Resumo de Bioqumica II Bloco 1

Metabolismo Celular
Metabolismo conjunto de reaes que uma clula utiliza para viver.
A clula usa a energia livre de Gibbs.
- O ATP libera sua energia por uma reao de hidrlise:
ATP + H2O ADP + PI. O ATP deve estar conjugado com MG para que seja reconhecido pelas enzimas.
- Reaes que compem o metabolismo:
Degradao da Glicose: Gliclise, Ciclo do cido ctrico e Fosforilao oxidativa. Consiste num processo de oxidao que
deve estar acoplado a um processo de reduo.
GLICLISE
Consiste em duas fases: fase preparatria (de 1 a 4) e fase de pagamento
(de 5 a 10).
Passo1 Processo irreversvel, catalisado pela enzima hexoquinase, a
Glicose fosforilada tornando-se Glicose-6-fosfato.
Passo2 A Glicose-6-fosfato convertida em Frutose-6-fosfato.
Passo3 Processo irreversvel, catalisado pela enzima fosfofrutoquinase 1
(PFK1) a Frutose-6-fosfato e novamente fosforilada para formar Frutose
1,6-bifosfato.
Passo 4 A Frutose-1,6-bifosfato quebrada para liberar o
Gliceraldedo-3-fosfato e Diidroxicetona fosfato.
Passo 5 A Diidroxicetona fosfato isomerizada em Gliceraldedo-3fosfato e com isso termina a Primeira fase da gliclise.
Note de duas molculas de ATP precisam ser investidas, aumentando o
contedo de energia livre dos intermedirios.
Passo 7 ao 10 Ocorre a liberao de energia quando ambas as
molculas de 1,3-bifosfatoglicerato so convertidas em duas molculas
de Piruvato. Passo 10 catalisado pelo piruvato quinas..
O produto lquido da gliclise so duas molculas de ATP por molcula
de glicose empregada, uma vez que duas molculas de ATP so
investidas na fase preparatria. Alm disso, quatro eltrons so transferidos de duas molculas do gliceraldedo 3-fosfato
para duas molculas de NAD.
Regulao:
A glicose em excesso convertida em glicognio. A regulao evita o acmulo de intermedirios e o desperdcio de
energia pela clula. Todos os processos de regulao atuam nas enzimas. As rotas metablicas so reguladas por sua ao
irreversvel.
Trs reaes da gliclise so muito exergnicas e devido a isso so irreversveis: as catalisadas pela hexoquinase, PFK1 e
piruvato quinase. Logo, a clula regula a ativao da
glicose nessas trs enzimas.
Hexoquinase catalisa a entrada de glicose na via
glicoltica. Sofre retroinibio, ou seja, inibida pelo seu
produto em excesso.
PFK1 o ATP inibe a PFK1, diminuindo sua afinidade
pela frutose-6-fosfato.
Alm disso, o Citrato um regulador alostrico da PFK1,
pois concentraes altas de citrato aumentam o efeito
inibidor do ATP, o que faz diminuir ainda mais o fluxo de
glicose.
O citrato um sinal intracelular de que a clula est
suprindo adequadamente suas necessidades energticas.
Se este citrato esta agindo, significa que tem alta
concentrao de glicose.
Isoenzimas:
Grupo de enzimas que catalisam a mesma reao, porm com diferenas na estrutura primria que alteram suas
propriedades. Com isso a clula se adapta ao organismo.
Hexoquinase e Glucoquinase A Hexoquinase (msculo) tm muito mais afinidade pelo substrato que a Glucoquinase
(fgado).

Essa diferena existe por que o fgado faz um acmulo

de glicognio, logo precisa de glicose para o seu
metabolismo e para reserva de glicognio.
Alm disso, a hexoquinase inibida pelo seu produto, e
a glucoquinase no.
Quando a glicose entra na clula, a hexoquinase e a
glucoquinase transformam-na em Glicose-6-fosfato,
fazendo com que no seja reconhecida pelo GLUT, que
seu transportador para dentro da clula. Porm, o fgado,
no fica captando glicose sempre, pois outros rgos
tambm precisam dela. Se seu nvel comea a diminuir, o
glucagon e a insulina regulam sua liberao no sangue.

PFK O ATP diminui a afinidade dessa enzima pela frutose. Quando se adiciona AMP aumenta um pouco essa
afinidade.
Quando o nvel de glicose no sangue diminui, o
hormnio glucagon avisa ao fgado para produzir
e liberar mais glicose e diminuir o seu consumo
para satisfazer suas necessidades prprias.
A frutose 2,6-bifosfato se liga ao stio alostrico na
PFK1, aumentando a afinidade da enzima pelo
substrato e diminui sua afinidade pelos inibidores
ATP e citrato..

