El ritmo, u oscilacin diaria circadiana de comportamientos y procesos
biolgicos es una caracterstica fundamental de la fisiologa de los mamferos que se ha desarrollado durante cientos de miles de aos bajo la presin evolutiva continua de conservacin y eficiencia energtica. La evolucin ha puesto a punto el reloj del cuerpo para anticipar y responder a las numerosas seales del medio ambiente con el fin de mantener el equilibrio homeosttico y promover la supervivencia. Sin embargo, ahora vivimos en una sociedad en la que estos estmulos de arrastre circadiano clsicos se han alterado dramticamente de las condiciones en que se fij inicialmente la maquinaria del reloj. Un bombardeo de los sistemas de iluminacin, calefaccin, refrigeracin artificiales que mantienen constante la temperatura ambiente; estilo de vida sedentario; y la disponibilidad de alimentos baratos, de alto contenido calrico ha amenazado incluso los mecanismos de programacin circadianos ms poderosos y antiguos. Tales cambios ambientales han contribuido a la reciente elevacin de escalonamiento en las patologas influenciadas por el estilo de vida, incluyendo el cncer, las enfermedades cardiovasculares, la depresin, la obesidad y la diabetes. Esta opinin examina el papel de los relojes internos del cuerpo en el cableado de las conexiones circadianas que se han desarrollado para lograr el equilibrio energtico y la capacidad de adaptacin, y discute las posibles estrategias teraputicas para restablecer el control del reloj metablico a la hora moderna en beneficio de la salud humana. Introduccion; El bilogo evolucionista Theodosius Dobzhansky postul que "nada tiene sentido en biologa excepto a la luz de la evolucin" (1). Esta doctrina se aplica bien a la observacin de los ritmos biolgicos endgenos cuya fase es aproximadamente la longitud de un da en la tierra, que se hace referencia como el ritmo circadiano. Estos rendimientos sistmicos medibles son el producto final de un vasto conjunto de circuitos coordinados, centrales a la que son un mecanismo molecular fundamental referido como el reloj de ncleo. La mayora de los organismos en el planeta tienen un reloj de este tipo, que es arrastrado por la luz y anticipa as como se adapta a las demandas externas para promover la salud del organismo. Cientos de miles de aos de insumos medio ambientales (por ejemplo, el perodo de 24 horas de rotacin de la Tierra alrededor de su eje) y derivados de nutrientes (por ejemplo, la disponibilidad de alimentos) han dado forma a la programacin rtmica de la produccin biolgica y de comportamiento que se confiere el supuesto beneficio ventaja de selectiva. A. maquinaria del reloj circadiano Uno de los relojes biolgicos ms simples est presente en las cianobacterias y consta de tres protenas (KaiA, KaiB, y KaiC) que oscilan en un ciclo de fosforilacin/desfosforilacin autosostenido. Este reloj impide la replicacin del ADN durante la luz del da bajo los rayos UV nocivos del sol y aumenta la supervivencia del organismo y de la aptitud reproductiva (2- 4).
Sin embargo, la complejidad de los metazoos de orden superior exige un
sistema ms avanzado, de mltiples facetas. En los mamferos, el ncleo del reloj molecular que est presente en cada clula se compone de un circuito transcripcional/traduccional de retroalimentacin autorreguladora que se restablece a diario por el reloj maestro se encuentra en el ncleo supraquiasmtico del hipotlamo (SCN). Como se detalla en la Figura 1, dos activadores de la transcripcin bHLH, los ciclos de produccin del aparato locomotor circadiano Kaput (CLOCK) y ARNT-like 1 del cerebro y el msculo (BMAL1 aka Arntl), heterodimerizan y se unen a promotores elementos E-box para inducir la expresin del brazo represivo del reloj, que incluyen criptocromos 1 y 2 (cRY1 / 2) y los perodos 1, 2 y 3 (PER1 / 2/3) y los receptores nucleares, Rev-erb y . CRY y PER forman un complejo de reglamentacin, que inhibe directamente la funcin de transactivacin CLOCK-BMAL1, mientras Rev-erb y reprime la transcripcin Bmal1 a travs de la contratacin de la histona deacetilasa 3. Otro grupo de receptores nucleares, los receptores RAR-hurfanos e (ROR e -), son inducidos por el CLOCK-BMAL1 y funcionan como activadores circadianos de la transcripcin a la retroalimentacin positiva en la expresin de Bmal1 en competencia con Rev-erb y . Adems, la casena quinasa 1 y - (CK1 /) Contribuye a la funcin del reloj a travs de la fosforilacin y la desestabilizacin de la protenas PER mientras FBXL3 dirige la degradacin mediada por E3 ubiquitina ligasa de protenas CRY. B. Evolucin de las protenas CRY A pesar de la dramtica variacin en la complejidad de los metazoos, existe la conservacin significativa de los componentes principales de este conjunto de herramientas del reloj evolutivo. En lugar de sintetizar completamente nuevas partes de novo, parece haber una reutilizacin de factores reguladores maestros para acomodar las presiones selectivas del organismo individual. Este concepto est ejemplificado en las protenas CRY. Este componente central del reloj posee una fuerte homologa de secuencia que recuerda a fotoliasas, que son enzimas reparadoras de ADN activadas por la luz, lo que sugiere que el ancestro de este reloj estaba estrechamente vinculado al mantenimiento activo de la integridad genmica con la exposicin al sol para contrarrestar los efectos dainos de los rayos UV del inducida por dimerizacin de pirimidina. En Drosophila y plantas, homlogos CRY funcionan como fotorreceptores de luz azul y se conectan directamente exposicin a la luz a la regulacin del reloj molecular. Curiosamente, estos dos fotoliasas y las propiedades de los fotorreceptores parecen haberse perdido en los mamferos, muy probablemente debido a la presin selectiva especfica que se enfrent a los eucariotas simples fue sustituida por una demanda ms urgente o se evit por un mecanismo alternativo. C. Interaccin entre el reloj y el metabolismo energtico La maquinaria del reloj circadiano tambin es responsable de la modulacin de la expresin de numerosos programas bioenergticos, especficos de tejido para orquestar ritmos metablicos sistmicos. Esta comunicacin entre el reloj y la funcin fisiolgica es de mayor importancia cuando se considera la influencia de la evolucin en las redes circadianos. Sin
