Você está na página 1de 6

Portugus 1/2

CREATININA

K016
INSTRUES DE USO
FINALIDADE
Mtodo para a determinao da Creatinina. Teste colorimtrico, somente
para uso diagnstico in vitro.
PRINCPIO DE AO
Metodologia: Jaff modificado
Colorimtrica de Ponto Final: a Creatinina reage com cido Pcrico,
formando um complexo de cor amarelo-avermelhado. Nesse pH ocorre a
mxima formao do complexo corado Creatinina-Picrato, e, tambm com
outros elementos plasmticos. Com a adio do Reagente cido, o pH
diminuido e a cor devida Creatinina desfeita, permanecendo a cor devida
aos cromognios. Por diferena entre as leituras obtidas no pH cido,
obtm-se o valor real da Creatinina.
Cintica de Tempo Fixo: a variao na velocidade de formao do Picrato
alcalino, sem acidificao do produto formado, obtida atravs de duas
leituras espectrofotomtricas nos primeiros minutos. As leituras assim
obtidas so livres da reao do Picrato com os cromognios, permitindo,
assim, a determinao da Creatinina.
REAGENTES
Nmero 1 - Reagente Alcalino - Conservar entre 15 e 30C. O
reagente em baixas temperaturas pode apresentar turvao; para elimin-la
aquec-lo a 37C. Homogeneizar antes de usar. Contm: Hidrxido de Sdio
110 mmol/L, Carbonato de Sdio 75 mmol/L e surfactante.
Nmero 2 - cido Pcrico - Conservar entre 15 e 30C. Contm: cido
Pcrico 60 mmol/L.
Nmero 3 - Reagente cido - Conservar entre 15 e 30C. Contm: cido
Actico 12,25 mol/L.
Nmero 4 - Padro - Conservar entre 15 e 30C. Aps o manuseio,
conservar na geladeira entre 2 e 8C para evitar evaporao. Contm:
Creatinina 3 mg/dL.
APRESENTAO
Reagente

Apresentao 1

Apresentao 2

N 1

200 mL

1000 mL

N 2

50 mL

250 mL

N 3

10 mL

50 mL

N 4

10 mL

30 mL

EQUIPAMENTOS E INSUMOS OPERACIONAIS


Espectrofotmetro ou colormetro, banho-maria 37C, relgio ou cronmetro,
pipetas, tubos de ensaio, Biocontro N e Biocontrol P Bioclin. Encontram-se
no mercado especializado de artigos para Laboratrios de Anlises Clnicas.
CONDIES DE ARMAZENAMENTO E TRANSPORTE
A temperatura de armazenamento e transporte dever ser de 15 a 30C.
Manter ao abrigo da luz e evitar umidade.
CUIDADOS ESPECIAIS
1- Somente para uso diagnstico in vitro profissional.
2- Seguir com rigor a metodologia proposta para obteno de resultados
exatos.
3- A gua utilizada na limpeza do material deve ser recente e isenta de
agentes contaminantes.
4- Colunas deionizadoras saturadas liberam gua alcalina, ons diversos e
agentes oxidantes redutores, que podem alterar de forma significativa os
resultados.
5- O nvel de gua no banho-maria deve ser superior ao nivel dos reagentes
nos tubos de ensaio.
6- O Reagente N 1 custico, portanto, deve-se evitar contato com a pele.
O Reagente N 3 deve ser manipulado com cuidado, pois irritante para
pele e mucosas, podendo causar queimadura leve.
7- Recomendamos aplicar as normas locais, estaduais e federais de
proteo ambiental para que o descarte dos reagentes e do material
biolgico seja feito de acordo com a legislao vigente.

8- Para obteno de informaes relacionadas biossegurana ou em


caso de acidentes com o produto, consultar as FISPQ (Ficha de Informaes de Segurana de Produtos Qumicos) disponibilizadas no site
www.bioclin.com.br ou atravs de solicitao pelo SAC (Servio de
Assessoria ao Cliente) da Quibasa.
9- No utilizar o produto em caso de danos na embalagem.
10- imprescindvel que os instrumentos e equipamentos utilizados estejam
devidamente calibrados e submetidos s manutenes peridicas.
AMOSTRAS
Soro ou plasma colhido com heparina, oxalato, fluoreto, citrato ou EDTABioclin. O analito estvel 07 dias entre 2 e 8C. A urina deve ser colhida
por um periodo de 24 horas e conservada em geladeira at o momento da
dosagem.
DESCRIO DO PROCESSO
A Bioclin recomenda, para uso do kit, utilizar como soro controle os kits
Biocontrol N e P Bioclin.
TCNICA I - PONTO FINAL
Marcar 3 tubos de ensaio: B (Branco), P (Padro) e A (Amostra), e proceder
como a seguir:
Branco

Padro

Amostra

Reagente N 1

2,0 mL

2,0 mL

2,0 mL

gua destilada

250 mL

---

---

Amostra

---

---

250 mL

Reagente N 4

---

250 mL

---

Reagente N 2

500 mL

500 mL

500 mL

Homogeneizar e incubar em banho-maria 37C por 10 minutos. Ler as


absorbncia da Amostra e do Padro em 510 nm (500 - 540 nm), acertando
o zero com o Branco. A absorbncia da Amostra ser A1 e a do Padro
ser P.
Em seguida adicionar:

Reagente N 3

Branco

Padro

Amostra

100 mL

---

100 mL

Homogeneizar e aguardar 5 minutos entre 15 e 30C. Ler a absorbncia


A2 da Amostra em 510 nm (500 - 540 nm), acertando o zero com Branco.
A reao de cor estvel por 30 minutos.
DOSAGEM NA URINA
Anotar o volume colhido em mL, centrifugar uma alquota da amostra de
urina a ser dosada e proceder uma diluio de 1:25 (0,1 mL de urina e
2,4 mL de gua destilada ou deionizada). Em seguida, fazer a dosagem
como na tcnica descrita acima, omitindo a segunda etapa (acidificao).
Multiplicar o resultado obtido por 25.
CLCULOS
Creatinina (mg/dL) =

