BIORREMEDIACION

UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTN
Facultad de Ingeniera de Procesos

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERA QUMICA
CURSO
: HIDROCARBUROS
Investigacin Formativa :
Biorremediacin de suelos
DOCENTE : Dr. Pavel Delgado Sarmiento
GRUPO
:B
PROPIO DE:
Mamani Salas Diana Noelia
CUI: 20120724
2016
HIDROCARBUROS
BIORREMEDIACION DE SUELOS
1. BIORREMEDIACION DE CRUCOS CON ECAS.

La Gua para la Elaboracin de Planes de Descontaminacin de Suelos (PDS) establece
lineamientos para la actuacin de los titulares de actividades extractivas, productivas o de
servicios, responsables naturales o jurdicos, pblicos o privados de la descontaminacin de
suelos contaminados, y para lo cual deben elaborar el PDS como un instrumento de gestin
ambiental, conforme lo establece el Decreto Supremo N 002-2013-MINAM que aprueba los
Estndares de Calidad Ambiental (ECA) para Suelo.
La necesidad de la elaboracin de un Plan de Descontaminacin de Suelos, se deriva en
general de la evidencia de que un sitio supera los ECA para suelo o los niveles de fondo,
calificndose como suelo contaminado; siendo necesario para determinar esta condicin el
desarrollo de la evaluacin preliminar del sitio y del muestro de identificacin en las reas de
potencial inters.
Determinada la necesidad de elaboracin de un PDS, procede el muestreo de detalle, el estudio
de caracterizacin, y cuando corresponda el estudio de Evaluacin de Riesgos a la Salud y el
Ambiente (ERSA), que junto a la propuesta de acciones de remediacin forman parte integrante
del Plan de Descontaminacin de Suelos.
Todos estos estudios tienen como finalidad establecer las actividades a realizar en el sitio
contaminado, causantes de los daos ambientales; los sucesos que condujeron a la
contaminacin del suelo, el subsuelo y la napa fretica, las condiciones hidrogeolgicas que
prevalecieron en el sitio con base a informaciones documentales, si existen; as como las
relaciones de posesin y uso pasado y presente del predio o predios en los cuales se localice el
sitio contaminado.
De esta manera, para la aplicacin de los ECA para suelo a todo proyecto o actividad que
genere o pueda generar riesgos de contaminacin del suelo en su emplazamiento y reas de
influencia, se identifican 3 fases claramente diferenciadas segn los objetivos que persiguen,
stas son:
a) Fase de identificacin (Previo a la elaboracin del PDS)
b) Fase de caracterizacin (Elaboracin del PDS)
c) Fase de remediacin (Posterior al PDS)
1.1. PLAN DE DESCONTAMINACIN DE SUELOS
Cuando se determine la existencia de un sitio contaminado derivado de las actividades
extractivas, productivas o de servicios, el titular debe presentar el Plan de Descontaminacin de
Suelos (PDS), el cual es aprobado por la autoridad competente. El PDS abarca la fase de
caracterizacin y las propuestas de acciones de remediacin.
La fase de caracterizacin procede cuando los resultados de la fase de identificacin
determinan que se supera los ECA para suelo o los niveles de fondo. Tiene por objeto
determinar la extensin y profundidad de la contaminacin del sitio, y comprende el desarrollo
del muestreo de detalle, el estudio de caracterizacin, el estudio de evaluacin de riesgo a la
salud y el ambiente (ERSA) cuando corresponda, que junto a la propuesta de acciones de
remediacin, conforma el Plan de Descontaminacin de Suelos (PDS), que debe ser
presentado a la autoridad competente para su evaluacin y aprobacin.
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BIORREMEDIACIN DE SUELOS
HIDROCARBUROS
1.1.1. ESTRATEGIA PARA EL ESTUDIO DE CARACTERIZACIN

Con la informacin recopilada en la fase de identificacin, y habiendo realizado el modelo
conceptual inicial del sitio contaminado, se debe planificar el proceso de intervencin para la
caracterizacin del sitio, determinando las concentraciones de los contaminantes en el
suelo, las posibles rutas de exposicin, y en base a ello determinar la posible contaminacin
de componentes ambientales como aguas superficiales y/o subterrneas y la fase gaseosa
del suelo en la atmsfera circundante. La aplicacin de una planeacin dinmica permite
correcciones durante el proceso de caracterizacin conforme se va ganando conocimientos.
Objetivos principales de la estrategia de caracterizacin son:
Determinar la profundad y extensin de la contaminacin del sitio en estudio.
Comprobar o descartar sospechas de contaminacin (sustancias y focos) fuera y
dentro del sitio.
Retroalimentar el Modelo Conceptual, considerando las rutas, vas de exposicin y
los efectos en los receptores.
Conocer la posibilidad de contaminacin procedente de otras fuentes no asociadas
al sitio.
Como resultado de la informacin generada, se establece la necesidad de continuar con los
siguientes procesos de gestin de un suelo contaminado: la realizacin del ERSA (de ser el
caso) y la propuesta de acciones de remediacin.
1.1.2. MUESTREO DE DETALLE
Tiene por objetivo obtener muestras representativas de suelo para determinar el rea y volumen
(la distribucin horizontal y vertical) de los contaminantes del suelo en las reas de inters
determinadas a travs de la fase de identificacin.
El muestreo de detalle, cuantifica y delimita las zonas de afectacin del suelo y las plumas de
propagacin en el agua superficial o subterrnea, tanto en espacio y tiempo, a partir del modelo
conceptual redefinido. Caracteriza los medios en relacin a factores que influyen en la
liberacin, migracin y comportamiento de los contaminantes, a travs de la delimitacin y
cuantificacin de los focos; as el muestreo de detalle deber tambin enfocarse a la
determinacin de las probables rutas y vas de exposicin debiendo considerar los posibles
puntos de exposicin en el caso de que se lleve a cabo una ERSA.
1.2. PROPUESTA DE ACCIONES DE REMEDIACIN
La propuesta de acciones de remediacin se elabora con base en el estudio de caracterizacin
de sitios contaminados y, de ser el caso, en el estudio de evaluacin de riesgo a la salud y el
ambiente (ERSA).
Los tipos de acciones de remediacin que se podrn aplicar, sola o en combinaciones, son:
acciones de remediacin para la eliminacin de los contaminantes del sitio, acciones para evitar
la dispersin de los contaminantes, acciones para el control del uso del suelo, y acciones para
el monitoreo del sitio contaminado.
Las acciones de remediacin en orden de prioridad incluyen (entre otras):
1. Acciones fsicas directas (tratamiento, remocin o destruccin de contaminantes) u
2. Otras soluciones para la gestin del riesgo (tales como la construccin de barreras fsicas
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HIDROCARBUROS
para el aislamiento o contencin de los contaminantes, atenuacin natural monitoreada etc.).