embargo, la unin de estos reguladores transcripcionales circadianos que
obliga secuencias de promotores diana no slo explica la ritmicidad de todos los productos gnicos. Para asegurar la coordinacin adecuada de biologas metablicos complejos, como los que se encuentran en los mamferos, los reguladores de reloj emplean una serie de activadores y represores accesorios para coordinar mltiples y distintas fases de la transcripcin, durante todo el da. Por otra parte, una cantidad significativa de procesamiento posterior a la transcripcin y de control de la traduccin, incluyendo las protenas de unin a ARN rtmicas, contribuye capas adicionales de la regulacin en la definicin del paisaje circadiano. La interaccin profundamente arraigada entre el ritmo circadiano y la presin evolutiva homeosttica se evidencia por los numerosos mecanismos por los que el reloj est conectado directamente en el estado energtico de la clula (resumido en la Figura 1). La union genmica rtmica de heterodmeros CLOCKBMAL1 est profundamente influenciada por el estado redox NADH/NAD. La oscilacin circadiana de la enzima biosintetica de NAD, nicotinamida fosforribosiltransferasa, impulsa los niveles rtmicos de NAD, que activan las desacetilasas dependientes de NAD, sirtuina 1 (SIRT1) en el citosol y en el ncleo y SIRT3 en la mitocondria, para dirigir la salida metablica. Heme acta como un ligando para Rev-erb, confiriendo de este modo una capacidad de deteccin de energa para el brazo represivo del reloj. Adems, el reloj circadiano es sensible a cambios en la relacin AMP/ATP a travs de la fosforilacion mediada por protena quinasa activada por AMP (AMPK) y posterior degradacin de CRY. Quizs el ejemplo ms antiguo y ms conservado de este emparejamiento integrante del ritmo circadiano y la presin evolutiva selectiva est en el ciclo independiente de transcripcin de enzimas peroxirredoxina, que protegen contra el aumento rtmica diaria de las especies reactivas de oxgeno y se encuentra en todos los dominios de la vida de las bacterias a las eucariota. Sin embargo, la lectura fisiolgica de este ritmo circadiano queda por establecer. D. el control del reloj metabolico en las sociedades modernas: la programacin en necesidad de una actualizacin La evolucin ha instaurado esta estructura molecular de control circadiano para adaptarse y prosperar bajo las presiones selectivas de escasez de alimentos, los cambios estacionales en la disponibilidad de luz solar, y rango variable de exposicin a la temperatura. Aunque este sistema afinado era suficiente para muchos miles de aos, hemos desarrollado rpidamente las condiciones sociales, que parecen superar las limitaciones de adaptacin de nuestra programacin circadiana (Figura 2). Con la introduccin de los restaurantes de comida rpida de 24 horas y la ayuda de las industrias multibillonarias de bebidas y aperitivos, comidas baratas y altas en caloras son accesibles a cualquier hora del da. Esta tendencia es an ms perjudicial para la salud humana combinada con una creciente poblacin de trabajadores de turno, ms viajes regulares en distintas zonas horarias, el jet lag social y la exposicin casi constante a la contaminacin lumnica artificial. Para empeorar las cosas, la mayora de las personas trabajan, recrear, y residen en condiciones interiores, donde los avances calefaccin y refrigeracin mantienen un entorno ambiental continuo. Acoplando esto a un estilo de vida sedentario en gran medida crea una situacin que requiere
poco o ningn gasto de energa para defender nuestra temperatura corporal
o ejercer actividad fsica, en marcado contraste con las realidades con las que se enfrentaban con frecuencia a nuestros antepasados. Es probable que no es una coincidencia que los ajustes radicales en estos parmetros ambientales de la nutricin, la luz y la temperatura se correlacionan con aumentos dramticos en las tasas de obesidad, diabetes, enfermedades cardiovasculares, depresin, y muchos tipos de cncer. Con este fin, ahora vamos a explorar la biologa circadiana especfica de tejido con una perspectiva evolutiva y examinar cmo estas funciones han o no han llegado a ser obsoletas o averiadas en la cara de condiciones de la sociedad moderna. En ltima instancia, esperamos que estas ideas identificarn las reas de control metablico circadiano que pueden ser objeto de nuevas estrategias teraputicas para volver a colocar las vas especficas reguladas por reloj con un mnimo o ningn perjuicio para la maquinaria central. II. Las contribuciones especficas de tejido a la fisiologa circadiana La fisiologa integradora de mamferos requiere que una red de clulas, rganos y tejidos especializados se comuniquen entre s a travs de los sistemas nervioso y endocrino. Este sistema es inherentemente interactivo, con ciertos rganos que actan como nodos, o centros, que juegan un papel desproporcionado en el comportamiento, el consumo y almacenamiento de energa, y la seleccin del combustible, como se detalla en esta seccin. Sin embargo, una consideracin importante al evaluar el control metablico circadiano especfico de tejido es la contribucin de la regulacin central por el reloj maestro vs los relojes de clulas autnomas. Esta distincin se aborda mejor usando la eliminacin condicional, especfica de tejido y se observar, en lo posible, en toda la seccin. A. Cerebro: el centro de mando El SCN es el regulador maestro circadiano que sincroniza el resto de los relojes celulares. Luz, una de las principales zeitgeber, es detectada por un conjunto especfico de fotorreceptores situados en la retina, y las seales se transmiten al SCN hipotalmico (Figura 2A). El SCN a su vez se comunica con otras neuronas en el sistema nervioso central para coordinar la ritmicidad del organismo en una red muy compleja que ha sido ms ampliamente examinada en otro lugar. El requisito absoluto del SCN en el control circadiano sistmico se demostr mediante la introduccin especficamente de lesiones en el hipotlamo. Temprano, estudios pioneros encontraron que las lesiones que destruyeron o alteraron el SCN ablandaron la ritmicidad tanto para la actividad de beber y fsica, as como los niveles de corticosterona en ratas. Experimentos similares demostraron adems que el SCN tambin se requiere para el patrn diario de la concentracin de glucosa en la sangre. Por ltimo, SCN injertos en animales con la biologa circadiana interrumpida pudieron rescatar y restaurar la ritmicidad del organismo. Cableando la sincronizacin de todos los relojes perifricos individuales a travs del SCN controlado por luz proporciona una serie de ventajas evolutivas. Lo ms importante, el regulador maestro garantiza una mayor