FORMAO DO ACETIL CO-A

Antes de entrar no Ciclo de Krebs, o piruvato
oxidado para liberar Acetil-CoA e CO2 por um
conjunto de estruturas chamado complexo da
piruvato desidrogenase (PDH). Ocorrendo uma
descarboxilao oxidativa com a remoo do
grupo carboxila e formao do NADH e CO2.
Esse acetil Ca no consumido e sua formao guarda muita

energia.
Complexo da piruvato desidrogenase (PDH) Complexo de enzimas E1 + E2 + E3.
1 - E1: O piruvato descarboxilado formando um carbnion. necessrio ento a TPP para transportar o carbanion.
2 - O carbanion reage com a lipoamida
3 - A enzima E2 incorpora o Ca.
4 - A E3 regenera a forma reduzida para oxidada e transfere os eltrons da E2 para o NAD.

Reguladores da PDH
- Inibio por produto inibida por altas concentraes de NADH e AcetilCoA.
- Modificao covalente Regulada pela E1, ativa na forma defosforilada (regulada pela piruvato desidrogenase
fosfatase) e inibida na forma fosforilada (regulada pela piruvato desidrogenase kinase).
Quando a piruvato desidrogenase fosfatase esta ativa, a piruvato desidrogenase kinase esta inativa, e vice-versa.

CICLO DE KREBS

Etapa 1 Condensao: realizada na

matriz
mitocondrial.
Processo
irreversvel regulado pela enzima
citrato sintase, formando Citrato.
Etapa 2 Isomerizao: processo
reversvel. 1 desidratao e 2
hidratao
pelo
intermedirio
Aconitase. Formando Isocitrato.
Etapa 3 Descarboxilao oxidativa:
formao de NADH, irreversvel.
Etapa 4 Descarboxilao oxidativa:
incorpora uma Ca e forma NADH,
tambm irreversvel.
Etapa 5 Libera ATP (ou GTP).
Etapa 6 Desidrogenao: liberao
de FADH2, reversvel.
Etapa 7 Hidratao.
Etapa 8 Desidrogenao.
A maior parte da sntese de ATP
ainda no aconteceu.
Reao
anaplerticas

Os
intermedirios do Ciclo do cido
ctrico podem ser usados para
biossntese. medida que so
removidos
para
servirem
de
precursores biossinteticos, eles so
repostos por meio de reaes
anaplerticas.

Regulao do Ciclo do cido Ctrico:

As reaes irreversveis so reguladas.
PDH fortemente inibido por ATP e
AcetilCoA e NADH. Porm a atividade
ativada quando a demanda energtica volta
a ser alta e necessrio um fluxo maior de
AcetilCoA para o ciclo.
No ciclo, trs passos so influenciados por
inibidores:
citrato
sintase,
isocitrato
desidrogenase e -cetoglutarato desidrogenase.
Cada um deles pode ser um passo limitante
na reao global.
A acumulao dos produtos inibe todos
os trs passos. J os ons Clcio e a demanda
de ATP ativam as enzimas.

OBS: cidos Graxos de cadeia longa

podem ser usados como precursores de
AcetilCoA atravs da oxidao. Esses
cidos graxos inibem a transio de
Piruvato em Acetil CoA, pois no momento
de degradao do cido graxo, a clula no
degrada glicose.

MITOCNDRIA
Gliclise Citoplasma
Ciclo e Cadeia Mitocndria.
Organela com duas membranas: externa bem permevel e interna seletiva.
Os eltrons passam atravs de uma srie de transportadores ligados a membrana. Existem molculas transportadoras de
eltrons que os recebem e continuam estveis. So elas:
NAD
Flavoprotenas
Ubiquinona tambm chamada de coenzima Q. Hidrofbica, na membrana interna. Pode aceitar um eltron formando
a semiquinona ou dois eltrons formando a ubiquinol. Difunde-se livremente na camada lipdica mitocondrial. Como
transporta tanto prtons quanto eltrons, ela desempenha um papel central no acoplamento de eltrons ao movimento de
prtons.
Citocromos existem trs classes: a b e c. Seu grupo Heme ajuda a hemoglobina a transportar oxignio.
Protenas ferro-enxofre o ferro est presente no na heme, mas associado a tomos de enxofre, formando stios de
coordenao.
Cada um desses elementos forma a Cadeia Respiratria., retirando eltrons do NADH, transformando-os em ATP.
CADEIA RESPIRATRIA
Os carregadores de eltrons funcionam em ordem crescente do potencial de reduo, uma vez que os eltrons fluem
espontaneamente dos carregadores de
menor potencial para os de maior.
Cada complexo responsvel pela
retirada do eltron de uma molcula e
transferi-lo para outro. Os complexos I e II
catalisam a transferncia de eltrons para a
ubiquinoina a partir do NADH e do
succinato. O complexo III transporta
eltrons da ubiquinona at o citocromo c, e
o complexo IV completa a seqncia
transferindo eltrons do citocromo c para o
O2.
Na ausncia de O2 os complexos ficam
reduzidos no realizando a transferncia de
eltrons, pois o O2 que o aceptor final de
eltrons.
Durante a transferncia de eltrons do
Complexo II a variao de energia livre
pequena, ao contrrio dos outros.
Durante o processo do Succinato no
Complexo II, ele usa o FAD, pois este mais
fcil de reduzir j que o succinato no gera
energia suficiente para reduzir uma
molcula de NAD. Gerando FADH2 e
fumarato.
Em cada complexo I, III e IV h uma
grande variao de energia livre, que usada
para bombear prtons da matriz da
membrana criando um gradiente de
concentrao de prtons. Criando uma
energia potencial.
Fora Prton-Motora uso do potencial
de prtons que a clula usa para a sntese de
ATP.
Na fosforilao oxidativa os prtons
voltam para a matriz mitocondrial, pois a
ATPsintase (F1/Fo) responsvel em transformar essa energia potencial de sada de prtons da matriz, em energia qumica,
formando ATP, atravs da entrada de H na matriz mitocondrial.
Inibidores de Cadeia Respiratria:
Retenona (complexo I), Antimeina A (complexo III) e CN- ou CO (complexo IV).