Estas acciones no necesariamente comprenden la aplicacin de tcnicas que reconviertan el
sitio a sus condiciones originales (restauracin), sino la remediacin del suelo para un uso
determinado en condiciones seguras.
Para la eleccin de las acciones de remediacin se debe evaluar la viabilidad de las posibles
alternativas de remediacin y determinarlas en funcin al:
Anlisis de las mejoras tcnicas disponibles
Anlisis de sostenibilidad de alternativas
Anlisis de Ecoeficiencia
De ser el caso: Resultados de ensayos de laboratorio y/o ensayo piloto
Anlisis de costo/efectividad (opcional).
Seleccionada una alternativa de remediacin, para su ejecucin se requiere de, una

planificacin detallada, considerando:
Descripcin detallada y representacin grfica de las acciones de remediacin
Plan de control y de monitoreo en la ejecucin
Plan de muestreo de comprobacin
Cronograma de ejecucin de actividades
Propuestas de medidas de seguimiento
Estimacin de costos.
En la elaboracin de las propuestas de acciones de remediacin, se debe considerar entre

otros, los siguientes puntos:
Si se remueven los suelos contaminados durante los procesos de tratamiento, se
almacenarn y manejarn en lugares o superficies, de manera tal que se evite la
lixiviacin y la filtracin de contaminantes en suelos.
Cuando las acciones de remediacin se lleven a cabo en el sitio de la contaminacin, se

deber contar con un sistema de captacin de lixiviados y no debern aplicarse proceso
o medida de tratamiento alguno en el que se involucren soluciones de agentes qumicos
o biolgicos que transfieran de manera descontrolada los contaminantes de un medio a
otro.
Cuando en las acciones de remediacin se empleen mtodos o tcnicas que liberen

vapores, se deber contar con el sistema de captacin correspondiente.
Los polvos y gases que se emitan como resultado de tratamientos trmicos en la

remediacin no excedern las concentraciones establecidas en los ECA de aire y/o los
LMP.
La disposicin final de los suelos tratados que hayan cumplido con los ECA para suelo,
los NF y/o los NR establecidos, podr realizarse en los sitios que de comn acuerdo se
establezcan entre la autoridad competente y el responsable.
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HIDROCARBUROS
En caso de que el suelo contaminado haya sido excavado para su confinamiento, el sitio
deber ser rellenado con material semejante al de la localidad y conforme a la topografa
del sitio.
Cuando deba excavarse o removerse el suelo contaminado para llevar a cabo las
acciones de remediacin, no deber quedar remanente de contaminacin en el sitio de
acuerdo con los ECA para suelo, NF o los NR (de ser el caso) establecidos en la
propuesta de remediacin.
La adicin de microorganismos al suelo se realizar, nicamente, cuando se haya

comprobado en campo su necesidad y eficacia.
Se considerar que los suelos son tratados a un lado del sitio (on-site), cuando el tratamiento se
realiza sobre un rea adyacente al sitio contaminado o sobre un rea dentro del sitio
contaminado, previa remocin del suelo y materiales semejantes a suelos.
Sern suelos tratados fuera del sitio (off-site), cuando se remueve el suelo y los materiales
semejantes a suelos contaminados a un lugar fuera de aqul donde se ubican, para someterlos
a tratamiento en instalaciones fijas autorizadas. Son materiales semejantes a suelos todos
aqullos que por sus propiedades mecnicas, fsicas y qumicas presenten semejanzas con los
suelos contaminados, tales como lodos de presas, lodos y sedimentos de crcamos , tanques de
almacenamiento, entre otros.
(Ambiental, 2014)
2. BIORREMEDIACION DE SUELOS.
2.1. Definicin:
La biorremediacin es el uso de seres vivos para restaurar ambientes contaminados. Es un
concepto que no se debe de confundir con depuracin. La depuracin es la eliminacin, ya sea
por mtodos fsico/qumicos o biolgicos, de un contaminante antes de que ste alcance el
medio ambiente. Cuando la contaminacin ya se ha producido, se precisa restaurar el
ecosistema contaminado, para lo que se pueden utilizar diversas estrategias. Una de ellas es la
biorremediacin.
2.2. Organismos que participan.

Se pueden emplear diversos organismos en los procesos de biorremediacin. Los ms usados
son los microorganismos (tanto bacterias, como algas y hongos) y las plantas (en procesos
llamados fitorremediacin), pero tambin se pueden utilizar otros seres vivos tales como los
nemtodos
(vermiremediacin).
Entre los microorganismos destacan especialmente las bacterias, los seres vivos con mayor
capacidad metablica del planeta. Las bacterias pueden degradar prcticamente cualquier
sustancia orgnica. Si la sustancia se degrada completamente se habla de mineralizacin; este
es el proceso ideal, pero no siempre ocurre. Algunas sustancias no son degradadas sino
transformadas en otras (biotransformacin). La biotransformacin puede ser peligrosa, ya que
la nueva sustancia formada puede ser tan nociva o ms que la de partida. Finalmente hay
sustancias que no son degradadas y se las denomina recalcitrantes. stas se acumulan
durante mucho en el medio ambiente, especialmente si adems son resistentes a procesos
fsico/qumicos
como
la
radiacin
ultravioleta
o
la
oxidacin.
Las bacterias adems pueden eliminar los contaminantes en ambientes donde hay oxgeno
(llamados aerbicos), pero tambin en ambientes sin oxgeno (llamados anaerbicos), ya que
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HIDROCARBUROS
pueden respirar otras sustancias diferentes al oxgeno (aceptores de electrones), como por
ejemplo el nitrato, el sulfato, el hierro (III), el manganeso, el selenio y un largo etctera.
2.3. Qu tipos de contaminantes se pueden eliminar por biorremediacin?

Todos aquellos contaminantes que puedan ser degradados o transformados por los seres vivos
son susceptibles de ser eliminados mediante procesos de biorremediacin. Los compuestos
orgnicos suelen ser degradados total o parcialmente y eliminados por completo del
ecosistema. Por ejemplo, compuestos contaminantes tales como el tolueno, el fenol o los
polibifenilos clorados (PCBs) pueden ser utilizados como fuente de carbono por bacterias, tanto
en condiciones aerbicas como anaerbicas. Bacterias de los gneros Pseudomonas,
Ralstonia, Burkholderia o Mycobacterium pueden eliminar hidrocarburos aromticos como el
tolueno o el naftaleno, pesticidas como las atrazinas, aditivos de la gasolina como el tricloruro
de etilo o sustancias venenosas como el cianuro potsico, tanto de ambientes slidos (suelos)
como
lquidos
(rios
mares).
Pero, adems muchas bacterias son capaces de modificar sustancias qumicas peligrosas,
transformndolas en otras menos txicas. As, algunas bacterias pueden reducir la
biodisponibilidad (hacerla menos accesible y por tanto menos txica) de metales pesados tales
como el mercurio, el arsnico, el cromo, el cadmio, el zinc o el cobre.
Figura: Ejemplo del empleo de bacterias para la eliminacin de un contaminante en capas

profundas del suelo. En este ejemplo las sustancias contaminantes estn haciendo peligrar un
acufero. Para su eliminacin se inyecta en el suelo nutrientes y aceptores de electrones que
favorecen el crecimiento de microoganismos que acabarn eliminando la sustancia txica.
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HIDROCARBUROS
2.4. Qu utilidad tienen los microorganismos usados en biorremediacin?