exactitud de alineacin de fase apropiada en los diversos sistemas
orgnicos. Acoplando este controlador maestro a un arrastre tan continuo y tan regular como la luz permite al organismo a responder no slo a los cambios diarios, sino tambin a los cambios estacionales. Por otra parte, una de las primeras funciones de los relojes biolgicos puede haber sido para proporcionar un mecanismo para disminuir los procesos celulares sensibles a mutacin como la replicacin del genoma durante la exposicin a la radiacin UV la luz del da (2). Sin embargo, la importancia central del SCN en el control circadiano de todo animal tambin hace que sea poco probable un punto de intervencin teraputica para la correccin de circuitos impuestos por evolucin obsoletos. En su lugar, la restauracin de la funcin del reloj y robustez circadiana en las redes neuronales puede ser un enfoque farmacolgico ms beneficioso para tratar las deficiencias en el reloj del sistema nervioso central. Esta estrategia ha sido prometedora en la mejora de comportamiento similar a la ansiedad. Los enfoques farmacolgicos correctivos podran tener un profundo impacto en la salud de la sociedad, teniendo en cuenta las numerosas variantes genticas o mutaciones en los genes del reloj que se han identificado en la poblacin. B. Tejido adiposo marrn: el centro termognico Tejido adiposo marrn (BAT) es una fuente importante de la termognesis facultativa de mamfero (es decir, la produccin de calor adicional por encima de la tasa metablica basal). El modelo clsico de la produccin de calor BAT comienza con un evento inicial estimulante, como la exposicin a la temperatura fra que provoca la actividad adiposo marrn travs de indicaciones hormonales transmitida por la sangre y de nutrientes, as como entrada directa neuronal desde el hipotlamo. Esta funcin se lleva a cabo a travs del consumo simultneo de fuentes de los lpidos y de combustible de carbohidratos y el reencaminamiento del gradiente de protones mitocondrial a travs del efector termognico, la disociacin de protenas 1. La actividad nica, de disipacin de energa de BAT tambin se controla de una manera circadiana (Figura 2B) por los componentes del reloj, Rev-erb, PER2, y BMAL1. Los niveles de Rev-erb aumentan mientras que los animales estn durmiendo y dan lugar a la represin transcripcional directa del programa termognico BAT, incluyendo UCP1. La eliminacin gentica de todo animal de Rev-erb suprime en gran medida la oscilacin de la actividad de BAT y la temperatura central de todo animal, lo que sugiere que el control del reloj del adiposo marrn es un importante impulsor del ritmo circadiano de la temperatura corporal. En consonancia con este modelo, cada da aumenta y disminuye en la termognesis BAT, segn lo medido por los termmetros de telemetra implantados, se encontr que preceden correspondientes cambios en la temperatura central. Para subrayar an ms el impacto potencial y la relevancia fisiolgica de produccin de calor BAT, estudios previos han demostrado que incluso los cambios sutiles en la temperatura corporal, bien dentro del rango termognico impulsados por Rev-erb, pueden sincronizar o restablecer relojes perifricos. La regulacin mediada por el reloj de la funcin termognica BAT tambin ejemplifica la asociacin integral entre el ritmo circadiano y la demanda
evolutiva. A medida que los euterios antiguos fueron sometidos a la
transicin de ectotrmicos a Endotrmicos, BAT ha adoptado un papel definido con mayor claridad y confiere una ventaja selectiva no slo para sobrevivir sino tambin para prosperar en climas ambientales adversos. Sin embargo, dada la escasez de alimentos con los que se enfrentaron nuestros antepasados durante miles de aos, la naturaleza de disipadora de energa de BAT tambin resultara muy desfavorable si no se controla. En este sentido, la hiptesis de que el reloj circadiano era evolutivamente programado para "apagar" BAT cuando no era necesaria su funcin, como por ejemplo durante el sueo, cuando la mayora de los animales estn protegidos en entornos ambientales. La actividad de BAT comienza a aumentar una vez que los animales se despiertan para proporcionar la proteccin trmica necesaria para la caza y la recoleccin de alimentos en ambientes hostiles. Esta red ha sido incluso ms equipado con una prueba de fallos en caso de que un animal es repentinamente expuesto a temperaturas fras durante el sueo. El principal regulador circadiano de BAT, Rev-erb, es rpido y significativamente reducido, lo que facilita la induccin completa de la respuesta termognica. Este mecanismo rtmico de la disminucin de la actividad de BAT durante el sueo est perfectamente en lnea con los principios evolutivos, pero ahora es ms un obstculo para la salud metablica frente a comer en las madrugadas y las dietas occidentales ricos en calorias. Orientando este freno en funcin de BAT podra proporcionar una manera de aumentar el consumo diario de BAT de reservas de glucosa y la grasa de una manera ms segura y ms especfico que a travs de la va ms clsica, ubicua de la sealizacin adrenrgica. Por otra parte, prevenir el reloj de BAT de suprimir de forma activa la quema de caloras en la noche podran aumentar potencialmente la produccin BAT sin una elevacin incmoda o peligrosa de la temperatura corporal que es quizs ms probable con las estrategias que mejoran la actividad BAT ms all de su mxima capacidad endgena. Sin embargo, si la diferencia en el balance energtico de desbloquear la inhibicin circadiana de BAT sera lo suficientemente significativo como para mitigar los efectos del sndrome metablico es todava indeterminado. Dado que el ritmo circadiano de la funcin BAT tambin se correlaciona con la ingesta de alimentos y BAT