UNIVERSIDAD AUSTRAL DE CHILE

FACULTAD DE CIENCIAS VETERINARIAS

INSTITUTO DE PATOLOGA ANIMAL

DESCRIPCIN CLNICA Y ANATOMOPATOLGICA DE LA ANEMIA

INFECCIOSA DEL SALMN (ISA) EN SALMN DEL ATLNTICO (Salmo salar)
NATURALMENTE INFECTADOS.

Memria de ttulo presentada como parte

de los requisitos para optar al TTULO DE
MDICO VETERINARIO.

DANIELA MARCELA JIMNEZ MANCILLA

VALDIVIA CHILE
2010

PROFESOR PATROCINANTE:

PROFESOR COPATROCINANTE:

PROFESORES CALIFICADORES:

FECHA DE APROBACIN:

Dr. Ricardo Enrquez S.

Nombre

Firma

Dr. Enrique Paredes H.

Nombre

Firma

Dr. Gerardo Acosta J.

Nombre

Firma

Dr. Jorge Toro Y.

Nombre

Firma

29 de Abril de 2010

NDICE

Captulo

Pgina

1. RESUMEN..

2. SUMMARY

3. INTRODUCCIN..

4. MATERIAL Y MTODOS

5. RESULTADOS..

10

6. DISCUSIN...

21

7. BIBLIOGRAFA

27

8. ANEXOS

30

9. AGRADECIMIENTOS.

31

1. RESUMEN

Con la finalidad de realizar una descripcin clnica de la Anemia Infecciosa del Salmn
(ISA), se realizaron dos muestreos aleatorios de salmones del Atlntico (Salmo salar)
enfermos de ISA. Ambos muestreos fueron realizados en la fase de engorda (3 - 4 kg) de
centros de cultivo ubicados en la X regin, desde donde se obtuvo un total de 22 peces.

A la totalidad de los peces se les realiz examen clnico externo, interno y examen
histopatolgico y perfil metablico, adems se realiz RT-PCR-ISA confirmatorio a una
muestra de peces.

Las principales lesiones externas que se detectaron fueron: branquias plidas (77,27%),
ano hemorrgico (50%), exoftalmia (31,81%). Internamente se detect enteritis hemorrgica
(86,36%), adherencias (54,54%), petequias en ciegos pilricos (50%), gnadas hemorrgicas
(36,36%), hgado oscuro (36,36%), petequias en grasa visceral (27,27%), esplenomegalia
(22,72%) y ascitis (9,09%). Histolgicamente se determin una congestin heptica severa,
necrosis heptica multifocal, atrofia de sinusoides hepticos, marcada vasculitis heptica,
hiperemia esplnica, hemosiderosis, proliferacin de la pulpa blanca del tejido linfoide,
necrosis en insterticio renal, necrosis tubular, glomerulonefritis, congestin renal, hemorragia
en mucosa intestinal, marcada enteritis hemorrgica en serosa y submucosa, epicarditis y
miocarditis, necrosis en miocardio y vacuolizacin neuronal.

La lesin de mayor presentacin en el estudio fue la enteritis hemorrgica (86,4%). El

hgado oscuro se present en el 36,7% de los peces que es el hallazgo ms comn en otros
estudios de ISA.

Los parmetros alterados en los perfiles metablicos encontrados en los peces

enfermos fueron: colesterol bajo, creatinina aumentada, hipoproteinemia, hipoalbuminemia,
hiperfosfatemia y aumento de las enzimas hepticas ALT, AST y SAP.

ISA produce en s. Atlntico una severa hemorragia y anemia, cursa con severa
degeneracin y necrosis de rganos, hemorragia intersticial, disminucin en niveles de
colesterol, hipoproteinemia, hipoalbuminuria y disminucin en niveles de creatinina.

Palabras claves: anemia infecciosa, salmn del Atlntico, histopatologa, perfil metablico.

2. SUMMARY

CLINICAL AND ANATOMOPATHOLOGICAL DESCRIPTION OF THE

INFECTIOUS SALMON ANAEMIA IN NATURAL INFECTED ATLANTIC
SALMON (Salmo salar).
The goal of this research was the description of the Infection Salmon Anaemia (ISA)
in two groups of natural infected Atlantic salmons of 3-4 kg. The 22 fishes were collected
from a farm located in Chiloe Island, X region.

All samples were submitted to external and internal analysis, metabolic profile, RTPCR was used to confirm the disease agent. The main external lesions were pail gills
(77,27%), hemorrhagic ano (50%), exophthalmia (31,81%). Internal lesion found were,
hemorrhagic enteritis (86,36%), adherences (54,54%), petechiae caeca (50%), hemorrhagic
gonads (36,36%), dark liver (36,36%), petechiae in visceral fat (27,27%), enlargement of the
spleen (22,72%) and ascites (9,09%).

Histologically it was observed a severe hepatic congestion, multifocal hepatic necrosis,

atrophy of hepatic sinusoids, hepatic vasculitis, splenic hyperemia with hemosiderosis,
proliferation of white pulp of the lymphoid tissue, necrosis in renal interstitium, tubular
necrosis, glomerulonephritis, renal congestion, mucosal bleeding, severe enteritis hemorrhagic
in intestinal serous and submucosa, epicarditis and myocarditis, myocardial necrosis and
neuronal vacuolization were found.

The more presentation lesion in this study was the hemorrhagic enteritis (86.4%). The
dark liver was found in the (36.7%) of the fishes and this is the most common finding in others
studies of ISA.

In the metabolic profile the parameters altered found in fish were: low cholesterol,
increased creatinine, hypoproteinemia, hypoalbuminemia, hyperphosphatemia and increased
of liver enzymes like ALT, AST and SAP.

