INTRODUCCIN AL ESTUDIO DE LA CLULA

Silvia Mrquez - Lionel Valenzuela Prez - Gladys Glvez - Luis A. Fernndez - Cecilia Bocchino

NIVELES DE ORGANIZACIN
Fig. 1.1. Niveles de organizacion de la materia
A los seres vivos se los define por sus caractersticas, una de stas es su organizacin. Esta
organizacin biolgica representa el patrn complejo que nos muestra el camino que ha seguido
la evolucin, desde formas sencillas a otras ms complejas.

Los seres vivos estn formados por materia.

La materia est formada por elementos (92
elementos naturales, como el Cloro, por
ejemplo) y se caracteriza por poseer
determinadas propiedades intensivas, tales
como el punto de fusin, punto de ebullicin,
conductividad
elctrica,
etc.
Los elementos estn formados por tomos.
Un tomo es la porcin ms pequea de un
elemento que conserva sus propiedades
qumicas. Las investigaciones de los fsicos
han descubierto un variado nmero
de partculas
subatmicas(Nivel
Subatmico),
para
nuestros
fines
mencionaremos slo tres : protones,
neutrones y electrones. Los protones son
partculas con carga positiva; los electrones,
en cambio, tienen carga negativa y masa muy
pequea; los neutrones son partculas
neutras, sin carga, y su masa es casi idntica
a la de los protones; los protones y
neutrones forman casi toda la masa de un
tomo y se localizan en el ncleo atmico. Si
combinamos un protn y un electrn se
forma un tomo de Hidrgeno, entidad con
propiedades diferentes a las de un protn y
un electrn (Nivel Atmico). Si combinamos
tomos de Hidrgeno entre s obtenemos
Hidrgeno molecular (H2), que es un gas
incoloro; si, en cambio, combinamos el H 2 con
Oxgeno, otro gas, obtenemos agua, una
molcula (Nivel
Molecular) cuyas
propiedades todos conocemos y que no son
las mismas que las del H2 y el O2 y que
tambin difieren de las propiedades de las
partculas subatmicas y de los tomos que
stas forman.

molculas.

La vida surgi a partir de tomos y

Si combinamos molculas entre s, formamos grandes y complejas molculas: las

macromolculas, como las protenas y los cidos nucleicos (Nivel Macromolecular). Estas
macromolculas constituyen la materia prima que forman los virus (Nivel Prebitico o
Supramolecular) y las clulas (Nivel Celular). En el Nivel Subcelular mltiples molculas se
ensamblan y dan lugar a estructuras especializadas como los organoides (mitocondrias,

cloroplastos, etc). Podemos decir que la vida aparece como propiedad definitoria en el Nivel
Celular, o de otro modo, la clula es la porcin ms sencilla de la materia viva que es capaz de
realizar todaslas funciones imprescindibles para la vida.
En la mayor parte de los individuos pluricelulares, las clulas se organizan de acuerdo a sus
caractersticas y funciones conformando tejidos como el conectivo, muscular, epitelial,
nervioso (Nivel Tisular). Los tejidos estn ordenados en estructuras funcionales,
denominadas rganos como el corazn y los pulmones en los animales, o las hojas y las races en
las plantas. Las funciones biolgicas bsicas se llevan a cabo por un sistema o aparato, que es
una asociacin coordinada de tejidos y rganos. Los organismos o individuos pluricelulares
estn formados por sistemas que actan en forma coordinada y rigurosa.
Existen otros niveles de organizacin biolgica, adems de los nombrados anteriormente,
donde las propiedades provienen de la relacin entre los organismos. Por ejemplo, el Nivel de
organizacinPOBLACIN rene a todos los individuos de una misma especie que viven en un
mismo lugar, en el mismo tiempo, y que comparten el mismo hbitat. Estas poblaciones
interactan de distinta manera con otras poblaciones del lugar constituyendo
una COMUNIDAD, por ejemplo la poblacin de seres humanos de la ciudad de Buenos Aires y el
conurbano, aprovecha para alimentarse a las distintas poblaciones de animales y plantas de la
zona y se halla parasitada por las mismas poblaciones de parsitos intestinales.
Esta comunidad comparte el mismo lugar fsico que presenta caractersticas particulares. La
unin de estos factores fsicos con los factores biolgicos constituyen los ECOSISTEMAS.
Todos los ecosistemas de la Tierra estn relacionados, directa o indirectamente. Es por ello
que un cambio drstico o continuo de alguno de ellos indefectiblemente acarrear cambios en
los restantes. Del mantenimiento de un equilibrio entre los distintos ecosistemas, depende la
vida en el planeta.

Tabla 1.1- Niveles de Organizacin

1. Nivel Subatmico

2. Nivel Atmico

3. Nivel Molecular (Monosacridos, Aminocidos, Nucletidos, etc.)

4. Nivel Macromolecular (Polisacridos, Protenas, Acidos nucleicos, Lpidos complejos, etc. )

5. Nivel Prebitico o Supramacromolecular (Virus )

6. Nivel Subcelular (Organoides: Mitocondrias, Cloroplastos, Ribosomas, etc.)

7. NIVEL CELULAR {Clula Procarionte, Clula Eucarionte) Individuos Unicelulares: Bacterias,

Algas unicelulares, Levaduras, Protozoos, etc.

8. Nivel Tisular (Tejidos: Conectivo, Epitelial, Muscular, etc.)

9. Organos (Corazn. Pulmones. Estmago, etc.)

10. Sistemas y Aparatos (Aparato Circulatorio, Sistema digestivo, etc. )

11. Organismos(Individuos Pluricelulares, Animales y Vegetales Superiores).

12. Poblacin

13. Comunidad.

14. Ecosistema

15. Universo

Durante el desarrollo de nuestra materia, nos ocuparemos de los niveles de organizacin

ms sencilla y haremos hincapi en el Nivel Celular de Organizacin.

ORGANIZACIN CELULAR
TEORA CELULAR

La clula es la unidad de vida ms pequea. Es la unidad anatmica y fisiolgica de todos los

seres vivos. Dos cientficos alemanes el botnico Mattias Schleiden (1804-1881) y el zologo
Theodor Schwann (1810-1882) fueron los primeros en sealar que " Los cuerpos de las plantas y
de los animales estn compuestos por clulas y por productos celulares " enunciando el
postulado inicial de la Teora Celular
Posteriormente, Rudolph Virchow (1821-1902) amplio la Teora Celular y afirm: " Todas las
clulas proceden de otra preexistente". Por lo tanto, las clulas no surgen por generacin
espontnea a partir de materia inanimada.
Otra importante conclusin de la Teora Celular afirma que todas las clulas actuales, tienen un
origen comn. La evidencia ms importante, sobre el origen comn de todas las formas
celulares, radica en las similitudes bsicas de sus estructuras y principalmente de su
composicin molecular.

Tabla 1.2 Postulados de la Teora Celular

1- Todos los seres vivos estn formados por clulas y productos celulares (unidad anatmica)

2- Las funciones de un ser vivo son el resultado de la interaccin de las clulas que lo componen
(unidad fisiolgica)

3- Toda clula slo puede tener origen en una clula progenitora.

4- Toda clula tiene la informacin hereditaria de el organismo del cual forma parte, y esta
informacin pasa de una clula progenitora a una clula hija.

CARACTERSTICAS DE LAS CLULAS

Todas las clulas estn cubiertas por una membrana externa, llamada membrana plasmtica,
que las separa de otras clulas y del medio circundante con el cualintercambian materia y
energa. Este intercambio esta altamente regulado y es selectivo. De esta forma la membrana
plasmtica debe actuar no slo como limite celular sino tambin como barrera selectiva. Por lo
tanto la clula, mantiene una composicin qumica muy ordenada y diferente a la del entorno.
Todas las clulas poseen un metabolismo o conjunto de reacciones qumicas, que posibilitan el
mantenimiento de la vida. Este metabolismo para sustentarse necesita de una o ms fuentes de
energa. Las clulas, necesitan de distintivos tipos de molculas energticas:

* Monedas energticas, como el ATP

* Molculas combustibles, como la glucosa o los cidos grasos
* Molculas de reserva de energa, como el glucgeno o el almidn
Dentro de las reacciones para obtener e interconvertir diferentes forma de energa, son muy
importantes las reacciones de oxido-reduccin o reacciones REDOX. En este tipo de
reacciones es esencial la participacin de las coenzimas de oxido-reduccin, como el NAD+ y el
FAD.
Todas las clulas, almacenan
en
forma
de
ADN, cido desoxirribonucleico,
a informacin necesaria para controlar sus actividades (reproduccin, metabolismo), y para
establecer su propia estructura. El ADN, es un polmero formado por una secuencia lineal, de
monmeros, llamados nucletidos. Esta secuencia de nucletidos, especifica una secuencia de
aminocidos (estructura primaria de una protena). La especificidad de la secuencia de
aminocidos determinada por la secuencia de bases del ADN esta regida por el cdigo
gentico. La secuencia de bases del ADN, que codifica una protena, es un GEN. Las
protenas, son molculas que llevan a cabo gran parte de las funciones celulares. Muchas
protenas son enzimas, molculas encargadas de dirigir y regular el metabolismo celular. Las
enzimas aceleran las reacciones qumicas, hacindolas compatibles con la vida. De esta manera
las enzimas, dirigen la sntesis y degradacin de todas las molculas biolgicas, incluidos
lpidos, glcidos, protenas y los mismos cidos nucleicos. De esta forma, el ADN al almacenar
la estructura de las enzimas y otras protenas reguladoras, ejerce el control del metabolismo
celular.
El ADN utiliza un segundo cido nucleico, el ARN, cido ribonucleico, como intermediario. A
partir de la secuencia de bases del ADN, que codifica una protena, se sintetiza una secuencia
de bases de ARN. Este proceso es llamado transcripcin. EL cido ribonucleico encargado de
transportar la informacin, recibe la denominacin de ARN mensajero. Este ARN mensajero,
porta la informacin necesaria para la sntesis de protenas, proceso llamado traduccin, el cual
tiene lugar en el citoplasma con la intervencin de dicho ARNm, los ribosomas y el ARNt que
porta los aminocidos.
Las clulas para perpetuarse necesitan reproducirse. Esto significa que la informacin
almacenada en el ADN debe duplicarse para poder ser transmitida a las clulas hijas. El ADN
tiene la excepcional caracterstica de ser una molcula capaz de autorreplicarse, es decir de
generar una copia de si misma. Este proceso es llamado duplicacin o replicacin.

DIMENSIONES DE LAS CLULAS

Por qu son tan pequeas las clulas? Las clulas deben captar alimento y otros materiales a
travs de su membrana plasmtica y deben eliminar los productos de desecho, generados en las
distintas reacciones metablicas rpidamente antes de que estos se acumulen hasta niveles
txicos para la supervivencia celular. Por lo tanto, las clulas son pequeas, de modo que en
ellas las molculas recorren distancias cortas, lo que acelera las actividades celulares.