Sntese de ATP:
A transferncia de eltrons libera e a fora prton-motriz libera energia livre mais que suficiente para formar ATP.
O modelo quimiosmtico a fora prton-motora dirige a sntese de ATP medida que os prtons fluem passivamente de
volta para a matriz atravs de um poro para prtons associado a ATP sintase. Essa teoria explica a dependncia da sntese de
ATP na mitocndria do transporte de eltrons. Quando o fluxo de prtons para dentro da matriz atravs da ATPsintase
bloqueado, no existe outro caminho para o retorno de prtons, e a continua extruso de prtons provocada pela atividade
da cadeia respiratria gera um grande gradiente de prtons. A fora prton-motriz aumenta at que a energia livre do
bombeaemtno de prtons para fora da matriz contra essa gradiente se iguale ou exceda a energia liberada pela transferncia
de eltrons do NADH para o O2..
Entretanto,
em
certas condies e
reagentes
podem
desacoplar
a
oxidao
da
fosforilao. Certos
compostos causam o
desacoplamento sem
romper a estrutura
mitocondrial: DNP e FCCP: cidos fracos que se difundem
atravs da membrana da mitocndria. Aps entrarem na matriz mitocondrial na forma protonada, eles liberam prton, e
com isto dissipam a gradiente de prtons.
Fuga de eltrons:
Os eltrons chegam matriz mitocondrial e reagem com o oxignio criando. Porm existem enzimas especiais da prpria
mitocndria que controlam esses radicais.
Quanto mais a mitocndria trabalhar, mais radicais ela produz. Esse estgio de produo de radicais pela alta atividade
chamado de Stress Oxidativo.
Acoplamento Mitocondrial:
A cadeia respiratria e a sntese de ATP ocorrem simultaneamente e correlacionadas, porm com a adio de alguns
compostos ocorre o desacoplamento dos processos.
DNP com o aumento da concentrao de prtons, o DNP protonado e sai de forma ionizada, podendo assim
atravessar a membrana externa. Com esse seqestro de prtons ele altera o gradiente da membrana interna, desativando a
ATPsintase, e ativa a cadeia respiratria causando o desacoplamento.
Se no houver essa compensao pela cadeia Respiratria saem citocromos da mitocndria pelo citoplasma, indicando
uma morte celular por apoptose.
FCCP realiza o mesmo processo da DNP, a energia que antes era utilizada para a sntese de ATP, passa a ser liberada na
forma de calor.
VCP protena desacopladora, presente em algumas mitocndrias, tambm liberam H para o citoplasma, diminuindo a
atividade da ATPsintase.
ATPsintase 2 domnios, que possuem vrias subunidades entre essas esto o stio ativo da enzima que vai sintetizar
ATP em cada etapa o ciclo cataltico da enzima um dos 3 stios encontra-se em uma das 3 possibilidades.
Aberto: deixa ATP sair
Fechado: sntese de ATP
Frouxo: forma ADP + PI.
Cada vez que os stios se modificam a enzima precisa de energia, que proveniente da dissipao do H, fazendo a poro
Fo girar, gerando energia.
No existe regulao sofisticada na sntese de ATP. O que ir regular a disponibilidade de ADP e Pi.
Translocadores de ADP/ATP: Embora o papel primrio do gradiente de prtons da mitocndria seja o de fornecer energia
para a sntese de ATP, a fora prton-motriz tambm comanda vrios processos de transporte essenciais fosforilao
oxidativa. Fosfatotranslocase (simporte) e adenina nucleotdeo translocase (antiporte). Ligando gliclise a fosforilao
oxidativa.
Lanadeira de Malato/Aspartato: NADH -> os eltrons presentes nele iro entrar na mitocndria via Malato, sofre
processos e liberam seus eltrons e saem da mitocndria na forma de aspartato. (essa lanadeira esta presente nas clulas do
fgado, rim e corao.)
Lanadeira Glicerol-3-fosfato: utilizada pelas clulas do crebro e msculo. O rendimento energtico menor pois o
NADH vai originar FADH2. Ocorre a reduo da dihidroxicetona em glicerol-3-fosfato e outra enzima realiza o processo
inverso, liberando os eltrons na forma de FADH2 na mitocndria.

Os msculos acumulam ATP na forma de fosfocreatina, que ser degradada na ausncia ou baixa concentrao de O2. Se
no for suficiente, ele far respirao anaerbica.