ISA produce in s. Atlantic a severe hemorrhage and anaemia, presents with severe
degeneration and organ necrosis, interstitial hemorrhage, low choresterol, hypoproteinemia,
hypoalbuminemia and low levels og creatinine.
Key words: infectious salmon anemia, histopathology, metabolic profile

3. INTRODUCCIN

La importancia de las enfermedades en la acuicultura es de elevada relevancia debido a

que cada ao se generan prdidas econmicas importantes por brotes de distintas
enfermedades ya sean bacterianas, virales o parasitarias (Salgado 2005). Dentro de este grupo
las enfermedades virales son las ms importantes por su impacto sobretodo en las poblaciones
de peces (Kinkelin y col 1985).
Una de las enfermedades virales de notable importancia econmica que impacta la
salmonicultura es la Anemia Infecciosa del Salmn (ISA) (Len y Tecklin 2006). Esta fue
reconocida por primera vez en 1984 en Noruega, tambin se ha encontrado en Canad 1996,
Escocia 1998, Islas Faroe y Dinamarca 2000, Chile 1999 y Estados Unidos en el 2001
(Moneke y col 2005).
En Chile, el virus ISAV se detect por primera vez en el Salmn Atlntico en junio de
2007, en un centro de cultivo ubicado en la isla Lemuy, Chilo. Por su sintomatologa se
confirm como un brote de Anemia Infecciosa del Salmn (ISA), el primero de presentacin
clsica y el primero en afectar a esta especie en Chile. Dado el comportamiento que ha tenido
en nuestro pas, algunos cientficos han acordado que se tratara de una variante distinta a la
europea (Salmon Chile 2008).
ISAV fue detectado por primera vez en Chile en 1999 en salmn coho (Oncorhynchus
kisutch) cultivado en agua de mar. En contraste con la presentacin clsica de ISA en salmn
del atlntico, la presencia de ISAV en Chile detectada en 1999 hasta ahora solo haba sido
asociada con una condicin clnica llamada Sndrome Ictrico del Salmn Coho en el cual el
aislamiento del virus no siempre fue posible. Durante julio de 2007, luego de una recuperacin
de un brote de Piscirickettsiosis se observ una mortalidad acumulada de 13,6% en peces de
precosecha en la localidad de Lemuy en Chilo (X regin). Basndose en los signos clnicos,
lesiones de los peces afectados y ensayos de laboratorio, se diagnostic la presencia de ISA,
presentndose de esta manera el primer brote clnico de ISA en salmn del atlntico en Chile
(Godoy 2008).

El agente etiolgico pertenece a la familia Orthomyxoviridae y al gnero Isavirus, el

virus se compone de una envoltura, nucleocpside y un core. El dimetro de la partcula viral
puede ser desde 90-140 nm. El virus posee proyecciones en la superficie que consisten en una
glicoprotena combinada, la hemoaglutinina-esterasa (HE), que posee actividad enzimtica
destructora de receptor y se encuentra codificado en el segmento 6, y una protena de fusin
codificada en el segmento 5 del genoma. El genoma se compone de 8 segmentos de RNA
linear de cadena simple extendindose en un largo de 1,0 a 2,4 Kb con un tamao molecular
total de aproximadamente 14,3 Kb (Workenhe 2008).

Anlisis en la secuencia de varios aislados de ISAV en los 8 segmentos de RNA,

revelan dos genotipos, designados como genotipo Europeo (I) y genotipo Norteamericano (II).
Variaciones en la secuencia del aminocido 35, regin altamente polimrfica (HPR) de la
glicoproteina HE ha permitido la separacin de los aislados de virus ISA, en grupos diferentes
de HPR, existiendo un grupo HPR0 que consiste en una cepa no cultivable, no patgena y
detectable solo por medio de RT-PCR en la cual variacin aproximadamente de 13
aminocidos podra hacer que esta cepa se vuelva patgena volvindose cultivable y
obtenindose de esta un CPE (Godoy 2008).

El virus causa una enfermedad fatal y altamente contagiosa, con mortalidades diarias
que varan desde 0,05% a 1%. El virus es sensible a las altas temperaturas y a pH cido, la
capacidad de infeccin de este se pierde cuando se ve expuesto a una temperatura de 56 C
por 5 minutos y a pH 4 o ms cido, alcanza su mxima replicacin a una temperatura de 15
C pero esta se anula a los 25 C (Hellebo y col 2004).

El virus es transmitido de manera horizontal, cuando los animales susceptibles entran

en contacto directo con salmones infectados, o con sus secreciones o excresiones (contenido
intestinal, orina y fecas) o con restos de animales muertos y contagiados, aguas contaminadas
con el virus o tambin por intercambio de vectores como el piojo del salmn. La sangre y
mucus de la epidermis contienen grandes cantidades de virus y transmiten ms efectivamente
el virus que la orina y fecas. Se encuentra en estudio la posibilidad de transmisin del virus de
manera vertical pudiendo infectarse de esta manera las ovas (Cipriano 2002).

Los peces infectados transmiten el virus semanas antes de mostrar signologa clnica,
aquellos que sobreviven a la enfermedad actan como reservorios y eliminan el virus por ms
de un mes. Dentro de las especies que actan como vectores y reservorios, pero sin el
desarrollo de un cuadro clnico se encuentran la trucha comn (Salmo trutta) y trucha arcoiris
(Oncorhynchus mykiss) (Cipriano 2002).

La signologa clnica que presentan los peces con ISA descrita en el hemisferio norte es
letargia, indiferencia al medio, exoftalmia, hemorragia en la cmara anterior del ojo, abdomen
dilatado, a veces hemorragias epidrmicas, y tendencia a ubicarse en el fondo de la jaula. En
las lesiones macroscpicas ms caractersticas se incluyen anemia severa, branquias plidas,
hemorragias petequiales en la grasa visceral y ciegos pilricos, ascitis, enteritis hemorrgica,
esplenomegalia, coloracin oscura y aumento de tamao del hgado, ocasionalmente se
presentan hemorragias petequiales en msculo esqueltico (Bruno y Poppe 1996). En pases
como Noruega dentro de los cambios patolgicos caractersticos mas vistos se incluye hgado
oscuro, moderada inflamacin renal, intestino de coloracin rojiza oscura debido a la

presencia de hemorragias en la pared y acumulacin de sangre en las branquias (Norwegian

Scientific Committee for Food Safety 2007).

Dentro de las lesiones microscpicas ms caractersticas de la enfermedad se

encuentran hemorragia del intersticio renal, degeneracin y necrosis tubular aguda,
glomerulonefritis, congestin y anemia de branquias, hemorragia, congestin e inflamacin de
mucosa intestinal, hemorragias en ciegos pilricos y grasa visceral, hemorragias multifocales,
congestin y necrosis del hgado, acumulaciones de eritrocitos en sinusoides hepticos
dilatados, epicarditis, endocarditis y presencia de clulas granulomatosas eosinoflicas y
engrosamiento arterial (Bouchard y col 1999). Histolgicamente la lesin ms frecuente
presente en otros pases es la necrosis hemorrgica del hgado y congestin y dilatacin
sinusoidal, estos cambos hepticos son altamente caractersticos de ISA pero no
patonogmnicos de la enfermedad (The Royal Society of Edinburgh 2002).

Los hallazgos hematolgicos ms significativos son: hematocrito inferior a 10% en

estadios finales y en casos menos severos 25 - 30%, frotis sanguneos con eritrocitos
vacuolizados o degenerados y presencia de eritroblastos con ncleos de forma irregular (OIE
2006).