El estudio de los procesos de biorremediacin tiene un gran inters, y no slo por las ventajas
que posee la restauracin de un ecosistema. Las bacterias responsables de la biorremediacin,
los procesos bioqumicos que llevan a las reacciones de degradacin, as como los genes que
codifican las enzimas responsables de estos procesos se estn analizando tanto para un
conocimiento desde un punto de vista bsico como aplicado. Conocer las protenas
responsables de estos procesos, as como los genes que codifican stas, como han
evolucionado y se han dispersado en los diferentes ecosistemas, permite conocer mejor la
evolucin ligada a procesos geoqumicos de nuestro planeta.
Adems ese conocimiento ha servido y est sirviendo para desarrollar herramientas de inters
biotecnolgico como por ejemplo, el uso de las bacterias, o parte de ellas en procesos de
biominera (extraccin de metales de inters usando bacterias), de bioproduccin de sustancias
de inters tales como bioplsticos o biopolmeros, energa (electricidad), sustancias de inters
farmacolgico, o enzimas que realizan procesos qumicos de una forma ms eficiente y ms
respetuosa con el medio ambiente que la industria qumica. Estas bacterias, o parte de ellas
tambin pueden ser usadas para desarrollar biosensores, sistemas de deteccin de sustancias
ms eficientes y rpidos que los tpicos anlisis qumicos.
(Biorremediacion: Una estrategia para eliminar contaminantes respetuosa con el medio
ambiente, 2006)
3. TIPOS DE BIORREMEDIACION
Tipos de biorremediacin En los procesos de biorremediacin generalmente se emplean
mezclas de ciertos microorganismos o plantas capaces de degradar o acumular sustancias
contaminantes tales como metales pesados y compuestos orgnicos derivados de petrleo o
sintticos. Bsicamente, los procesos de biorremediacin pueden ser de tres tipos:
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HIDROCARBUROS
3.1. Degradacin enzimtica:

Este tipo de degradacin consiste en el empleo de enzimas en el sitio contaminado con el fin de
degradar las sustancias nocivas. Estas enzimas se obtienen en cantidades industriales por
bacterias que las producen naturalmente, o por bacterias modificadas genticamente que son
comercializadas por las empresas biotecnolgicas. Por ejemplo, existe un amplio nmero de
industrias de procesamiento de alimentos que producen residuos que necesariamente deben
ser posteriormente tratados. En estos casos, se aplican grupos de enzimas que hidrolizar
(rompen) polmeros complejos para luego terminar de degradarlos con el uso de
microorganismos (ver en la prxima seccin). Un ejemplo lo constituyen las enzimas lipasas
(que degradan lpidos) que se usan junto a cultivos bacterianos para eliminar los depsitos de
grasa procedentes de las paredes de las tuberas que transportan los efluentes.
Otras enzimas que rompen polmeros utilizados de forma similar son las celulosas, proteinasas
y amilasas, que degradan celulosa, protenas y almidn, respectivamente. Adems de hidrolizar
estos polmeros, existen enzimas capaces de degradar compuestos altamente txicos. Estas
enzimas son utilizadas en tratamientos en donde los microorganismos no pueden desarrollarse
debido a la alta toxicidad de los contaminantes. Por ejemplo, se emplea la enzima peroxidasa
para iniciar la degradacin de fenoles y aminas aromticas presentes en aguas residuales de
muchas industrias.
3.2. Remediacin microbiana:
En este tipo de remediacin se usan microorganismos directamente en el foco de la
contaminacin. Los microorganismos utilizados en biorremediacin pueden ser los ya existentes
(autctonos) en el sitio contaminado o pueden provenir de otros ecosistemas, en cuyo caso
deben ser agregados o inoculados. La descontaminacin se produce debido a la capacidad
natural que tienen ciertos organismos de transformar molculas orgnicas en sustancias ms
pequeas, que resultan menos txicas. El hombre ha aprendido a aprovechar estos procesos
metablicos de los microorganismos. De esta forma, los microorganismos que pueden degradar
compuestos txicos para el ambiente y convertirlos en compuestos inocuos o menos txicos, se
aprovechan en el proceso de biorremediacin. De esta forma, reducen la polucin de los
sistemas acuticos y terrestres. La gran diversidad de microorganismos existente ofrece
muchos recursos para limpiar el medio ambiente y, en la actualidad, esta rea est siendo
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HIDROCARBUROS
objeto de intensa investigacin. Existen, por ejemplo, bacterias y hongos que pueden degradar
con relativa facilidad petrleo y sus derivados, benceno, tolueno, acetona, pesticidas,
herbicidas, teres, alcoholes simples, entre otros. Los metales pesados como uranio, cadmio y
mercurio no son biodegradables, pero las bacterias pueden concentrarlos de tal manera de
aislarlos para que sean eliminados ms fcilmente. Las actividades microbianas en el proceso
de biorremediacin se pueden resumir en el siguiente esquema:
3.3. Remediacin con plantas (fitorremediacin):

La fitorremediacin es el uso de plantas para limpiar ambientes contaminados. Aunque se
encuentra en desarrollo, constituye una estrategia muy interesante, debido a la capacidad que
tienen algunas especies vegetales de absorber, acumular y/o tolerar altas concentraciones de
contaminantes como metales pesados, compuestos orgnicos y radioactivos. La
fitorremediacin ofrece algunas ventajas y desventajas frente a los otros tipos de
biorremediacin:
Las plantas pueden ser utilizadas como bombas extractoras de bajo costo para depurar
suelos y aguas contaminadas.
Algunos procesos degradativos ocurren en forma ms rpida con plantas que con
microorganismos.
Es un mtodo apropiado para descontaminar superficies grandes o para finalizar la
descontaminacin de reas restringidas en plazos largos.
Limitaciones:
El proceso se limita a la profundidad de penetracin de las races o aguas poco
profundas.
Los tiempos del proceso pueden ser muy prolongados.
La biodisponibilidad de los compuestos o metales es un factor limitante de la captacin.
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HIDROCARBUROS
Las plantas pueden incorporar las sustancias contaminantes mediante distintos procesos que
se representan en la siguiente ilustracin y se explican en la tabla que contina:
FITORREMEDIACIN: Tipos de fitorremediacin, en donde se indica la zona de la planta en

donde ocurre el proceso.
Se conocen alrededor de 400 especies de plantas con capacidad para hiperacumular