A1 - A2
x3
Absorbncia do Padro

Como a reao segue a lei de Lambert-Beer, o Fator de Calibrao pode


ser usado.
Fator de Calibrao = Concentrao do Padro (3 mg/dL)
Absorbncia do Padro
Creatinina (mg/dL) = (A1 - A2) x Fator de Calibrao
Creatinina na Urina (mg/24h) = mg/dL x Volume de 24h (mL)
100

TCNICA II - MTODO CINTICO DE TEMPO FIXO


PREPARAO DO REAGENTE DE TRABALHO
Mistura uma parte do Reagente N 2 (cido Pcrico) com quatro partes do
Reagente N 1 (Reagente Alcalino). Armazena em frasco mbar. Estvel
24 horas entre 15 e 30C. Homogeneizar o Reagente de Trabalho antes
de iniciar a tcnica.
REAO
Adicionar 0,1 mL de Padro ou Amostra (soro, plasma ou urina) a 1 mL
de Reagente de Trabalho (previamente homogeneizado), homogeneizar e
transferir imediatamente para uma cubeta termostatizada a 37C. Medir as
absorbncias do Padro e da Amostra em 510 nm (500 - 540 nm) aos 30 e
90 segundos.
CLCULOS
Absorbncia do Padro = Abs. 90 segundos - Abs. 30 segundos
ou da Amostra
Fator de Calibrao = Concentrao do Padro (3 mg/dL)
Abs. do Padro
Creatinina (mg/dL) = Abs. da Amostra x Fator de calibrao
DEPURAO
Hidratar o paciente com no mnimo 600 mL de gua e, em seguida, orient-lo
para esvaziar a bexiga. A depurao da Creatinina dever ser realizada
ultilizando o volume total de urina colhida em 4,12 ou 24 horas, de acordo
com o procedimento padro do laboratrio. Em qualquer momento do
intervalo de tempo escolhido, colher uma amostra de sangue. Medir o
volume total de urina e calcular o volume por minuto (VM).
VM = Volume urinrio do tempo determinado (mL)
Tempo determinado (em minutos)
Dosar a Creatinina srica e urinria seguindo as metodologias propostas.
Fazer o clculo da Depurao de Creatinina:
U = Creatinina urinria (mg/dL)
S = Creatinina srica (mg/dL)
VM = Volume/minuto
A = Valor da superfcie corporal do paciente em m
Depurao da Creatinina = U x VM
(mL/min)
S
Obs.: Este valor dever ser corrigido para a superficie corporal do paciente.
Usar o nomograma de correlao peso-altura. Multiplicar o valor da
depurao por 1,73 e dividir pela superficie corporal do paciente.
Depurao da Creatinina = U x VM x 1,73
(mL/min./1,73 m)
S
A
LIMITAES DO PROCESSO
O processo cintico s poder ser realizado em espectrofotmetro com
cubeta termostatizada 37C, devido ao pequeno intervalo de tempo de
reao. As metodologias descritas no devero ser utilizadas para amostras
extremamente lipmicas.
CONTROLE INTERNO DE QUALIDADE
O Laboratrio Clnico deve possuir um programa interno de controle da qualidade, onde procedimentos, normas, limites e tolerncia para variaes sejam
claramente estabelecidos. importante ressaltar que todos os sistemas de
medio apresentam uma variabilidade analtica caracterstica, que deve ser
monitorada pelos prprios laboratrios. Para tanto, recomendvel a utilizao
de controles, que permitem avaliar a preciso e a exatido das dosagens.
RASTREABILIDADE
O padro do kit rastrevel ao material de referncia SRM 914 do NIST
(National Institute of Standards and Technology), tornando-o equivalente ao
mtodo IDMS (Espectrometria de Massa com Diluio Isotpica), segundo
recomendao do NKDEP (National Kidney Disease Education Program).

Portugus 2/2

VALORES DE REFERNCIA
Os valores de referncia em mg/dL, para o presente mtodo, foram obtidos
atravs da determinao de Creatinina em populaes sadias do sexo
masculino e feminino.
Adultos

0,4 - 1,4 mg/dL

Recm-nascido

0,31 - 0,92 mg/dL

2 semanas - 1 ano

0,16 - 0,39 mg/dL

1 - 3 anos

0,17 - 0,35 mg/dL

3 - 5 anos

0,26 - 0,42 mg/dL

5 - 7 anos

0,29 - 0,48 mg/dL

7 - 9 anos

0,34 - 0,45 mg/dL

9 - 11anos

0,32 - 0,64 mg/dL

11 - 13 anos

0,42 - 0,71 mg/dL

Soro / Plasma

Urina

Depurao da
Creatinina

13 - 15 anos

0,46 - 0,81 mg/dL

Adulto (Masculino)

1500 - 2500 mg/24h


ou 21 - 26 mg/kg/24h

Adulto (Feminino)

800 - 1500 mg/24h


ou 16 - 22 mg/kg/24h

Criana 2 - 3 anos

6 - 22 mg/kg/24h

Criana > 3 anos

12 - 30 mg/kg/24h

Adulto (Masculino)

97 - 137
mL/min/1,73m

Adulto (Feminino)

88 - 128
mL/min/1,73m

Crianas

70 - 140
mL/min/1,73m

Amostra 1

Amostra 2

Amostra 3

Concentrao
Mdia (mg/dL)

0,679

1,129

1,440

Desvio
Padro (mg/dL)

0,001

0,001

0,001

Coeficiente de
Variao (%)