El diagnstico de ISA se basa en hallazgos clnicos y patolgicos, en combinacin con

pruebas de laboratorio que confirman la presencia del virus. Estos incluyen el aislamiento del
virus en cultivo celular seguido por su identificacin inmunolgica, RT-PCR (reaccin en
cadena de la polimerasa transcriptasa reversa), e IFAT (prueba de inmunofluorescencia
indirecta). Los diagnsticos diferenciales son con otras condiciones anmicas y hemorrgicas,
como la lcera de invierno causada por Moritella viscosa (Woo 1999).

En el caso del cultivo celular los rganos utilizados son el bazo, corazn y rin. A
partir de estos rganos de realiza un homogenizado que es inoculado en los cultivos celulares.
Las lneas celulares ms utilizadas son ASK (rin del salmn del Atlntico) y SHK-1 (rin
anterior de salmn Atlntico) u otras lneas celulares susceptibles como TO y CHSE-214
(embrin de salmn chinook). En caso de presencia del virus se observara un efecto citoptico
(CPE) caracterstico, que consiste en clulas vacuolizadas que se redondean y separan de la
superficie de crecimiento (OIE 2006).

La reaccin en cadena de la polimerasa transcriptasa reversa (RT-PCR) detecta

pequeas cantidades de RNA, material gentico de ISAV que est presente en los tejidos de
peces infectados. Los partidores FA y RA derivados del segmento 8 del RNA son utilizados
para la deteccin de ISA (OIE 2006). El test de RT-PCR es positivo cuando se detecta una
banda de un tamao molecular de 211pb. Las muestras utilizadas para este examen son de
rin y corazn (OIE 2006).

La descripcin clnica y anatomopatolgica de ISA es importante para tener un mayor

conocimiento acerca de las caractersticas de la enfermedad, definir de manera ms precisa la
signologa y lesiones que produce en los peces afectados, lo que facilita su diagnstico y
control. Adems facilita la comparacin de la signologa y lesiones que provoca la
enfermedad en distintas partes del mundo.

En este contexto, el objetivo de esta investigacin es la descripcin clnica y

anatomopatolgica de la Anemia Infecciosa del Salmn en Chile (ISA) en salmn del
Atlntico (Salmo salar) naturalmente infectados. Los objetivos especficos son los siguientes:

Descripcin del cuadro clnico de ISA en S. del Atlntico (S. salar) naturalmente
infectados en Chile.

Descripcin de las lesiones tisulares macro y microscpicas en peces naturalmente

infectados con ISA.

Determinar el perfil metablico de peces adultos naturalmente infectados de ISA.

4. MATERIAL Y MTODOS

4.1. MATERIAL

4.1.1 Material biolgico

Para la realizacin de este estudio se utilizaron 22 ejemplares moribundos de salmn
del Atlntico, infectados naturalmente con ISAV y sin historial de otra enfermedad, de un peso
de 3-4 kg y de ambos sexos. Se muestrearon de 2 centros de cultivo localizados en Achao, en
la X regin, correspondiendo a 12 ejemplares moribundos de salmn Atlntico en un primer
muestreo y 10 en un segundo muestreo (Anexo 1).

4.1.2 Material de laboratorio

Este estudio se realiz en el Laboratorio de Biotecnologa y Patologa Acutica de la
Universidad Austral de Chile, donde se ejecutaron las necropsias, examen bacteriolgico y
viral. Para la realizacin del estudio histolgico las muestras fueron enviadas al Laboratorio de
Anatoma Patolgica, ambos del Instituto de Patologa Animal de la Facultad de Ciencias
Veterinarias de la Universidad Austral de Chile. El estudio del perfil metablico se realiz en
el Laboratorio de Patologa Clnica del Hospital Clnico Veterinario de esta Facultad.

4.2. MTODO

4.2.1 Recepcin de los peces

Los peces adultos con signologa clnica de ISA fueron obtenidos moribundos desde
los centros de cultivo ya mencionados y sacrificados con un golpe en la base del crneo,
posteriormente fueron transportados en cajas de material aislante trmico con hielo, hasta el
laboratorio para su necroscopia. Se extrajeron las muestras de tejidos y rganos necesarios
para los anlisis en los respectivos laboratorios.
Como medida preventiva se utilizo alcohol 75% para rociar la superficie de los peces,
alcohol al 95% e hipoclorito de sodio (6g/l) para desinfeccin de materiales, en el pediluvio y
en la desinfeccin peridica de la sala de acuarios. Todas las muestras de los peces infectados
o no infectados y materiales utilizados fueron esterilizados en autoclave, previo a su
eliminacin para as evitar posible diseminacin del agente.

4.2.2 Procesamiento de las muestras

4.2.2.1 Exmen clnico externo

Cada pez fue examinado clnicamente mediante inspeccin directa donde se
describi macroscpicamente las alteraciones externas de acuerdo a American Fisheries
Society (1992). Durante este examen se extrajeron las muestras de sangre para el perfil
metablico de los peces adultos naturalmente infectados.

4.2.2.2 Examen interno

Finalizado el examen externo de los peces se procedi a realizar la necropsia siguiendo
la tcnica descrita por la American Fisheries Society (1992). Este consiste en el corte de aleta
izquierda por la base mediante el uso de tijeras, introduccin de la punta de la tijera en la base
de la aleta, un corte ventral siguiendo el curso de la lnea media hasta poco antes del poro anal,
luego un corte dorso craneal siguiendo la lnea lateral y luego caudalmente al oprculo,
desprendiendo la pared ventrolateral izquierda y realizando la observacin de los rganos
internos, teniendo en consideracin rasgos tales como: color y consistencia, hemorragias,
inflamacin, presencia de pstulas, ndulos y contenido de alimento o mucus en el estmago e
intestino.
A travs de la inspeccin directa se describieron las alteraciones macroscpicas de los
rganos examinados (branquias, rin, corazn, hgado, bazo, piel-musculatura, gnadas, y
cerebro). Durante este exmen se extrajeron las muestras para histologa.