Adems, a mayor superficie celular, mayor es el transporte de molculas a travs de la

membrana, siendo importante para la continuidad de los procesos metablicos la proporcin
superficie celular sobre volumen celular. Supongamos una clula de forma cbica, cuanto ms
grande es, su superficie crece proporcionalmente lado x lado, es decir a la segunda potencia de
la longitud de un lado, en cambio el volumen celular aumenta proporcionalmente a la tercera
potencia. Por lo tanto, el volumen celular aumenta ms que su superficie a medida que la clula
crece, determinando el limite superior al tamao de la clula en cuestin. Est clula slo podr
iniciar el proceso de divisin celular (previa duplicacin de su ADN) o perecer.
Por otra parte, debemos recordar que en las clulas el material Gentico (localizado en el
ncleo, en clulas eucariontes), posee un rea limitada de influencia sobre el citoplasma
circundante, que es el que incrementa marcadamente su tamao durante el crecimiento celular,
siendo otra limitante del tamao celular larelacin ncleo/citoplasma.

CLULAS EUCARIOTAS Y PROCARIOTAS

CARACTERSTICAS PRINCIPALES
Todas las clulas se parecen y responden a un patrn comn por ms diversas que sean. Las
clulas de organismos pluricelulares son diferentes en su funcin, por ser distintas
estructuralmente, pero todas concuerdan con un patrn comn. Por ejemplo, aquellas
especializadas en la sntesis de lpidos, tendrn mayor desarrollo del retculo endoplasmtico
liso y sern distintas de las neuronas especializadas en la transmisin del impulso nervioso,
cuya especializacin es tan grande que pierden su capacidad de reproducirse.
A pesar de las semejanzas y diferencias entre las clulas y que todas cumplen con los
postulados de la Teora Celular, se distinguen dos grandes tipos de clulas:

PROCARIOTAS (sin ncleo verdadero) y EUCARIOTAS (con ncleo).

Tabla 1.3- Principales caractersticas comunes entre clulas eucariotas y procariotas

1- En ambos tipos celulares el ADN es el material gentico.

2- Ambos tipos celulares poseen membranas plasmticas como lmite celular.

3- Poseen ribosomas para la sntesis proteica.

4- Poseen un metabolismo bsico similar

5- Ambos tipos celulares son muy diversos en formas y estructuras.

Los eucariontes son

organismos
cuyas
clulas
poseen
un sistema
de
endomembranas (membranas internas) muy desarrollado. Estas membranas internas forman y
delimitan organelos donde se llevan a cabo numerosos procesos celulares. De hecho l ms
sobresaliente de estos organelos es el ncleo, donde se localiza el ADN. Justamente, el
trmino eucarionte, significa ncleo verdadero (eu: verdadero, carion: ncleo). Por lo tanto, las
clulas eucariontes, poseen diversos compartimentos internos, rodeados por membranas. De
esta forma es ms eficiente reunir a los sustratos y sus enzimas, en una pequea parte del
volumen celular total. Adems de conseguirse una mayor velocidad, las membranas favorecen la
aparicin de estructuras reguladoras que orientan el flujo de molculas y su posterior
conversin en otros productos. Ciertos procesos como la fotosntesis y la cadena respiratoria
estn altamente organizados gracias a la localizacin de las enzimas en diferentes estructuras
de membrana. Por otra parte, las membranas tambin impiden la aparicin de sustratos en
forma inespecfica en distintas regiones de la clula, ya que actan como barrera selectiva. En
cuanto al tamao, podemos decir que en promedio una clula eucarionte es diez veces mayor
que una clula procarionte. En cuanto al material gentico, podemos decir que el ADN eucariota
posee una organizacin mucho ms compleja que el ADN procarionte.
Las clulas procariontes carecen de ncleo y generalmente son mucho menores que las clulas
eucariontes. El ADN de las clulas procariontes no est rodeado por una membrana, pero puede
estar limitado a determinadas regiones denominadas nucleoides. Las clulas procariontes, al
igual que las clulas eucariontes, poseen una membrana plasmtica, pero carecen de membranas
internas, que formen organelos. Sin embargo, debemos precisar que en algunas clulas
procariontes, la membrana plasmtica forma laminillas fotosintticas.
Las clulas procariontes poseen una caracterstica nica, una pared de peptidoglicanos, un gran
polmero de glcidos y aminocidos.

Tabla 1.4- Caractersticas Diferenciales entre el Modelo Celular Procaritico y Eucaritico

Caracterstica

Clula Procaritica

Clula Eucaritica

Ncleo

No posee membrana nuclear

Posee membrana nuclear

Cromosomas

Un nico cromosoma circular y

desnudo

Posee uno o ms cromosomas

lineales unidos a protenas
(cromatina)

ADN extracromosmico

Puede estar presente como

plsmidos

Presente en organelas

Organelas citoplasmticas

No posee

Mitocondrias y cloroplastos, (los

cloroplastos presentes slo en
clulas vegetales)

Membrana plasmtica

Contiene las enzimas de la cadena Semipermeable, sin las funciones

respiratoria, tambin puede
de la membrana procaritica
poseer los pigmentos
fotosintticos

Sistema de endomembranas

No posee

Presenta REG, REL, Golgi,

lisosomas, vacuolas y vesculas.

Pared celular

Capa rgida de peptidoglucano

(excepto micoplasmas)

No poseen pared de
peptidoglucano. Pueden poseer una
pared de celulosa o quitina

Esteroles

Ausentes (excepto micoplasmas)

Generalmente presentes

Citoesqueleto

Ausente

Presente. Formado por filamentos

proteicos.

Exocitosis y Endocitosis

Ausente

Presente

Ribosomas

70 S en el citoplasma

80 S en el retculo endoplsmico y
en el citosol

Divisin

Fisin Binaria (amitosis)

Mitosis - Meiosis

Tamao

0,2 a 10 mm

Siempre superior a 6 mm

ESTRUCTURA DE LAS CLULAS PROCARITICAS

Fig. 1.2- Esquema de una ultraescructura de una bacteria idealizada

BACTERIAS, MICOPLASMAS Y ALGAS CIANOFCEAS

Cuadro 1.1- Estructura de una Clula procarita

Las bacterias pueden definirse como organismos unicelulares procariontes que se reproducen
por fisin binaria. Contienen toda su informacin gentica en un nicocromosoma bacteriano
circular. Tambin poseen sistemas productores de energa y biosintticos necesarios para el

crecimiento y la reproduccin. Poseen como caracterstica particular una pared rgida de

peptidoglicanos. Son generalmente de vida libre y poseen ADN extracromosmico en forma
de plsmidos, estos codifican genes de resistencia a antibiticos o factores "sexuales" como
los pili.
Los micoplasmas son las bacterias mas pequeas de vida independiente. Son muy flexibles y
deformables por lo que atraviesan los filtros de esterilizacin. Entre sus caractersticas
principales se encuentran: a) carecen de pared celular, b) en su membrana plasmtica poseen
esteroles, que no son sintetizados por la bacteria sino que son absorbidos del medio de cultivo
o del tejido donde se desarrolla.. Los micoplasmas son resistentes a la penicilina (carecen de
pared de peptidoglucano) y por la misma razn no toman la coloracin de Gram.
Las cianobacterias, anteriormente llamadas algas cianofceas (azulverdosas), son bacterias
Gramnegativas. Se encuentran presentes en estanques, lagos, suelo hmedo, cortezas de
rboles, ocanos y algunas en fuentes termales. La mayor parte de las cianobacterias
son auttrofos fotosintticos. Contienen clorofila a, que tambin se encuentra en plantas y
algas. La clorofila a y pigmentos accesorios se localizan en membranas fotosintticas, llamadas
laminas internas o laminillas fotosintticas. Muchas especies de cianobacterias fijan
nitrgeno, este proceso enriquece el suelo.
En la Tabla 1.4 se aprecian las diferencias ms importantes entre las clulas procariotas
(bacterias) y eucariotas
PLSMIDOS
Un plsmido es una molcula de ADN extracromosmico que se replica en forma autnoma, por
lo que al igual que el cromosoma es un replicn. Puede haber hasta 50 copias de un plsmido en
una bacteria. Funcionalmente los plsmidos son elementos genticos accesorios, es decir que la
bacteria puede vivir sin ellos. Sin embargo, la informacin que contienen puede contribuir a la
adaptacin de la bacteria al medio y a la evolucin de la misma. Los plsmidos pueden contener
genes que codifican factores de resistencia a antibiticos (los plsmidos R) y factores de
patogenicidad como exotoxinas. La evolucin bacteriana a travs de los plsmidos es factible,
ya que pueden ser intercambiados entre distintas bacterias (por ejemplo, el plsmido F). Es
decir que ciertos genes pueden transferirse de una bacteria otra mediante el pasaje de
plsmidos, a este mecanismo se lo denomina conjugacin. Para que la conjugacin pueda llevarse
a cabo las dos bacterias deben ponerse en contacto fsico . Esto es posible debido a que una de
las bacterias, posee pili sexuales (pelos) en su envoltura. Estos pili se encuentran codificados
en el mismo plsmido F (plsmido conjugativo). La bacteria que transfiere el plsmido es la que
posee pili y se la denomina F+, la clula receptora es F-.
TRANSPOSONES
Los transposones son elementos genticos movibles, que se encuentran presentes en
los procariontes (aunque tambin en las clulas eucariontes). El descubrimiento de los
transposones se lo debemos a Barbara McClintock. Los transposones son fragmentos de ADN
que se mueven de una localizacin a otra del cromosoma. Esta transposicin es catalizada por

una enzima llamada transposasa. El gen de la transposasa esta incluido dentro del mismo
transposn. Los transposones al ser elementos mviles, dentro del genoma, pueden provocar
mutaciones al insertarse en nuevas regiones del ADN.
PARED CELULAR. BACTERIAS GRAMPOSITIVAS Y GRAMNEGATIVAS
Por fuera de la membrana celular, se encuentra una pared celular rgida de peptidoglicano, que
esta presente en todas las bacterias excepto los micoplasmas. La presencia de la pared
protege a la bacteria de la diferencia de presin osmtica entre el medio interno de la
bacteria y el medio exterior. De no existir la pared la bacteria estallara. Adems la pared
cumple funciones de proteccin como por ejemplo contra sustancias txicas .
Existen dos tipos de pared bacteriana que pueden diferenciarse por la Tincin de Gram (siglo
XIX). El primer grupo de bacterias son aquellas capaces de retener el colorante cristal violeta
luego de la decoloracin con alcohol-cetona. Estas bacterias son llamadas Grampositivas. El
segundo grupo esta conformado por aquellas bacterias incapaces de retener el colorante luego
del tratamiento decolorante, por lo tanto son llamadas Gramnegativas.
LA PARED CELULAR DE LAS BACTERIAS GRAMPOSITIVAS