0,085

0,089

0,080

Sensibilidade
A sensibilidade foi calculada a partir de 20 determinaes de uma amostra
isenta de Creatinina. A mdia encontrada foi 0,0377 mg/dL, com desvio
padro de 0,0006 mg/dL. A sensibilidade, que indica o limite de deteco
do mtodo, corresponde a mdia mais 3 vezes o desvio padro, e igual
a 0,0395 mg/dL.
Linearidade
A reao de cor linear at a concentrao de 10 mg/dL. Para valores
maiores, diluir a amostra com Cloreto de Sdio 0,85% e repetir a
determinao. Multiplicar o valor obtido pelo fator de diluio.
SIGNIFICADO DIAGNSTICO
A Creatinina, sintetizada principalmente no figado e nos rins, produzida e
excretada em um ritmo constante independente da dieta, grau de hidratao
e metabolismo protico. Com a falncia da funo renal, os dados
laboratoriais proporcionam ndices seguros quanto a capacidade renal de
excretar, reabsorver e secretar.
A Creatinina est elevada na insuficincia renal aguda e crnica, na
obstruo do trato urinrio, na insusficincia cardiaca congestiva, na
desidratao, no choque, no diabetes melitus.
Niveis diminuidos podem ser observados: nas distrofias musculares,
desnutrio diminuio da massa muscular, doena renal severa.
NMERO DE TESTES
K016-1 .... 100 Testes / 250 mL de amostra / 2 mL de Reagente
200 Testes / 125 mL de amostra / 1 mL de Reagente

mg/ Kg peso = mg/24h dividido pelo peso corporal


Para converter os valores de mg/dL em mmol/L (SI), multiplicar por 0,0884.

K016-2 .... 500 Testes / 250 mL de amostra / 2 mL de Reagente


1000 Testes / 125 mL de amostra / 1 mL de Reagente

Os resultados fornecidos por este kit devem ser interpretados pelo profissional mdico responsvel, no sendo o nico critrio para a determinao
do diagnstico e/ou tratamento do paciente.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
1 - JAFFE, M.: J. Phisiol. Chem. 10:381, 1886.
2 - SLOT, C.: Sand. J. Clin. Lab. Invest. 17:381, 1965.
3 - HENRY, R. J .: Clinical Chemistry - Principles and Technics, Ed., Harper
and Row. New York, 1964.
4 - TODD, SANFORD, DAVIDSOHN: Diagnsticos Clnicos, 16 Ed., Editora
Manole, 1983.
5 - CARL, A. B. and EDWARD, R.A.: Tietz Textbook of Clinical Chem 2 nd
ed., 1994, 1531 - 1539.

DESEMPENHO DO PRODUTO
CONTROLE DE QUALIDADE
Exatido
COMPARAO DE MTODOS E ESPECIFICIDADE METODOLGICA
O kit de Creatinina foi comparado com outro mtodo para dosagem de
Creatinina comercialmente disponvel. Foram realizadas 07 anlises e os
resultados foram avaliados. A equao linear obtida foi Y = 1,072X - 0,056
e o coeficiente de correlao linear 0,999. Com estes resultados, pode-se
concluir que o kit apresenta boa especificidade metodolgica.
Preciso
REPETIBILIDADE
A repetibilidade foi calculada a partir de 20 determinaes sucessivas,
utilizando 3 amostras com concentraes diferentes, obtendo-se os
seguintes resultados:

Concentrao
Mdia (mg/dL)

Amostra 1

Amostra 2

Amostra 3

0,679

1,128

1,441

GARANTIA DE QUALIDADE
Antes de serem liberados para o consumo, todos os reagentes
Bioclin so testados pelo Departamento de Controle de Qualidade. A qualidade dos reagentes assegurada at a data de validade mencionada na
embalagem de apresentao, desde que armazenados e transportados nas
condies adequadas.
QUIBASA QUMICA BSICA Ltda
Rua Teles de Menezes, 92 - Santa Branca
CEP 31565-130 - Belo Horizonte - MG - Brasil
Tel.: (31) 3439.5454 - Fax: (31) 3439.5455
E-mail: bioclin@bioclin.com.br
CNPJ: 19.400.787/0001-07 - Indstria Brasileira
EC

REP

OBELIS S.A.

Desvio
Padro (mg/dL)

0,008

0,008

0,008

Bd. Gnral Wahis, 53


1030 Brussels, Belgium

Coeficiente de
Variao (%)

1,198

0,697

0,573

ATENDIMENTO AO CONSUMIDOR
Servio de Assessoria ao Cliente
Tel.: 0800 0315454
E-mail: sac@bioclin.com.br

REPRODUTIBILIDADE
A reprodutibilidade foi calculada a partir de 20 determinaes sucessivas
durante 3 dias consecutivos, utilizando 3 amostras com concentraes
diferentes, obtendo-se os seguintes resultados:

EC
EC

REP
REP

Nmero de registro do kit de Creatinina na ANVISA: 10269360089


Reviso: Outubro/2013

REPRESENTANTE
EUROPEU AUTORIZADO

PROTEGER DA

EC

REP

PANTONE
LUZ 654
E CALOR PANTONE 5435
EC

REP

EC

REP

MARCA CE

NO UTILIZAR SE A
EMBALAGEM ESTIVER
DANIFICADA

Espaol 1/2

CREATININA

K016
INSTRUCCIONES DE USO
FINALIDAD
Mtodo para la determinacin de la Creatinina. Test colorimtrico, solamente
para uso diagnstico in vitro.
PRINCIPIO DE ACCIN
Metodologa: Jaff modificado
Colorimtrica de Punto Final: la Creatinina reacciona con el Acido Pcrico,
formando un complejo de color amarillo-enrojecido. A este pH ocurre la
mxima formacin del complejo coloreado Creatinina-Picrato asi como
con otros elementos plasmticos. Con la adicin del Reactivo cido, el pH
disminuye y el color se debe Creatinina se deshace, permanece debido a
sus cromgenos. Por diferencia entre las lecturas obtenidas en el pH acido
se obtiene el valor real de la Creatinina.
Cintica de Tiempo Fijo: la variacin en la velocidad de formacin del
Picrato alcalino, sin acidificacin del producto formado, es obtenida con
dos lecturas espectrofotomtricas en los primeros minutos. Las lecturas
obtenidas son libres de la reaccin del Picrato con cromgenos, permitiendo
as la determinacin de la Creatinina.
REACTIVOS
Nmero 1 - Reactivo Alcalino - Almacenar entre 15 y 30C. El reactivo,
en bajas temperaturas puede presentar turbiedad; para eliminarla, calentar
a 37C. Homogenizar antes de usar. Contiene: Hidrxido de Sodio
110 mmol/L, Carbonato de Sodio 75 mmol/L y surfactante.
Nmero 2 - cido Pcrico - Almacenar entre 15 y 30C. Contiene: cido
Pcrico 60 mmol/L.
Nmero 3 - Reactivo cido - Almacenar entre15 y 30C. Contiene: cido
Actico 12,25 mol/L.
Nmero 4 - Patrn - Almacenar entre 15 y 30C. Despus de la
manipulacin, almacenar en la refrigeradora entre 2 y 8C para evitar
evaporacin. Contiene: Creatinina 3 mg/dL.
PRESENTACIN
Reactivo