4.2.2.3 Estudio histopatolgico

Se realiz un muestreo histolgico en la totalidad de los peces adultos naturalmente
infectados, de los cuales se obtuvo trozos de tejido de branquias, hgado, corazn, bazo, rin,
msculo-piel, intestino, testculo, ovario, pncreas, cerebro, este ltimo rgano fue tomado
solo de los peces del segundo muestreo, los cuales fueron fijados en formalina bufferizada al
10%, y luego fueron laminados y puestos en el autotcnico donde se realiz la deshidratacin,
en la cual se utiliz dos alcoholes de 80 luego otro de 96 y tres de 100, luego de esto se us
un intermediario para aclarar la muestra, para que sta no sufriera deterioros, la cual consisti
en una mitad de alcohol de 100 y otra de xilol. Posteriormente, se sigui aclarando con dos
xilol y luego se realiz la impregnacin con parafina de uso histolgico que se funde a una
temperatura entre 58 y 60 C. Todo el procedimiento en el autotcnico dur aproximadamente
20 horas dependiendo del tamao de la muestra. Luego se sacaron las muestras del autotcnico
y se realiz la inclusin en un Tissue Center, posteriormente se realizaron los cortes en
micrtomo de rotacin a 5 micras. Luego, las muestras se pasaron al secado en una estufa a
58 C durante media hora. Finalmente, las muestras se tieron en una batera de hematoxilina
(ncleo azul) y eosina (citoplasma rojo), y pasaron a un montaje en resina sinttica. El

procedimiento en su totalidad dur 26 horas. Una vez terminado todo el procedimiento las
muestras fueron sometidas a un estudio histolgico con la finalidad de caracterizar
microscpicamente la enfermedad.

4.2.2.4 Perfil metablico

Se realiz un perfil metablico, para la totalidad de los peces adultos naturalmente
infectados. Las muestras no heparinizadas se centrifugaron a 12.000 rpm durante 5 minutos y
se enviaron al Laboratorio de Patologa Clnica donde se midi la actividad plasmtica de las
siguientes enzimas: AST (aspartato amino transferasa), ALT (alanina amino transferasa) y
SAP (fosfatasa alcalina), adems de protenas totales, albminas, y colesterol y triglicridos,
que indican funcionalidad heptica. Para determinar funcionalidad renal se realiz
determinacin de creatinina y fosfato.

4.2.2.5 RT-PCR
Se realiz un ensayo de RT PCR-ISAV como mtodo confirmatorio de la presencia del
virus en una muestra de dos peces tomados al azar. Se utiliz como gua para la realizacin de
este procedimiento el Manual de Pruebas de Diagnstico para los Animales Acuticos de la
OIE (2006), tomando como muestra para este examen hgado y corazn, los cuales fueron
transportados en hielo para evitar la degradacin del ARN. El RNA se obtuvo de
homogenizados tisulares, el RT-PCR fue realizado en dos pasos en los que el RT y PCR son
realizados en tubos separados. Se usaron partidores RA1 e FA2 (GGC-TAT-CTA-CCA-TGAACG-AAT-CGCC-AAG-TGT-AAG-TAG-CAC-TCC) derivados del segmento genmico 8 y
descritos en el Manual de la OIE (2006). Los productos del PCR fueron resueltos en un gel de
agaroza al 2%, teidos con bromuro de etidio y visualizados en un transiluminador de luz
ultravioleta (U.V.).

10

5. RESULTADOS

5.1 SIGNOS CLNICOS

Se realiz la extraccin de 22 peces enfermos de ISA, los que presentaron letargia,

nado errtico, exoftalmia bilateral, peces flacos, con cabeza de mayor tamao que el cuerpo y
algunos con coloracin oscura en la piel.

En la siguiente tabla se presenta un resumen de los hallazgos a la inspeccin externa en

los peces muestreados.
Tabla 1. Distribucin de signos clnicos externos observados en salmones del Atlntico
(Salmo salar), en etapa de engorda de 3-4 kg, con Anemia Infecciosa del Salmn, procedentes
de centros de cultivo ubicados en Chilo, X regin.
Lesiones Externas

Branquias plidas
Branquias congestivas
Ano hemorrgico

17
14
11

77,27
63,63
50

Exoftalmia uni/bilateral

31,81

Petequias abdominales
Hemorragia ocular

5
1

22,72
4,54

En la tabla 1 y figura 1 se aprecian las principales lesiones externas detectadas

asociadas a ISA: branquias plidas (77,27%), branquias congestivas (63,63), ano hemorrgico
(50%) y exoftalmia uni o bilateral (31,81%).

a)

b)

c)

Figura 1: a) S. salar (3-4 kg), con branquias congestivas; b) S. salar con presencia de ano
hemorrgico; c) S. salar con hemorragia ocular.

11

Tabla 2. Distribucin de signos internos observados en salmones del Atlntico (Salmo salar)
en etapa de engorda de 3-4 kg, con Anemia Infecciosa del Salmn, procedentes del centros de
cultivo ubicados en Chilo, X regin.
Lesiones Macroscpicas Internas
Enteritis hemorrgica
Adherencias
Petequias en ciegos pilricos
Hgado oscuro
Gnadas hemorrgicas
Petequias en grasa visceral
Esplenomegalia
Ascitis
Bazo congestivo
Hgado plido

N
19
12
11
8
8
6
5
2
1
1

%
86,36
54,54
50
36,36
36,36
27,27
22,72
9,09
4,54
4,54

Estmago hemorrgico

4,54

En la tabla 2 y figuras 2 y 3 se aprecia principalmente: enteritis hemorrgica (86,36%),

adherencias (54,54%), petequias en ciegos pilricos (50%), gnadas hemorrgicas (36,36%),
hgado oscuro (36,36%).

Figura 2: S. salar en etapa de engorda (3-4 kg), infectado naturalmente con ISAV, con
enteritis hemorrgica.

12

Figura 3: S. salar adulto (3-4 kg), con presencia de hgado oscuro, testculo hemorrgico,
petequias en grasa visceral, hemorragia en ciegos pilricos y esplenomegalia.

5.2 ESTUDIO HISTOLGICO

Se describen las caractersticas histolgicas correspondientes al anlisis efectuado en

hgado, bazo, rin, corazn, cerebro, intestino, branquias, musculatura-piel, ovario y testculo
en salmones del Atlntico adultos naturalmente infectados con el virus ISA.

Hgado: En los peces naturalmente infectados, llam la atencin la presencia de mltiples

focos irregulares de necrosis, algunos de ellos con ubicacin perivascular, adems, se
encontraron numerosas zonas con prdida de la estructura histolgica, acompaado de
hemorragias multifocales coalescentes, comprometiendo irregularmente al parnquima (figura
4 y 5). En las reas no alteradas se apreci moderada a severa atrofia de hepatocitos. Por otra
parte, las clulas epiteliales de los conductos biliares presentaron marcada degeneracin y
necrosis. Adems, se observ moderada a severa vasculitis (figura 6) y congestin severa del
parnquima.

13

a
b

Figura 4: a) Necrosis y prdida de estructura histolgica, b) hemorragias multifocales, en S.

salar de fase de engorda (3-4 kg) infectado naturalmente con ISAV (H&E 100x).

