario para destruir los microorganismos en una suspensin, a una
temperatura especfica y en condiciones definidas. Sin embargo como la
destruccin es logartmica no es posible eliminar completamente los
microorganismos de una muestra.
Existen diversos mtodos de control de microorganismos por medio del calor:
a.

Esterilizacin por vapor (calor hmedo o autoclave):

El agua es llevada a punto de ebullicin de manera que el vapor llena la
cmara, desplazando el aire fro. Cuando todo el aire es expulsado, se
cierran las vlvulas de seguridad y el vapor satura toda la cmara, por lo
que incrementa la presin, hasta que se alcanzan los valores deseados
(121C y 15 lb presin).
En estas condiciones se destruyen todas las clulas vegetativas y
endosporas en un tiempo que por lo general es de 15 minutos. Se
piensa que el calor hmedo degrada los cidos nucleicos, desnaturaliza
protenas y adems alterar las membranas celulares.
Si no se cumplen las condiciones adecuadas, no hay esterilizacin. Para

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controlar el buen funcionamiento del equipo, se pueden incluir con la

esterilizacin un control biolgico o un indicador qumico.
El indicador biolgico consiste en una ampolla estril con un medio y un
papel cubierto con esporas de Bacillus stearothermophilus o Clostridium.
Luego de la esterilizacin se rompe la ampolla y se incuba por unos
das. El indicador qumico consiste en una cinta especial con letras o
lneas que cambian de color despus del tratamiento suficiente con
calor.
b.

Pasteurizacin:
Se utiliza para sustancias o medios que no pueden ser calentadas a ms
de su temperatura de ebullicin.
Un calentamiento breve a 55 o 60C destruir los microorganismos
patgenos y disminuye los causantes de la descomposicin de la
sustancia. NO esteriliza.
Existen variaciones que son utilizadas en la industria de la leche: la
pasteurizacin rpida (HTST high temperature short-term) que consiste
en calentar a 72C por 15 segundos. Y la pasteurizacin a temperatura
ultra elevada (UTH ultrahigh temperature) que calienta a 140-150C por
1 a 3 segundos.

c.

Tindalizacin o esterilizacin fraccionada al vapor:

Se utiliza para qumicos o material biolgico que no puede llevarse a
ms de 100C. Se calienta a una temperatura de 90C a 100C durante
30 minutos por tres das consecutivos y se incuba a 37C entra cada
calentamiento.
El primer calentamiento destruye clulas vegetativas pero no esporas,

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por lo que germinan a 37C y luego son eliminadas con el siguiente

calentamiento.
d.

Calor seco:
Se utilizan hornos o estufas a una temperatura de 160-170C por 2 o 3
horas. Es menos efectivo que el calor hmedo, pero no corroe utensilios
metlicos. Es lenta y no se puede utilizar para material termo sensible.

e.

Incineracin:
Destruye por completo los microorganismos. (calentar las asas en los
mecheros).

f.

Temperaturas bajas:
Refrigeracin y congelacin, son nicamente bacteriostticos. En
general, el metabolismo de las bacterias est inhibido a temperaturas
por debajo de 0 C. Sin embargo estas temperaturas no matan a los
microorganismos sino que pueden conservarlos durante largos perodos
de tiempo.
Esta circunstancia es aprovechada tambin por los microbilogos para
conservar los microorganismos indefinidamente. Los cultivos de
microorganismos se conservan congelados a -70 C o incluso mejor en
tanques de nitrgeno lquido a -196 C.

g.

Desecacin:
Es de efecto bacteriosttico y las esporas permanecen viables.

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FILTRACIN:
Es utilizada para materiales termosensibles.
a.

Filtros de profundidad:
Se utilizan materiales fibrosos o granulados que forman una capa gruesa
con canales de dimetro muy pequeo. La solucin es aspirada al vaco
y los microorganismos quedan retenidos o son adsorbidos por el
material. Se utilizan diatomeas, porcelana no vidriada, asbestos.

b.

