ESPECTROSCOPA DE RESONANCIA MAGNTICA NUCLEAR

La espectroscopia de RMN fue desarrollada a finales de los aos cuarenta para estudiar los
ncleos atmicos. En 1951, los qumicos descubrieron que la espectroscopia de resonancia
magntica nuclear poda ser utilizada para determinar las estructuras de los compuestos orgnicos.
Esta tcnica espectroscpica puede utilizarse slo para estudiar ncleos atmicos con un nmero
impar de protones o neutrones (o de ambos). Esta situacin se da en los tomos de 1H, 13C, 19F y
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P. Este tipo de ncleos son magnticamente activos, es decir poseen espn, igual que los
electrones, ya que los ncleos poseen carga positiva y poseen un movimiento de rotacin sobre un
eje que hace que se comporten como si fueran pequeos imanes.
En ausencia de campo magntico, los espines nucleares se orientan al azar. Sin embargo cuando
una muestra se coloca en un campo magntico, tal y como se muestra en la siguiente figura, los
ncleos con espn positivo se orientan en la misma direccin del campo, en un estado de mnima
energa denominado estado de espn , mientras que los ncleos con espn negativo se orientan
en direccin opuesta a la del campo magntico, en un estado de mayor energa denominado
estado de espn

.
Existen ms ncleos en el estado de espn que en el pero aunque la diferencia de poblacin no
es enorme s que es suficiente para establecer las bases de la espectroscopia de RMN.
La diferencia de energa entre los dos estados de espn y , depende de la fuerza del campo
magntico aplicado Ho. Cuanto mayor sea el campo magntico, mayor diferencia energtica habr
entre los dos estados de espn.

Cuando una muestra que contiene un compuesto orgnico es irradiada brevemente por un pulso
intenso de radiacin, los ncleos en el estado de espn son promovidos al estado de espn .
Esta radiacin se encuentra en la regin de las radiofrecuencias (rf) del espectro electromagntico
por eso se le denomina radiacin rf. Cuando los ncleos vuelven a su estado inicial emiten seales

cuya frecuencia depende de la diferencia de energa () entre los estados de espn y . El

espectrmetro de RMN detecta estas seales y las registra como una grfica de frecuencias frente
a intensidad, que es el llamado espectro de RMN. El trmino resonancia magntica nuclear
procede del hecho de que los ncleos estn en resonancia con la radiofrecuencia o la radiacin rf.
Es decir, los ncleos pasan de un estado de espn a otro como respuesta a la radiacin rf a la que
son sometidos.
La siguiente ecuacin muestra la dependencia entre la frecuencia de la seal y la fuerza del campo
magntico H0 (medida en Teslas, T).
E = h

h H0

Donde = radio giromagntico

El valor del radio giromagntico depende del tipo de ncleo que se est irradiando; en el caso del
1
H es de 2.675 x 108 T-1s-1. Si espectrmetro de RMN posee un imn potente, ste debe trabajar a
una mayor frecuencia puesto que el campo magntico es proporcional a dicha frecuencia. As por
ejemplo, un campo magntico de 14.092 T requiere una frecuencia de trabajo de 600 MHz.
Hoy en da los espectrmetros de RMN trabajan a 200,300, 400, 500 y 600 MHz.
A continuacin, se muestra de forma esquemtica los principales componentes de un equipo para
medidas de resonancia magntica nuclear.

Como se observa, el espectrmetro de RMN consta de cuatro partes:

1. Un imn estable, con un controlador que produce un campo magntico preciso.
2. Un transmisor de radiofrecuencias, capaz de emitir frecuencias precisas.
3. Un detector para medir la absorcin de energa de radiofrecuencia de la muestra.
4. Un ordenador y un registrador para realizar las grficas que constituyen el espectro de RMN.
Para obtener un espectro de RMN, se coloca una pequea cantidad del compuesto orgnico
disuelto en medio mililitro de disolvente en un tubo de vidrio largo que se sita dentro del campo
magntico del aparato. El tubo con la muestra se hace girar alrededor de su eje vertical.
En los aparatos modernos el campo magntico se mantiene constante mientras un breve pulso de
radiacin rf excita a todos los ncleos simultneamente. Como el corto pulso de radiofrecuencia
cubre un amplio rango de frecuencias los protones individualmente absorben la radiacin de
frecuencia necesaria para entrar en resonancia (cambiar de estado de espn). A medida que dichos
ncleos vuelven a su posicin inicial emiten una radiacin de frecuencia igual a la diferencia de