Figura 5: Necrsis heptica en S. salar de fase de engorda (3-4 kg) infectado naturalmente
con ISAV (H&E 100x).

14

Figura 6: Vasculitis heptica en S. salar de fase de engorda (3-4 kg) infectado naturalmente
con ISAV (H&E, 400x).

Bazo: En los peces adultos naturalmente infectados se encontr una intensa proliferacin de la
pulpa blanca una severa congestin, acompaada de mltiples focos de marcada a severa
hemosiderosis (figura 7 y 8), proliferacin de clulas melanomacrofgicas, prdida de la
arquitectura y en algunos casos se observa una vasculitis crnica.

b
b
Figura 7: (a) Congestin, (b) proliferacin de pulpa blanca en bazo de S.salar en fase de
engorda (3-4 kg) infectado naturalmente con ISAV (H&E, 400x).

15

a
a
b

b
Figura 8: (a) Congestin, (b) proliferacin de la pulpa blanca, y (c) hemosiderosis en bazo de
S.salar en fase de engorda (3-4 kg) naturalmente infectado con ISAV (H&E, 400x).

Rin: En los peces adultos naturalmente infectados se observ fuerte degeneracin y

necrosis glomerular (figura 9), tambin se observ necrosis tubular aguda y focos de necrosis
intersticiales (figura 10), adems, vasculitis crnica de leve a moderada y en algunos casos
necrotizante, se evidenci glomerulonefritis, moderada nefritis, hemosiderosis, y marcada
presencia de clulas melanomacrofgicas, en algunos peces se evidenci reas de leve
hemorragia y proliferacin de clulas hematopoyticas.

Figura 9: (a) Necrsis glomerular de S. salar en fase de engorda (3-4 kg) infectado
naturalmente con ISAV (H&E, 400x).

16

b
a
a

Figura 10: (a) Tbulo renal con degeneracin y necrosis (b) degeneracin y necrosis
intersticial de S. salar en fase de engorda (3-4 kg) infectados naturalmente con ISAV (H&E,
400x).

Intestino: En los peces adultos naturalmente infectados se observ moderada a marcada

congestin con focos de hemorragia en lamina propia de mucosa intestinal (figura 11),
adems, marcada infiltracin de clulas granulares eosinoflicas en submucosa y lmina propia
de la mucosa, inflamacin del tejido perifrico intestinal, serosa y submucosa, y edema de la
serosa, la que en algunos casos compromete a toda la pared intestinal. Adems se presenta
proliferacin del estrato granular del intestino y vasculitis.

Figura 11: Hemorragia en vellosidades intestinales en S. salar en fase de engorda (3-4 kg)
naturalmente infectado con ISAV (H&E, 100x).

17

Corazn: En los peces adultos naturalmente infectados se pudo apreciar leves focos de
miocarditis necrotizante (figura 12), congestin de leve a moderada, engrosamiento de arterias
en zona cercana a bulbo arterioso (figura 13), acmulo focal de clulas granulares
eosinoflicas bajo el endocardio (figura 14), infiltrado inflamatorio en epicardio
correspondiente a una epicardtis de leve a severa (figura 15) y en algunos casos con presencia
de fibroblastos.

Figura 12: Foco de miocarditis necrotizante en S. salar en fase de engorda (3-4 kg)
naturalmente infectado con ISAV (H&E, 400x).

Figura 13: engrosamiento arterial en zona cercana al bulbo arterioso en S. salar en fase de
engorda (3-4 kg) naturalmente infectado con ISAV (H&E, 400x).

18

Figura 14: Clulas granulares eosinoflicas bajo el endocardio en S. salar en fase de engorda
(3-4 kg) naturalmente infectado con ISAV (H&E, 400x).

Figura 15: Infiltrado inflamatorio en epicardio en S. salar en fase de engorda (3-4 kg)
naturalmente infectado con ISAV (H&E, 400x).

Branquias: En los peces adultos naturalmente infectados se observ congestin de moderada

a marcada en mucosa del arco branquial acompaada de hiperplasia epitelial con presencia de
abundantes clulas mucosas. En las laminillas secundarias se evidenci severa congestin,
infiltrado inflamatorio y telangectasia.
Pncreas y ciegos pilricos: En peces adultos naturalmente infectados se evidenci
proliferacin de macrfagos en el tejido adiposo perifrico, y pancreatitis necrotizante focal.

19

Ovario: En los peces adultos naturalmente infectados se encontr congestin y ooforitis

multifocal leve.
Testculo: En peces adultos naturalmente infectados slo se evidenci la presencia de
congestin leve.
Musculatura y piel: En peces adultos naturalmente infectados se encontr hiperplasia de la
piel y presencia de abundantes clulas mucosas.
Cerebro: En adultos naturalmente infectados se observ congestin moderada, presencia de
infiltrado inflamatorio en meninges correspondiente a una meningitis leve, vacuolizacin
neuronal y presencia de focos necrticos.

5.3 PERFL METABLICO

Tabla 4. Perfil metablico del salmones del Atlntico (Salmo salar) naturalmente infectados
con ISAV provenientes de centros de cultivo de Chilo, X regin.
Caso

ALT
AST
U/L
U/L
1
136+
873+
2
12
0*
3
131+
0*
4
157+
0*
5
154+
0*
6
0*
0*
7
117+ 1076+
8
168+ 1021+
9
15
164
10
4
293
11
8
203
12
2373
13
24
881+
14
0*
257
15
17
650+
16
41+
587
Media 15,86 426,00
12,51 237,32
D.E
-0,02
0,53
H
Valores de referencia
3
100
MIN
29
615
MAX

SAP COL
CRE
TRI
P
PRO
U/ml Mmol/L Mmol/L Mmol/L Mmol/L g/L
0,00*
1,5489+
0,98
14,95+
49
0,19
1,3375+
1,21
15,52+
270,54
1,46116+
1,94
17,58+
56
0,52
1,2479+
1,54
16,35+
31
1,48+
1,3747
1,81
15,34+
30
0,34
0,71124+
1,84
17,02+
30
0,18
1,1442
0,83
12,95+
220,44
1,4290+
1,66
16,42+
270,51
1,9233
0,56
9,00
100,53
1,8535
0,48
7,63
80,41
1,4231
0,35
6,21
60,30
1,2436
0,27
5,21
50,31
1,2544
0,33
6,03
51,31+
5,3933
1,24
4,99
32
0,36
1,3732
0,35
5,81
60,19
1,0631
0,65
4,56
30,49
1,94
34,38
0,53
6,18
9,38
0,33
1,33
4,00
0,29
1,38
8,77
-0,48
-2,99
0,78
-1,79
-0,79
-4,80

ALB
g/L
39816
1312614
3321118
213,88
5,40
-4,03

0,14
1,06

13
28

4,80
15,60

5
50

0,22
6,60

4,00
11,00

+ o Indica valor sobre o bajo valor de referencia * Indica valor no considerado.

