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Agricultura primitiva en una

ameba social
Debra A. Brock, Tracy E. Douglas, David C. Queller & Joan E. Strassmann

Integrantes:
Betancourt Morales Alejandro Daro
Cortes Ballesteros Pamela

Lpez Figueroa Jos de Jess


Peralta Miranda Mauricio

INTRODUCCIN

La agricultura es parte del xito ecolgico de los seres


humanos, as como de los animales.

Un puado de animales implican la dispersin, la siembra de


propgulos, la cosecha del cultivo y la cosecha sostenible.
Los microorganismos tienen comportamientos sofisticados
tales como la cooperacin, la comunicacin y el
reconocimiento, as como muchos tipos de simbiosis.
La ameba social Dictyostelium discoideum tiene una simbiosis
de agricultura primitiva que incluye la dispersin y la
recoleccin de la cosecha
Son capaces de criar bacterias e incorporarlas a sus cuerpos
fructferos y durante la dispersin de esporas pueden sembrar
un nuevo cultivo.
La evolucin de la cra de bacterias en las amebas sociales
tienen beneficios ya que establecen grupos de parentesco
entre varias generaciones.

MTODOS

Mountain Lake, Virginia

Lake Itasca, Minnesota


Recoleccin de 35
cepas de
D. discoideum

Ensayo de uso de bacteria

MTODOS

11 no agricultores y 9 de agricultores
En cada cepa individualmente se agrego 30 ml esporas
mezcladas con K. aerogenes vivo (A600 3,0) en cajas 5 SM,
as como para K. aerogenes solo como control.
Para la densidad bacteriana se eso un asa de inoculacin esterilizada para se
recogi todo el crecimiento de un lugar para cada cepa en un tubo Eppendorf de
1,5 ml que contiene 1 ml KK2.

Se coloco en Vortex para obtener una suspensin uniforme, de la cual se elimin el


tramado de ameba o esporas por centrifugacin para sedimentar.

Luego la determinacin de la
absorbancia (A600) de las bacterias
restantes.

Ensayo de migracin

MTODOS

8 agricultores y 8 no agricultores por


replica, para dos repeticiones.
Se preparo una suspensin de esporas 5 x 106 de una cepa
de D. discoideum, K. aerogenes y KK2.

Se aplic la suspensin en una caja de Petri que contiene 80 ml de agar


libre de nutriente (0,198 g KH2PO4, 0,0356 g Na2HPO4 y 15 g de agar por
litro).
Cada caja se envolvi en papel aluminio y con un alfiler si hizo un
pequeo agujero justo enfrente de las esporas y bacterias para
proporcionar la luz direccional.
Se colocaron en una incubadora iluminada a 21 uC
durante 84 h para permitir que las babosas se
formen y migren.

Para cada cepa, contaron la distancia


recorrida por las babosas a travs de la cajas
de agar libre de nutriente

MTODOS

Ensayo de suelo

Colecta de suelo en
dos locaciones en el
Houston Arbodeum
and Nature Center
Houston, Texas
Se cultivaron
esporas en agar
sin nutrientes
Agricultorno agricultor

Agricultorno agricultor

Se pusieron en
placas separadas
por tipo de suelo

Ensayo de cuerpo
fructfero

Se colocaron en suelo estril el


contenido del soro por individuo
de agricultores y no agricultores a
temp. ambiente

Construccin de la
filogenia
Se realizo una secuenciacin
del ADN de las esporas por
PCR

Se aislaron los cuerpos fructferos


y se realizo una suspensin de
esporas

Se analizaron
aproximadamente 4.300 pb
de la secuencia de
nucletidos del 17S

Se realizo un conteo de esporas y


se determino el numero de
esporas por clon

Se utilizaron los mtodos


bayesianos para la
reconstruccin filogentica

RESULTADOS

Cuando el alimento escasea,


las amebas se agrupan y crean
una babosa que despus
dar origen a un cuerpo
fructfero (20% de clulas
mueren para formar el tallo
estril.)
Forman estructuras llamadas
soros donde hay esporas y
bacterias

RESULTADOS

Cultivo en medio
para bacterias
Bacterias y esporas
en Soros
El 36% (13 de 35)
de las cepas
recolectadas fue
agricultora
Figura 1. Contenido de bacterias en soros.

RESULTADOS
rbol filogentico Bayesiano a partir de 14 clones (5 agricultores y 9 no agricultores).
Los agricultores y no agricultores se intercalan en la filogenia y no haba diferencia entre ellas,
por lo tanto corresponden a la misma especie.
Las distancias genticas entre los agricultores-agricultores , no agricultores-no agricultores y los agricultores-no
agricultores no se encontraron diferencias en las distribuciones.
En la secuenciacin del gen ribosomal 16s bacteriano se identifico que los agricultores llevan una gran variedad
de bacterias que sirven como fuentes alimenticias para D. discoideum en general para agricultores y no
agricultores.
En laboratorio se utilizaron bacterias Klebsiella aerogenes y Escherichia coli

Escherichia coli
Klebsiella aerogenes

RESULTADOS
Para determinar la capacidad de Dicty para
cargar bacterias como semillas se sometieron a
un tratamiento con antibiticos para eliminar
cualquier bacteria que llevaran consigo.
Se sembraron tanto a las Dicty agricultoras
como no agricultoras en medios de
cultivo llenos de Kleibsella aerogenes y les
extrajeron sus soros para sembrarlas en un
medio de cultivo estril.
Al cabo de un par de das empezaron a
formarse colonias de K. aerogenes en las
placas que tenan los soros de las agricultoras
confirmando la capacidad de portar bacterias.
Figura 2. Los agricultores se asocian fcilmente con bacterias, lo
que sugiere una interaccin persistente.

RESULTADOS

La ventaja de llevar alimento depende del contexto

Las agricultoras producen ms esporas que las no-agricultoras cuando colonizan sitios estriles
con sustratos nutritivos para bacterias.

RESULTADOS

Las agricultoras producen menos esporas que las no-agricultoras cuando se les proveen
cantidades de bacterias vivas como alimento.

RESULTADOS

Las amebas agricultoras producen ms esporas que las no-agricultoras en sustrato enriquecido
con suelo no estril.

RESULTADOS

Ejemplos representativos de cuerpos fructferos de agricultoras y no-agricultoras despus del


estadio social en suelo no estril. Escala 1 mm.

D. discoideum normalmente abandonan la etapa de aislamiento y entran en la fase


social cuando se agota la comida, pero los agricultores pueden hacerlo pronto y
guardar algunas bacterias para el transporte.

Se propuso que el bajo xito de


los agricultores cuando se
proporcionan las bacterias se
deriva de la cosecha prudente.

RESULTADOS

Las cepas de agricultores establecen cuerpos fructferos antes de que


todas las bacterias se agotan mientras que los no agricultores
consumen todas las fuentes de alimentos disponibles antes de la
fructificacin.

RESULTADOS

RESULTADOS
Las cepas de agricultores migran significativamente en menor medida que los no
agricultores durante la fase mvil que precede inmediatamente a la fructificacin.

Esto podra ser por:


Un coste causado por la interferencia bacteriana
Una respuesta de no tener que avanzar en la medida en que los agricultores llevan
sus propias bacterias.

CONCLUSIONES

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