se cree que es un contribuyente a la termognesis inducida por la dieta, experimentos adicionales tambin deben ser llevados a cabo de separar las contribuciones mecanicistas de control central y de dieta de la oscilacin de la actividad de BAT. C. El tejido adiposo blanco: el centro de almacenamiento El mayor depsito del cuerpo para la energa derivada de la dieta es el tejido adiposo blanco, que se acumula triglicridos. Con una energa potencial de 9 kcal/g, los triglicridos son la forma de almacenamiento ms eficiente de la energa biolgica. Durante los perodos de ayuno, los adipocitos blancos moviliza estas reservas de lpidos para su uso como sustratos oxidativos en los tejidos perifricos como el msculo esqueltico. De esta manera, la evolucin ha programado el reloj circadiano para aumentar vas lipolticas durante el sueo para compensar la ausencia de fuentes de energa de la dieta en ratn y humano. Por el contrario, mientras que los animales estn despiertos y alimentndose, adipocitos blancos
construye tiendas de triglicridos con los lpidos producida por hgado
(Figura 2C). El control circadiano de la movilizacin de lpidos est mediada, al menos en parte, a travs de ritmo inducido por CLOCK y a BMAL1 de la lipasa adiposa de triglicridos (ATGL) y la expresin gnica lipasa sensible a hormonas (HSL). De hecho, la interrupcin gentica de Bmal1 o uso del mutante dominante negativo CLOCK19 resulta en niveles arrtmicos de cidos grasos libres sricos y disminucin de tasas de liplisis, lo que contribuye al desarrollo de la obesidad. Adems, eliminacin de BMAL1 adiposo-especifico tambin parece influir en la diafona adiposo-hipotalmica travs de alteraciones en el nivel de las especies de lpidos poliinsaturados que se liberan en la sangre. El brazo represor del reloj modula el metabolismo de los lpidos a travs de la supresin PER2-dependiente del receptor activado por el proliferador de peroxisomas receptor nuclear altamente adipognica y sensibilizantes a la insulina y la represin transcripcional dependiente de Rev-erb de la lipoprotena lipasa. El tejido adiposo es tambin un factor clave para la sealizacin endocrina a travs de la produccin de adipoquinas, incluyendo la leptina, resistina, adiponectina y, cuyos niveles circulantes son robustamente circadiano. El saciedad de adipoquinas, leptina, alcanza niveles sricos mximos en el periodo inicial de la fase inactiva en tanto animales diurnos (por ejemplo, mono y humano) y nocturnos (por ejemplo, ratn y rata). Esto es consistente con una supresin del apetito en previsin de sueo. Adems, la adiponectina y la resistina exhiben patrones de expresin rtmicos, aunque la funcin fisiolgica de esta oscilacin sigue siendo desconocida. Las funciones circadianas conservadas de tejido adiposo blanco sirven para modular la homeostasis sistmica de lpidos a travs del almacenamiento de triglicridos durante la alimentacin y el suministro de tejidos perifricos con sustrato de cido graso durante el ayuno. Sin embargo, los patrones de estilo de vida actual, caracterizado por la alimentacin frecuente y alta en caloras, con perodos ms cortos de ayuno, as como eventos perturbadores del sueo, tales como el jet lag y el trabajo por turnos, han inclinado negativamente el metabolismo adiposo blanco hacia el almacenamiento y la acumulacin. Un rasgo de una vez selectivamente deseable para la supervivencia del organismo cuando la comida era escasa ahora contribuye a las tallas de continua expansin y enfermedades metablicas perjudiciales. La intervencin teraputica para corregir la desregulacin circadiana del metabolismo adiposo blanco sera probable que tenga que acoplarse a un mtodo para aumentar la oxidacin de grasas en los tejidos perifricos. Simplemente limitando la acumulacin de triglicridos en los depsitos de tejido adiposo podra resultar en un cambio de ruta y deposicin de los lpidos en otros tejidos, como el msculo esqueltico y el hgado, posiblemente con consecuencias an ms perjudiciales. Por otra parte, elucidacin adicional de las contribuciones endocrinos circadianas de
adiposo blanco podra ser beneficioso en el desarrollo de nuevas estrategias
para sincronizar la homeostasis energtica sistmica. D. Hgado: el centro de gestin de combustible El hgado es un rgano que ha sido evolutivamente encargado de la responsabilidad de mantener la homeostasis energtica sistmica a travs de la sntesis y almacenamiento coordinados de las fuentes de lpidos y carbohidratos de combustible (Figura 2D). Para ms efectivamente lograr este equilibrio, el hgado recibe seales del reloj maestro en el SNC, as como seales independientes del comportamiento de alimentacin y el ayuno del animal. Sin embargo, estos colaboradores neuronales y mediados por nutrientes a la oscilacin metablica heptica no funcionan en exclusividad mutua. Por ejemplo, el hepatokina inducida en ayuno, factor 21 de crecimiento de fibroblastos, influye directamente en redes circadianas centrales a travs de la unin a su correceptor obligado, -KLOTHO, en el SCN. Adems, las hormonas glucocorticoides producidas suprarrenalmente antagonizan la capacidad de tiempos de comida alterados para desacoplar el control central y perifrico sobre ritmos metablicos del hgado. La coordinacin circadiana de la homeostasis de la energa heptica emplea tanto activar y reprimir los brazos del reloj central. CLOCK y BMAL1 ejercen una profunda influencia en la gluconeognesis y la oscilacin sistmica de glucosa en sangre. CLOCK juega un papel en la va de la sntesis de glucgeno mediante la promocin de la expresin de GYS2. La evidencia de modelos knockout en todo animal demuestra que PER2 tambin estimula los niveles de glucgeno durante la realimentacin a travs de aumentos en GYS2. Por el contrario, la produccin de glucosa se regula negativamente por las protenas CRY, que atenan los aumentos mediada por glucagn en niveles AMPc y disminuyen la produccin de la gluconeognesis. CRY1 y -2 tambin interactan con los receptores de glucocorticoides de una manera dependiente de hormonas para modular directamente la expresin de la enzima efectora de gluconeognesis, la fosfoenolpiruvato carboxiquinasa 1 (PCK1 o PEPCK). La induccin anticipatoria en genes lipognicos hepticos antes de una