Filtros de membrana:
Son circulares con un grosor de 0.1 mm y con poros muy pequeos, de
unos 2 m por lo que los microorganismos no pueden atravesarlo. Se
fabrican de acetato de celulosa, policarbonato, fluoruro de polivinilo u
otros materiales sintticos.
RADIACIN:

a.

Ultravioleta:
Es letal para todas las clases de microorganismos por su longitud de
onda corta y su alta energa. Es letal a 260 nm ya que es la longitud de
onda que es ms efectivamente absorbida por el ADN.
El mecanismo primario del dao al ADN es la formacin de dmeros de
timina lo que inhibe su funcin y replicacin. Son escasamente
penetrantes y se utilizan para superficies.

b.

Ionizante:
Niveles bajos pueden producir mutaciones e indirectamente resultar en
la muerte, niveles altos son letales. Especficamente causan una serie

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de cambios en las clulas: ruptura de puentes de hidrgeno, oxidacin

de dobles enlaces, destruccin de anillos, polimerizacin de algunas
molculas, generacin de radicales libres.
La mayor causa de muerte es la destruccin del ADN. Es excelente
esterilizante y con penetracin profunda en distintos materiales, por lo que se
utilizan para esterilizar materiales termolbiles (termosensibles) como jeringas
desechables, sondas, etc.
No se utilizan para medios de cultivo o soluciones proteicas porque producen
alteraciones de los componentes.

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PRUEBA DE DIFUSIN EN AGAR:

El microorganismo a investigar se inocula en una o varias placas de agar
Mller-Hinton y sobre su superficie se disponen los discos correspondientes a
varios antibiticos.
Se incuban las placas durante 16-24 horas a 35C y al cabo de este tiempo se
estudia el crecimiento en ellas.
Se valora el dimetro de la zona de inhibicin que se forma alrededor de cada
disco y se compara con las referencias oportunas publicadas por el NCCLS.
Con esta referencia podemos informar si el micoorganismo es Sensible,
Intermedio o Resistente (S, I, R) a cada uno de los antibiticos ensayados en
las placas.

Mtodo de E-test:
Se trata de una tcnica cuantitativa en placa que permite obtener una lectura
directa de CMI en g/ml, ya que se emplean tiras plsticas impregnadas en
concentraciones crecientes de antibitico indicadas en una escala graduada
sobre la propia tira.

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El microorganismo a investigar se inocula en una placa y sobre ella se deposita

la tira del antibitico (o antibiticos) a ensayar. Tras la incubacin de 16-24
horas a 35C se observan las placas y se valora la zona de inbicin, de forma
elptica, alrededor de cada tira. La CMI se lee directamente observando el
punto ms bajo de la elipse que presente crecimiento.

Pruebas automatizadas:
La mayora de estos novedosos mtodos utilizan sistemas de microdilucin en
medio lquido sobre microplacas con pocillos en "U" e interpretan el crecimiento
bacteriano en los diferentes pocillos por medio de un autoanalizador
(mediciones por turbidez o fluorescencia).

Su manipulacin suele ser fcil y rpida, generalmente automatizada o

semiautomatizada, lo que los convierte en mtodos ideales para grandes
volmenes de trabajo. Una de sus grandes limitaciones es que slo ofrecen
garanta para investigar microorganismos de crecimiento rpido y que no
tengan requerimientos especiales.

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Conclusin

Los mtodos fsicos son aquellos que no involucran el empleo de sustancias

letales para los microorganismos, sino procedimientos fsicos como la radiacin
ionizante, el calor o la filtracin de soluciones con membranas que impiden el
paso de microorganismos, incluyendo virus.
El mtodo ms usado en esta categora es el calor que mata microorganismos
por la desnaturalizacin de las enzimas; el cambio resultante en la forma
tridimensional de las protenas las inactiva.

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Bibliografa
Web Citadas
http://clasedecontroldemicrorganismos.blogspot.pe/
http://webcd.usal.es/Web/educativo/micro2/tema08.html
http://es.slideshare.net/tango67/agentes-fsicos-y-qumicos-17739065
https://es.scribd.com/doc/47834828/agentes-fisicos-y-quimicos-sobre-losmicroorg

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ANEXO

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Grafico 01

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Grafico 02

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