Fig. 1.3- Esquema de la parecelular de una bacteria Grampositiva

La pared celular de las Grampositivas es ms gruesa que la de los Gramnegativas. Posee
peptidoglicano, cidos teicoicos y lipoteicoicos. El componente fundamental es la murena, un
peptidoglicano que solo se encuentra en los procariontes. La murena consiste en una cadena
lineal de dos azcares alternados N-acetilglucosamina y cido acetilmurmico. A cada residuo
de cido murmico se encuentra unido un tetrapptido compuesto de D- y L- aminocidos.
Aproximadamente un tercio de los tetrapptidos presentes participan de la unin lateral entre
cadenas adyacentes de murena. La pared celular es biolgicamente estable, resiste el ataque
de las enzimas de los mamferos, excepto de la lisozima que la degrada. La sntesis de la pared
puede ser afectada por antibiticos como la penicilina. Los cidos teicoicos son el principal
determinante antignico de las bacterias Grampositivas y por lo tanto definen la individualidad
inmunolgica de estas bacterias.
LA PARED CELULAR DE LAS BACTERIAS GRAMNEGATIVAS

Fig. 1.4- Esquma de la pared celular de una bacteria Gramnegativa

El espesor de la pared celular de una bacteria Gramnegativas es considerablemente menor que
el de una Grampositivas. La cantidad de murena es mucho menor en los Gramnegativas. Los
cidos teicoicos no estn presentes en las bacterias Gramnegativas. A ambos lados de la fina
pared de murena se encuentra un gel periplsmico, que define al llamado periplasma (antes
llamado espacio periplasmtico).
Por fuera del periplasma se encuentra una estructura exclusiva de las Gramnegativas, la
denominada membrana externa. Si bien es estructuralmente similar a una bicapa lipdica, su
composicin es diferente de la de otras membranas biolgicas. Esta bicapa es muy asimtrica,
la semicapa interna esta compuesta por fosfolpidos, pero la semicapa externa esta compuesta
por lipopolisacridos (LPS), altamente txico para el ser humano (endotoxina).

Para obtener nutrientes las bacterias Gramnegativas, poseen porinas que son protenas que
forman poros en la membrana externa.
CPSULAS
Por fuera de la membrana externa de las Gramnegativas y de la gruesa pared de las
Grampositivas, se encuentra presente, en algunas bacterias, una cpsula o matriz
exopolisacrica, formada por un gel hidroflico. En general esta cpsula o matriz esta formada
por polmeros de azcares. Las cpsulas permiten a las bacterias evadir los mecanismos de
defensa de los organismos pluricelulares, tambin tienen funciones de adherencia a epitelios
permitiendo de esta manera colonizar los tejidos del husped.

ESTRUCTURA DE LAS CLULAS EUCARITICAS

Cuadro 1.2- Estructura de una Clula eucarita

Fig.1.5- Esquema de la ultraestructura tridimencional de una clula animal y sus

principales componenetes

Presentan este modelo celular, los organismos de los reinos Protista, Hongos, Plantas y
Animales.
Si bien existe una gran diversidad entre estas clulas, el modelo bsico es similar,
presentando como estructura sobresaliente el ncleo celular.
NCLEO CELULAR
Las diversas partes de una clula eucaritica interactan de forma integrada. Esto es posible
porque existe un centro primordial de control: el ncleo celular. Una membrana doble, la
envoltura nuclear (constituida por dos unidades de membrana), controla el transporte, muy
selectivo, de sustancias entre el ncleo y el citoplasma. El pasaje se realiza a travs de los
poros nucleares. La envoltura nuclear posee ribosomas adheridos a la cara citoplasmtica y una
estructura proteica en su parte interna llamada lamina nuclear, que sirve como esqueleto al
ncleo.
En el interior del ncleo, se encuentra el material gentico (ADN) asociado a protenas bsicas
llamadas histonas, formando una estructura fibrilar muy enrollada denominada cromatina y el
nucleolo, sitio de ensamblaje de los ribosomas (estructuras esenciales para la sntesis de
protenas, formados por ARN ribosomal y protena). El ARN ribosmico se sintetiza en el

nucleolo, y las protenas ribosmicas en el citoplasma, para pasar despus al ncleo y de all al
nucleolo, donde se unen al ARN ribosomal para formar los ribosomas.

Tabla 1.5- Caractersticas del Ncleo Celular y sus Componentes

Estructura : Ncleo Celular

Descripcin

Funcin

Ncleo

Estructura rodeada por una doble Regular la funcin celular.

membrana con poros. Contiene
Control del metabolismo,
cromatina/cromosomas y nucleolo. reproduccin (ciclo celular) y
diferenciacin celular.

Envoltura Nuclear

Estructura formada por dos

unidades de membrana unidas a
nivel de los poros nucleares.

Continuacin del REG. Posee

poros que regulan el pasaje
entre ncleo y citoplasma

Nucleolo

Cuerpo granular en el ncleo, que

consiste en ARN y protenas.

Sitio de sntesis del RNA

ribosmico y de ensamble de
los ribosomas.

Cromatina

ADN asociado a protenas, tanto

estructurales (histonas) como a
protenas regulatorias. La
cromatina es visible durante la
interfase celular

Empaquetamiento
(plegamiento) de ADN. El ADN
compone los genes. Funciones
regulatorias de la transcripcin
gentica.

Cromosomas

ADN asociado a protenas, en

estado superenrrollado. Visible en
forma de estructuras cilndricas
cuando la clula se divide, ya sea
en mitosis o meiosis.

Contienen los genes que son las

unidades de informacin, que
rigen las funciones y
estructura celular.

Rodeando al ncleo encontramos el CITOPLASMA, coloide donde predominan como

constituyentes agua, iones, enzimas y donde se encuentran incluidos los organelos celulares. El
citoplasma se encuentra separado del ambiente exterior por la membrana plasmtica.

MEMBRANA PLASMTICA
Estructuralmente esta compuesta por una bicapa fosfolipdica. El colesterol esta
presente en las clulas animales, pero esta ausente, en general, en plantas, hongos y
procariontes (salvo micoplasmas). La membrana plasmtica tambin contiene mltiples
protenas con diversas funciones. Podemos dividirlas en dos grandes grupos: a) protenas
integrales de membrana y b) protenas perifricas de membrana. Las primeras atraviesan la
membrana de lado a lado, mientras que las segundas estn en contacto con la membrana, pero
no la atraviesan. Algunas son enzimas reguladoras, otras receptores hormonales. Existen
tambin protenas transportadoras y canales reguladoras del movimiento de iones y molculas a
travs de la membrana plasmtica, de all su enorme especificidad. Otra funcin importante de
la membrana es la comunicacin intercelular y el reconocimiento de diversos tipos de molcula
(hormonas, virus, anticuerpos, toxinas, etc.) que interactan con ella. En general esta funcin
es llevada acabo por glucoprotenas y glucolpidos, que se encuentran solo en el lado externo de
la membrana plasmtica. Se cree que los glcidos juegan un importante papel en la adhesin
entre clulas. A esta capa, de glucolpidos y glucoprotenas se la denomina glucoclix.
SISTEMA DE ENDOMEMBRANAS
Este sistema se compone de sistemas membranosos interconectados entre s, como el
retculo endoplalmtico liso o agranular (REL), el retculo endoplasmtico rugoso o granular
(REG) y el aparato de Golgi. Estas estructuras permiten la circulacin de sustancias siempre
dentro de formaciones limitadas por membrana interactuando por medio de vesculas.

Tabla 1.6 - Organizacin del Sistema de endomembranas

Estructura

Descripcin

Funcin

Retculo endoplasmtico rugoso

(REG)

Membranas internas en forma de Sntesis de Protenas destinadas a

sacos aplanados y tbulos. Con
secrecin(exportacin) o a la
ribosomas adheridos a su
incorporacin de membranas.
superficie externa. La envoltura
nuclear es parte del REG.

Retculo endoplasmtico liso

(REL)

Membranas internas donde

predominan los tbulos. Sin
ribosomas adheridos.

Aparato de Golgi

Pilas de sacos membranosos

Modificacin de protenas
aplanados (dictiosomas). Funcional (glicosilacin). Empaquetamiento de

Sitio de biosntesis de lpidos y

detoxificacin de medicamentos.

y estructuralmente polarizado.

protenas secretadas. Clasificacin

de las protenas que se distribuyen
a membrana plasmtica, secrecin o
lisosomas.

Lisosomas

Vesculas (sacos) membranosas

Contienen enzimas hidrolticas, que

desdoblan materiales ingeridos,
secreciones y deshechos celulares.

Vacuolas

Sacos membranosos
Transporte de materiales,
principalmente, en plantas, hongos deshechos y agua.
y algas.

ORGANELAS

Tabla 1.7 - Principales organoides membranosos de la clula eucarionte

Estructura

Descripcin

Funcin

Mitocondria

Organelas semiautnomas. Poseen

ADN y ribosomas tipo
procarionte. Una doble membrana
les sirve de envoltura. La
membrana interna forma las
crestas mitocondriales.

Metabolismo aerbico. Sitio

de muchas de las reacciones
de la respiracin celular. All
se realizan el ciclo de Krebs,
la cadena respiratoria y la
fosforilacin oxidativa. Es
decir la transformacin de la
energa de lpidos o glucosa
(molculas combustibles) en
ATP (moneda energtica).

Cloroplasto

Organela semiautnoma. Posee

ADN y ribosomas tipo
procarionte. Una doble membrana
envuelve a los tilacoides. La
clorofila, se encuentra en las
membranas tilacoidales.

La clorofila capta la energa

luminosa para formar ATP y
otros compuestos con gran
cantidad de energa. Estos
compuestos altamente
energticos sirven para

sintetizar, glucosa a partir de

CO2.

Microcuerpos (Peroxisomas)

Vesculas membranosas que

contienen diversas enzimas
relacionadas con el metabolismo
del oxigeno y el perxido de
hidrogeno. No poseen ADN ni
ribosomas

Sitio de muchas reacciones

metablicas. Enzimas que
protegen de la toxicidad del
oxigeno, por ejemplo la
catalasa.

RIBOSOMAS Y POLIRRIBOSOMAS
Son estructuras redondeadas que a diferencia de las anteriores, carecen de unidad de
membrana.
Estn constituidos por dos subunidades, mayor y menor separadas entre s. Ambas subunidades
se unen cuando leen una molcula de ARNm. Las subunidades estn formadas por ARNr y
protenas, siendo ensambladas en el nucleolo. Cuando hay varios ribosomas unidos a una
molcula de ARNm, lo denominamos polirribosoma.
La funcin de los ribosomas es sintetizar protenas.
CITOESQUELETO
El citoesqueleto es una red de fibras protenicas. Esta red es dinmica encontrndose en
constante cambio. Sus funciones, son esenciales para las clulas eucariontes y abarcan
motilidad celular, forma, diferenciacin, reproduccin, regulacin, etc.