vigilia y alimentacin animal est mediado casi exclusivamente por la desrepresin de genes diana de Rev-erb/ e histona deacetilasa 3. Este fenmeno se observa tanto en modelos todo-animal y especficos de tejido de interrupcin Rev-erb, indicando de este modo las contribuciones significativas por el reloj del hgado perifrico. Rev-erb tambin modula la ritmicidad del metabolismo del colesterol a travs del factor de transcripcin, proteina vinculada a elementos reguladora de esterol, y sntesis de cidos biliares mediante la regulacin de CYP7A1. Las oscilaciones en la biosntesis de NAD conducen la activacin de SIRT3 en las mitocondrias, que conduce a aumentos circadianos en la utilizacin de cidos grasos del hgado durante la fase de sueo. Diariamente el ritmo de NAD en el citosol y el ncleo coordina desacetilacin mediada por SIRT1 de histonas y componentes del reloj central para orquestar la expresin gnica. Adems de la desacetilacin dependiente de SIRT1 de histonas, el control de todo el genoma circadiano de la programacin metablica heptica se
suscit en una intrincada red de las fases de la transcripcin impulsada por
factores individuales de reloj. En conjunto, estos mecanismos definen cmo est cableado el reloj del hgado para mantener la homeostasis de la glucosa en sangre. Las reservas de glucgeno del hgado se agotan mientras el animal est dormido y en un estado de ayuno y despus se rellenan durante el perodo de vigilia cuando el animal mantiene la glucosa en sangre a travs de medios dietticos. Los aumentos en el programa lipognico heptica que proceden la primera alimentacin del animal probablemente sirven una ventaja evolutiva en la maximizacin de la cantidad de energa que podra ser extrada de una comida y se deposita en los depsitos de tejido adiposo. Curiosamente, el hgado se ha demostrado que media la diafona entre tejidos a travs de la produccin rtmica de fosfatidilcolina 18: 0/18: 1 para influir en la utilizacin de lpidos circadianos en el msculo esqueltico. La programacin circadiana del hgado, que desde hace miles de aos era ventajosa debido a su coordinacin con la disponibilidad de nutrientes, los patrones de alimentacin y los hbitos de estilo de vida, es desafiado por nuestra sociedad moderna caracterizado por el exceso de caloras y el aumento de la prevalencia de trastornos del sueo. De hecho, una dieta alta en grasa ad libitum (HFD) deteriora la funcin heptica circadiana, y los trabajadores por turnos exhiben tasas significativamente mayores de hgado graso. Por otra parte, los estudios que examinan la alimentacin de tiempo restringido en ratones sugieren que el viejo dicho "eres lo que comes" debe modificarse para incluir tambin "eres cuando comes." Cuando los animales se vieron obligados a comer durante el perodo de luz cuando normalmente duermen, ritmos metablicos en el gasto de energa y ritmos de la temperatura corporal se invirtieron completamente. Sin embargo, la restriccin del tiempo del consumo de alimentos al perodo de alimentacin murino normal en la noche hizo posible sincronizar las vas metablicas del hgado, corregir disfuncin en el modelo diabtico db/db, y prevenir el desarrollo de la patologa heptica inducida por HFD, sin reduccin en la ingesta calrica total diaria. Sorprendentemente, incluso el tiempo de restriccin de la HFD slo durante la semana y permitiendo a los ratones el acceso ad libitum durante el fin de semana para simular un estilo de vida humano ms recreacional era suficiente para retener los beneficios metablicos observados bajo alimentacin restringida de tiempo constitutiva. La preponderancia de los datos podra, por tanto, sugerir que el "tratamiento" ms eficaz sera la simple adopcin de un estilo de vida en el que la alimentacin se limita aproximadamente al mismo tiempo y dentro de las horas del da. Sin embargo, esta es una meta inalcanzable para el creciente porcentaje de la poblacin que trabaja en la noche o navegacin repetidas ocasiones entre las zonas horarias. Dado que la interrupcin gentica y diettica del reloj de hgado de ratn conduce a aberrante lipognesis hiperactiva y, en consecuencia, la esteatosis, orientando negativamente la produccin heptica de lpidos dentro de la ventana circadiana en la que la lipognesis es normalmente suprimida podra servir como una medida correctiva. Este concepto ya ha sido propuesto para el control circadiano de la homeostasis de la glucosa. La induccin ectpica de
CRY1 suprime la gluconeognesis y mejor la sensibilidad a la insulina en un
modelo de ratn diabtico. E. Corazn: el centro de distribucin El corazn es responsable de asegurar la circulacin continua de oxgeno, metabolitos y hormonas transmitidas en sangre necesarias para la coordinacin de la homeostasis del organismo correspondiente. Esta carga de trabajo del corazn aumenta significativamente cuando los animales son activos, y por lo tanto el reloj ha sido configurado para modular en consecuencia el metabolismo cardaco durante todo el da (Figura 2E). El ritmo circadiano de la frecuencia cardaca y la presin arterial humana alcanza su nadir, o punto ms bajo, en las primeras horas de la maana que corresponde al punto de sueo ms profundo y temperatura corporal central ms baja. Sin embargo, antes de despertar, tanto la frecuencia cardaca y la presin arterial aumentan. La manera en que estos eventos fisiolgicos preceden al acto de excitacin y preparan el corazn para una carga de trabajo aumentada ejemplifica la naturaleza anticipatoria de programacin evolutiva circadiana. Esta oscilacin diaria es facilitada metablicamente por una transicin entre las fuentes de combustible. Los cardiomiocitos se someten a aumentos impulsados por circadiano en la captacin de glucosa y la gluclisis, as como la elevacin en la sntesis de triglicridos inmediatamente antes y durante las horas de vigilia activas. Resultados similares se observaron en ratas donde los corazones aislados durante la fase de oscuridad, cuando la actividad de roedores aument, mostraron los niveles ms altos de rendimiento contrctil, la oxidacin de carbohidratos, y el consumo de oxgeno. El ritmo de estos procesos fue separado en gran parte en modelos de cardiomiocitos especfico de la expresin mutante Clock19 o la supresin de