Presentacin 1

Presentacin 2

N 1

200 mL

1000 mL

N 2

50 mL

250 mL

N 3

10 mL

50 mL

N 4

10 mL

30 mL

EQUIPAMIENTO E INSUMOS OPERACIONALES


Espectrofotmetro o colormetro, bao maria a 37C, reloj o cronmetro,
pipetas, tubos de ensayo, Biocontrol N y Biocontrol P Bioclin. Materiales
encontrados en el mercado especializado de artculos para Laboratorios de
Anlisis Clnicos.
CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO Y TRANSPORTE
La temperatura del almacenamiento y transporte deber ser de 15 a 30C.
Mantener cubierto de la luz y evitar humedad.
CUIDADOS ESPECIALES
1- Solamente para el uso diagnstico in vitro profesional.
2- Seguir con rigor la metodologa propuesta para obtencin de resultados exactos.
3- El agua utilizada en la limpieza del material debe ser reciente y exenta de
agentes contaminantes.
4- Columnas deionizadoras saturadas liberan agua alcalina, iones diversos
y agentes oxidantes y reductores, que pueden alterar de forma significativa
los resultados.
5- El nivel de agua en el bao maria debe ser superior nivel de los reactivos
en los tubos de ensayo.
6- El Reactivo N 1 es custico, por lo que debe evitar contacto con la piel.
El Reactivo N 3 debe ser manipulado con cuidado, pues es irritante para la
piel y mucosas, pudiendo causar quemaduras leves.
7- Se recomienda la aplicacin de la ley local, estatal y federal de proteccin
ambiental para la eliminacin de reactivos y material biolgico se hace de
acuerdo con la legislacin vigente.

8- Para obtener informacin relacionada con la seguridad biolgica o en


caso de accidentes con el producto, consultar la FISPQ (Ficha de Informaciones de la Seguridad de Productos Qumicos) disponibles en el site
www.bioclin.com.br o solicitando a travs del SAC (Servicio de Asesora al
Cliente) de Quibasa.
9- No utilice el producto en caso de daos en su embalaje.
10- Es esencial que los instrumentos y equipos utilizados estn adecuadamente calibrados y sometidos a mantenimientos peridicos.
MUESTRAS
Suero o plasma obtenido con heparina, oxalato, fluoruro, citrato o EDTABioclin. El analito es estable por 07 das a temperaturas entre 2 y 8C. La
orina debe ser obtenida por un periodo de 24 horas y conservada refrigerada
hasta el momento de la dosificacin.
DESCRIPCIN DEL PROCEDIMIENTO
La Bioclin recomienda, para uso del kit, utilizar como suero control los kits
Biocontrol N y P Bioclin.
TCNICA I - PUNTO FINAL
Marcar 3 tubos de ensayo: B (Blanco), P (Patrn) y A (Muestra), y proceder
como sigue:
Blanco

Patrn

Muestra
2,0 mL

Reactivo N 1

2,0 mL

2,0 mL

gua destilada

250 mL

---

---

Muestra

---

---

250 mL

Reactivo N 4

---

250 mL

---

Reactivo N 2

500 mL

500 mL

500 mL

Homogenizar e incubar en bao maria a 37C por 10 minutos. Leer las


absorbancias de la Muestra y del Patrn en 510 nm (500 - 540 nm),
ajustando el cero con el Blanco. La absorbancia de la Muestra ser A1 y del
Patrn ser P.
En seguida adicionar:

Reactivo N 3

Blanco

Patrn

Muestra

100 mL

---

100 mL

Homogenizar y aguardar 5 minutos a temperaturas entre 15 e


30C. Leer las absorbancias A2 de la Muestra en 510 nm (500 - 540 nm),
ajustando el cero con el Blanco. La reaccin de color es estable por
30 minutos.
DOSIFICACIN EN LA ORINA
Anotar el volumen obtenido en mL, centrifugar una alicuota de la muestra
de orina a ser dosificada y diluirla 1:25 (0,1 mL de orina y 2,4 mL de agua
destilada o deionizada). En seguida, hacer la dosificacin como en la tecnica
descripta antes, omitiendo la segunda etapa (acidificacin). Multiplicar el
resultado obtenido por 25.
CALCULOS
Creatinina (mg/dL) =

A1 - A2
x3
Absorbancia del Patrn

Como la reaccin sigue la ley de Lambert-Beer, el Factor de Calibracin


puede ser usado.
Factor de Calibracin = Concentracin del Patrn (3 mg/dL)
Absorbancia del Patrn
Creatinina (mg/dL) = (A1 - A2) x Factor de Calibracin
Creatinina en Orina (mg/24h) = mg/dL x Volumen de 24 h (mL)
100

TCNICA II - MTODO CINTICO DE TIEMPO FIJO


PREPARACIN DEL REACTIVO DE TRABAJO
Mezclar una parte del Reactivo N 2 (Acido Picrico) con cuatro partes del
Reactivo N 1 (Reactivo Alcalino). Guardar en frasco mbar. Estable por
24 horas a temperaturas entre 15 y 30C. Homogenizar el Reactivo de
Trabajo antes de iniciar la tcnica.
REACCIN
Agregar 0,1 mL del Patrn o Muestra (suero, plasma o orina) a 1 mL del
Reactivo de Trabajo (previamente homogenizado), homogenizar y transferir
inmediatamente a una cubeta termostatizada a 37C. Medir las absorbancias
del Patrn y de la Muestra en 510 nm (500 - 540 nm) a los 30 y 90 segundos.
CALCULOS
Absorbancia del Patrn = Abs. 90 segundos - Abs. 30 segundos
o de la Muestra
Factor de Calibracin = Concentracin del Patrn (3 mg/dL)