Tabla 1.8 - Organizacin General del citoesqueleto

Estructura

Microtbulos

Descripcin

Funcin

Sostn estructural,
participan en el movimiento
Tubos huecos compuestos por la
de organelas y la divisin
forma monomrica de la protena
celular (aparato mittico),
tubulina. (monmero globular)
componentes de cilios,
flagelos y centrolos.

Filamentos de actina
(microfilamentos)

Filamentos intermedios

Estructura slida en forma de

huso consistente en la protena
actina. (monmero globular)

Sostn estructural,
participan en el movimiento
de la clula y sus organelos y
en la divisin celular.

Sostn estructural. Forman

Protenas filamentosas, en forma
redes que conectan la
de tubos. Compuestas por
membrana plasmtica con la
monmeros fibrosos.
envoltura nuclear.

Centrolos

El huso mittico se forma

Pares de cilindros huecos,
entre los centrolos durante
localizados cerca del centro de la la divisin de clulas animales,
clula, formados por
fija y organiza los
microtbulos.
microtbulos. Estn ausentes
en las plantas superiores.

Cilios

Movimiento de algunos
Proyecciones relativamente
organismos unicelulares. Se
cortas que se extienden desde la
utiliza para mover materiales
superficie celular. Compuestas
en la superficie de algunos
por microtbulos.
tejidos.

Flagelos

Proyecciones largas compuestas

por microtbulos. Cubiertos por
membrana plasmtica

Locomocin celular de
espermatozoides y algunos
organismos unicelulares.

Fig. 1.6- Esquema de componentes del citoesqueleto

CLULA EUCARITICA ANIMAL Y VEGETAL

Fig. 1.7- Esquemas de una clula vegetal (izquierda) y tridimencional de un cloroplasto con sus
componentes (derecha)

Cuadro 1.3- Modelos bsicos de clula eucarita

Las clulas eucariontes poseen dos modelos estructurales bsicos: a) clulas auttrofas
fotosintticas y b) clulas hetertrofas.

Las clulas auttrofas son aquellas que sintetizan su propio alimento, es decir sus propias
molculas combustibles. En este caso las clulas eucariontes vegetales son clulas
auttrofas fotosintticas, por lo tanto utilizan la luz solar como fuente de energa.
Transforman la energa solar en energa qumica, este proceso es llamado fotosntesis. La
fotosntesis en las clulas vegetales se lleva a cabo en un organelo membranoso
llamado cloroplasto. Dentro del cloroplasto se encuentran sacos membranosos apilados,
denominados tilacoides, en cuyas membranas encontramos el pigmento llamado clorofila,
esencial para la fotosntesis.
Las clulas hetertrofas son aquellas que no sintetizan su propio alimento sino que necesitan
una fuente externa de energa tanto como de materiales de construccin de sus propias
molculas. Las clulas animales (y los hongos), son clulas eucariontes hetertrofas.
Las clulas animales y las clulas vegetales poseen unas organelas membranosas
llamadas mitocondrias, donde se lleva acabo la respiracin celular. En este proceso son rotos
los enlaces de alta energa de las molculas combustibles orgnicas. Esta energa liberada es
utilizada para la sntesis de las monedas energticas como el ATP. El ATP es esencial para las
diferentes funciones celulares. Para que este proceso se lleve a cabo dentro de las
mitocondrias es necesaria la presencia de oxigeno.
Por lo tanto en ambos tipos celulares son necesarias las mitocondrias , para obtener energa
qumica en forma de ATP a partir de las molculas combustibles. Pero es diferente el origen
de las molculas orgnicas utilizadas como combustibles. En el caso de las clulas
vegetales (auttrofas), ellas sintetizan sus propias molculas combustibles en los cloroplastos,
en el proceso de fotosntesis. En cambio las clulas animales (hetertrofas), necesitan una
fuente externa de molculas energticas que sirvan como combustible celular.

Tabla 1.9 - Principales diferencias entre clulas animales y clulas vegetales

Estructura

Clula animal

Clula vegetal

Pared celular

Ausente

Pared celular constituida por

celulosa.

Aparato mittico (Huso

acromtico )

Astral

Anastral

Centrolos

Presente

Ausente

Vacuolas

Vacuolas pequeas

Vacuolas grandes, puede ser una

grande central

Metabolismo

Hetertrofo

Auttrofo

Mitocondrias

Presentes

Presentes

Cloroplastos

Ausentes

Presentes

Fig. 1.8- Esquema de la ultraestructura de una clula animal idealizada

Fig. 1.9- Esquema de la ultraestructura de una clula vegetal idealizada

VIRUS
Hacia fines del siglo pasado se formulo la teora de que cada enfermedad era producida
por un germen especfico. Hasta ese momento los patlogos estaban convencidos de que para
cada enfermedad seria posible encontrar el microorganismo responsable, utilizando las

siguientes tcnicas: a) observacin del germen con la ayuda del microscopio, b) cultivo sobre un
medio nutritivo y c) retencin por filtros. Sin embargo, en 1892, Iwanowski (o Ivanovsky?)
pudo demostrar que el agente productor de la enfermedad del mosaico de tabaco pasaba a
travs de los filtros para bacterias y no poda ni verse ni cultivarse. Luego en 1898 Beijerinck,
determin que la enfermedad del mosaico del tabaco era provocada por un nuevo agente
infeccioso a los que denomino virus filtrables (virus: palabra de origen latino que significa
veneno). Los virus estn ampliamente distribuidos en la naturaleza y afectan a todo tipo de
organismos, tanto del reino animal, vegetal o protista.
CARACTERSTICAS ESTRUCTURALES DE LOS VIRUS
La estructura de los virus esta integrada por dos tipos de macromolculas: cidos
nucleicos y protenas, los que forman las partculas virales o viriones. Bsicamente existen dos
tipos de partculas virales: partculas virales simples (virus desnudo) o partculas virales
envueltas (virus envuelto). El virus desnudo consta de un cido nucleico (genoma) asociado a
protenas y una cubierta proteica o cpside. Por otra parte los virus envueltos aaden a esta
estructura bsica una envoltura lipoproteica de origen celular. La funcin de la cpside es de
servir al cido nucleico como proteccin y vehculo.
Postulado de Lwoff

"nicamente sern considerados virus aquellos agentes infecciosos cuya partcula elemental
contenga un solo tipo de cido nucleico". Es decir poseen ARN o ADN, pero no ambos tipos de
cidos nucleicos funcionales a la vez. Por lo tanto los virus pueden ser ADN o ARN virus.
Debido a la estructura simple de virus, para su multiplicacin dependen en forma absoluta de la
clula husped que infectan. Por lo tanto consideraremos a los virus como parsitos
intracelulares obligados.

REPLICACIN VIRAL
La clula husped, una vez infectada, sintetizar nuevas molculas de cido nucleico viral,
ya que el genoma viral tomara el control de las actividades metablicas de la clula. Bajo este
control, tambin se producirn gran cantidad de protenas virales. De esta manera el
ensamblado de nuevas partculas virales provendr de la asociacin de las nuevas molculas de
cido nucleico viral con las protenas. Este proceso es muy diferente de la reproduccin
celular, tanto de los procariontes como de los eucariontes. Por lo tanto es mas apropiado hablar
de REPLICACION VIRAL.
LOS VIRUS COMO PARSITOS INTRACELULARES
Hasta el momento no se ha podido demostrar que ningn virus aislado pueda utilizar o
almacenar energa mediante procesos similares a la respiracin, tampoco pueden sintetizar
protenas. Es decir no tienen metabolismo propio, dependiendo en forma absoluta del medio
ambiente celular.

El parasitismo de los virus se ejerce a nivel gentico, ya que el genoma viral dentro de la clula
desplaza al genoma de la clula hospedadora del control celular.
PROVIRUS
Anteriormente hemos explicado que los virus, infectan las clulas y hacen replicas de si
mismos. Luego abandonan la clula husped y pasan a otra, recomenzando su ciclo. Pero tambin
puede ocurrir que el genoma viral se integre al ADN del husped. Cuando el genoma viral se
integra al genoma celular y se replica junto con este se lo denomina PROVIRUS. Un provirus
puede activarse espontneamente o bien expuesto a diversos estmulos, una vez activado puede
inducir la produccin de virus completos. Los provirus pueden modificar la morfologa celular y
su metabolismo, esto puede deberse a la produccin de alguna protena viral. Estos cambios en
la estructura celular, generalmente asociados a cambios en la membrana celular, inducidos por
un provirus reciben el nombre de transformacin. En algunos casos estas clulas
transformadas por los provirus pueden ser cancerosas.
LOS VIRUS COMO AGENTES INFECCIOSOS
El parasitismo celular obligado es la causa bsica por la cual un virus puede causar dao. La
relacin que establece un virus y su clula husped es variable. El resultado de la interaccin
depende tanto del virus en cuestin como de la clula husped. Por ejemplo, se denominan virus
citocdicos , a los que como resultado de su multiplicacin, producen una rpida induccin hacia
la muerte celular. Por otra parte se encuentran los virus no citocdicos, que son aquellos que no
provocan la muerte celular. Ejemplos de virus no citocdicos serian los virus moderados y los
virus oncognicos. Los virus moderados son aquellos que producen partculas virales y no
producen la muerte celular. Han llegado con la clula husped a un estado de equilibrio ms o
menos estable. Luego estn los virus oncognicos, capaces de estimular la divisin celular,
estos cambios pueden ser irreversibles si la clula pierde la capacidad de regular su ciclo
celular. Este estado se denomina transformacin celular.
Los virus no citocdicos pueden causar dos tipos de infecciones:
1- Las infecciones latentes, donde el virus permanece sin manifestarse, alojado en clulas no
productoras. Ante determinados estmulos, estrs, enfermedades, exposicin a la luz solar, el
virus se reactiva, recomenzando la sntesis de cidos nucleicos y protenas virales. Ejemplos: L
Herpes simplex, Varicela zoster.
2- Las infecciones crnicas, donde de una persona enferma siempre es posible obtener virus
infeccioso, aun por periodos muy prolongados de tiempo. Por ejemplo, virus de la hepatitis B,
Epstein-Barr, virus de la rubola.