28
58

20

Los hallazgos ms importantes presentes en el perfil metablico realizado a los

salmones del Atlntico adultos naturalmente infectados con ISA fueron: colesterol bajo los
rangos en todas las muestras de los peces, creatinina por sobre valores de referencia en
muestra 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, y 8, hipoproteinemia en los peces (2, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 15 y 16),
hipoalbuminuria en los peces (1, 2, 3, 5, 6, 7, 9, 10, 11, 12, 13, 15 y 16), hiperfosfatemia en los
peces (1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 y 8), ALT aumentada en peces (1, 3, 4, 5, 7, 8, 16) y disminuido en
muestra 12, AST por sobre los rangos en los peces (1, 7, 8, 13 y 15), SAP elevado en muestra
5 y 14 y triglicridos dentro de los rangos para todas las muestras.

5.4 RT-PCR

Para evaluar la presencia del virus en los peces en estudio se realiz un ensayo de RT-PCR
para amplificar un fragmento de RNA especfico de 211pb que se encuentra en el segmento 8
del genoma viral. La figura 18 muestra el anlisis electrofortico en un gel de agarosa al 2%
donde se observa el producto de amplificacin especfico de ISAV correspondiente a una
muestra de rganos de corazn y rin (carril 1). No se observa producto de PCR en el control
negativo (-), de la reaccin y en la muestra correspondiente al carril 2. Se puede observar
tambin el producto de PCR de las muestras migran a la misma altura que el producto de PCR
del control positivo (+).

pb

St

(+)

(-)

1000__
500__
300__
200__
100__

Figura 16: Anlisis en gel de agarosa al 2% de los productos de RT-PCR especficos para la
identificacin de virus ISA. Se observa el producto de RT-PCR de 211pb para la muestra
positiva (carril 1) y el control positivo, carril (+). No se observa producto de RT-PCR en la
muestra del carril 2 y en el control negativo, carril (-). St; estndar de tamao de DNA 100 pb.

21

6. DISCUSIN

La mayora de las lesiones encontradas en peces afectados con ISAV ya sean externas,
internas e histolgicas se caracterizan por ser semejantes en cualquiera de los pases donde se
presenta esta enfermedad, dado fundamentalmente a que salmn Atlntico es la especie
susceptible. La anemia infecciosa del salmn ha estado presente en Noruega por al menos 15
aos y tambin se encuentra en otros pases como Escocia y Canad, entre otros (Kibenge y
col 2001). En Noruega la signologa principal de la enfermedad se caracteriza por hgado
oscuro, renomegalia, hemorragia y necrosis tubular e intestinal y acumulacin de sangre en
filamentos branquiales (Norwegian Scientific Committee for Food Safety 2007). En Escocia,
la signologa externa es bsicamente igual a la que se presenta en Noruega, histolgicamente
las lesiones ms caractersticas de ISA son la necrosis hemorrgica multifocal en hgado y
dilatacin y congestin sinusoidal (Evensen y col 1991). A diferencia de los otros pases
afectados por ISAV, la lesin mas comn que se evidencia en los peces en Canad es
hemorragia del intersticio renal con necrosis tubular y las lesiones severas en hgado son
raramente observadas (Lovely y col 1999). En Chile, los peces enfermos de ISA mostraron la
misma signologa externa que en Noruega y Escocia, presentando s una variacin con
respecto a la signologa interna debido a la presencia de hidropericardio, lesin ausente en
otros pases en los cuales se presenta ISA y destacndose como una de las lesiones principales
(Godoy 2008), adems del hgado oscuro la enteritis hemorrgica es la lesin mayormente
presente en los peces analizados en este estudio.
Segn los resultados del examen clnico externo obtenido en el estudio realizado, se
apreci en los peces analizados, que la principal lesin externa asociada a ISA en los peces
naturalmente infectados, fue la palidez branquial (77,27%). Las branquias plidas es una
manifestacin clnica indicativa de la anemia (Roberts 1981), producida por las hemorragias
que afectan a los distintos rganos de los peces infectados por ISAV. La anemia es la
deficiencia de hemoglobina en la sangre o la reduccin de la masa total de eritrocitos,
resultando esto en la deficiencia de transporte de oxgeno, producindose una disminucin
cualitativa o cuantitativa en el volumen de la sangre dentro del sistema vascular. En etapas
ms avanzadas de la enfermedad, el dao endotelial es el causante de la severa anemia con que
cursan los peces enfermos de ISA (Simko 2001). La anemia en peces se clasifica de acuerdo a
su etiologa, a su origen fisiopatolgico o por las caractersticas del patrn de los eritrocitos
resultantes, las ms usada es la clasificacin fisiopatolgica la cual es: anemia hemoltica,
anemia hemorrgica y anemia hipoplsica. La anemia hemoltica se caracteriza por que el
ritmo de destruccin de los eritrocitos es mucho ms alto que lo normal y por lo tanto el ritmo
de produccin de eritrocitos tambin se encuentra aumentado para compensar las prdidas,
esta se caracteriza por la presencia de abundantes glbulos rojos inmaduros y esplenomegalia.
La anemia hemorrgica bsicamente se produce por la prdida de eritrocitos debido a
sangramiento excesivo. La anemia hipoplsica se asocia con la falla del tejido hematopoytico
en la produccin de clulas sanguneas, y puede afectar la produccin de cualquiera de estas,
la anemia producida por ISA corresponde a estas dos ltimas categoras, debido a la