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HIDROCARBUROS
selectivamente alguna sustancia. En la mayora de los casos, no se trata de especies raras,

sino de cultivos conocidos. As, el girasol (Heliantus anuus) es capaz de absorber en grandes
cantidades el uranio depositado en el suelo. Los lamos (gnero Populus) absorben
selectivamente nquel, cadmio y zinc. Tambin la pequea planta Arabidopsis thaliana de gran
utilidad para los bilogos es capaz de hiperacumular cobre y zinc. Otras plantas comunes que
se han ensayado con xito como posibles especies fitorremediadoras en el futuro inmediato son
el girasol, la alfalfa, la mostaza, el tomate, la calabaza, el esparto, el sauce y el bamb. Incluso
existen especies vegetales capaces de eliminar la alta salinidad del suelo, gracias a su
capacidad para acumular el cloruro de sodio.
En general, hay plantas que convierten los productos que extraen del suelo a componentes
inocuos, o voltiles. Pero cuando se plantea realizar un esquema de fitorremediacin de un
cuerpo de agua o un rea de tierra contaminados, se siembra la planta con capacidad (natural o
adquirida por ingeniera gentica) de extraer el contaminante particular, y luego del perodo de
tiempo determinado, se cosecha la biomasa y se incinera o se le da otro curso dependiendo del
contaminante. De esta forma, los contaminantes acumulados en las plantas no se transmiten a
travs de las redes alimentarias a otros organismos.
Uso de organismos modificados genticamente en biorremediacin
En los ltimos aos, los avances en ingeniera gentica han permitido el desarrollo de
organismos transgnicos. Y la biorremediacin hace uso de esta nueva tecnologa para resolver
varios problemas de contaminacin. El futuro promete an ms. Muchos grupos de
investigacin estn desarrollando en el laboratorio, plantas y microorganismos genticamente
modificados para ser mejores agentes de biorremediacin, es decir que degraden mejor o ms
eficientemente a los agentes contaminantes.
Por ejemplo, se puede utilizar material gentico de bacterias resistentes a metales para
insertarlo en el genoma de una planta que, entonces, adquirira esta nueva caracterstica. Un
grupo de investigacin utiliz un gen llamado merA, que codifica para la enzima reductasa del
ion mercrico, altamente txico, que cataliza su reduccin hasta la forma voltil y poco txica de
mercurio elemental, gaseoso en condiciones de temperatura no muy elevadas. Estos
investigadores, consiguieron la transferencia del gen bacteriano merA a cultivos de Liriodendro
tulipifera (lamo amarillo). El gen se expres adecuadamente en ese material vegetal, de modo
que las plntulas regeneradas germinaron y crecieron vigorosamente en los medios de cultivo,
que contenan niveles de iones mercurio que son normalmente txicos, siendo capaces de
captarlo en su forma inica y de reducirlo en el interior de la planta, tras lo cual era liberado en
la forma gaseosa no txica.
Esta investigacin ha abierto el camino para que en el futuro sea posible realizar plantaciones
arbreas transgnicas que, mediante este proceso de fitovolatilizacin u otros parecidos, sean
capaces de descontaminar terrenos con altos niveles de contaminantes. Se estn
perfeccionando nuevos mtodos de biotecnologa para el tratamiento del agua, que eliminarn
los compuestos que contengan fsforo, nitrgeno y azufre. Este bioprocesamiento se est
extendiendo a varios procesos industriales, entre ellos los de las industrias petroqumicas,
qumicas y mineras, con el
uso de bacterias oxidantes.
La biorremediacin mediante bacterias ofrece grandes posibilidades de limpiar y descontaminar
sistemas complejos y gracias a sus ventajas econmicas y ambientales ser una de las
tecnologas ms desarrolladas durante este siglo. Se estn utilizando cepas especializadas de
microorganismos de alta actividad para tratar agentes contaminantes en diferentes sectores,
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HIDROCARBUROS
como las industrias que utilizan catalizadores, las textiles, las curtiembres, el procesamiento de
celulosa y almidn, la galvanoplastia, la minera, el desengrasado y recubrimiento de superficies
y la impresin.
Nuevos desarrollos biotecnolgicos en plantas y bacterias
Entre los desarrollos biotecnolgicos que se estn llevando a cabo para procesos de
fitorremediacin se encuentran los siguientes:
Rizofiltracin para la extraccin de Uranio de aguas subterrneas en Asthabula, Ohio,
EEUU.
Rizofiltracin a nivel de cultivo in vitro para detoxificar compuestos fenlicos en aguas
contaminadas (por ejemplo los derivados de los herbicidas tradicionales y contaminantes
como el 2,4-D) en la Universidad Nacional de Ro Cuarto, Crdoba por el grupo de
investigacin de la Dra. Elizabeth Agostini.
Fitovolatilizacin de mercurio (Hg) por medio de plantas transgnicas (Arabidopsis
thaliana) que fueron transformadas con dos genes provenientes de microorganismos
que pueden transformar el mercurio inico en mercurio ms estable.
Plantas transgnicas de tabaco con genes provenientes de bacterias que le permiten
detoxificar TNT y GTN en suelos de campos minados.
Plantas transgnicas de Arabidopsis thaliana que toleran la acumulacin de cadmio,
arsnico y mercurio.
Bacterias Pseudomonas transgnicas que son capaces de degradar compuestos txicos
que contienen cloro en compuestos menos nocivos.
Microorganismos capaces de degradar TNT, un explosivo de gran potencia y muy
agresivo para el entorno.
Bacterias capaces de reducir las formas altamente txicas de mercurio en otras menos
txicos y voltiles.
Bacterias que transforman metales del suelo en formas menos txicas o insolubles. Por
ejemplo: la reduccin de cromo (Cr+6 a Cr+3).
La utilizacin de la bacteria Deinococcus radiodurans para eliminacin de elementos
radiactivos presentes en el suelo y aguas subterrneas. Este microorganismo es un
extremfilo que resiste condiciones extremas de radiacin, sequedad, agentes oxidantes
y diversos compuestos mutagnicos.
Cianobacterias a las que se le han introducido genes de bacterias Pseudomonas con
capacidad de degradar diferentes hidrocarburos o pesticidas
(biotecnologia)
4. BIORREMEDIACION CON PSEUDOMONAS.