Abs. del Patrn
Creatinina (mg/dL) = Abs. de la Muestra x Factor de Calibracin
DEPURACIN
Hidratar al paciente al menos con 600 mL de agua y en seguida orientarlo
para vaciar la vejiga. La depuracin de la Creatinina deber ser realizada
con el volumen total de orina colectada con 4, 12 o 24 horas, de acuerdo
con el procendimento patrn de laboratorio. En cualquier momento de ese
intervalo de tiempo, tomar una muestra de sangre. Medir el volumen total de
orina y calcular el volumen por minuto (VM).
VM = Volumen urinario de tiempo determinado (mL)
Tiempo determinado (em minutos)
Dosificar la Creatinina srica y urinaria siguiendo las metodologas
propuestas.
Hacer el clculo de la Depuracin de Creatinina:
U= Creatinina Urinaria (mg/dL)
S = Creatinina srica (mg/dL)
VM = Volumen/minuto
A = Valor de la superficie corporal del paciente en m
Depuracin de la Creatinina = U x VM
(mL/min)
S
Obs.: Este valor deber ser corregido por la superficie corporal del paciente.
Usar el nomograma de correlacin peso-altura. Multiplicar el valor de la
depuracin por 1,73 y dividir por la superfcie corporal del paciente.
Depuracin de la Creatinina = U x VM x 1,73
(mL/min./1,73m)
S
A
LIMITACIONES DEL PROCESO
El proceso cintico solamente podr ser realizado en espectrofotmetro
con cubeta termostatizada a 37C, debido al pequeo intervalo de tiempo
de reaccin. Las metodologias descriptas no deberan ser utilizadas para
muestras extremamente lipmicas.
CONTROL INTERNO DE CALIDAD
El Laboratorio Clnico debe poseer un programa interno de control de
calidad, donde procedimientos, normas, lmites y tolerancia para variaciones
sean claramente establecidos. Es importante resaltar que todos los sistemas
de medicin presentan una variabilidad analtica caracterstica, que debe
ser vigilada por los propios laboratorios. Por lo tanto, es recomendable la
utilizacin de controles, que permiten la evaluacin, la precisin y la
exactitud de las dosificaciones.

TRAZABILIDAD
El patrn del kit se puede rastrear a los materiales de referencia SRM 914
del NIST (National Institute of Standards and Technology), por lo que es
equivalente al mtodo de IDMS (Espectrometra de Masas con Dilucin
Isotpica), segn lo recomendado por el NKDEP (National Kidney Disease
Education Program).

REPRODUCTIBILIDAD
La reproductibilidad fue calculada a partir de 20 determinaciones sucesivas
durante 3 das consecutivos, utilizando 3 muestras con concentraciones
diferentes, obtenindose los siguientes resultados:

VALORES DE REFERENCIA
Los valores de referencia en mg/dL, para el presente mtodo,
fueron obtenidos por el determinacin de Creatinina en poblaciones sanas
del sexo masculino y femenino.

Suero / Plasma

Orina

Depuracin de la
Creatinina

Adulto

0,4 - 1,4 mg/dL

Recin-nacido

0,31 - 0,92 mg/dL

2 semanas - 1 ao

0,16 - 0,39 mg/dL

1 - 3 aos

0,17 - 0,35 mg/dL

3 - 5 aos

0,26 - 0,42 mg/dL

5 - 7 aos

0,29 - 0,48 mg/dL

7 - 9 aos

0,34 - 0,45 mg/dL

9 11 aos

0,32 - 0,64 mg/dL

11 - 13 aos

0,42 - 0,71 mg/dL

13 - 15 aos

0,46 - 0,81 mg/dL

Adulto (Masculino)

1500 - 2500 mg/24h


o 21 - 26 mg/kg/24h

Adulto (Femenino)

800 - 1500 mg/24h


o 16 - 22 mg/kg/24h

Nio 2 - 3 aos

6 - 22 mg/kg/24h

Nio > 3 aos

12 - 30 mg/kg/24h

Adulto (Masculino)

97 - 137
mL/min/1,73m

Adulto (Femenino)

88 - 128
mL/min/1,73m

Nio

70 - 140
mL/min/1,73m

mg/Kg peso = mg/24h dividido por el peso corporal


Para convertir los valores de mg/dL en mmol/L (SI), multiplicar por 0,0884.
Los resultados proporcionados por este kit deben ser interpretados por el
profesional mdico responsable, no siendo el nico criterio para determinar
el diagnstico y / o tratamiento del paciente.
DESEMPEO DEL PRODUCTO
CONTROL DE CALIDAD
Exatictud
COMPARACIN DE METODOS E ESPECIFICIDAD METODOLGICA
El kit de Creatinina fue comparado con otro mtodo para dosificacin
de Creatinina comercialmiente disponible. Fueron realizadas 07 anlisis y los resultados fueron evaluados. La ecuacin linear obtenida fue
Y = 1,072X - 0,056 y el coeficiente de correlacin 0,999. Con estos resultados se puede concluir que el kit presenta buena especificidad metodolgica.
Precisin
REPETIBILIDAD
La repetibilidad fue calculada a partir de 20 determinaciones sucesivas,
utilizando 3 muestras con concentraciones diferentes, obtenindose los
siguientes resultados:
Muestra 1

Muestra 2

Muestra 3

Concentracin
Promedio (mg/dL)

0,679

1,128

1,441

Desvo
Patrn (mg/dL)

0,008

0,008

0,008

Coeficiente de
Variacin (%)

1,198

0,697

0,573

Muestra 1

Muestra 2

Muestra 3

Concentracin
Promedio (mg/dL)

0,679

1,129

1,440

Desvo
Patrn (mg/dL)

0,001

0,001

0,001

Coeficiente de
Variacin (%)