22

destruccin que el virus produce en el tejido hematopoytico de los peces afectados (Robert
2001).
La palidez branquial aunque es una lesin muy caracterstica de ISA no es cien por
ciento indicativa de la presencia de la enfermedad, ya que esta se presenta en muchas otras
enfermedades de peces ya sea bacterianas o virales, como por ejemplo en la necrosis
pancretica infecciosa (IPN), septicemia rickettsial del salmn (SRS) entre otros. Por lo tanto
no es un hallazgo especfico de ISA, pero si uno muy frecuente y que se presenta en la
mayora de los casos de peces infectados (Joseph y col 2004). Es importante destacar que en
este estudio no se realiz la medicin de hematocrito para determinar de manera especfica el
nivel de anemia de los peces, el nico parmetro usado fue el exmen clnico de las branquias
en los peces muestreados.
Adicionalmente, en las branquias se observ principalmente congestin del arco
branquial y laminillas secundarias, infiltrado inflamatorio en laminilla primaria y secundaria
(Simko y col 2000) y telangiectasia. La telangiectasia se define como la dilatacin de los
capilares y es un hallazgo coincidente con los hallazgos encontrados por Kibenge y col (2006).
La congestin branquial detectada (63,63%) en los peces adultos naturalmente infectados, es
otro de los signos comnmente asociados a ISA, y se presenta debido a la acumulacin de
sangre en el sistema circulatorio venoso. En el caso de ISA la congestin tiene su origen en la
incapacidad del corazn para contraerse adecuadamente provocndose la acumulacin de
sangre en distintos rganos (Simko y col 2000).
Otras lesiones encontradas al examen clnico externo fueron ano hemorrgico en el
50% de los peces naturalmente infectados, exoftalmia 31,81%, petequias abdominales 22,72%
y hemorragia ocular 4,54%, todas estas lesiones se presentan comnmente en peces que cursan
con la enfermedad (Moneke y col 2005). En relacin a las lesiones macroscpicas encontradas
en los rganos, se describe principalmente la presencia de enteritis hemorrgica (86,36%),
adherencias (54,54%), hgado oscuro (36,36%), gnadas hemorrgicas (36,36%) y petequias
en grasa visceral (27,27%). Todas estas lesiones son consistentes con las encontradas por
Godoy y col (2008).
Es posible que la presencia de adherencias en alto porcentaje se explique debido a que
los peces muestreados haban sido previamente vacunados. Las adherencias son uno de los
efectos secundarios causados por la aplicacin intraperitoneal de vacunas oleosas en los peces
y se ha reportado que las adherencias abdominales son causadas por la respuesta inflamatoria
del organismo a los antgenos solos o en combinacin de stos con los adyuvantes. La
combinacin de bacterinas o virinas con aceites usados en las vacunas inician una respuesta
inflamatoria local con efectos protectivos, ya que se produce una estimulacin prolongada del
sistema inmune con la liberacin lenta de antgenos. Esta reaccin inflamatoria se observa

23

macroscpicamente como adherencias intraabdominales fibrosas que conectan rganos entre

s u rganos con el peritoneo que cubre la pared muscular abdominal (Vera 2006).
El hgado oscuro es una manifestacin heptica causado por la necrosis hemorrgica
que se produce en los peces infectados por el virus ISA. La necrosis heptica en peces
generalmente se presenta en pequeas zonas de uno o ms hepatocitos frente a enfermedades
txicas y/o septicmicas. Los cambios se evidencian primariamente con la rpida
condensacin de la cromatina nuclear, seguida del incremento en la eosinofilia citoplasmtica
y la individualizacin de los hepatocitos viables. Los remanentes celulares pueden ser
fagocitados por clulas adyacentes. Estos cambios necrticos pueden ser acompaados por
infiltrado inflamatorio (Ferguson 1989).

Histolgicamente en el hgado se presentan principalmente hemorragias multifocales

coalescentes, abundantes focos irregulares de necrosis, congestin severa del parnquima,
prdida de estructura histolgica y vasculitis. Estas lesiones son consistentes con los estudios
histolgicos realizados en hgados de s. Atlntico afectados con ISA (Simko y col 2000,
Godoy col 2008). La necrosis puede afectar a clulas hepticas individuales y se caracteriza
por aumento del volumen celular, hipereosinoflia, picnosis y cariorexis. En los estados ms
avanzados de la enfermedad se observa necrosis focal a coalescente (Godoy y col 2009)

La congestin, constituye uno de los trastornos circulatorios ms importantes y es

desencadenante de reacciones fibroblsticas. Su origen se relaciona principalmente con fallas
centrales cardacas o respiratorias (Lpez y col 2001). ISA produce un cuadro que
compromete corazn y branquias, dando origen a trastornos circulatorios como congestin y
hemorragias.

El bazo presenta hiperemia que va de leve a severa, congestin con mltiples focos de
hemosiderosis, una intensa proliferacin de la pulpa blanca del tejido linfoide, todas estas
lesiones concuerdan con lo descrito por Robert (2001). Dentro de los elementos ms
importantes que componen el bazo estn los elipsoides, la pulpa y los centros
melanomacrofgicos, la pulpa est compuesta de tejido fagoctico sinusoidal similar al del
rin, en el cual es mantenido una gran cantidad de glbulos rojos y tejido hematopoytico, en
presencia de cuadros infecciosos ocurre una proliferacin de la pulpa blanca debido al alto
contenido fagoctico de esta. La hemosiderosis se presenta como resultado de la hemlisis,
depositndose la hemosiderina resultante de la destruccin de los eritrocitos en los centros
melanomacrofgicos (Robert 2001).

Las alteraciones renales descritas para ISA por Bouchard (1999) y Simko y col (2000)
concuerdan con los cambios renales observados en este estudio. Las dos alteraciones
histopatolgicas de mayor importancia que se presentaron a nivel renal fueron la congestin y

24

hemorragia intersticial y la segunda fue la degeneracin y necrosis tubular e intersticial.

Adems de las lesiones anteriores, tambin se evidenci hemosiderosis moderada, aumento en
la cantidad de clulas melanomacrofgicas en intersticio renal y glomerulonefritis. En la
porcin anterior del rin, se encuentra el sistema reticuloendotelial, el cual est compuesto de
clulas linfoides y reticulares (tejido hematopoytico). Tambin se pueden observar clulas
melanomacrofgicas, las cuales son clulas reticulares que poseen pigmento melnico en su
citoplasma y gran capacidad fagocitaria (Amin y col 1992).

Las principales lesiones presentes en intestino fueron una enteritis congestiva con
marcados focos hemorrgicos en lamina propia, la congestin y hemorragia de la mucosa, las
cuales coinciden con las encontradas por Godoy y col (2008), tambin se evidenci presencia
de clulas granulares eosinoflicas en submucosa intestinal, las cuales se encuentran
normalmente en el intestino de los telesteos, as como tambin en la piel y tejido
hematopoytico. Estas clulas estn implicadas en la inflacin y existen reportes de que
poseen algn tipo de actividad fagoctica, son diferentes de los eosinfilos encontrados
normalmente en sangre, aunque estos no son comunes en la sangre de los peces (Roberts
2001). En peces que cursan con infeccin por ISAV la enteritis hemorrgica es uno de los
signos ms frecuentes (Godoy y col 2008).