La biorremediacin del suelo, puede ser dividida en estrategias in situ y ex situ. In situ
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HIDROCARBUROS
corresponde a la biorremediacin referente a tratamientos que no requieren excavacin del

suelo contaminado; ex situ es un mtodo donde se excava el suelo o el material a tratar y se le
maneja en un sistema controlado como una celda de landfarming o algn tipo de biorreactor
(11-13).
Las tcnicas de biorremediacin in situ presentan una mayor ventaja sobre las ex situ por el
menor costo y la disminucin de la generacin de residuos a eliminar en la superficie (14). La
biorremediacin in situ es la ms aplicada y utiliza microorganismos autctonos, estos en el
suelo pueden degradar un gran nmero de constituyentes de lodo pero su eficacia y su
poblacin son afectados cuando algunos contaminantes txicos estn presentes en altas
concentraciones. La reintroduccin de microorganismos aislados de un sitio contaminado
ayuda a resolver este problema ya que los microorganismos pueden degradar los constituyentes y tiene una gran
Los mtodos, ms empleados en biorremediacin son:
(i) Biofiltracin, en esta entra el aire contaminado a unos biorreactores en los cuales la flora
microbiana degrada los contaminantes voltiles en dixido de carbono, agua y biomasa, (ii)
Bioventing, el cul es un proceso de biorremediacion in situ que consiste en la ventilacin
forzada del suelo mediante la inyeccin de O2 en la zona no saturada mediante pozos
de inyeccin; debido a la aireacin se va a favorecer la degradacin de los hidrocarburos por
volatilizacin y migracin de la fase ms voltil del contaminante, y por biodegradacin, ya que
al incrementar la oxigenacin del suelo se va a estimular la actividad microbiana, (iii) el
Biosparging es un mtodo in situ que combina el efecto de la ventilacin con la utilizacin de los
microorganismos autctonos para degradar compuestos orgnicos absorbidos por el suelo en la
zona saturada. En este el aire y los nutrientes se inyectan en la zona saturada para mejorar la
actividad de los microorganismos presentes.
Est tcnica se utiliza para la degradacin de compuestos orgnicos en el suelo y aguas
subterrneas. (iv) las biopilas , son un tipo de biorremediacin de tipo ex situ en
condiciones no saturadas, consiste en la reduccin de la concentracin de contaminantes
derivados del petrleo de suelos excavados mediante el uso de la biodegradacin. La tcnica
consiste en la formacin de pilas de material biodegradable de dimensiones variables formadas
por suelos contaminados y materia orgnica, compost, en esta se aplica una aireacin activa
volteando la pila o pasiva por tubos de aireacin. Este principio se puede aplicar a la mayora
de los compuestos orgnicos siendo ms eficaz en los ligeros (16-21).
Entre los factores que influyen en la aplicacin de esta tcnica se destacan: los
hidrocarburos deben ser no halogenados con concentraciones en suelo meno- res a
50.000ppm, superficie de trabajo relativamente grandes, necesidad de una poblacin
microbiana mayor a 1000UFC (Unidades Formadoras de Colonias) por gramo de suelo.
(v) la atenuacin natural, es una tcnica de biorremediacin in situ de bajo costo, su
caracterstica principal es la utilizacin de los procesos fsico- qumicos de interaccin
contaminante suelo y los proceso de biodegradacin tienen lugar de forma natural. estos
procesos se conocen como procesos de biotransformacin natural, que van a reducir la concentracin de los contaminates. Entre ellos se encuentra la dilucin, la dispersin,
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HIDROCARBUROS
volatilizacin, adsorcin, biodegradacin y la reacciones qumicas que se producen en el

suelo.
Microorganismos degradadores de petrleo
En Long Beach (California), aplicaron la biorremediacin in situ en suelos contaminado con
aceite diesel mediante el uso de microorganismos autctonos complementada con la adicin
de nutrientes y oxigeno en el suelo bioestimulacin (23), e inoculacin de una mezcla
enriquecida de consorcios bacterianos previamente extrada del mismo suelo
bioaumentacin. Esto permiti encontrar consorcios bacterianos degradadores de
hidrocarburos identifi- cados por secuenciacin de genes 16S-RNA, demos- trando la
presencia de Bacillus cereus, Bacillus sphaericus, Bacillus fusiformis, Bacillus pumilis,
Acinetobacter junii, y Pseudomonas sp (24).
El estudio hecho sobre la adaptacin y seleccin de microorganismos autctonos en medios
de cultivo enriquecidos con petrleo crudo realizado por Maria del Carmen Rivera-Cruz 2002
indic que los microorganismos con crecimiento abundante aislados de suelos receptores de
derrames recientes y crni- cos de petrleo crudo y otros no contaminados, son considerados
degradadores de petrleo (25).
Los microorganismos aislados en suelos poseen actividades de peroxidasas y oxigenasas,
que permiten la oxidacin de algunas fracciones del petrleo (26). Esta oxidacin cambia las
propiedades de los compuestos haciendolos susceptibles a ataques se- cundarios y facilitando
su conversin a bioxido de carbono y agua (27, 28).
Uno de los gneros bacterianos ms explotados en bioprocesos no convencionales es
Rhodococcus, un grupo nico consistente en microorganismos que presentan una gran
diversidad metablica, capaz de transformar, biodegradar y utilizar como nica fuente de
carbono compuestos hidrfobos (29).
Los Rhodococcus son aerbios, Gram positivos, inmviles, Nocardiformes, Actinomicetos, que
en algunas ocasiones presentan pequeas proyecciones filamentosas. Las caractersticas
bioqumicas encon- tradas en algunas cepas son la produccin de poli-3- hidroxialcanoatos,
acumulacin de metales pesados y enzimas tiles como la fenilalanina, deshidrogenasa y
endoglucosidasas.
El Rhododoccus poseen una gran variedad de vas metablicas para la degradacin y
modificacin de compuestos aromticos, incluyendo las actividades de di-oxigenasa y monooxigenasa sobre anillos, as como la actividad de ruptura de catecol. Algunas cepas presentan
tambin la va del 3-oxoadipato. Lo anterior sumado a su capacidad de crecimiento en medios
con escasos nutrientes, la carencia de un sistema de re- presin catablica y su persistencia
ambiental las ha- cen excelentes candidatas para los tratamientos de biorremediacin (29).
El Rhodococcus sp. utiliza el dibenzotiofeno (DBT) como nica fuente de azufre, el DBT y sus
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HIDROCARBUROS
derivados son los rganoazufrados ms abundantes en el diesel primario. En Mxico,