Fig. 1.10- Virus del Mosaico del Tabaco (ARN virus) y Bacterifago T4 (ADN virus)
MORFOLOGA VIRAL
Los virus poseen gran variedad de formas y tamaos. Por ejemplo los virus que al microscopio
electrnico aparecen aproximadamente esfricos se denominan isomtricos. En estos virus el
cido nucleico esta rodeado por una cpside (caja) proteica. Las subunidades estructurales que
forman la cpside, visibles al microscopio electrnico, se denominan capsmeros. A su vez los
capsmeros estn formados por subunidades proteicas. La cpside por su naturaleza antignica
es la que determina la identidad viral.
El cido nucleico viral no se encuentra desnudo, sino que esta asociado a protenas distintas de
las de la cpside, cuya funcin puede ser estructural (plegado del ADN) o enzimtica
(polimerasa). Al conjunto de cido nucleico y protenas asociadas se lo denomina "core". Por
ultimo diremos que los virus donde la cpside rodea directamente al cido nucleico (es decir
que no hay un "core" evidente), el conjunto de cpside y cido nucleico recibe la denominacin
de nucleocpside.
GENOMA VIRAL
El genoma, que puede encontrase en los distintos tipos de virus, puede sistematizarse de
acuerdo a diversos criterios:
1- Tipo de cido nucleico: ADN o ARN
2- Polaridad o sentido: + o - (aplicado principalmente a los ARN virus)
3- Nmero de cadenas: monocatenario o bicatenario
4- Genoma circular o desnudo
5- Genoma entero o fragmentado

Debemos recordar que las cadenas de un cido nucleico de doble cadena, son de polaridad
(sentido) opuesto. Por convencin se considera que si una tiene sentido + la otra ser -.
De acuerdo a este criterio se considera que un virus es + (o cadena +), cuando su genoma
monocatenario tiene la misma polaridad que un ARNm. Es decir el mismo genoma viral, puede
actuar dentro de la clula como ARNm y llevar a cabo directamente la sntesis de protenas
virales. Los "virus +", pueden infectar con el cido nucleico solo, salvo los retrovirus que siendo
+, necesitan una transcriptasa reversa asociada al genoma para poder infectar. Por el
contrario, se denomina "virus -" cuando el genoma no puede actuar directamente como
mensajeros. El ARN - puede actuar como molde, para la sntesis de ARN +, el ARNm viral.

Fig. 1.11- Esquema y microfotograa electrnica de un Bacterifago

BACTERIFAGOS
Los Bacterifagos son virus especficos de las bacterias. Bacterifagos, significa que se
"alimenta" o multiplica a expensas de bacterias.
Los Bacterifagos que infectan clulas husped, pueden establecer dos tipos de procesos:
1- Ciclo Ltico: en este tipo de ciclo el virus produce inmediatamente gran cantidad de cidos
nucleicos virales y protenas de la cpside. Estos se ensamblan produciendo nuevas partculas
virales que son liberadas al medio al producirse la lisis celular.
2- Ciclo Lisognico: en este ciclo la relacin entre clula husped y virus, puede prolongase por
periodos variables de tiempo. El virus integra su genoma al cromosoma bacteriano, replicndose
conjuntamente el cido nucleico del parsito y el del husped. Un virus bacteriano integrado al
cromosoma se denomina profago. Por lo tanto el profago se replica junto con el ADN
bacteriano. En determinadas circunstancias (por ejemplo ruptura del ADN bacteriano por luz
ultravioleta o agentes qumicos), el profago se activa, y comienza la produccin de cido
nucleico viral y protenas virales, produciendo luego la lisis celular. Las bacterias que portan

profagos se denominan lisognicas. Los Bacterifagos que pueden integrarse como profagos y
que no lisan inmediatamente a las clulas se denominan fagos atenuados.

Fig. 1.12- Esquema del Ciclo Ltico Viral (de multiplicacn) y del Ciclo Lisogenico Viral
LOS VIRUS COMO VECTORES
Los virus pueden servir como vehculos (vectores), para transferir material gentico de
una clula a otra. Este fenmeno se denomina transduccin. Durante el ciclo ltico, el ADN del
husped queda fragmentado y alguno de esos fragmentos puede ser tomado al azar y quedar
dentro de la cpside. De esta forma, cuando el virus infecta una nueva clula, transporta genes
de una antigua clula husped a otra nueva.
VIRUS DE LA INMUNODEFICIENCIA HUMANA (HIV)

El SIDA (sndrome de inmunodeficiencia humana), es una enfermedad infecciosa crnica

producida por el virus HIV. Esta enfermedad esta caracterizada por una deficiencia
inmunolgica progresiva, con la expresin clnica de infecciones oportunistas y/o tumores.
El HIV es un retrovirus. Los retrovirus son virus cuyo material gentico es ARN. Una vez que
el virus ha penetrado en una clula, una enzima llamada retrotranscriptasa, produce ADN a
partir del ARN viral. El ADN recin sintetizado viaja al ncleo y se integra al ADN
cromosmico . En este punto la infeccin se ha hecho permanente , y la forma integrada del
virus se denomina provirus. El HIV es un LENTIVIRUS. Por lo tanto su ciclo vital intracelular
(ciclo de infeccin) puede prolongarse por aos. Sus genomas son complejos y sus mecanismos
regulatorios son solo parcialmente conocidos. Los Lentivirus causan infecciones crnicas.
El sistema inmune del hombre reconoce las protenas del HIV como antgenos y produce
anticuerpos contra ellas. Por lo tanto una persona infectada tendr circulando en sangre
anticuerpos contra las protenas del HIV. En este aspecto se basa el test de diagnstico ms
utilizado en la actualidad: el test de ELISA (inmunoensayo ligado a enzima).

Fig. 1.13- Esquema del Virus de la Inmunideficiencia Hunama (HIV)

El virin del HIV, esta recubierto por una membrana lipdica, por lo tanto se trata de un virus
envuelto. De la membrana sobresalen glicoprotenas: la gp41 y la gp120. La membrana
compuesta por lpidos y protenas recubre el ncleo (core) del virin, formado por las protenas
p28 y p24. En el core se encuentran el ARN del virus y la enzima transcriptasa inversa.

Ciclo Vital Intracelular de un retrovirus

Empieza cuando un virin o partcula vrica , se une a la superficie externa de una clula
susceptible. Este primer estadio del ciclo se lo denomina adsorcin. Luego el virus fusiona su
envoltura lipoproteica con la membrana celular, introduciendo en la clula su nucleocpside

junto con el ARN que constituye su dotacin gentica. En cada partcula viral se encuentran
dos cadenas de ARN vrico. A este proceso se lo conoce como penetracin.
La enzima transcriptasa inversa es una ADN polimerasa que primero produce una copia de ADN
simple cadena que a continuacin se copia a si misma obtenindose ADN doble cadena. Por lo
tanto este ADN doble cadena se obtuvo a partir de ARN. La sntesis del ADN doble cadena
ocurre junto con la degradacin del ARN original. El ADN doble cadena (provirus), emigra hacia
el ncleo y se integra en el propio ADN celular. La integracin de este ADN doble cadena en el
cromosoma del husped es necesaria para la sntesis de nuevas molculas de ARN, por la ARN
polimerasa celular, ya que el virus carece completamente de la maquinaria metablica necesaria
para realizar la transcripcin y la sntesis de protenas necesarias para la cpside y la misma
transcriptasa reversa.

Fig. 1.14- Esquema del Ciclo Vital Intracelular de un Retrovirus

VIRUS DE LA HEPATITIS B (VHB)
La hepatitis B en si misma, es un problema sanitario grave y muy extendido . Pero
encierra una amenaza peor. El virus que la produce es el carcingeno humano ms importante

despus del tabaco. Trescientos millones de personas , la mayora habitantes con escasos
recursos asistenciales, estn crnicamente infectados con el virus y tienen una probabilidad
muy elevada de contraer cncer de hgado. En el tercer mundo, el virus suele transmitirse de
madre a hijo, durante el primer mes de vida, y principalmente durante el nacimiento. Si el
pequeo es nia, se convertir probablemente en portadora crnica y transmitir el virus de la
hepatitis B (VHB) a su descendencia cuando alcance la edad frtil. En cambio en los pases
desarrollados su incidencia es mayor en adultos, que por su profesin tienen contacto directo
con la sangre (cirujanos, enfermeras, dentistas), los receptores de sangre u hemoderivados o
personas que reciben tratamientos de dilisis o drogadictos intravenosos.
El virus de la hepatitis B (VHB) es mucho ms contagioso que el HIV.
EXPERIMENTO DE FRENKEL-CONRAT Y SINGER

Fig. 1.15- Esquema del experimento de Frenkel - Conrat y Singer

Este experimento demostr que el ARN es el material gentico del virus del mosaico del
tabaco. Los resultados del experimento son extensibles a otros tipos de virus con genoma a
ADN.
VIROIDES
Los viroides son agentes infecciosos que poseen al igual que los virus un solo tipo de cido
nucleico y son parsitos absolutos, pero y esta es la gran diferencia con los virus, carecen de
cpside y envoltura. Por lo tanto los viroides estn constituidos solo por una secuencia de
nucletidos, adems los viroides carecen de informacin para la sntesis de protenas, en
cambio los virus siempre poseen dicha informacin.

PRIONES
Las partculas infecciosas llamadas priones, estn constituidas nicamente por una protena de
aproximadamente 250 aminocidos. Es decir carecen completamente de cidos nucleicos. Es
esta la razn por la cual fue resistida durante mucho tiempo, la hiptesis de que las protenas
por si solas podan ser la causa de enfermedades infecciosas. De acuerdo al dogma imperante
hasta 1980, las enfermedades transmisibles (infecciosas) necesitaban material gentico, para
que la infeccin se asentara en el husped. Hasta ese momento eran los virus los agentes
infecciosos ms pequeos conocidos, y todos ellos poseen ADN o ARN como material gentico
necesario para codificar sus protenas y dirigir la replicacin viral en el husped.
Pero ahora sabemos que las partculas protenicas infecciosas (priones), pueden ser el sustrato
de diversas enfermedades, hereditarias o contagiosas. Este comportamiento dual tanto
infeccioso como hereditario era desconocido. Posteriormente se descubri que los priones se
multiplican por una va increble y desconocida hasta ese momento: convierten protenas
normales en MOLECULAS INFECCIOSAS, con solo alterar la estructura proteica.
Las encefalopatas espongiformes transmisibles (EET), son las enfermedades degenerativas
del sistema nervioso central que afectan a animales y seres humanos causadas por los priones.
Se denominan espongiformes ya que el cerebro adquiere un aspecto parecido al de una esponja.
Las EET que sufren los seres humanos son el Kuru (o muerte de la risa), la enfermedad de
Creutzfeldt -Jakob (ECJ), el sndrome de Gerstman-Straussler-Scheinker (GSS) y el insomnio
Familiar Fatal (IFF); las EET de animales, incluyen el scrapie (del ingles to scrape, raspar, por
la tendencia de los animales infectados a rasparse contra postes , troncos o cercas para
combatir la picazn) de ovejas y cabras, la enfermedad de agotamiento crnico de mulas y
ciervos en cautiverio y la encefalitis espongiforme bovina (EEB), o enfermedad de la vaca loca.
Las EET se caracterizan por su prolongado periodo de incubacin (en el hombre puede tener un
periodo de incubacin de 30 o mas aos), generalmente asociadas a declives progresivos de las
funciones motoras y cognitivas (enfermedad activa), y por su evolucin inevitablemente fatal.
Las EET en el ser humano generalmente aparecen en personas de edad avanzada.