Un hallazgo comn encontrado fue la congestin cardaca de leve a moderada, que es

uno de los signos histopatolgicos ms comunes en el tejido cardiaco. Segn estudios
realizados por Moneke y col (2005), el dao cardaco producido por ISAV, incrementa a
medida que progresa la enfermedad. El corazn es uno de los ltimos rganos en los cuales se
evidencia signologa de ISA. Debido a esto es posible que la mayora de las lesiones cardiacas
observadas en este estudio indicaran que los peces muestreados presentaban un curso crnico
de la enfermedad.

Kibenge y col (2006) encontraron la presencia de endocarditis asociada a otros

cambios en el tejido cardaco (hiperplasia endocardial con evidencia de infiltrado de clulas
mononucleares), sin embargo, ellos establecen que esto fue un hallazgo inesperado, puesto que
ISAV en s. Atlntico comnmente no produce inflacin significativa en el tejido cardaco. No
se encontraron mayores lesiones en pncreas, ovarios, testculos, musculatura y cerebro.

Los perfiles metablicos realizados a los peces adultos naturalmente infectados

coinciden en sus resultados con el primer y segundo muestreo y se present: colesterol bajo,
hipoproteinemia, hipoalbuminemia, ALT, AST y SAP aumentadas y triglicridos dentro de los
rangos de referencia, los valores que difieren son: creatinina aumentada en el primer muestreo
y normal en el segundo y presencia de hiperfosfatemia en los peces del primer muestreo y
fosfato normal en los peces del segundo muestreo. Las desigualdades entre los perfiles
metablicos realizados para los peces naturalmente infectados del primer muestreo y del

25

segundo, se deben principalmente a una diferencia en la etapa de produccin en la que se

encontraban los peces al momento del muestreo.

Segn algunos autores ISAV causa en los peces infectados un dao generalizado del
endotelio y prdida de sangre lo que provoca una severa anemia e hipoproteinemia. La
hipoproteinemia asociada con prdida de sangre es un descubrimiento comn en vertebrados
(Duncan y col 1994), pero no est claro si la presencia de hemorragia en peces puede resultar
en una hipoproteinemia.

Hargens y col (1974), sugieren que los salmones poseen elevada permeabilidad capilar,
si la elevada concentracin proteica del fluido intersticial as como la elevada permeabilidad
capilar estn presentes en s. Atlntico, entonces la hipoproteinemia asociada con la prdida de
protena plasmtica secundaria a hemorragia parece ser poco probable. Segn Evensen y col
(1991), es posible que la hipoproteinemia sea explicada como un efecto de dilucin causada
por la ascitis. Alternativamente, una disminucin en los niveles de protena plasmtica puede
ser asociada con dao heptico resultando en la disminucin de la produccin de protena
plasmtica. Sin embargo las lesiones hepticas en ISA descritas en algunos estudios se
caracterizan por necrosis hepticas que van desde agudas a subagudas en etapas tardas de la
enfermedad (Speilberg y col 1999, Simko y col 2000). Debido a esto es poco probable que el
dao heptico producido en etapas tempranas de la enfermedad, provoque la disminucin en
los niveles de protena plasmtica. La patognesis de hipoproteinemia en ISA no est clara, sin
embargo, considerando la falta de estudios publicados sobre los mecanismos de los electrolitos
y las protenas en peces, la prdida de protenas plasmticas como resultado de dao endotelial
y hemorragia no puede ser descartado y se presenta como la principal explicacin (Simko y
col 2001).

El colesterol bajo, hipoalbuminemia y el aumento de las enzimas ALT y AST se deben

principalmente a la falla heptica presente en peces enfermos de ISA. En el caso del colesterol
y la albmina, el hgado es el rgano encargado de la sntesis de estos, en el caso de la ALT
este es liberado de los hepatocitos al haber destruccin de estos debido al severo dao del
hgado.

La creatinina aumentada y la hiperfosfatemia se deben al dao renal presente en ISA,

ya que este es el rgano encargado de la eliminacin de estos productos. La diferencia de
tiempo en la toma de muestras de sangre en los distintos muestreos podra haber influido en
los altos niveles de fsforo que presenta el perfil metablico de los peces del primer muestreo
en comparacin a los del segundo muestreo, en el cual los rangos de fsforo se encontraban
normales. En el caso de la enzima SAP sus niveles aumentados se deben no solo al dao
heptico presente sino tambin al dao intestinal que ocasiona la enfermedad en los peces.

26

De lo expuesto anteriormente se concluye que:

La anemia infecciosa del salmn cursa con severa anemia de tipo hemorrgica, severo
dao heptico, renal, intestinal y esplnico.
El cuadro clnico se caracteriza por la presencia de palidez y congestin branquial,
enteritis hemorrgica, petequias en ciego pilricos, hgado oscuro, ano hemorrgico, petequias
abdominales y esplenomegalia.
Histolgicamente se presenta principalmente necrosis y hemorragia del parnquima
heptico, necrosis de intersticio y tbulos renales, hemosiderosis e intensa proliferacin de la
pulpa blanca y abundantes hemorragias en mucosa intestinal.
Los parmetros principalmente alterados del perfil metablico de los peces enfermos
de ISA, corresponden a una fuerte disminucin en niveles de colesterol, hipoproteinemia
hipoalbuminemia y aumento en los niveles de las enzimas ALT, AST Y SAP.

27

7. BIBLIOGRAFA

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30

8. ANEXOS

Anexo 1: Peso y sexo de salmones del Atlntico (Salmo salar) moribundos de ISA
procedentes de 2 centros de cultivo de Chilo X regin.
N Peces
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22

Peso (kg)
3
3
3
4
3,5
3
4
3
3,2
3,4
3,1
3,3
3,5
2
3,5
2,5
3
3,5
3,5
4
2,5
4

Sexo
Macho
Macho
Macho
Macho
Hembra
Hembra
Macho
Macho
Macho
Hembra
Hembra
Macho
Hembra
Hembra
Macho
Macho
Macho
Macho
Hembra
Macho
Macho
Hembra

31

9. AGRADECIMIENTOS

Al Dr. Ricardo Enrquez, Dr. Enrique Paredes, Dr. Alex Romero, Dr. Vania Quinteros
y Esteban Henrquez por toda su confianza, disponibilidad y conocimiento.

Quiero agradecer enormemente a mi familia por su confianza y paciencia en mi,

muchas gracias a mis padres, mi ta, abuela y a mi hermano por todo su apoyo durante
este trabajo.

A mis amigos por siempre estar presentes en todo momento en mi vida y entregarme
alegra.

A todos los profesores de la Escuela de Medicina Veterinaria de la Universidad Austral

de Chile, por todos los conocimientos entregados y por compartir sus experiencias de
vida y profesionales.