energa entre estados de espn. La intensidad de esta frecuencia disminuye con el tiempo a medida
que todos los ncleos vuelven a su estado inicial.
Un ordenador recoge la intensidad respecto al tiempo y convierte dichos datos en intensidad
respecto a frecuencia, esto es lo que se conoce con el nombre de transformada de Fourier (FTRMN). Un espectro FT-RMN puede registrarse en 2 segundos utilizando menos de 5 mg de
muestra.
Resonancia magntica nuclear de 1H. Apantallamiento o proteccin magntica por los
electrones.
Hasta ahora se ha descrito el concepto de resonancia de un ncleo aislado dentro de un campo
magntico, pero en realidad los ncleos, como pueden ser los protones o los carbonos que forman
las molculas orgnicas, no se encuentran aislados sino que estn rodeados de electrones que los
protegen parcialmente del campo magntico externo al que se ven sometidos. Los electrones se
mueven generando un pequeo campo magntico inducido que se opone al campo magntico
externo.
En cualquier molcula la nube electrnica que existe alrededor de cada ncleo acta como una
corriente elctrica en movimiento que, como respuesta al campo magntico externo, genera una
pequea corriente inducida que se opone a dicho campo. El resultado de este hecho es que el
campo magntico que realmente llega al ncleo es ms dbil que el campo externo, por tanto, se
dice que el ncleo est protegido o apantallado. Este apantallamiento es muy importante desde el
punto de vista experimental ya que el campo magntico efectivo (Hef) que siente un protn dentro
de una molcula es siempre menor que el campo externo, y por lo tanto, para que el ncleo entre
en resonancia dicho campo externo debe ser mayor.
Hef = Ho - Hloc
Si todos los protones ( 1H) de una molcula orgnica estuvieran apantallados de igual forma, todos
entraran en resonancia con la misma combinacin de frecuencia y campo magntico. Sin
embargo, los protones se hallan dentro de entornos electrnicos diferentes y, por tanto, se
encuentran diferentemente protegidos o apantallados.
Por ejemplo, en el metanol el tomo de oxgeno retira densidad electrnica del entorno electrnico
que rodea al protn del grupo hidroxilo, quedando este tomo de hidrgeno menos protegido que
los protones del grupo metilo. La consecuencia es que el protn del grupo hidroxilo resuena a un
campo magntico menor que los protones del grupo metilo.

Por lo general, los efectos de proteccin, o apantallamiento, de las nubes electrnicas que rodean
a cada protn son diferentes, lo que provoca diferentes frecuencias de emisin. El resultado es un
espectro de diversas frecuencias donde cada conjunto de ncleos especficos da origen a una
seal nica de RMN. As pues, un espectro de RMN es una grfica de la intensidad de seal en
funcin de la frecuencia de la energa electromagntica que liberan los diversos ncleos de una
muestra.
Las variaciones en las frecuencias de absorcin de resonancia magntica nuclear, que tienen lugar
debido al distinto apantallamiento de los ncleos, reciben e nombre de desplazamientos
qumicos (unidades ppm).
Espectroscopia de resonancia magntica nuclear de 13C
La resonancia magntica nuclear de 13C es complementaria a la de 1H. Esta ltima tcnica se
utiliza para deducir la estructura del esqueleto carbonado observando los entornos magnticos de
los tomos de hidrgeno, mientras que la espectroscopia de RMN de 13C determina el entorno
magntico de los tomos de carbono.

Aproximadamente el 99% de los tomos de carbono en una muestra natural son del istopo 12C.
Este istopo posee un nmero par de protones y un nmero par de neutrones, por tanto, no tiene
espn magntico y no puede dar lugar a seales de resonancia magntica nuclear. El istopo de
13
C menos abundante tiene un nmero impar de neutrones, lo que le confiere un espn magntico
de 172, igual al del protn.
La espectroscopia de resonancia magntica nuclear de 13C es menos sensible que la de 1H debido
a que slo el 1% de los tomos de carbono posee espn y a que, adems, la frecuencia de
resonancia del 13C, para un campo magntico dado, es la cuarta parte de la que se da en la RMN
de 1H.
Los desplazamientos qumicos del carbono son de 15 a 20 veces mayores que los del hidrgeno
debido a que el carbono est directamente unido a los tomos que resultan ser bien apantallantes
o desapantallantes. Por ejemplo, el protn de un aldehdo absorbe a 9.4 ppm en el espectro de 1H
mientras que el carbono de carbonilo absorbe a 180 ppm en el espectro de 13C.
Adems, las seales en el espectro de 13C son lneas verticales, es decir, no hay desdoblamientos
de espn-espn. Esto se debe a que slo el 1% de los tomos de carbono entran en resonancia, y
por tanto, existe una probabilidad muy pequea de que un ncleo de 13C est adyacente a otro
ncleo de 13C.
La espectroscopia de RMN puede utilizarse, entre otras cosas, para estudiar mezclas de analitos,
para comprender efectos dinmicos como el cambio en la temperatura y los mecanismos de
reaccin, y es una herramienta de valor incalculable para la comprensin de la estructura y funcin
de las protenas y los cidos nucleicos. Se puede aplicar a una amplia variedad de muestras, tanto
en solucin como en estado slido.
El rango de posibles aplicaciones de la resonancia magntica nuclear es demasiado amplio para
incluir un lista completa, pero algunas aplicaciones incluyen:
Verificacin del grado de pureza de materias primas.
Anlisis de drogas y frmacos.
Desarrollo de productos qumicos.
Control de calidad de productos qumicos.
Investigacin de reacciones qumicas.
Identificacin de sustancias desconocidas.
Anlisis de polmeros.

