Universidad de Puerto Rico en Humacao,

Departamento de Biologa

Ejercicio: Actividad Enzimtica de las Clulas

Fernando J. Bentez Gonzlez

Nm. de estudiante: 842-16-0624
14 de noviembre de 2016

Introduccin
Los objetivos en este laboratorio se centralizan en observar la actividad de la catalasa en
la papa. Adems, se va a poner a prueba el efecto de la temperatura en la actividad enzimtica de
la catalasa. La idea general es la investigacin de la catalasa en la papa y mediante los
procedimientos se informar la actividad enzimtica. La hiptesis del ejercicio va a ser que las
enzimas cuyo ambiente es cido se puede desnaturalizar en bajas o altas temperaturas.
Un catalizador es un agente qumico que acelera una reaccin. Una enzima es una
protena cataltica. Todas las enzimas son protenas el cual estn compuestas de muchos amino
cidos. El propsito de las enzimas es agilizar las reacciones para que as la clula pueda efectuar
sus procesos cotidianos. Algunos factores que afectan las actividades enzimticas son el PH y la
temperatura. Altas temperaturas pueden desnaturalizar una protena causando que pierda su
tridimensionalidad. Las enzimas son tambin sensitivas al PH por ejemplo la pepsina que se
encuentra en el estmago es un ambiente bien cido. Sin embargo, hay otras enzimas en el
citosol que trabajan en un PH neutral por tanto las enzimas se acoplan a sitio en donde estn
asignadas.
Ahora bien, la catalasa es una enzima que rompe la reaccin de descomposicin del
perxido de hidrgeno (agua oxigenada) en agua y oxgeno. La descomposicin sera de esta
manera 2 H2O2
H2O + O2. El ejemplo clsico es cuando una persona se corta se le aplica
agua oxigenada. La razn es porque en la sangre se encuentra la catalasa y cuando se le aplica
agua oxigenada se ven unas burbujas y eso es una seal de una reaccin qumica. Sin mas
prembulos, quisiera hacer mencin que para elaborar esta introduccin se utiliz informacin de
los libros y los sitios electrnicos que aparecen en la referencia.

Mtodo
Antes de haber realizado el procedimiento 1 de actividad enzimtica de las clulas la
ayudante de laboratorio nos provey los siguientes materiales para realizar el experimento de
observar osmosis atraves del gradiente de concentracin. Estos instrumentos fueron: 2 tubos de
ensayos, 20 mL de una solucin de fresca de perxido de hidrgeno al 3%, 10 mL de macerado
de papa compuesto de una papa cortada en pedazos (100 g) con 250 mL de agua, 20 mL de agua
destilada, 3 probetas de 10 mL, reloj, marcador, removedor y una regla mtrica. Para el segundo
procedimiento los siguientes materiales que se utilizaron fueron: 8 tubos de ensayo, 20 mL de
macerado de papa preparado como el primer procedimiento, 20 mL de solucin fresca de
perxido de hidrgeno, 20 mL de agua, 3 probetas de 10 Ml, regla mtrica, reloj, marcador,
termmetro y removedor. Fue de suma importancia que ya tenan preparados los baos de mara
a 0oC, 25oC, 37oC y 80oC.

Por lo general, despus de tener los materiales listos podemos comenzar a describir lo
pasos. En la determinacin de la actividad enzimtica primero, se rotul un tubo como control y
otro como experimental. Posteriormente, se utiliz una probeta en el cual se midi 3 mL del
macerado de papa y se aadi a cada tubo. Ahora, al tubo control se le ech 3 mL de agua y se
mezcl con cuidado. Entonces, utilizando el marcador se fij una lnea hasta donde lleg el
volumen del agua. Ya completado este paso se trabaj con el grupo experimental el cual es el
ms importante; a este se le derram 3 mL de solucin de perxido y se hizo el mismo
procedimiento del marcador que se hizo anteriormente. Luego, utilizando la regla se midi cada
tubo la altura del aumento en volumen despus de 1 minuto. Esto se midi a base de la marca
que se haba hecho en cada tubo. Despus, se midi el volumen cada minuto por un intervalo de
5 minutos. Finalmente, se construy una grfica de altura como funcin de tiempo para los
resultados de cada tubo.
Ahora bien, ya terminado el procedimiento 1 se sigui al procedimiento 2 en el cual en la
parte inferior ya se estableci los materiales. Para comenzar, se marc un tubo como control a
0oC y otro experimental a 0oC. Por consiguiente, se le aadi a cada tubo 3mL de macerado de
papa y se colocaron los tubos a bao de mara de 0oC por 15 minutos. Luego de este proceso, al
tubo control se le aadi 3 mL de agua y se mezcl con cuidado. Al nivel donde lleg el agua se
traz una lnea con el marcador y se coloc rpidamente de nuevo en el bao de mara. Despus,
al tubo experimental se aadi 3 mL del perxido. Tambin, se marc a donde llegaba el
perxido en seguida se puso en la cubeta de hielo por 5 minutos. Prontamente, pasado los 5
minutos se utiliz la regla y se midio la altura en que cada tubo aument. Ahora bien, se repiti
los mismos pasos para la agrupacin de 25oC, 37oC y 80oC. Despus, se confeccion una grfica
de altura de la espuma como funcin de temperatura para los resultados de los tubos
experimentales. Finalmente, los procedimientos y materiales se obtuvieron del manual entregado
por la profesora el cual en la seccin de referencia hace mencin.