Bmal1, lo que indica una dependencia funcional en el propio reloj del corazn y un papel directo en la enfermedad cardaca. La depresin del reloj, el regulador transcripcional, factor 15 como Krppel, contribuyen al control circadiano de la repolarizacin cardiaca, los dficits de los cuales desempean un papel causal en el desarrollo de arritmias cardacas. Por otra parte, la disminucin diaria o "cada" de la presin arterial es esencial, y las personas que mantienen una elevada carga de trabajo cardiaco constitutivo estn en riesgo significativamente mayor de daos en los rganos perifricos y en la vasculatura. La estructuracin de la evolucin del reloj del corazn para aumentar la utilizacin de carbohidratos y la carga de trabajo antes de la excitacin demuestra una clara ventaja selectiva en la preparacin de los animales para explosiones agudas de actividad necesarias para garantizar la alimentacin o la seguridad. Sin embargo, en el contexto de la sociedad moderna, ese mismo programa circadiano ha afectado profundamente a la salud de las personas que padecen una perturbacin aguda o crnica de sueo, sobre todo en la forma de trabajo por turnos. La intervencin teraputica en el reloj cardiaco presenta una propuesta arriesgada dado el papel crtico del corazn. Con este fin, tal vez la opcin ms viable para mejorar la salud cardiovascular circadiana puede ser simplemente restaurar la robustez de la amplitud del reloj del corazn en individuos que sufren de
trastornos circadianos genticos o ambientales. Esta mejora puede ser
exigida travs de la activacin de molculas pequeas de la funcin de los componentes de reloj. Esta activacin funcional probablemente tendra que ocurrir independientemente de la estabilizacin de protenas debido a un aumento de vida media del factor de reloj podra afectar negativamente a la periodicidad. F. Pncreas: el centro de control de la glucemia El mantenimiento continuo de los niveles de glucosa en sangre dentro de un estrecho rango de concentraciones es absolutamente crtico para la funcin neuronal y la supervivencia. Homeostasis glucmica es supervisada y sostenida por la liberacin coordinada de insulina o glucagn del pncreas para subir o bajar la glucosa en sangre, respectivamente (Figura 2F). Dado los patrones de sueo/vigilia, alimentacin/ayuno, y activos/inactivos que los mamferos exhiben, el reloj biolgico ha encableado el pncreas para anticipar periodos diarios de aumentos o disminuciones de glucosa. De hecho, los genes pancreticos involucrados en la vida de produccin y secrecin de insulina oscilan, y los niveles circulantes de insulina tienen un ritmo circadiano tanto en roedores y seres humanos. En los seres humanos, este ciclismo llega a su punto ms bajo durante las primeras horas de la maana y aumenta en la tarde a mediados y finales. Aunque los patrones de alimentacin diarios probablemente juegan un papel integral en la coordinacin de la secrecin de insulina circadiano, aislados islotes de rata muestran un ritmo clula autnoma de liberacin de insulina, lo que subraya la importancia del reloj pancretico intrnseco. Modelos Bmal1 knockout todo-animal y CLOCK19 dominante negativo de ratn demuestran defectos en la proliferacin y funcin celular y la secrecin de insulina estimulada por glucosa que resulta en intolerancia a la glucosa en todo el animal. Una de las rutas a travs del cual BMAL1 es protector de la funcin celular parece ser a travs de la prevencin de la acumulacin de especies reactivas de oxgeno a travs de la induccin de la transcripcin del factor 2 relacionado con el factor de 2 eritroide (Nrf2) factor regulador antioxidante maestro. El brazo represivo del reloj tambin juega un papel en la sealizacin endocrina del pncreas. La interrupcin de Re-verb en las clulas y clulas atenuan significativamente la liberacin de insulina estimulada por la glucosa y la secrecin de glucagn estimulada por baja glucosa, respectivamente. Por el contrario, la glucosa fue ms eficaz en la estimulacin de la secrecin de insulina en ratones que carecen PER2. La comprensin de cmo y cuando el reloj influye ms significativamente a la secrecin de insulina y glucagn seran potencialmente informativos en la modulacin de concentraciones de dosis apropiadas a lo largo del da. Esto es particularmente importante dado el advenimiento de anlogos de insulina que son ms longevos que la insulina pancretica endgena. G. El msculo esqueltico: el centro de movimiento El msculo esqueltico comprende la masa de tejido ms grande del cuerpo humano y representa una mayora de la eliminacin de glucosa en sangre postprandial. A travs de fuerzas de contraccin, el msculo esqueltico
proporciona el medio esencial por el cual los animales alcanzan movimiento,
incluyendo los actos fundamentales de la supervivencia tales como la bsqueda de alimento y refugio y evitar a los depredadores y peligros ambientales (Figura 2G). El msculo esqueltico quema combustibles diferentes en funcin de la demanda metablica, que dependen ms exclusivamente de la glucosa durante condiciones de alimentacin y entrenamiento de resistencia, pero conmutando principalmente a la utilizacin de lpidos durante el ayuno y el ejercicio de resistencia prolongado. Dada la estrecha relacin entre la actividad fsica y los patrones de sueo / vigilia, no es de extraar que numerosos aspectos de la programacin bioenergtica del msculo esqueltico estn bajo el control del reloj, tanto en ratones como en humanos. A pesar de que las estimaciones anteriores identificaron 215 genes circadianos en msculo esqueltico del ratn, los anlisis ms recientes han indicado que ms de 800 genes que muestran un ritmo circadiano en el tejido. Modelos knockout genticos han sido altamente informativo en el descubrimiento de las funciones reguladoras especficas de los componentes individuales de reloj en el metabolismo del msculo esqueltico. La eliminacin inducible msculos-especfica de BMAL1 revel una deficiencia notable en la captacin de glucosa estimulada por la insulina. Estos estudios sugirieron que el brazo de activacin del reloj es crtico en orquestar el interruptor en la fuente de combustible a partir de lpidos a glucosa que se produce durante la transicin sueo-a-vigilia. Adems, el rescate de