ESPECTROSCOPA DE MASAS
Es una tcnica analtica instrumental de alta sensibilidad capaz de identificar cuali y
cuantitativamente, y de forma inequvoca, cualquier tipo de mezclas de sustancias. Asimismo esta
tcnica permite tambin determinar la masa molecular de un compuesto, as como de los diversos
fragmentos que resultan de la rotura controlada del mismo dando estos una informacin muy
valiosa sobre la estructura de la molcula.
Un espectrmetro de masas siempre contiene las siguientes partes: un sistema de introduccin del
compuesto o mezcla de compuestos que se van a analizar, una fuente para ionizar estos
compuestos, uno o varios analizadores de masas para separar los iones producidos, un detector o
contador de iones y finalmente un sistema de procesamiento de datos que reproduce el espectro
de masas.

Cuando una molcula se somete a ionizacin por impacto electrnico en un espectrmetro de

masas el proceso primario consiste en la abstraccin de un electrn para dar un catin-radical.
Este catin-radical se trata del in molecular y tendr mayor o menor tendencia a fragmentar en
funcin de su estabilidad. Los iones moleculares muy estables tendrn poca tendencia a
fragmentar y sern muy abundantes. Al in mas abundante del espectro se le denomina pico base.
Los fragmentos ms abundantes de un espectro de masas nos dan una informacin valiossima
sobre la estructura de la molcula.
M Bombardeo electrnico

M+

(Molcula)

(In Molecular)

Fragmentos

La interpretacin de un espectro de masas se realiza aplicando la siguiente regla: Una molcula

fragmentar en un espectrmetro de masas de manera tal que se formarn los iones ms estables

DESVENTAJAS DE LA ESPECTROSCOPIA DE MASAS.

Es una tcnica destructiva: la muestra no se puede recuperar integra, al haber sufrido la
fragmentacin.

Cmo se consiguen los iones?

En la ionizacin por impacto electrnico, se bombardea la molcula con un haz de electrones de
alta energa.
Un electrn de este tipo puede arrancar un electrn de un enlace, creando un catin radical (in
positivo con un electrn despareado).

Qu tipos de iones tendremos?

Cmo se separan los iones?

Empleando, por ejemplo, un campo magntico que es capaz de provocar la defleccin de

los cationes obtenidos.
La intensidad de la defleccin depende de la relacin m/q (masa/carga).
La seal que se obtiene en el detector es proporcional al nmero de iones que chocan
contra l.
Variando el campo magntico, se pueden recolectar y contar iones de todas las masas.

EL ESPECTRO DE MASAS
Un grfico que recoge y ordena en orden creciente los fragmentos obtenidos, por masas e
indicando su abundancia relativa.

ALCANOS

APLICACIONES
Algunas de las aplicaciones generales de estos equipos son:

Determinacin del peso molecular de compuestos orgnicos voltiles.

Identificacin de un compuesto, o un fragmento del mismo mediante su espectro de masas

por comparacin con libreras.

Anlisis cuantitativo de mezclas voltiles.

Determinacin de masas exactas de compuestos orgnicos voltiles.

Determinacin de policloro-dibenzo-p-dioxinas (PCDDs), policlorodibenzofuranos (PCDFs)

as como policlorobifenilos (PCBs) y policloronaftalenos (PCNs) en emisiones procedentes
principalmente de fuentes industriales as como de alimentos (leche, carne...) y en
animales (gallinas, peces...)