Aparentemente todas las EET son causadas por el cambio en la estructura de una protena
normalmente presente en las membranas celulares, denominada protena prinica (PrP). La
forma anormal de la PrP se designa PrP sc (scrapie), para diferenciarla de la forma normal
llamada PrPc (celular). La secuencia de aminocidos (estructura primaria) de la PrP c y la PrPsc es
idntica lo que varia es su conformacin (plegamiento en el espacio). De acuerdo a esta teora
la protena alterada (PrPsc), puede unirse a la protena normal (PrP c) y cambiar su conformacin,
transformndola a su vez en una protena alterada. De esta forma se propagara la enfermedad
y se generaran nuevas protenas infecciosas. De esta forma el pasaje de la forma normal a la
patolgica es catalizada por el mismo prin (PrP sc), por lo tanto solo hace falta una pequea
cantidad de este para provocar la transformacin de toda la protena normal, ya que se trata
de un fenmeno de crecimiento exponencial.
Recientemente , se ha aceptado que los priones pueden ser transmitidos, posiblemente por
comida, inoculacin directa en el cerebro, piel, msculo o estmago. Por esto la epidemia de
EEB, ocurrida en Gran Bretaa provoco un enorme inters en todo el mundo.
Desafortunadamente han aparecido en ese pas una nueva variedad de la ECJ (casos en
personas mucho mas jvenes que lo usual), lo que probara una relacin causal entre la EEB y los
casos seres humanos. El gobierno britnico tuvo que admitir la posibilidad de que la aparicin
de estos extraos casos de la ECJ hubieran sido provocados al ingerirse carne vacuna
infectada (tejido nervioso).
Al principio habamos hablado de la dualidad de los priones, por un lado partculas infecciosas y
por el otro responsables de enfermedades hereditarias. Esto es naturalmente confuso. Por
ejemplo, ciertas enfermedades prinicas como la GSS, son hereditarias. Esta enfermedad
tiene una herencia autosomal y dominante, lo cual significa que si un padre desarrolla la
enfermedad , los hijos tienen un 50 por ciento de probabilidades de desarrollarla. La
explicacin a estos hechos vino dado por el descubrimiento de mutaciones gnicas puntuales en
la secuencia de nucletidos del gen que codifica la PrP . Estos genes mutados provocan cambios
en la secuencia de aminocidos de la protena PrP. Estos cambios podran incrementar la
probabilidad de la transformacin de la protena PrP mutante de una forma normal a una
anormal patgena. Diferentes mutaciones en el gen provocaran diferentes protenas mutantes,
con mayor o menor tendencia a transformarse en la forma aberrante patgena. Esto explica
tambin las distintas enfermedades prinicas hereditarias, la ECJ espordica , un 15 por
ciento de los casos hereditaria y la GSS autosomal dominante.

Tabla 1.10- Principales Enfermedades causadas por Priones

Enfermedad

Sntomas tpicos

Va de Propagacin

Distribucin

Kuru

Prdida de coordinacin, Infeccin, probablemente Nueva Guinea

demencia
por canibalismo

2600 casos

ECJ

Demencia, prdida de
coordinacin

De ordinario desconocida 1 persona por milln en

(espordica)
todo el mundo
En un 15 por ciento de los 100 familias identificadas
casos hereditaria, por
(forma heredada)
mutacin del gen que
determina la protena PrP Forma infecciosa 80
casos
Raramente por infeccin
(por ejemplo por un
transplante u otro
tratamiento medico)

EGSS

Prdida de coordinacin, Herencia de una mutacin 50 familias identificadas

demencia
en gen de la PrP

IFF

Trastornos del Sueo,

insomnio demencia

Herencia en una mutacin 9 familias identificadas

del gen de la PrP

TCNICAS DE ESTUDIO DE LA CELULA

UNA COMBINACIN DE MTODOS AYUDA AL ESTUDIO DE LA CLULA
El desarrollo de la biologa celular y molecular se produce en forma paralela a la invencin
de instrumentos y tcnicas biofsicas y bioqumicas que extienden los sentidos a nuevos lmites
y acrecientan el conocimiento de la estructura y funcionamiento de la clula. El acceso a este
tipo de conocimiento resulta dificultoso pues las clulas son pequeas y transparentes. El ojo
humano slo puede discriminar dos puntos separados por ms de 0,1 mm 100 micrmetros
(mm). La mayora de las clulas son mucho ms pequeas y se necesita del microscopio ptico
cuyo lmite de resolucin es de 0,2 mm. Para estructuras ms pequeas, que midan entre 0,4 y
200 nanmetros (nm), se requiere del microscopio electrnico. Para mayores detalles, consulte
la Tabla 1a.2
Como se aprecia, las principales unidades de medida que se emplean corrientemente en
microscopia no son las de uso cotidiano. En la siguiente tabla se expresan aquellas unidades y
sus equivalencias:

Tabla 1.11-Medidas utilizadas en microscopia

Unidad

Smbolo

Equivalencia en metro (m) Utilizacin principal en citologa

Centmetro

cm

0,01 metro

Objetos macroscpicos a simple vista.

Huevos grandes.

Milmetro

mm

0,001m

Objetos macroscpicos a simple vista.

Clulas muy grandes.

Micrmetro

mm

10-6 m

Microscopia de luz (ptica)

Casi todas las clulas y organelos grandes.

Nanmetro

nm

10-9 m

Microscopia electrnica.
Organelas
grandes.

Angstrom

10-10 m

pequeas,

macromolculas

Microscopia electrnica. Mtodos de

difraccin de rayos X. Molculas y tomos.

Por lo tanto: 1m=102 cm=102 mm=103 mm=106 nm=109

Por otra parte, la mayora de los componentes de la clula viva son transparentes debido a su
alto contenido de agua. Al disecarla no presenta un significativo contraste. Entonces la tincin
selectiva de ciertos componentes celulares resuelve el problema del contraste. Sin embargo la
mayora de estas tcnicas conduce a la muerte de la clula y an ms, a cambios qumicos y
morfolgicos que no se encuentran en las clulas activas y en la matriz extracelular.
Cabe destacar que algunos pigmentos del citoplasma y de organoides vegetales pueden
absorber determinadas longitudes de onda (l) [1] y no necesitan de previo tratamiento para su
observacin al microscopio ptico.
Para el estudio de la clula viva se emplean tcnicas pticas especiales como, por ejemplo, la
microscopia de contraste de fase o la de interferencia.

Fig. 1.16 Cuadro comparativo de distintos ejemplos de niveles de organizacin a nivel

microscpico.

En el nivel macromolecular, la difraccin de rayos X resulta ser la tcnica ms adecuada para

estudiar la configuracin molecular de protenas, de cidos nucleicos y de algunos entes
prebiticos tales como los virus.
Los compuestos qumicos que constituyen la clula pueden ser detectados, descriptos y
localizados dentro y fuera de la clula mediante mtodos adaptados de la Qumica Analtica.
Las tcnicas aislamiento y separacin especfica de clulas, organelas y macromolculas y
el preparado de cultivos celulares para el estudio detallado son herramientas invalorables para
el avance de la biologa celular y molecular.
LOS MICROSCOPIOS PROVEEN VENTANAS PARA EL MUNDO DE LA CLULA

Fig. 1.17- Esquema de un Microscopio ptico

El descubrimiento y estudio temprano progres con la invencin y mejora de los microscopios
en el siglo XVII. Los microscopios de varios tipos son an herramientas indispensables para el
estudio de las clulas.
Los microscopios primeramente usados en el Renacimiento tanto como los que son utilizados en
los laboratorios hoy, son microscopios pticos. La luz visible pasa a travs de la muestra y de
las lentes de vidrio por donde la luz es refractada (doblada) de tal manera, que la imagen del
espcimen es amplificada cuando se proyecta en el ojo.
Dos valores importantes en microscopia son el aumento y el poder de resolucin . Entendemos
por aumento a las dimensiones aparentes de los objetos comparados con su tamao real. El
poder de resolucin es la medida de la nitidez de la imagen; es la capacidad del instrumento
para brindar imgenes distintas de dos puntos cercanos.
El microscopio ptico nunca puede resolver detalles menores a 0,2mm, la medida de una
pequea bacteria. Esta resolucin es limitada por la longitud de onda de la luz visible usada

para iluminar la muestra. Los microscopios pticos o de luz pueden aumentar efectivamente
alrededor de 1000 a 1500 veces el tamao de la muestra real; si se incrementase el aumento la
imagen proyectada sera borrosa. La mayora de las mejoras en microscopia de luz del comienzo
de este siglo ha involucrado nuevos mtodos para aumentar el contraste. Sin estas tcnicas
sera imposible para el ojo humano el conocimiento del mundo celular.
La mayora de las organelas son demasiado pequeas para ser visualizadas por la microscopia de
luz. La Biologa Celular avanz rpidamente hace un poco ms de cincuenta aos con la
introduccin del microscopio electrnico. En lugar de luz visible, el microscopio electrnico
utiliz un haz de electrones [2] a travs de la muestra. El poder de resolucin est
inversamente relacionado con la longitud de onda (l) de la radiacin que un microscopio usa y un
haz de electrones tiene longitudes de onda mucho ms cortas que la luz visible. Para mayores
precisiones al respecto, consulte el cuadro 1.4

Cuadro 1.4- Poder de resolucin del Microscopio

En cualquier tipo de microscopio, el poder de resolucin depende de la longitud de onda (l) y de

laapertura numrica (AN) del objetivo (la capacidad de colectar la luz). As, el lmite de resolucin, que
es la distancia mnima que debe existir entre dos puntos para que puedan ser discriminados como tales, y
responde a la siguiente ecuacin:
Lmite de resolucin=0,61 l /AN
A su vez,
AN = n . seno a
donde, n es el ndice de refraccin del medio que atraviesa el haz y a es el ngulo de apertura
Ntese que el lmite de resolucin es inversamente proporcional al poder resolutivo del instrumento, de
modo tal que cuanto mayor sea ste, menor ser el lmite de resolucin conseguido.