Aumento en volumen como funcin de tiempo del tubo control

100
80

Altura (mm)

Aumento en
volumen como
Funcin de Tiempo

60
40
20
0

Tiempo (min)

Resultados

Tubo Control
Tiempo
(min.)
1

Altura
(mm)
0

En la primera grfica el control no aumento nada por ende no hubo cambio. Por lo
general, esto siempre se espera del control ya que no es la variable que se estaba probando. De
manera que esta primera prueba fue el mismo patrn durante el intervalo de los cinco minutos.
En la grfica a mano derecha se encuentran los valores en el eje de X (tiempo) y Y (altura)

Aumento en volumen como funcin de tiempo del tubo experimental

100
80
60

Altura (mm)

Aumento en volumen
como Funcin de
Tiempo

40
20
0

Tiempo (min)

Tubo
Experimental
Tiempo Altura
(min.)
(mm)
1
25
2

37

50

64

75

Ahora bien, al aadirle la solucin de perxido vemos que hubo un cambio rpido. En los
primeros segundos ascendi a una altura de 25 milmetros. Despus, en el primer minuto de 25
milmetros ascendi a 37 milmetros. Como consecuencia, hasta el tercer minuto llego a 50 lo
cual es un aumento considerable. Ya se puede determinar que hay una tendencia a aumentar
cuando pasa cada minuto.

Altura de espuma como funcin de temperatura

100
80
60

Altura (mm)

Altura de espuma
como Funcin de
Tiempo

40
20
0

25

37

80

Temperatura (C)

Altura de espuma como

funcin de temperatura
Temperatura
Altura
o
(C )
(mm)
0
54
25

98

37

28

80

En la grfica en la parte posterior se observ la reaccin de la espuma a diferentes

temperaturas como 0o C, 25o C, 37o C y 80o C en el cual duro un perodo de 15 minutos. Segn,
los resultados en el eje de Y el ms alto valor fue de 98 cuando el bao de mara se encontraba a
25o C. Despus de haber llegado a su punto culminante se desarroll un patrn en el cual decay
sustancialmente. Debemos recordar que a medida que aumenta la temperatura va a incrementar
la funcin de la enzima.