0,085

0,089

0,080

Espaol 2/2

ATENDIMIENTO AL CONSUMIDOR
Servicio de Asesora al Cliente
Tel.: 0800 0315454
E-mail: sac@bioclin.com.br

Nmero de registro del kit de Creatinina en la ANVISA: 10269360089


Revisin: Octubre/2013

Sensibilidad
La sensibilidad fue calculada a partir de 20 determinaciones de uma muestra
exenta de Creatinina. El promedio encontrado fue 0,0377 mg/dL, con desvo
patrn de 0,0006 mg/dL. La sensibilidad, que indica el lmite de deteccin
del mtodo, corresponde el promedio mas 3 veces el desvo patrn, y es
igual a 0,0395 mg/dL.
Linearidad
La reaccin de color es lineal hasta la concentracin de 10 mg/dL.
Para valores mayores, diluir la muestra con Cloruro de Sodio 0,85% y repetir
la determinacin. Multiplicar el valor obtenido por el factor de dilucin.
SIGNIFICADO DIAGNSTICO
La Creatinina, sintetizada principalmente en el hgado y riones, es producida y excretada en un ritmo constante independente de la dieta, grado de
hidratacin y metabolismo proteco. Con la fallas de la funcin renal, los
datos de laboratorio proporcionan ndices seguros en cuanto a la capacidad
renal de excretar, reabsorver y secretar.
La Creatinina est elevada en la insuficiencia renal aguda y crnica, en la
obstrucin del tracto urinario, en la insuficiencia cardaca congestiva, en la
desidratacin, en el choque, en la diabetes mellitus.
Niveles disminuidos pueden ser observados: en las distrofias musculares,
desnutricin, disminuicin de la masa muscular, enfermedad renal severa.

SIMBOLOGA UNIVERSAL

NMERO DE PRUEBAS
K016-1 ... 100 Pruebas / 250 mL de muestra / 2mL de Reactivo
200 Pruebas / 125 mL de muestra / 1mL de Reactivo
K016-2 ... 500 Pruebas / 250 mL de muestra / 2mL de Reactivo
1000 Pruebas / 125 mL de muestra / 1mL de Reactivo
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
1 - JAFFE, M.: J. Phisiol. Chem. 10:381, 1886.
2 - SLOT, C.; Sand. J. Clin. Lab. Invest. 17:381, 1965.
3 - HENRY, R. J.: Clinical Chemistry - Principles and Technics, 4 Ed., Harper
and Row. New York, 1964.
4 - TODD, SANFORD, DAVIDSOHN; Diagnsticos Clnicos, 16 Ed., Editora
Manole, 1983.
5 - CARL, A. B. and EDWARD, R. A.: Tietz Textbook of Clinical Chem 2nd
ed., 1994, 1531-1539.
GARANTA DE CALIDAD
Antes de ser liberados para el consumo, todos los reactivos
Bioclin son probados por el Departamento de Control de Calidad. La calidad
de los reactivos es asegurada hasta la fecha de validad mencionada en la
caja de presentacin, si son almacenados y transportados en condiciones
adecuadas.
QUIBASA QUMICA BSICA Ltda
Rua Teles de Menezes, 92 - Santa Branca
CEP 31565-130 - Belo Horizonte - MG - Brasil
Tel.: +55 (31)3439.5454 - Fax: +55 (31) 3439.5455
E-mail: bioclin@bioclin.com.br
CNPJ: 19.400.787/0001-07 - Industria Brasilea
EC

REP

OBELIS S.A.

Bd. Gnral Wahis, 53


1030 Brussels, Belgium

EC
EC

REP
REP

EUROPEA REPRESENTANTE
AUTORIZADO

PROTEGER DEL

EC

REP

PANTONE
LUZ 654
Y CALOR PANTONE 5435
EC

REP

EC

REP

MARCADO CE

NO UTILICE SI EL
EMBALAJE ESTA
DAADA

English 1/2

CREATININE

K016
USAGE INSTRUCTIONS
FUNCTION
Method for determination of Creatinine. Colorimetric test, for in vitro
diagnostic only.
PRINCIPLE OF ACTION
Methodology: Jaffe modified
End point colorimetric: the Creatinine reacts with the Picric Acid, forming
a complex of reddish-yellow. This pH occurs in a maximum formation of the
Picric-Creatinine color complex, and, also with other plasmatic elements.
With the adding of the Acid Reagent, the pH is reduced and the correct color
creatinine is undone, remaining the cromogens color. For difference between
the readings obtained in the acid pH, obtains the real value of Creatinine.
Fixed time Kinetic: the variation on the alkaline Picric formation speed,
without acidification of the products formed, its gained through the
spectrophotometers reading on the first minutes. The readings obtained
are free from reaction with cromogens pricrate, allowing, the creatinine
determination.
REAGENTS
Number 1 - Alkaline Reagent - Store between 15 and 30C. In low
temperatures the reagent can present turbidity, to discard it heat up to 37C.
Mix before use. Contains: Sodium Hydroxide 110 mmol/L, Sodium Carbonate
75 mmol/L and surfactant.
Number 2 -Picric Acid -Store between 15 and 30C.Contains:Picric Acid
60 mmol/L.
Number 3 - Acid Reagent - Store between 15 and 30C. Contains: Acetic
Acid 12,25 mol/L.
Number 4 - Standard -Store between15 and 30C. After handling
keep in refrigerator between 2 and 8C to avoid evaporation.Contains:
Creatinine 3 mg/dL

10- It is essential that the instruments and equipments used are properly
calibrated and subjected to periodic maintenance.
SAMPLE
Serum or plasma collected with heparin, oxalate, fluoride, citrate or EDTABioclin. The analyte is stable for 7 days between 2 and 8C. The urine must
be collected in a period of 24 hours and kept in a refrigerator until the dosage
time.
PROCESS DESCRIPTION
Bioclin recommends, as control serum, Biocontrol N and P Bioclin Kits.
TECHNIQUE I - END POINT
Mark 3 test tubes with: B (Blank), P (Standard) and A (Sample), and proceed
as follows:
Blank