investigadores del Instituto Mexi- cano del Petrleo han aislado cepas de Rhodococcus de
sitios contaminados con petrleo capaces de desulfurar muestras de diesel. Otros
microorganismos reportados como capaces de utilizar el DBT como fuente de azufre son las
cepas de Gordona y Nocardia sp. Dentro de las aplicaciones industriales y ambientales, se
incluye la produccin de cido acrlico y acrilamida, conversin de esteroides, biorremediacion
de hidrocarburos clorados y fenoles, a lo que se aade su gran capacidad de degradar
hidrocarburos alifaticos halogenados y numerosos compuestos aromaticos, como los PHAs
(hidrocarburos policiclicos aromticos) (30), evidenciandose que tanto R. rhodochorus como R.
erythropolis demostraron ser una excepcin, pues la degradacin de naftaleno por parte de
estos no es signi- ficativa, debido a que la actividad degradadora de PAHs por parte de estos
microorganismos, se ve regulada por las proteobacterias del medio afectado (31-33).
Otras aplicaciones potenciales son la produccin de biosurfactantes emulsificantes naturales
de hidrocarburos, los cuales son producidos por algunos hongos o bacterias y el anlisis de
su metabolismo permite obtener biomolculas a escala comercial y la biodesulfuracin de
combustibles, la deshalogenacin de emisiones gaseosas y l a construccin de
biosensores (34).
Nuevas especies de Rhodococcus que presentan una nueva mutacin tienen la capacidad de
degradar compuestos alifticos con enlaces dobles principalmente en el noveno carbono del
grupo metilo termi- nal (alquenos). Las bacterias del gnero Pseudomonas poseen la habilidad
para utilizar diversos substratos, incluyendo aquellos creados por el petrleo. Las
Pseudomonas son bacterias Gram ne- gativas, obicuas, que pertenecen a la subclase gamma
de las Proteobacterias.
Las Pseudomonas son bacterias productoras de biosurfactantes como los ramnolipidos
involucrados en procesos de remocin de aceites y productos relacionados, Bushnell y Hass
fueron de los primeros en describir bacterias productoras de biosurfactantes, como el
Corynebacterium simplex y cepas de Pseudomonas (29,35).
Algunos microorganismos productores de biosurfactantes extracelulares que solubilizan y facilitan la penetracin de los hidrocarburos a travs de la pared celular hidroflica; contienen
adems enzimas degradadoras de hidrocarburos en la membrana citoplasmtica. La
Pseudomonas aeruginosa, es otro de los microorganismos ms usado y estudiado en
biorremediacin y presenta una serie de actividades naturales sobre xenobiticos.
Lamentablemente, tambin es conocida por ser un patgeno oportunista en humanos y
causante de complicaciones graves en per- sonas inmunosuprimidas, con quemaduras severas
o con fibrosis qustica. Por estas razones existe mucho inters en el estudio de las relaciones
filogenticas entre serotipos clnicos y ambientales (36).
Estudios con relacin al desempeo metablico de la Pseudomonas aeruginosa ha
permitido identificarla como degradadota de gran cantidad de sustratos como el n-hexadecano,
mineralizacin de compuestos alifticos en condiciones anaerobias, y degradadora de
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HIDROCARBUROS
hidrocarburos aromticos y poli aromticos, as como del pireno en estudios in vitro La P.

aeruginosa tiene la capacidad de sintetizar ramnolipidos cuando se encuentra en la fase
estacionaria de su crecimiento, por tal razn esto slo se puede realizar en la primera fase del
proceso de biorremediacion y contribuyendo as con la moviliza- cin y solubilizacin de los
contaminantes durante la fase siguiente de mineralizacin. Al mismo tiempo que pueden
tranformarse bajo microcosmos en el suelo con un tratamiento fsico o qumico especifico, caracterstica que comparte con el Agrobacterium tumefasciens (39).
La Pseudomona putida es un saprofito del suelo , oportunista, cosmopolita,
metablicamente verstil, por poseer una dioxigenasa inicial, una tolueno dioxigenasa, aunque
no presenta la dioxigenasa es- pecfica para los PAHs por lo cul es una buena candidata para
las aplicaciones biotecnolgicas, tales como agricultura, biocatlisis, biorremediacin,
biocontrol en proteccin de las plantas y produccin de bioplsticos (14).
La P. putida posee la capacidad de colonizar la rizosfera de plantas de cosecha y una gran
capacidad metablica que facilita el desarrollo de biopesticidas y promotores de crecimiento de
la planta. La degradacin de los alcanos por Pseudomona putida se ha estudiado por
secuenciacin en el plasmido OCT que codifica una enzima dioxigenasa que convierte alcanos
a aldehdos a travs del hidroperoxidasa del n-alkyl sin un intermediario del alcohol, conocido
como la va de Finnerty; un proceso similar lo presentan los gneros Acinetobacter sp y
Nocardiodes sp. aunque ellos no poseen este plasmido.
La Pseudomonas fluorescens es degradadora de naftaleno y fenantreno, ventaja que tiene
frente a las otras Pseudomonas, que solo metabolizan naftaleno y asfaltenos (36).
Estudios realizados demuestran que Flavobacterium y Pseudomonas son los
microorganismos ms aislados en la fase de degradacin de los TPH (Hidrocarburos Totales).
La Pseudomonas stutzeri es una degradadora de PHAs (33).
Burkholderia es otro gnero bacteriano utilizado para biorremediacin de herbicidas y
pesticidas recalcitrantes y tambin es usado para proteger cultivos contra hongos. Debido a
su genoma extremadamente flexible, Burkholderia cepacia, bacilo Gram negativo no
fermentador, productora de pigmento amarillo tiene una gran capacidad mutagenica y
adaptativa, ha sido recuperada a partir de agua y superficies hmedas, es resistente a
mltiples antibiticos y sta capacidad es altamente transmisi- ble entre especies. Por todas
estas razones, la seleccin de cepas seguras para su uso ambiental no es posible por el
momento y su uso en la agricultura tambin debe ser cauteloso. Aunque es una excelente
degradadora de los hidrocarburos aromticos (34,40) El Acinetobacter sp es un bacilo Gram
negativo,
es productor de cido a partir de la glucosa, se desarrolla a 41 y 44C, produce a-xilosa y
utiliza el malato. Dentro de las especies de importancia ambiental se destacan, A. baumanii,
Acinetobacter calcoaceticus carente de cido metlico. Las cepas de Acinetobacter baumanii
son eficientes en la degradacin de fracciones de alcanos (41).
Los productos de petrleo ampliamente usados como gasolina, keroseno y Diesel son
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HIDROCARBUROS
contaminantes comunes del ambiente, se ha observado que la biodegradacin de gasolina por

microflora de suelo y agua de sitios contaminados es eficiente; compuestos como el benceno,
tolueno, etilbenceno, y n-alcanos son realmente biodegradables. Se aisl una cepa con una
alta capacidad de degradar dichos compuestos identi- ficada como Mycobacterium
austroafricanum (42).
Se selecciono una cepa en un acufero contaminado con gasolina, la cul tiene la capacidad
de utilizar el isoctano (2,2,4-trimetilpentano) como nica fuente de carbono y energa. El
microorganismo aislado fue identificado por medio de la secuenciacin del 16S ribosomal. Se
identifico una cepa perteneciente a Mycobacterium austroafricanum(42); y otra cepa como
Mycobacterium sp. Esta de manera inusual utilizo como fuente de carbono y sustrato de
crecimiento n-alcanos y multimetil, donde degrado el metil t-butil eter, y grupos 3-metil,
posiblemente por mecanismos de carboxilacin y deacetilacin; logrando finalmente la
degradacin del
86% de los sustratos contenidos en este sitio contaminado con gasolina (43).
La degradacin de gasolina por microflora de suelo
y agua en sitios contaminados, es realmente eficiente, se puede alcanzar un nivel de
biodegradacin hasta del
90%. La limitacin de esta microflora aparentemente se presenta a nivel de la degradacin de
compuestos como el ciclohexano y trimetilpentano, los cuales se presentan como compuestos
recalcitrantes (44).
La microflora degradadora de ciclohexano e isoctano es seleccionada directamente de las
muestras tomadas del ambiente. La cepa que utiliza el ciclohexano como nica fuente de
carbono no se ha logrado aislar pura, debido a los fenmenos de metabolismo y
cometabolismo involucrados en la degradacin de este compuesto.
En cuanto a la capacidad de degradacin del isoctano, resulta ser complicada en las
muestras naturales, solo se ha aislado el Mycobacterium austroafricanum con esta
capacidad, as como tambin se ha encontrado que esta cepa se caracteriza por el uso de
ciclohexano como un cosustrato, pues su habilidad radica en el uso de isoctano como nica
fuente de carbono (42).
Otro gnero estudiado dentro de las tcnicas de biorremediacion es Sphingomonas , bacilos
no fermentadores y dentro de estos la Sphingomona wittichi es un microorganismo capaz de
degradar en condiciones anaerobias el 2.7diclorobenceno, produ- ciendo el metabolito 4
clorocatenol y el 1,2,3,4 tetraclorodibenceno, y cepas como Sphingomonas yanoikuyae, y
Sphingomonas paucimobilis como degradadoras de PAHs utilizandolos como unica fuente de
energa, tienen actividad Catecol 2,3- dioxigenasa, fenantreno y antraceno.
Se han aislado cepas capaces de metabolizar naftaleno y fenatreno como nica fuente de
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HIDROCARBUROS
carbono, estas fueron taxonmicamente implicadas en diferentes subclases de las

