Unive rs id ad N acio nal Fe d e rico Vill arre al

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PRACTICA N 14
DETERMINACION DE LACTOSA
I.

OBJETIVOS
a) Determinar la concentracin de lactosa en una muestra de leche por el
mtodo de Fehling-Causse-Bonnans.

II.

REVISION DE LITERATURA
El principal carbohidrato de la leche es la lactosa. Existe en dos formas: La
forma alfa monohidratada y la beta anhidra. Debido a que la lactosa cristaliza
lentamente en los productos a base de leche fresca a menudo se encuentra
presente como una capa amorfa y transparente parecida al vidrio y
posteriormente durante el reposo ocurre la cristalizacin. La lactosa es de un
17.8 a 18 % soluble en agua a 25C.
La lactosa tiene un poder edulcorante de 5 a 6 veces menor que el de la sacarosa
y cada gramo de lactosa contribuye con 4 kilocaloras de energa trmica al valor
nutritivo de la leche o productos lcteos.

III.

MATERIALES Y METODO
III.1 Materiales, Equipos e Instrumentos
-

Probeta 250 mL

Bureta

Matraz

Soporte universal con pinzas

Pipeta 1 y 10 mL

Reactivo F.C.B. (Se mezclan en el orden indicado):

B R O M AT O LO G I A
Matienzo

Pro f e s o r a Pr i n c i p a l :
Pro f e s o r A u x i l i a r:

B a rr a g n

D r a E l v a Ad r i a n z e n
Ing.Carlos Chinchay

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Tartrato de sodio y potasio

130 gr

Hidrxido de sodio

110 gr

Sulfato de cobre

24 gr

Ferrocianuro de potasio

16,8 gr

Completar a 1L con agua destilada

-

Solucin acuosa de azul de metileno al 1%

Solucin de lactosa 0,5%

III.2 Mtodo
a) Determinacin de lactosa por el mtodo de Fehling-Causse-Bonnans
(AOAC 1965)
Valoracin del reactivo
-

En un matraz se coloca 10 ml de reactivo FCB, 30 ml de agua destilada y

perlas de vidrio o porcelana porosa

Se calienta a ebullicin. Una vez alcanzada sta, se comienza a agregar desde la

bureta la solucin patrn de azcar (lactosa o glucosa 0,5%) a una velocidad de
goteo controlada (1 gota/3 seg) evitando interrumpir la ebullicin.

Cuando la coloracin azul del reactivo disminuye de intensidad o alcanza un

tono celeste verdoso, se agregan 3 gotas de la solucin de azul de metileno y se
contina con el agregado de solucin patrn, hasta decoloracin.

La 1ra gota que torna a amarillo oro parte de la solucin indica el punto final.
Deben gastarse alrededor de 5-6 ml de la solucin patrn para decolorar 10 ml
de reactivo de FCB. Si el volumen gastado no est en este rango hay que
modificar la velocidad de adicin hasta lograr el valor indicado. La velocidad
de goteo encontrada como ptima ser la empleada al valorar las soluciones
problema.

B R O M AT O LO G I A
Matienzo

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No es necesario agitar el erlenmeyer con las manos, la misma ebullicin sirve

de agitacin.
Valoracin de lactosa en muestra de leche

Colocar en un matraz 10 ml de leche y diluir con 60 - 80 ml de agua

destilada.

agregar 5 ml de subacetato de plomo al 30 %, agitar enrgicamente.

El exceso de plomo se elimina aadiendo 5 ml de Na2SO4 al 30 %

En una probeta llevar a 100 ml con agua destilada. Homegeneizar, reposar

por 30 minutos y filtrar.

El lquido filtrado valorar la lactosa por el mtodo de Fehling-CausseBonnans.

Equivalencia:
50 mg glucosa = 66 mg lactosa anhidra = 69.5 mg lactosa hidratada

IV.

RESULTADOS Y DISCUSION
Reportar los resultados obtenidos y discutir con los datos obtenidos en la
revisin bibliogrfica.

V.

CONCLUSIONES
De acuerdo a los resultados dar las conclusiones correspondientes.

VI.

CUESTINOARIO

a) Mencione 4 pruebas para evaluar adulteracin en leches

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Matienzo

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b) Cules son los componentes y como se prepara el reactivo de Fehling-CausseBonnans

c) Que finalidad tiene precipitar la leche previo a realizar el mtodo cuantitativo

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Matienzo

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