Discusin y Conclusin
En primer lugar, compararemos los resultados obtenidos entre el grupo control con el
grupo experimental del procedimiento 1. Tal y como se esperaba en el grupo control se iba a
quedar igual en otras palabras iba a ser constante ya que lo nico que se le haba aadido haba
sido agua y no iba a reaccionar. La razn por la cual sabemos que no reaccion fue porque no
hubo burbujas y porque su altura no aument durante los cinco minutos. Ahora bien, en el grupo
experimental a medida que fue aumentando los minutos la altura tambin aument. Del primer
minuto al segundo aumento 12 mm, del segundo al tercero aumento 13 mm, del tercero al cuarto
fue de 14 mm y del cuarto al quinto fue 11 mm. Estos resultados que se plasmaron en la grfica
se debe a que hubo una reaccin qumica y esa fue las burbujas o espumas observadas esto es
una consecuencia del mezclar pulpa de papa con agua oxigenada. Tambin, otra razn por la que
se ven las espumas es que realmente se descompuso el perxido de hidrogeno. Este cambio si se
podra utilizar como medida de la efectividad de la catalasa porque durante la reaccin si se
encuentra perxido de hidrogeno (agua oxigenada) el cual es roto en agua y oxigeno por la
catalasa y esa es la verdadera prueba de que la catalasa funciona. La funcin de la catalasa es
romper molculas toxicas como el perxido de hidrogeno pero como el agua no es toxica la
catalasa no puede romper agua por esta razn es que tenemos los resultados en el grupo control.
En otras palabras al no haber ningn compuesto txico en el control por es que fue constante.
La temperatura es un factor determinante en la actividad enzimtica. La grfica revel
alturas diferentes depende la temperatura. Cuando el ambiente se torn cido en este caso los
tubos experimentales la estructura de la enzima cambia. Al haber este cambio la enzima a medida
que va incrementando la temperatura hasta llegar a su punto de mayor produccin que es cuando
la temperatura est en los mas o menos los 27oC. La razn por la que llegamos a esta conclusin
es que segn la grfica cuando la enzima est a los 25oC la altura est a 98mm por tanto est bien
cerca de llegar a su VMAX. De manera que esta es la explicacin por la cual en un ambiente cido
la altura en 0o C y a 25oC es bien elevada. Por otro lado, aunque entre 25oC y 37oC es
relativamente cercana la disminucin en altura de la actividad enzimtica es alarmante. Por eso,
ya en esta etapa falta poco para que la protena se desnaturalice y el resultado se nota cuando la
enzima se encuentra a 80oC en el cual ya est desnaturalizada.

A base de estas conclusiones se puede determinar que parcialmente la hiptesis fue

aceptada. El argumento por el cual decimos esto es que era cierto que en altas temperaturas en un
ambiente cido la protena se puede desnaturalizar pero en bajas temperaturas la enzima sigue
catalizando una actividad favorable. Algunas limitaciones para este ejercicio fue la falta de
informacin provista ya que se tuvo que buscar referencias adicionales para poder tener un
anlisis y una conclusin de altura. Sin embargo, si el ejercicio hubiera tenido ms informacin
se hubiera tenido una perspectiva de un cuadro mas completo para de esa manera llegar mas
rpido a una conclusin adecuada.

Referencias
Referencias sacadas de libros:
Brooker, Robert J., Widmaier, Eric P., Graham, Linda E. & Stiling, Peter D. (2014).
Biology Third Edition. Avenue of Americas, NY: McGraw-Hill
Dr. Motta, Noel., Dr. Flores, Rosa V. & Cintrn, Isabel G. (2007 y 2009). Alianza para
el Aprendizaje de Ciencias y Matemticas. Ro Piedras: UPR & Humacao: UPR
Referencias sacadas de sitios electrnicos:
El Efecto PH sobre las Enzimas. (n/a). Sacado de
http://lasaludi.info/ph-efecto-sobre-enzimas.html
Cardenas, Camilo A., Pineda, Carlos J. & Ruiz, Yohandary. (2013, octubre 11).
Factores que afectan la Actividad Enzimtica. Sacado de
http://www.academia.edu/9180412/Informe_de_actividad_enzimatica
King, Carrie. (n/a). Cul es el Rol de la Catalasa?. Sacado de
http://www.ehowenespanol.com/rol-catalasa-sobre_105533/
Gonzalez, Monica (2010, octubre 25). Enzima Catalasa. Sacado de
http://quimica.laguia2000.com/conceptos-basicos/enzima-catalasa

Resumen (Abstract)
En este ejercicio se observ y estudi acerca de la catalasa en la papa y el
efecto de la temperatura en la catalasa. En el primer procedimiento se aprendi que
la catalasa nicamente funciona cuando est presente el perxido de hidrgeno y
que sin el durante los primeros 5 minutos no lleva a cabo ninguna actividad.
Adems, la temperatura juega un rol importante en la actividad enzimtica. En el
segundo procedimiento se utilizaron 8 tubos de ensayo el cual haban 4 que eran
control y 4 que eran experimental. Despus, se coga un experimental y un control y
se introduca a 0oC y lo mismo se haca con las otras temperaturas solicitadas. En

la grfica se pudo demostrar que desde 0 oC hasta 25oC trabaja a un ritmo ptimo.
Sin embargo, despus de 37oC la actividad baja significativamente y cuando llega a
80oC la protena se desnaturaliza. Por ltimo, quisiera agradecerles a los autores de
los libros y artculos el cual me ayudaron a hacer una conclusin de datos ptima
para poder entender de manera sencilla como la actividad de enzimas trabaja y que
factores cambian su escenario de juego.