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INSTITUTO DE QUMICA
DEPARTAMENTO DE TECNOLOGIA DE PROCESSOS QUMICOS
2015
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I- Introduo
gua estril no encontrada na Natureza. Ela recebe sua flora microbiana das mais variadas
fontes: ar, solo, guas residurias, resduos orgnicos, plantas, animais mortos, etc. Isto
significa que a gua pode conter micro-organismos de vrias espcies, patognicas ou no. O
numero de espcies presentes depende da fonte contaminante.
A anlise microbiolgica consiste na pesquisa do chamado grupo coliforme que, quando
presente, evidencia uma possvel contaminao fecal. As principais caractersticas do grupo
coliforme so: bastonetes Gram-negativos, no esporulados, aerbios ou anaerbios
facultativos, que no so inibidos por sais biliares ou pelo corante verde brilhante e so
capazes de fermentar lactose com produo de aldedo, cido e gs dentro de 48h a 35oC. O
grupo inclui tanto espcies de bactrias originrias do trato gastrintestinal de humanos e
outros animais de sangue quente, como tambm espcies no entricas. Por esse motivo, a
presena de bactrias do grupo coliforme menos representativa como indicao da
contaminao fecal, do que a enumerao de coliformes fecais ou Escherichia coli. Embora a
presena do grupo coliforme em amostras de gua seja considerada uma indicao de
contaminao.
O grupo de coliformes fecais representa os membros do grupo coliforme capazes de fermentar
a lactose com produo de gs, em 24h a 44,5oC. Esta definio teve como objetivo selecionar
os coliformes do trato gastrintestinal. Atualmente sabe-se que o grupo de coliformes fecais
inclui pelo menos trs gneros: Escherichia, Enterobacter e Klebsiella. Entretanto, dois
desses gneros (Enterobacter e Klebsiella) incluem cepas de origem no fecal. Logo, a
existncia de coliformes fecais em uma determinada amostra de gua pode no significar uma
contaminao fecal. Cabe ressaltar que a presena de coliformes fecais em uma determinada
amostra de gua muito mais representativa da contaminao por fezes do que a de
coliformes totais, dada alta incidncia de E. coli dentro do grupo fecal.
Dentre as bactrias de habitat fecal, pertencente ao grupo de coliformes fecais, a E. coli a
mais conhecida e a mais facilmente diferenciada dos no fecais. Todos os demais membros do
grupo tem uma associao duvidosa com a contaminao fecal. Portanto, a enumerao da E.
coli o melhor indicador de contaminao fecal conhecido.
A Contagem Padro de Bactrias realizada visando conhecer a densidade de bactrias na
gua, tendo em vista que um aumento considervel da populao bacteriana pode
comprometer a deteco de organismos coliformes. Embora a maioria dessas bactrias no
seja patognica, pode representar riscos a sade, como tambm, deteriorar a qualidade da
gua, provocando odores e sabores desagradveis e a produo de limo ou pelculas.
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1 Prtica
I-Teste Presuntivo de Coliformes Totais:
1-Objetivo: verificar a fermentao da lactose com produo de gs nos tubos inoculados.
2-Meio de cultura: Caldo Lauril Sulfato Triptose (LST)
3-Procedimento: Inoculao de trs sries de tubos
1 - Inocular 10 mL de amostra em tubos (3 ou 5) contendo 10 mL do caldo LST em
concentrao dupla e tubos de Durhan.
2 - Inocular 1 mL de amostra em tubos (3 ou 5) contendo 10 mL do caldo LST em
concentrao simples e tubos de Durhan.
3 - Inocular 0,1 mL de amostra em tubos (3 ou 5) contendo 10 mL do caldo LST em
concentrao simples e tubos de Durhan.
4 - Incubao: 35oC/48 horas.
5 - Contagem: verificar a produo de gs nos tubos de Durhan e anotar os tubos
positivos de cada srie.
2 Prtica
I-Teste Confirmativo de Coliformes Totais
1-Objetivo: evidenciar o crescimento dos coliformes no caldo verde-brilhante. O verdebrilhante inibe o crescimento dos outros micro-organismos que fermentam a lactose e no so
do grupo coliforme.
2-Meio de cultura: Caldo Verde-Brilhante
3-Procedimento: Transferir uma alada bem carregada de cada tubo de LST onde houve
produo de gs para tubos de caldo verde-brilhante contendo tubos de Durhan.
4-Incubao: 35oC/48 horas.
5-Contagem de coliformes totais: verificar a produo de gs nos tubos de Durhan e anotar os
tubos positivos, confirmativos da presena de coliformes totais. Determinar o NMP/ml
utilizando uma tabela de NMP apropriada.
Concluso:
Padro de potabilidade, segundo a PORTARIA N 2.914, DE 12 DE DEZEMBRO DE 2011 do Ministrio da Sade (Anexo 1).