Proteobacterias (Sphingomonas sp, Acidovorax sp, Comamonas sp, y Pseudomonas sp), y a
bacterias Gram positivas con bajo y alto contenido de DNA G+C ( Paenibacillus sp y
Rhodococcus sp, respectivamente) (45).
Alcalgenes, Micobacterium y Bacteroides han sido reportados como degradadores de
hidrocarburos de petrleo, y estos filotipos son candidatos para el tratamiento de terrenos
contaminados con TPH. Sin embargo su poca abundancia se convierte en una desventaja para
su aplicacin (46).
La degradacin del bifenil policlorinato PCBs y otros hidrocarburos por microorganismos como
Comamonas acidovorans, Acinetobacter calcoaceticus, Achromobacter sp. Pseudomonas sp.
Flavobacterium devorans, Bacillus lentus, Bacillus mascerans y Bacillus thuringensis ha sido
aplicada con buenos resultados para el tratamiento de los mismos (47,48).
Se ha referenciado que las Comamonas son degradadoras de fenaltreno, Gordona sp.
degrada el Pireno, d e 5 a 35 das luego de ser inoculada. Azoarcus spp. puede degradar
benceno, tolueno, etilbenzeno y xileno (31,32).
En el estudio hecho por Christopher W. Kaplan y Christopher L. Kitts en cuanto al
dinamismo de las comunidades bacterianas en relacin con la concentracin de petrleo en
el suelo, la importancia de las comunidades microbianas radica en su maquinaria celular como
responsable de la bioconversin de estos contaminantes (43).
Los microorganismos que conforman el consorcio microbiano extremo haltolerante para la
biodegradacin de crudos es altamente empleados en medios con gran cantidad de salinidad y
contaminados con benceno.
Las poblaciones microbianas usadas para degradar hidrocarburos recalcitrantes (aromticos),
son menos eficientes, debido a que producen sustancias txicas que pueden inhibir los
microorganismos degradadores de aceite diesel.
La persistencia de los PAHs en el ambiente se deben a factores como los nutrientes, la
viabilidad, la temperatura, el oxigeno y la presencia de microorganismo degradadores y el
mayor problema para la degradacin de esto es la baja solubilidad en agua para poder
implementar un sistema aerbico, por esto la degradacin anaerbica a bajas temperaturas
ha sido estudia- da como posible causa de una baja degradacin donde encontraron que las
bajas temperaturas no afectan la poblacin microbiana sino que la disponibilidad de oxigeno,
siendo este el agente ms limitante y que con- duca a formacin metabolitos txicos que
inhiban el crecimiento bacteriano (34, 44, 49, 50).
(Mesa)
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HIDROCARBUROS
5. Factores biticos y abiticos que condicionan la

biorremediacin por Pseudomonas en suelos contaminados
por hidrocarburos
En los ambientes contaminados existen en abundancia especies con estas capacidades
metablicas especficas, debido a la adaptacin de la microflora presente en el contaminante
(8). Las Pseudomonas spp son una opcin muy viable., ya que son microorganismos capaces
de utilizar estos hidrocarburos como fuente de carbono y energa (9) necesaria para su
crecimiento, generando productos ms sencillos. Para que estos procesos metablicos se
lleven a cabo y puedan ser utilizados como una tcnica de biorremediacin, es necesario
conocer las condiciones fsicas qumicas y de nutricin adecuadas del medio (10, 11,12).
En cuanto a las condiciones fsicas y qumicas, existen varios factores que condicionan la
biorremediacin de un suelo; entre las fsicas se encuentran factores ambientales como el pH
(2), la temperatura (3), concentracin de minerales, humedad del suelo, respiracin y nutrientes
disponibles. Entre las qumicas encontramos la estructura molecular del contaminante, su
concentracin y la presencia de una poblacin microbiana potencialmente
activa (13)
FACTORES BIOTICOS
Suelo
El suelo est formado por una cubierta superficial llamada corteza terrestre o litosfera,
que es la capa ms delgada de las que forman la tierra y constituye un conjunto complejo de
elementos fsicos, qumicos y biolgicos. Uno de esos componentes son los minerales, que
se forman por la meteorizacin de las rocas, de materia orgnica, como el humus y la
biomasa viva y muerta, de gas y de agua. Todos ellos desempean funciones naturales
como la descomposicin de productos vegetales o la biodegradacin de ciertos
componentes que lo contaminan por medio de procesos metablicos que llevan a cabo los
microorganismos (14, 15, 16).
La estructura del suelo se encuentra dividida en tres tipos de capas a las que se les llama
horizontes y su diferenciacin se debe tanto a la dinmica interna, ya sea por su
composicin y textura, como al transporte vertical debido a la lixiviacin o la capilaridad. El
horizonte A es el ms superficial, en el cual abunda materia orgnica descompuesta o
humus, el contacto de este con las bacterias facilita la degradacin de hidrocarburos como
el fenantreno (17). Esta zona se puede ver alterada por incendios, explotacin de minas y
contaminacin por componentes que no se degradan. El horizonte B, tambin llamado
subsuelo, es el ms grande, se compone de materiales provenientes de fragmentos de
rocas como la arena gruesa y liviana, que cumple funciones de filtracin; el limo, el cual
mantiene la homeostasis y la arcilla, que retiene el agua. El horizonte C est compuesto de
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HIDROCARBUROS
material rocoso que no ha sufrido ninguna alteracin qumica o fsica (15).