la expresin en musculo esqueltico de BMAL1 en el contexto de un nocaut en todo el animale impidi parcialmente la disminucin de la actividad y el peso corporal total y se indica que el ritmo de msculo funcional tiene un impacto profundo en la homeostasis energtica sistmica. Subrayando an ms la importancia del control de reloj en la fisiologa del msculo es la constatacin de que la clave del factor de transcripcin de diferenciacin muscular, MyoD, es circadiano, y la alteracin de su patrn de expresin normal debido a cualquiera de la mutacin clock19 o la supresin Bmal1 resultando en la estructura y funcin muscular modificada. El brazo represivo del reloj tambin contribuye a la programacin circadiana del msculo esqueltico. Rev-erb controla la utilizacin de lpidos del msculo esqueltico, al menos en parte, a travs de la regulacin de la transcripcin directa de la lipoprotena lipasa como se evidencia por la eliminacin de Rev-erb en todo el animal. Tambin se encontr que Reverb impacta positivamente en la capacidad de ejercicio y el metabolismo oxidativo al incidir sobre el eje LKB1-AMPK-SIRT1-PGC-1. Curiosamente, el coactivador transcripcional, PGC-1, ha sido previamente demostrado que induce la expresin de tanto Bmal1 y Rev-erb en el msculo esqueltico a travs de los receptores nucleares ROR, idealmente ilustrando cmo la diafona entre el reloj y las redes metablicas va en ambas direcciones. Al igual que en otros tejidos tales como tejido adiposo marrn, el control circadiano de metabolismo del msculo esqueltico, en particular la seleccin de sustrato de energa, se probablemente evolucion como un medio de conservacin. La utilizacin de carbohidratos se baja durante el
perodo de reposo, en la que el animal esta ayunando, y los lpidos se
convierten en la fuente de energa predominante a preservar los niveles de glucosa en sangre para la funcin cerebral adecuada. Antes de despertar, el reloj de nuevo seala una transicin anticipada que restituye la glucosa como fuente de combustible principal preparando al animal para la actividad fsica (por ejemplo, la bsqueda de alimentos). Curiosamente, el reloj perifrico del msculo esqueltico no slo dicta el ritmo de la capacidad funcional, pero es en s mismo sujeto a la influencia y sincronizacin por la actividad fsica. Esto ayuda a explicar cmo el estilo de vida sedentario del hombre moderno ha repercutido notablemente en los mecanismos instalados evolutivamente de arrastre. La influencia de la actividad fsica en el reloj del msculo esqueltico tambin indica que el ejercicio en diferentes momentos del da puede ser ms o menos beneficioso y por lo tanto tiene importantes implicaciones para la salud humana. Adems, la comprensin del mecanismo molecular del control circadiano del musculo esqueltico circadiano puede proporcionar vas teraputicas potentes para la enfermedad metablica. La determinacin de la maquinaria depresora a travs del cual el reloj msculo esqueltico cambia entre las fuentes de combustible o modula la absorcin de glucosa podra proporcionar objetivos potentes, especficos de tejido para soltar los frenos evolutivos para contrarrestar la hiperglucemia diabtica o elevar la capacidad oxidante de grasa. H. Microbiota intestinal: el centro de procesamiento de alimentos El intestino humano es hometo a una enorme y muy diversa poblacin de microorganismos, conocida como la microbiota intestinal, que ha coevolucionado con su husped para influenciar profundamente la homeostasis de la energa del organismo. La composicin nica del medio bacteriano confiere diferentes propiedades al husped, incluyendo la influencia sobre cual nutrientes pueden ser extrados de los alimentos (Figura 2H). La interrupcin de este delicado equilibrio husped / microbio puede conducir a graves consecuencias fisiopatolgicas, como las enfermedades cardiovasculares y la obesidad. Por lo tanto, el eje microbiano intestinal/estomacal es crtico para la forma en que el husped "ve" una comida. Dada la naturaleza circadiana de la ingesta de alimentos, no es sorprendente que esta dinmica est sujeta a la regulacin por el reloj. De hecho, las actividades de regulacin de componentes de reloj, ROR, y Rev-erb contribuyen a la conversacin circadiana entre las clulas epiteliales intestinales y la microbiota intestinal a travs de la regulacin transcripcional de los receptores tipo toll. El reloj central afecta tambin la oscilacin de las especies bacterianas que comprenden la microbiota. La interrupcin gentica de todo el cuerpo del reloj del husped a travs de la eliminacin de Per1 y 2 dio como resultado la prdida del ritmo bacteriano. Por otra parte, la alteracin ambiental del ritmo circadiano humano y del raton mediante el cambio de fase de los ciclos de luz: oscuridad y el jet lag a travs de las zonas horarias, respectivamente, alter significativamente el patrn bacteriano 24 horas. El ritmo circadiano de la microbiota del intestino est influenciado de manera similar por la composicin diettica. HFD afecta negativamente el ciclo diurno de la microbiota intestinal; sin embargo, la HFD restringida de tiempo a una porcin del perodo activo oscuro, rescata
parcialmente la oscilacin normal. La combinacin de mltiples
interrupciones ambientales y el cambio de fase de los ciclos luz: oscuridad de los ratones alimentados con una dieta alta en grasa / alta en azcar agrava an ms los efectos perjudiciales en el microbioma intestinal. Desde una perspectiva teraputica, el microbioma intestinal ofrece vas nicas para el desarrollo de nuevas estrategias de tratamiento. Los estudios de prueba de concepto han demostrado que las bacterias que fueron genticamente modificadas para producir un metabolito beneficioso fueron capaces de reducir la adiposidad, la resistencia a la insulina y la esteatosis heptica en ratones obesos. Pueden usarse enfoques probiticos similares para corregir, restablecer o mantener un ritmo adecuado en la poblacin de flora intestinal. El microbioma del intestino y su patrn circadiano probablemente coevolucionaron con el husped para maximizar la extraccin de caloras, dada la relativa escasez de disponibilidad de alimentos por miles de aos. Una investigacin adicional de la composicin del microbioma a diferentes horas