EXTRACCION DE PROTEINA DE LA HARINA DE QUINUA Pesamos 10g de harina de quinua.
Se le coloco en un matraz Erlenmeyer de 250ml, aadimos 100mL de una solucin
de NaCl al 10 %, agitando vigorosamente durante 30 min.
Lo pusimos en refirgeracion durante 24h.luego filtramos con una gasa.
PRECIPITACION POR ADICION DE SALES DE METALES PESADOS
Se preparo una batera de 4 tubos de ensayo y codifquelos de 1 al 4.
Adicionamos 2 ml de la solucin de protena de quinua.
Se aadi 2 ml de acetato de plomo en los dos primeros tubos de ensayo y
homogeniza y observamos las reacciones.
Aadir 2 ml de la solucin de protena de la quinua en un tubo de ensayo.
Se aadi 2 ml de sulfato cuproso en los dos ltimos tubos d ensayo y homogeniza y observe las reacciones.
Resultados:
PREPARACIN DE LA SOLUBILIZACINDE AISLADO DE PROTENA
A refrigeracin: Aislado de protena de Quinua se prepar segn Alsohaimy et al. (2007).se pes 50 g de harina de quinua.
50 gramos de harina de quinua se suspendi en 500 ml de agua destilada, midiendo
el ph este daba un valor de Ph= 7.
y se ajust el pH 9 ,con 2mL de NaOH 1 N.
La suspensin se agit durante 1 h manteniendo el pH en el valor determinado para
alcanzar el nivel mximo de solubilizacin.
La muestra se puso en refrigeracin durante 24h. La concentracin de protenas se
midi en el sobrenadante por la adicion 2 ml de H2SO4 (cido sulfrico al 10%) Se recogi el sobrenadante, y el valor de pH se ajust a 4,5 para precipitar la protena. La suspensin se le dejo en reposo durante 24 horas. El precipitado se recogi, se le lavo con agua destilada y el precipitado se la puso en placas Petri, para luego llevarlos a la estufa a 40 C durante 24 horas. Despus de trancurrido el tiempo se la saco de la estufa y la molio en un mortero. A temperatura de 40 C : Pesamos 50 gramos de harina de quinua. Se midio 500mL de agua destilada, se le ajusto el Ph=9 con 1.5 ml de NaOH,la harina de quinua se suspendio en el agua destilada, y se ajust el pH 9 con 2 ml de NaOH 1 N. La suspensin se agit durante 1 h manteniendo el pH en el valor determinado para alcanzar el nivel mximo de solubilizacin. La muestra se someti al bao mara a una temperatua de 40 C durante 45 min. La concentracin de protenas se midi en el sobrenadante por la adicion de 1ml H2SO4 (cido sulfrico al 10%) precipitacin con cido de la protena solubilizada. Se recogi el sobrenadante, y el valor de pH se ajust a 4 para precipitar la protena. . El precipitado se recogi, se le lavo con agua destilada y el precipitado se la puso en placas Petri, para luego llevarlos a la estufa a 40 C durante 24 horas. Despus de trancurrido el tiempo se la saco de la estufa y la molio en un mortero.
Con adicion de metabisulfito
Se pes 0.5 gramos de metabisulfito al 0.5% para 500ml Pesamos 50 gramos de harina de quinua. Se midio 500mL de agua destilada, en donde se diluyo el metabisulfito. harina de quinua se suspendi en 500 ml de agua destilada,midiendo el ph este daba un valor de Ph= 7. Y se le ajusto el Ph=9 con 3ml de de NaOH 1 N. La suspensin se agit durante 1 h manteniendo el pH en el valor determinado para alcanzar el nivel mximo de solubilizacin. La muestra se someti al bao mara a una temperatua de 40 C durante 45 min. La concentracin de protenas se midi en el sobrenadante por la adicion de 4 gotas H2SO4 concentrado precipitacin con cido de la protena solubilizada. Se recogi el sobrenadante, y el valor de pH se ajust a 4 para precipitar la protena. . El precipitado se recogi, se le lavo con agua destilada y el precipitado se la puso en placas Petri, para luego llevarlos a la estufa a 40 C durante 24 horas. Despus de trancurrido el tiempo se la saco de la estufa y la molio en un mortero. PUNTO ISOELECTRICO DE LA HARINA DE QUINUA Precipitacin de solucin Pesamos 1.362g de protena de la quinua obtenida anteriormente. Se le adiciono 50 ml de agua destilada para suspender la protena. Le adicionamos
25 ml de NaOH al 1N y agitamos
lentamente para evitar la
formacin de espuma, hasta disolver por completo la protena.
Le adicionamos 25 ml de cido actico 1M y agitamos cuidadosamente. Le medimos el ph el cual nos dio un valor de 14 . despus le ajustamos en ph a neutro en el cual le adicionamos 4.5 ml de acido acetico al 1M .
Determinacin del punto isoelctrico de la protena de quinua
Armamos una bateria de nueve tubos de ensayo y las codificamos del 1 al 9.
Tubo 1: en este tubo le adicionamos 4ml de agua destilada y 0,5ml de acido
acetico al 0.01M. midiendo el ph esta nos dio un valor de 5. Despus se le adiciono
0.5mL
de
la
solucin
preparada
suavemente y observamos los resultados.
anteriormente.
Agitamos
Tubo 2: en este tubo le adicionamos 4.4ml de agua destilada y 0,1ml de acido
acetico al 0.1M. midiendo el ph esta nos dio un valor de 4.5. Despus se le adiciono 0.5mL de la solucin preparada anteriormente. . Agitamos suavemente y observamos los resultados.
Tubo 3: en este tubo le adicionamos 4.3ml de agua destilada y 0,2ml de
acido acetico al 0.1M. midiendo el ph esta nos dio un valor de 4.5. Despus se le adiciono 0.5mL de la solucin preparada anteriormente. . Agitamos suavemente y observamos los resultados.
Tubo 4: en este tubo le adicionamos 3.7ml de agua destilada y 0,8ml de
acido acetico al 0.1M. midiendo el ph esta nos dio un valor de 4. Despus se le adiciono 0.5mL de la solucin preparada anteriormente. . Agitamos suavemente y observamos los resultados.
Tubo 5: en este tubo le adicionamos 3.5ml de agua destilada y 1ml de acido
acetico al 1M. midiendo el ph esta nos dio un valor de 3. Despus se le adiciono 0.5mL de la solucin preparada anteriormente. . Agitamos suavemente y observamos los resultados.
Tubo 6: en este tubo le adicionamos 2.5ml de agua destilada y 2ml de acido
acetico al 1M. midiendo el ph esta nos dio un valor de 3. Despus se le adiciono 0.5mL de la solucin preparada anteriormente. . Agitamos suavemente y observamos los resultados.
Tubo 7: en este tubo le adicionamos 0.5ml de agua destilada y 3ml de acido
acetico al 1M. midiendo el ph esta nos dio un valor de 2. Despus se le adiciono 0.5mL de la solucin preparada anteriormente. . Agitamos suavemente y observamos los resultados.
Tubo 8: en este tubo le adicionamos 3.9ml de agua destilada y 0.8ml de acido
acetico al 2M. midiendo el ph esta nos dio un valor de 2. Despus se le adiciono 0.5mL de la solucin preparada anteriormente. . Agitamos suavemente y observamos los resultados.
Tubo 9: en este tubo le adicionamos 3.7ml de agua destilada y 1ml de acido
acetico al 2M. midiendo el ph esta nos dio un valor de 2. Despus se le adiciono 0.5mL de la solucin preparada anteriormente. . Agitamos suavemente y observamos los resultados.