Standard

Sample

Reagent N 1

2,0 mL

2,0 mL

2,0 mL

Distilled Water

250 mL

---

---

Sample

---

---

250 mL

Reagent N4

---

250 mL

---

Reagent N 2

500 mL

500 mL

500 mL

Homogenize and incubate in water-bath at 37C for 10 minutes. Read the


absorbance of the Sample and the Standard at 510 nm (500 - 540 nm),
hitting the zero with the Blank. The absorbance of the Samples is A1 and
the Standard is P.
And then add:

PRESENTATION
Reagent

Presentation 1

Presentation 2

N 1

200 mL

100 0 mL

N 2

50 mL

250 mL

N 3

10 mL

50 mL

N 4

10 mL

30 mL

EQUIPMENTS AND OPERATIONAL INPUTS


Spectrophotometers or colorimeter, water-bath at 37C, watches and
stopwatches, pipettes, test tubes, Biocontrol N and Biocontrol P Bioclin. They
can be found at markets specialized in Clinical Analysis Laboratories.

Reagent N 3

Blank

Standard

Sample

100 mL

---

100 mL

Homogenize and wait for 5 minutes between 15 e 30C. Read the absorbance
A2 of the Sample at 510 nm (500 - 540 nm), hitting the zero with the Blank.
The color of the reaction is stable for 30 minutes.
URINE DOSAGE
Take note of the collected volume in mL, centrifuge a aliquot of the urine
sample to be dosed in proceed the dilution of 1:25 (0,1 mL of urine and
2,4 mL of distilled or deionized water). Then, making the determination as the
technique described above, omitting the second part (acidification). Multiple
the obtained results for 25.

TRANSPORTATION AND STORAGE CONDITIONS


The storage and transport temperatureshouldbe between 15and 30C.
Protect fromlightandavoidmoisture.

CALCULATIONS
Creatinine (mg/dL) =

SPECIAL CARE
1- For professional in vitro diagnostic use only.
2- Strictlyfollowthe methodologyproposedtoobtain exact results.
3- Waterused inmaterial cleaning must toberecent and free ofcontaminants.
4- Saturated deionizer columnsreleasealkaline water, many ions, oxidizing
agents and reducersthatmayalter the results significantly.
5- The water level in water bath must by higher than the reagent level in
test tubes.
6- The reagent N 1 is caustic, therefore you should avoid akin contact. The
reagent N 3 must be manipulated with care, because it is irritating to skin
and mucous membrane, can cause minor burns.
7- We recommend applying the local, state and federal rules for environmental
protection, so that disposal of reagents and biological material can be made
in accordance with current legislation.
8- To obtain information related to biosafety or in case of accidents with the
product, consult the MSDS (Material Safety Data Sheet) available on the
website www.bioclin.com.br or upon request by the SAC (Customer Advisory
Service) of Quibasa.
9- Do not use the product in case of damaged packaging.

According to the Lambert-Beer Law, the Calibration Factor can be used.

A1 - A2
x3
Standard Absorbance

Calibration Factor = Standard Concentration (3 mg/dL)


Standard Absorbance
Creatinine (mg/dL) = (A1 - A2) x Calibraton Factor
Creatinine in Urine (mg/24h) = mg/dL x Volume in 24h (mL)
100
TECHNIQUE II FIXED POINT KINETIC METHOD
WORKING REAGENT PREPARATION
Mixture a share of reagent N 2 (Picric Acid) with four shares of reagent N 1
(Alkaline Reagent). Store in a amber flask. Stable for 24 hours between 15
and 30C. Homogenized the Working Reagent before the technique begins.

REACTION
Add 0,1 mL of Standard or Sample (serum, plasma or urine) in 1 mL of
Working Reagent (homogenized previously), homogenize and transfer
immediately for thermostated cuvette at 37C. Measure absorbance of
Standard and Sample at 510 nm (500 - 540 nm) in 30 and 90 seconds.
CALCULATIONS
Absorbance from Standard = Abs. 90 seconds Abs. 30 seconds
or Sample
Calibration Factor = Standard Concentration (3 mg/dL)
Standard Absorbance
Creatinine (mg/dL) = Sample Absorbance x Calibraton Factor
DEPURATION
Hydrate the patient with minimum 600 mL of water, and then, orientation to
empty the bladder. The depuration of Creatinine must be carried out using
the total volume of collected urine 4, 12 or 24 hours, according to standard
procedure in the laboratory. In any moment of the chosen interval, collect
a blood sample. Measure the total volume of the urine and calculate the
volume per minute (VM).
VM = Determined time urinary volume (mL)
Determined time (in minutes)
Dose the serum Creatinine and urine according to the proposed
methodologies.
Calculate the Creatinine Depuration:
U = Urine Creatinine (mg/dL)
S = Serum Creatinine (mg/dL)
VM = Volume/minute
A = Body surface value of the patient in m2
Creatinine depuration = U x VM
(mL/min)
S
Attention: This value can be corrected to the patients body surface.
Use a chronogram of weight-height correlation. Multiply the depuration value
by 1,73 and divide by the patient body surface.
Creatinine depuration = U x VM x 1,73
(mL/min./1,73m2)
S
A
PROCEDURE LIMITATIONS
The kinetic process can only be carried out in a spectrophotometer with
thermostated cuvette at 37C, due to the small time interval of the reaction,
The methodologies described shall not be used in extremely lipemic samples.
INTERNAL QUALITY CONTROL
The Clinical Laboratory must have an internal quality control, where all
procedures, rules, limits and tolerance to variations be clearly established.
It is important to mention that all measurement systems present a
analytical variety, and it must be monitor by the laboratory. Therefore, it is
recommendable the use of controls, allowing the precision and accuracy of
the dosages.
TRACEABILITY
The kits standard is traceable to the reference material NIST (National
Institute of Standards and Technology) SRM 914, making it equivalent to the
IDMS method (Isotope Dilution Mass Spectrometry), as recommended by the
NKDEP (National Kidney Disease Education Program).
REFERENCE VALUES
Thereference valuesinmg/dL,for this method were obtained
through the determinationofCreatinine in healthy populationsofmaleand
female.