Fig. 1.18- Comparacin entre un Microscopio ptico y Electrnico

La mayora de los microscopios electrnicos modernos pueden lograr una resolucin de 0,2 nm,
unas 1000 veces mejor que la obtenida con el microscopio ptico.
Los bilogos usan el trmino ultraestructura celular para referirse a la anatoma celular cuando
se resuelve por un microscopio electrnico.
Hay dos tipos de microscopio electrnico: el microscopio electrnico de transmisin (MET) y el
microscopio electrnico de barrido (MEB):
El MET permite develar la ultraestructura de las clulas y de la matriz extracelular. El haz
de electrones es desviado por un campo electromagntico (que actuara como lente). En este
tipo de microscopia se requiere que las muestras tengan un grosor de 100 nm.
El MEB es especialmente til para estudios de superficie del espcimen. El haz de
electrones explora la superficie de la muestra la que usualmente se recubre con una pelcula de
oro. El haz excita a los electrones sobre la superficie de la misma muestra y estos electrones
secundarios se recolectan y enfocan sobre una pantalla. Esto forma una imagen de la
topografa del espcimen. Un importante atributo del MEB es su gran profundidad de campo, la
cual resulta en una imagen tridimensional.
El ME revela muchas organelas que son imposibles de resolver con MO. Pero el MO ofrece
muchas ventajas especialmente para el estudio de la clula viva. Una desventaja de ME es que
los mtodos qumicos y fsicos usados para preparar la muestra, no slo matan a las clulas sino
que puedan introducir artefactos, estructuras peculiares vistas en micrografas que no existe
en una clula viva.
La preparacin de la muestra para el MO y el ME resulta similar si se trabaja con las
clulas muertas.

En la tabla 1.9 se comparan los pasos a seguir en ambos tipos de microscopia para la
preparacin de la muestra:

Tabla 1.12 -Tcnicas para Preparar una Muestra en Microscopia ptica y Electrnica

Paso

Microscopia ptica

Microscopia Electrnica

Pueden usarse fijadores

qumicos (formol, etanol,
metanol o mezclas fijadoras).
Tambin se utilizan mtodos
fsicos como la desecacin, el
calor seco, el fro o la
congelacin.

Se realiza con paraformaldehido,

con tetrxido de osmio o,
ltimamente, con glutaraldehido,
en soluciones acuosas de pH
neutro y concentracin salina
semejante al medio. Luego se lava
la pieza y se post-fija con
tetrxido de osmio durante una
hora; el osmio se une a
estructuras lipoproteicas
(membranas celulares) ofreciendo
mayor contraste en la imagen.
Esto se conoce como coloracin o
contrastado.

OBTENCIN: Se hace
cuidadosamente con instrumental
adecuado.

FIJACIN: se destina a impedir

la autodegradacin enzimtica
(autlisis)de las clulas tratando
de evitar, en lo posible, la
alteracin de las estructuras
originales y su autodigestin.

DESHIDRATACIN: retira
el Pasajes sucesivos por alcoholes Baos con alcohol o acetona.
agua de las piezas fijadas, para de concentracin creciente.
que luego puedan ser incluidas en
un elemento que es insolubles en
solventes acuosos.

ACLARACIN

Se realiza para eliminar de la

No requiere
muestra restos de alcohol y
toda sustancia hidrosoluble. Se
impregna la muestra con un
solvente no acuoso, orgnico y
soluble en parafina, como

xileno, tolueno o benceno.

INCLUSIN

Se incluye el material en
Se utilizan resinas sintticas tipo
parafina o celoidina
epoxi que luego de secarse se
previamente calentada, la que al transforman en un material muy
solidificarse sirve de sostn de duro, apto para que se le
la muestra y posibilita su corte. efecten cortes extremadamente
Se forma eltaco.
delgados.

CORTE

Es lo suficientemente delgado Debe obtenerse un corte de la

como para ser atravesado por la muestra tal que el haz de
luz. Esto se logra utilizando
electrones logre atravesarla.
elmicrtomo con el que se
Elultramicrtomo realiza cortes
realiza cortes uniformes del
de 20 a 100 nm de espesor con
tejido a un dado espesor.
cuchillas de vidrio o diamante.

REHIDRATACIN

Se retira la parafina con xilol y

se lava con alcoholes de
concentracin creciente. Al ser
los colorantes solubles en agua
resulta indispensable
rehidratar

COLORACIN

Las clulas y los tejidos son

coloreados para lograr mayores
contrastes facilitando la
observacin. La coloracin de
hematoxilina-eosina es una de
las ms comnmente utilizadas.
Tie el ncleo de azul y el
citoplasma de rosa.

MONTAJE

El corte se monta sobre un

Estas muestras se montan en
portaobjetos. El cubreobjetos pequeas grillas de cobre
El corte se coloca sobre ciertas puede colocarse por encima
para proteger el preparado.
clases de estructuras.
Este puede conservarse
durante dcadas si el

cubreobjetos se sella.

CONTRASTADO

La pieza se impregna en acetato

de uranilo, citrato de plomo u
otras sustancias.

Las diferencias ms notables de los principales componentes del MO y del ME y sus

caractersticas singulares se especifican en la siguiente tabla.

Tabla 1.13 - Diferencias entre el MO y ME

MICROSCOPIO PTICO

CARACTERSTICA

MICROSCOPIO ELECTRNICO

De interferencia de rayos
luminosos

1) IMAGEN DADA POR

MECANISMO:

De dispersin de electrones

Simple con aire

2) TUBO

Al vaco con gran diferencia de

potencial

Luz (fotones)

3) FUENTE

Filamento de tungsteno
(electrones)

Lentes: Ocular, objetivo y

condensador

4) ELEMENTOS

Bobinas electromagnticas

Clulas vivas o muertas

5) ESTUDIAN

Clulas muertas

Coloreadas o no

6) OBSERVACIN DE LA IMAGEN Distintas tonalidades de gris. En la

actualidad se ven imgenes
"sombreadas" electrnicamente.

0,25m

7) LIMITE DE RESOLUCIN

3 a 5 (terico)
10 (en la prctica)

5.500 (trmino medio)

8) LONGITUD DE ONDA

0,056

500 X a 1500 X

9) AUMENTO (el signo X significa

aumento)

30.000 X a 1.000.000 X

Carnoy u otros fijadores

10) FIJACIN

Bicromato de potasio, tetrxido

de osmio, formaldehdo.

Parafina o coloidina

11) INCLUSIN

Acrlicos o resinas de epoxi.

Con el micrtomo. (cuchilla

de acero). Cortes de 10m

12) CORTES

Con ultramicrtomo. (cuchilla de

diamante o vidrio) Cortes de 100 a
500 .

De vidrio

13) PORTAOBJETO

Placas de Colodion, aluminio o

berilio.

Nivel microscpico:

14) NIVEL DE OBSERVACIN

Nivel submicroscpico:

ESTRUCTURA

ULTRAESTRUCTURA

LAS CLULAS VIVAS PUEDEN SER OBSERVADAS A TRAVS DEL MICROSCOPIO

Se pueden utilizar ingeniosamente las propiedades ondulatorias de la luz aumentando el
contraste de las estructuras transparentes. As surgieron varias clases de microscopios
pticos convirtindose en herramientas destacadas en el estudio de la clula. Ms an, si se
considera la posibilidad de que algunos componentes de la clula puedan perderse o
distorsionarse durante la preparacin de la muestra. En consecuencia, el examen de la clula
viva (sin fijacin ni congelacin) resulta til.

Los microscopio de contraste de fase y de interferencia son sistemas pticos especiales que
logran intensificar la escasa interferencia [3] y proporcionan mayor contraste que el obtenido
con un MO comn.
En el microscopio de campo oscuro, el haz luminoso se proyecta oblicuamente y los sistemas de
lentes detectan la luz reflejada por la muestra que se ve como un objeto brillante contra un
fondo oscuro, logrndose un gran relieve de rasgos de la clula que son invisibles en el MO.
El microscopio de luz polarizada puede proveer datos sobre la estructura a nivel molecular de
las clulas y los tejidos no slo en las clulas vivas sino en preparados post-mortem. Ciertos
componentes celulares y tisulares se comportan peculiarmente cuando la luz polarizada (luz que
gira nicamente en un plano) los atraviesa.
LAS ORGANELAS PUEDEN AISLARSE PARA ESTUDIARLAS MS PROFUNDAMENTE
La descripcin de las diversas organelas dentro de la clula revela poco acerca de su funcin.
La Biologa Celular actual desarrolla la integracin de la Citologa con la Bioqumica, es decir el
estudio de la estructura celular junto con el anlisis de los procesos qumicos de la vida
(metabolismo). El fraccionamiento celular ha sido particularmente importante en esta ciencia.
El objetivo del fraccionamiento celular es disgregar las clulas separando las organelas
principales de modo que, sus funciones individuales puedan ser estudiadas. El instrumento
usado para fraccionar las clulas es la centrfuga capaz de girar a diversas velocidades. La ms
poderosa, llamada ultracentrfuga puede dar vueltas tan rpidamente como 80000 revoluciones
por minuto (RPM) y aplicar fuerzas sobre las partculas de 500000 veces mayores que la
fuerza de la gravedad (500000g).

Fig. 1.19- Esquema del Proceso de Fraccionamiento Celular

El fraccionamiento celular comienza con la homogeneizacin, o sea la ruptura de la clula. El
objetivo es romper las clulas sin daar severamente sus organelas. El homogenato se
centrifuga logrndose la separacin de las partes de la clula en dos fracciones: el pellet que
consiste en las estructuras ms grandes depositadas en el fondo del tubo y
el sobrenadante constituido de partes ms pequeas suspendidas en el lquido por encima del
pellet. El sobrenadante es transvasado a otro tubo y centrifugado otra vez. El proceso es
repetido incrementando la velocidad en cada paso. De esta manera se consigue recolectar
componentes ms pequeos de los sucesivos pellets.
Los detalles de esta marcha se aprecian en la Fig.1.19.
El fraccionamiento celular permite preparar los componentes especficos de la clula
tanto cualitativa como cuantitativamente.
LAS POBLACIONES CELULARES PUEDEN SER SEPARADAS POR EL CITMETRO DE FLUJO
Este instrumento posee un tubo muy delgado por donde se hacen pasar a las clulas una tras
otra. Un determinado tipo celular emitir fluorescencia, previo tratamiento

con fluorocromo (pigmento fluorescente). Esto permite la discriminacin y, por lo tanto, la