del da podra revelar subtipos bacterianos oscilantes especficos responsables de la variacin diurna en la capacidad de procesar alimentos. III. Conclusin Una tesis central de esta revisin es que los mecanismos de reloj circadiano seleccionados evolutivamente se ven afectados por estilos de vida modernos. Este nuevo desafo plantea la posibilidad de estrategias circadianas basadas en la terapia que modulan las actividades de componentes del reloj central. Por ejemplo, se ha sugerido que los agonistas de Rev-erb aumentan el gasto energtico y reducen la adiposidad en los modelos de ratones obesos inducidos por la dieta, aumentan la capacidad de ejercicio y suprimen el comportamiento similar a la ansiedad. Sin embargo, a pesar de estos efectos benficos potenciales, el objetivo de los componentes del reloj central conlleva un riesgo, dada su presencia funcional en cada clula del cuerpo. Los diversos roles metablicos de los factores de reloj en diversos tejidos complican an ms el uso sistmico de agonistas o antagonistas ubicuos. Con este fin, ahondar ms profundamente en los mecanismos especficos del tejido a travs de los cuales el reloj controla las vas metablicas clave ofrece una ventaja selectiva con menor riesgo de efectos secundarios adversos. Es importante destacar que tener en cuenta el propsito evolutivo de varias funciones controladas por reloj proporciona un valioso filtro a travs el cual se pueden identificar las redes que podran ser ms clnicamente eficaces. Por ejemplo, podemos desarrollar estrategias teraputicas dirigidas para detener la regulacin negativa mediada por reloj de la produccin de calor de grasa marrn, aumentar la sensibilidad a la glucosa muscular a lo largo del da o atenuar la lipognesis heptica aberrante en individuos con interrupcin del sueo? Se podra utilizar un muestreo de ARN de pequea molcula y un pequeo ARN interferente para identificar receptores de superficie claves especficos de tejidos y factores intracelulares que median el control metablico circadiano de una manera similar a la empleada anteriormente para moduladores oscilatorios ms
generales. Esta estrategia tiene el potencial de lograr terapias novedosas
altamente potentes y selectivas sin detrimento global del reloj central. No slo este concepto es factible, pero la probabilidad es que muchos medicamentos comercialmente disponibles ya estn funcionando de esta manera. De hecho, ms del 50% de los frmacos ms vendidos en los Estados Unidos se dirigen a un producto gnico circadiano. Este hallazgo demuestra la profunda importancia de determinar la ventana temporal ms apropiada de oportunidad teraputica para cada objetivo del frmaco. De hecho, la reevaluacin de la dosificacin y el tiempo de administracin de los frmacos existentes que se dirigen a los programas metablicos circadianos puede mejorar la eficacia o reducir los efectos secundarios negativos. La evolucin ha instalado en nosotros un potente reloj interno programado para anticipar acontecimientos fisiolgicos basados en una batera de seales de arrastre, incluyendo luz, temperatura, comida y actividad fsica. Desafortunadamente, la infraestructura de la sociedad de hoy y nuestras opciones de estilo de vida han "tirado una llave" en nuestro mecanismo biolgico. Con este fin, descubriendo los fundamentos moleculares a travs de los cuales se coordina el metabolismo circadiano de cada tejido, podemos ser capaces de manipular la caja de herramientas evolutiva y llevar el reloj hasta los tiempos modernos.
Figura 1. Interaccin entre el reloj celular-autnomo y el metabolismo. El
reloj biolgico central, presente en cada clula del cuerpo, consiste en un circuito de retroalimentacin transcripcional autorregulatorio. El brazo activador (resaltado en verde) est compuesto por los reguladores transcripcionales BMAL1 y CLOCK, los cuales heterodimerizan e inducen la expresin del brazo inhibidor (destacado en rojo). El brazo inhibidor contiene los factores Rev-erb, CRY y PER. Rev-erb acta para suprimir la transcripcin de Bmal1, mientras que CRY y PER inhiben directamente la funcin de activacin de complejos heterodimeros BMAL1 / CLOCK. Los miembros de ambos brazos activadores e inhibidores del reloj coordinan la programacin metablica a travs del control transcripcional de los genes controlados por reloj (CCG) implicados en una amplia gama de redes bioenergticas. El resultado metablico resultante de esta regulacin se retroalimenta en componentes de reloj individuales, vinculando la aptitud energtica de la clula con la funcionalidad circadiana. Varios nodos en este circiuto molecular sostenido estn sujetos a control adicional por las oscilaciones intracelulares de metabolitos clave, incluyendo heme, NAD y AMP.
Figura 2. Impacto de ambientes modernos en funciones circadianas
programadas evolutivamente. La luz solar, la temperatura, la actividad fsica y la ingesta de alimentos sirven como indicadores bsicos de arrastre, o zeitgebers, que coordinan los procesos circadianos especficos del tejido para definir de forma acumulativa la fisiologa del organismo entero. Entre estos zeitgebers, la luz es la seal principal de sincronizacin y acta para restablecer el reloj maestro (A) en el SCN hipotalmico cada da, que luego transmite la sealizacin a los tejidos perifricos. Se describen los procesos circadianos especficos de tejidos evolutivamente ajustados, analizados en esta revisin, que incluyen: B, produccin de calor por adiposo marrn; C, almacenamiento de energa por adiposo blanco; D, manejo de la fuente de combustible entre los sustratos de carbohidratos y lpidos en el hgado; E, distribucin o circulacin de factores sanguneos, hormonas y metabolitos por el corazn; F, control de los niveles de glucosa en sangre por el pncreas; G, capacidad de movimiento y actividad por msculo esqueltico; Y H, procesamiento de alimentos y extraccin de nutrientes por el microbioma intestinal. Una combinacin de contaminacin lumnica de fuentes de luz artificial, estilos de vida sedentarios que carecen en gran medida de actividad fsica, acceso continuo a alimentos ricos en caloras y condiciones de vida mantenidas a temperatura ambiente constante, han contribuido a la interrupcin del estado fisico circadiana.