English 2/2

Serum / Plasma

Adult

0,4 - 1,4 mg/dL

Newborn

0,31 - 0,92 mg/dL

2 weeks - 1 year

0,16 - 0,39 mg/dL

1 - 3 years

0,17 - 0,35 mg/dL

3 - 5 years

0,26 - 0,42 mg/dL

5 - 7 years

0,29 - 0,48 mg/dL

7 - 9 years

0,34 - 0,45 mg/dL

9 11 years

0,32 - 0,64 mg/dL

11 - 13 years

0,42 - 0,71 mg/dL

13 - 15 years

0,46 - 0,81 mg/dL

Adult (Male)

1500 - 2500 mg/24h


or 21 - 26 mg/kg/24h

Adult (Female)

800 - 1500 mg/24h


or 16 - 22 mg/kg/24h

Children 2 - 3 anos

6 - 22 mg/kg/24h

Children > 3 anos

12 - 30 mg/kg/24h

Adult (Male)

97 - 137
mL/min/1,73m

Adult (Female)

88 - 128
mL/min/1,73m

Children

70 - 140
mL/min/1,73m

Urine

Creatinine Clearance

Sample 1

Sample 2

Sample 3

Average
Concentration (mg/dL)

0,679

1,129

1,440

Standard
Deviation (mg/dL)

0,001

0,001

0,001

Coefficient of
Variation (%)

0,085

0,089

0,080

Sensitivity
The sensitivity was calculated from 20 determinations of the sample free of
Creatinine. The average found was 0,0377 mg/dL, with standard deviation of
0,0006 mg/dL. The sensitivity, which indicates the method detection limit,
corresponds the average plus 3 times the standard deviation and is equal
to 0,0395 mg/dL.
Linearity
The color reaction is linear up to 10 mg/dL. For higher values, dilute the
sample with Sodium Choride 0,85% and repeat the determination. Multiply
the obtained value by dilution factor.
DIAGNOSTIC SIGNIFICANCE
The Creatinine, synthesized mainly in the liver and in kidney, is produced
and excrement in a constant rhythm, independently of diet, hydratation level
and protein metabolism. With the kidney function failure, the laboratorial
data proportionate secure indexes as the kidneys ability to excrement,
re-absorption and secrete.
The Creatinine is raised in the acute and chronic kidney insufficiency, in the
urine tract obstruction, congestive heart insufficiency, dehydration, chock and
mellitus diabetes.
Lower levels can be observed on: muscle dystrophy, reduction by innutrition
of the muscle mass, severe kidney disease.

mg/Kg weight = mg/24h divided by body weight


To convert the values of mg/dL in mmol/L (SI), multiplyby 0,0884.

NUMBER OF TESTS
K016-1 ... 100 Tests / 250 mL of sample / 2 mL of reagent
200 Tests / 125 mL of sample / 1 mL of reagent

The results provided by this kit must be interpreted by the medical


professional responsible, not being the only criterion for the determination of
diagnosis and / or treatment of the patient.

K016-2 ... 500 Tests / 250 mL os sample / 2 mL of reagent


1000 Tests / 125 mL of sample / 1 mL of reagent

PRODUCT PERFORMANCE
QUALITY CONTROL
Accuracy
COMPARISON OF METHODS AND METHODOLOGICAL SPECIFICITY
Creatinine kit was compared with other commercially available
methods for measurement of Creatinine. 07 analyzes were performed
and the results were evaluated. The linear equation obtained was
Y = 1,072X - 0,056, with correlation coefficient 0,999. With these results, we
can conclude that the kit shows good methodological specificity.
Precision
REPEATABILITY
The repeatability was calculated from 20 successive determinations, using
3 samples with different concentrations, obtaining the following results:
Sample 1

Sample 2

Sample 3

Average
Concentration (mg/dL)

0,679

1,128

1,441

Standard
Deviation (mg/dL)

0,008

0,008

0,008

Coefficient of
Variation (%)

1,198

0,697

0,573

REPRODUCIBILITY
The reproducibility was calculated from 20 successive determinations
for 3 consecutive days, using 3 samples with different concentrations,
obtaining the following results:

UNIVERSAL SYMBOLOGY

BIBLIOGRAPHIC REFERENCES
1 - JAFFE, M.: J. Phisiol. Chem. 10:381, 1886.
2 - SLOT, C.: Sand. J. Clin. Lab. Invest. 17:381, 1965.
3 - HENRY, R. J .: Clinical Chemistry - Principles and Technics, Ed.,Harper
and Row. New York, 1964.
4 - TODD, SANFORD, DAVIDSOHN: Diagnsticos Clnicos, 16 Ed.,Editora
Manole, 1983.
5 - CARL, A. B. and EDWARD, R.A.: Tietz Textbook of Clinical Chem 2 nd
ed., 1994, 1531 - 1539.
QUALITY ASSURANCE
Beforebeingreleasedfor consumption, all Bioclin reagents
are tested by the Department of Quality Control. The quality of reagents
isassured untilexpiration datestatedon the presentation packaging,when
storedandtransported under appropriate conditions.
QUIBASA QUMICA BSICA Ltda
Rua Teles de Menezes, 92 - Santa Branca
CEP 31565-130 - Belo Horizonte - MG - Brasil
Phone.: +55 (31) 3439.5454 - Fax: +55 (31) 3439.5455
E-mail: bioclin@bioclin.com.br
CNPJ: 19.400.787/0001-07 - Made in Brazil
EC

REP

OBELIS S.A.

Bd. Gnral Wahis, 53


1030 Brussels, Belgium
CUSTOMER SERVICE
Customer Advisory Service
Phone.: 0800 0315454
E-mail: sac@bioclin.com.br
ANVISA registration number for Creatinine kit: 10269360089

EC
EC

REP
REP

Review: October/2013

EUROPEAN AUTHORIZED
REPRESENTATIVE

KEEP AWAY

EC

REP

PANTONE
654
PANTONE 5435
FROM
SUNLIGHT
EC

REP

EC

REP

CE MARK

DO NOT USE IF
PACKAGE IS
DAMAGED