separacin de las clulas as tratadas de acuerdo a la fluorescencia que emitan.
LAS CLULAS VIVAS PUEDEN SER ESTUDIADAS MEDIANTE EL CULTIVO CELULAR
Con el objetivo de preservar toda la informacin que sea posible sobre todos los tipos
celulares, se han desarrollado tcnicas de disociacin de las clulas.
En los primeros tiempos, la tcnica consista en colocar un explante de un pequeo trozo de
tejido en un medio compuesto por suero sanguneo, extracto de embriones y solucin salina.
Hoy se conocen los requerimientos nutricios de las clulas eucariontes. Se las mantienen y
hacen crecer en un medio sinttico enriquecido de suero. Se distinguen tres tipos de cultivos:
Cultivos Primarios se obtienen de los animales o vegetales. El tejido se separa en
condiciones aspticas y se corta en pequeos trozos y se los trata con tripsina (enzima
proteoltica) que disocia los agregados celulares y genera una suspensin de clulas libres que
se cultivan en un medio apropiado.
Cultivos Secundarios se obtienen mediante el tratamiento con tripsina de un cultivo
primario, seguido de un nuevo cultivo en una caja de Petri.
Cultivos de lneas establecidas cuyo crecimiento se prolonga debido a las condiciones
cancerosas de las clulas. Entre las ms usadas se encuentran las clulas HeLa. A pesar de
tales anomalas son muy tiles para el estudio del cncer.
LAS MOLCULAS ORGNICAS SON ESTUDIADAS DENTRO Y FUERA DE LA CLULA
A nivel molecular, los organismos estn formados por relativamente pocos tipos de compuestos.
El agua constituye alrededor del 70% de la mayora de los seres vivos. De los dems
compuestos, los principales son los glcidos, los lpidos, las protenas y los nucletidos, muchos
de ellos combinados para formar los cidos nucleicos, cido ribonucleicos (ARN) y cido
desoxirribonucleico(ADN). Aunque hay muchos otros compuestos presentes, estas cuatro
categoras constituyen la mayora de las molculas orgnicas de los seres vivos y son los
actores de los procesos metablicos. Por lo tanto, su localizacin y funcin dentro de la clula
como un estudio ms detallado fuera de ella se hace necesario.
Algunos ejemplos de tcnicas para el estudio, la ubicacin y la cuantificacin de molculas
orgnicas se mencionan a continuacin:
RECONSTRUCCIN DE IMGENES A PARTIR DE ELECTROMICROGRAFAS
Las microfotografas electrnicas poco claras de cristales de molculas o estructuras
supramoleculares se colocan en la trayectoria de un haz de rayos lser para obtener un
diagrama de difraccin ptica. Este diagrama es procesado por un programa de computacin
consiguiendo la reconstruccin de las molculas individuales en las fases y amplitudes
correspondientes a un rea de la microfotografa.

DIFRACCIN DE RAYOS X
Este mtodo consiste en el bombardeo de la molcula por un delgado haz de rayos X y
provoca la dispersin (difraccin) de la radiacin a travs de los electrones de los tomos de la
muestra. Este haz disperso debe alcanzar una placa fotogrfica. La estructura molecular
tridimensional se deduce de las posiciones y las intensidades de las manchas registradas en la
placa fotogrfica.
LOS MTODOS CITOQUMICOS
Los compuestos qumicos se identifican "in situ" por medio de mtodos citoqumicos.
Este objetivo es cualitativo y cuantitativo y muchas veces persigue el estudio de los cambios
dinmicos producidos en el contenido qumico celular en las distintas etapas del metabolismo.
Para ello, el compuesto qumico debe ser:
a) inmovilizado en posicin original e,
b) identificado por un procedimiento especfico para el compuesto o para un grupo qumico
caracterstico que posea.
Los mtodos fsicos y reacciones qumicas similares a las implementadas en Qumica Analtica
pero adaptadas a tejidos se usan para llevar a cabo este tipo de identificacin.
LAS DIVERSAS MOLCULAS DE LA CLULA PUEDEN LOCALIZARSE POR LAS
TCNICAS INMUNOHISTOQUMICAS
Cuando los vertebrados superiores, los animales e incluso el hombre, son expuestos a la
actividad de los microorganismos o a molculas ajenas a sus ultraestructuras, ya sea
naturalmente o por inyeccin, aquellos sintetizan anticuerpos. Estos son protenas que pueden
fijarse selectivamente a los materiales extraos que desencadenaron su sntesis. Por lo tanto,
el organismo produce tantos anticuerpos como partculas extraas ( antgenos) son reconocidas.
As, se puede obtener una gran variedad de anticuerpos.
Los anticuerpos son herramientas experimentales muy verstiles para reconocer y manipular
clulas y molculas. Si un animal de una especie determinada es inyectado con un componente
celular o molecular de otra especie, el primero logra fabricar anticuerpos capaces de
reconocer y fijar fuertemente aquel componente (el del segundo animal). A estos anticuerpos
se acoplan colorantes fluorescentes que son visibles al MO. De modo similar, con el M.E. se
pueden detectar molculas trazadoras acopladas en anticuerpos. De esta manera, los
componentes celulares y moleculares quedan teidos en forma diferencial por los anticuerpos
que se fijan a ellos.
Como todava no se han presentado los aspectos fundamentales de las molculas
orgnicas, otros mtodos fisicoqumicos de ms fina determinacin, purificacin y

cuantificacin de las biomolculas se mencionarn en las prximas unidades. Como se ver,

dichas tcnicas son de uso corriente en el diagnstico mdico rutinario.
CUESTIONARIO DE AUTOEVALUCIN
1.

Cul de los siguientes organoides no forman parte del Sistema de Endomembranas?:

a.

envoltura nuclear

b.

cloroplasto

c.

aparato de Golgi

d.

retculo endoplasmtico

2. Un determinado veneno destruye el citoesqueleto. Cul de las siguientes funciones sera

afectada directamente?:
a.

la divisin celular

b.

la respiracin celular

c.

la fotosntesis

d.

la sntesis de protenas

3.

Cul de las siguientes organelas est presente en la clula animal y vegetal?:

a.

cloroplasto

b.

pared celular

c.

mitocondria

d.

centrolos.

4.

Qu organela est presente en una clula procarionte?:

a.

mitocondria

b.

ribosoma

c.

cloroplasto

d.

retculo endoplasmtico

5.

En qu parte de la mitocondria aparecen las crestas?

6.

Qu organela carece de membrana?

7.

En qu parte de la bacteria se realiza la respiracin?

8. Si Ud. tuviera que argumentar acerca de que los virus son organismos vivos, qu
caractersticas estructurales y funcionales del virus podra utilizar para apoyar su
argumentacin?
9. Qu tipo de clulas pensara Ud. que alcanzaran el mayor tamao: una clula muy
aplanada o una esfrica? Por qu?
10. Por qu casi todas las clulas casi siempre son microscpicas?
11. Cules son las propiedades fundamentales que comparten todas las clulas? Describa la
importancia de cada una de ellas.
12. Compare en un cuadro las diferencias estructurales, funcionales y metablicas entre las
clulas procariontes y eucariontes.
13. Qu propiedades distinguen a un virus de una bacteria?
14. Enumere los pasos de la infeccin viral, y describa brevemente cada paso.
15. Utilizando el Sistema Mtrico Decimal resuelva las equivalencias en metros de: a) 1 nm; b)
1 mm.
16. Indique el poder de resolucin del: a) M.O.; b)M.E.T.; c)M.E.B.
17. Cuntas veces son mayores los aumentos del M.E. en relacin a los del M.O.?
18. A qu es igual el poder de resolucin?:
a.

AN / 0.61 x l

b.

0.61 x l / AN

c.

0.61 / AN x l

d.

0.61 x AN /l.

19. Qu compuesto se usa como fijador en microscopia electrnica? Y en microscopia

ptica?

20. Explique qu tcnicas utilizara para crear suficiente contraste cuando se usa el M.O. y el
M.E.
21. Qu tipo de microscopios se usan para la observacin de la clulas vivas?
22. Cules son las ventajas de estudiar las clulas con el M.E.T. y el M.E.B.?
23. Cundo utilizara la microscopia de contraste de fase? Por qu?
24. Para qu se utiliza la tcnica de fraccionamiento celular? Qu se obtiene en cada paso?
25. Qu es un anticuerpo? Por qu es una herramienta til en la investigacin biolgica?
26. Para qu se utiliza la difraccin de rayos X?
27. Cuando una clula de forma esfrica crece, los mm2 de superficie de la membrana
plasmtica por mm3 del volumen celular:
a.

decrece

b.

aumenta

c.

se mantiene constante

d.

se vuelve ms delgada

28. El microscopio de interferencia es:

a.

una variante del M.O.

b.

una variante del M.E.

c.

til cuando se colorea la muestra

d.

utilizado para visualizar tomos

29. La ultracentrfuga se emplea en:

a.

citometra de flujo

b.

b) microscopia electrnica

c.

fraccionamiento celular

d.

difraccin de rayos

30. Las muestras de clulas vivas o preparados fijados se pueden estudiar indistintamente
con:
a.

microscopia electrnica

b.

microscopia de interferencia

c.

microscopia de luz polarizada

d.

difraccin de rayos X.

BIBLIOGRAFA
Alberts, B et al; (1996) Biologa Molecular de la Clula. 3 ra Edicin. Ediciones Omega S.A.
Barcelona.

Brock, T; (1997) Biology the Microorganisms. 8th Edition. Prentice Hall. NY

Campbell, N; (1997) Biology. 4th Edition. the Benjamin Cummings Publishing Company. Inc.
California

Castieira de Dios L. y col. (1999). Cuadernillos de Biologa e Introduccin a la Biologa

Celular N 2. Bs.As. Ediciones CCC-Educando.

Curtis y Barnes (1992). Biologa. 5 Ed. Bs.As. Editorial Mdica Panamericana.

De Robertis(h); Hib; Ponzio. (1996).Biologa Celular y Molecular de De Robertis. 12

Edicin. El Ateneo. Bs.As.

De Robertis, E.; Hib, J.; (1998) .Fundamentos de Biologa Celular y Molecular. El Ateneo.
Bs.As.

Freidfelder, D. (1982) Physical Biochemestry. 2 Ed. W.H. Freeman and Co.

Holtzman, E. y Novikoff, A.B.(1986). Estructura y Dinmica Celular. 3 Ed. Mxico.

Interamericana.

Karp, G.; (1998) Biologa Celular y Molecular. Ed. Mc Graw Hill Interamericana. Mxico.

Moreno Azorero, R. y Schwartzman, G.; (1986). Principios de Biologa Celular. El Ateneo.

Bs.As.

Smith and Wood; (1997) . Molculas Biolgicas. Ed.Addison-Wesley, Iberoamericana S.A.

Solomon y col. (1998) . Biologa de Villee. 4. Ed. Mex. McGraw-Hill. Interamericana

[1] La longitud de onda (l) es la distancia entre dos puntos consecutivos que vibran en fase.
Siempre que dos puntos estn separados por una distancia igual a la que recorre la onda en un
perodo, o a un mltiplo de ella, los dos puntos vibrarn en fase.
[2] Los electrones pueden considerarse como una variedad de radiacin de pequea longitud de
onda.
[3] Interferencia: Es un fenmeno fsico producido entre ondas cuyos "picos" y "valles" no
coinciden, es decir no estn en fase.