Los contaminantes del petrleo se alojan principalmente en el horizonte A, donde se encuentra
el mayor contenido de materia orgnica que incluye a los microorganismos (18,19) que pueden
ser estimulados por la adicin de nutrientes, ya sean fertilizantes (20), o de Oxgeno por medio
de la agitacin. Existen otros tipos de contaminantes como los hidrofbicos (21) que se
absorben y se depositan en los poros del suelo, dificultando la biodegradacin (3).
Los suelos expuestos a la contaminacin prolongada con hidrocarburos derivados del petrleo,
constituye un microhbitat adecuado para la evolucin de especies bacterianas degradadotas.
El contaminante ejerce una presin sobre la poblacin microbiana involucrada y de esta forma
se seleccionan aquellos capaces de sobrevivir y adaptarse a estas condiciones (22-25).
capacidad metablica del microorganismo
En el proceso de biorremediacin la degradacin efectuada por la Pseudomonas spp, se debe
tener en cuenta que al ser parte de una poblacin nativa, est interactuando con otros
microorganismos formando los llamados consorcios microbianos. En este se establecen
procesos simbiticos (26, 27, 28) como el de Arthrobacter y Pseudomonas spp para la
degradacin del fluoreno, sin la acumulacin de 9-fluorenona, metabolito de oxidacin
intermedia (29), o de comensalismo con un cultivo mixto de Rhodococcus erythopolis, Bacillus
cereus y Pseudomonas fluorescens para biodegradar hidrocarburos poliaromticos. Esta
interrelacin, que se fundamenta en que el cultivo mixto, crece a expensas de los
contaminantes, mientras que P. aeruginosa GL1 degrada los metabolitos por la ruptura en la
posicin meta, estabilizando la poblacin microbiana en el cultivo (30). Relaciones y condiciones
naturales que han sido muy difciles de recrear en el laboratorio.
Con referencia a la biomasa, se debe tener en cuenta la cintica de crecimiento del
microorganismo obteniendo mayor rendimiento metablico en la fase exponencial, debido a que
el aumento de esta es un indicador del proceso de biorremediacin. (3, 24,31). Se ha logrado
estimar que la cantidad suficiente de microorganismos para efectuar en buenas condiciones un
proceso de biodegradacin es de 103 a 104 UFC/g suelo y de hetertrofos totales de 105 a 106
UFC/g de suelo (32), capaces de metabolizar y mineralizar el contaminante a CO2 y H2O
(33,34), compuestos que permiten efectuar el reciclaje en el medio ambiente al ser fcilmente
incorporados en los ciclos biogeoqumicos.
La conformacin gentica de Pseudomonas es muy verstil; por posee r operones, elementos
mviles como transposones y plsmidos (35), que permiten la transferencia de los genes (31,
27) y, por lo tanto, la rpida adaptacin frente a la presencia de agentes contaminantes nuevos
en un ecosistema en particular (27,36). Adems, poseen genes que codifican para enzimas, con
las que se lleva a cabo la mineralizacin del contaminante (2,19). Se ha estudiado la produccin
en la fase estacionaria de biosurfactantes o tensoactivos por parte de la Pseudomonas
aeruginosa cuyo papel en la biorremediacin es de solubilizar los compuestos hidrofbicos
(37-40).
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HIDROCARBUROS
En los derrames de petrleo la mayora de compuestos alifticos se pierden por volatilizacin,

mientras que los hidrocarburos policclicos permanecen, generando un gran impacto en virtud
de los efectos recalcitrantes y txicos parar los seres vivos (41). Los hidrocarburos p o l i a r o
m t i c o s ( H A Ps ) m s e s t u d i a d o s s o n l o s monoaromticos BTEX, el
diaromtico naftaleno y los triaromticos fenantreno, antraceno y fluoreno (42), que generan un
impacto negativo a los ecosistemas y afecta la salud de los seres vivos (43).
El proceso de biorremediacin se inicia con la oxidacin del anillo aromtico mediante la
incorporacin de dos tomos de oxgeno catalizado por una dioxigenasa (44). A partir de esta
reaccin se forma un cis-dihidrodiol y el anillo pierde la aromaticidad. A continuacin una
deshidrogenasa NAD+ dependiente, reconstituye el anillo aromtico formando un catecol (diol).
Los dioles son molculas a partir de las cuales se produce la ruptura del anillo aromtico
mediante dioxigenasas estereoselectivas (la ruptura se da entre los dos grupos hidroxilo
adyacente, denominndose meta-ruptura) (45-47).
Sin embargo, este proceso puede ser limitado por la estructura qumica del contaminante, ya
que al incrementar la cantidad de enlaces y grupos funcionales (26,48) o al polimeralizarse
resulta ms difcil la incorporacin al metabolismo bacteriano, especialmente cuando presentan
grupos halgenos (49) y metales pesados, catalogados como txicos para los microorganismos
(3,50).
Nutrientes
Los nutrientes son uno de los factores ms relevantes por ser sustancias qumicas necesarias
para la actividad microbiana y metablica de la Pseudomonas spp, por lo que estos
constituyentes se deben encontrar disponibles para su asimilacin y sntesis, y deben ser
controlados para aumentar la eficiencia y el buen desarrollo de la biorremediacin. Se dividen en
dos grandes grupos: macronutrientes y micronutrientes (14,51).
Los macronutrientes de mayor importancia metablica se encuentran; el carbono (C) en este
caso los hidrocarburos como contaminantes proporcionan la energa necesaria para la
fabricacin de compuestos celulares y productos metablicos (dixido de carbono, agua,
enzimas) (6); el Nitrgeno (N), elemento necesario para la produccin de aminocidos,
protenas, enzimas, cidos nucleicos y otros constituyentes celulares. En ocasiones la utilizacin
de estos nutrientes es rpida, los suelos no alcanzan a cubrir todas las necesidades, siendo un
factor limitante para la degradacin microbiana, por lo cual se incorpora fertilizantes de uso
agrcola como urea o sulfato de amonio y de origen orgnico como estircol, para acelerar el
proceso de biorremediacin (52,53).
El fsforo (P) que interviene en la formacin de compuestos energticos dentro de las clulas y
es requerido para la sntesis de cidos nucleicos y fosfolpidos en los procesos de
reproduccin y degradacin, puede ser adicionado al suelo como fosfato diamnico o fosfato
triclcico. El Potasio (K) requerido por una gran cantidad de enzimas para catalizar diferentes
reacciones (10)
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HIDROCARBUROS
Por lo general suele haber en el suelo una concentracin de macronutrientes suficiente, sin
embargo, s estos no se encuentran en el rango normal se puede adicionar mayor cantidad al
medio.
La fuente de micronutrientes, oligoelementos o elementos minoritarios constituye un conjunto
variado de elementos entre los que se encuentra el hierro (Fe), cobre (Cu), zinc (Zn), azufre
(S), cobalto (Co), manganeso (Mn), magnesio (Mg) y calcio (Ca), normalmente no se
incorporan en el proceso de biorremediacin, puesto que el suelo provee estos elementos en
cantidades suficientes (55, 56).
Respiracin y aireacin
La biorremediacin es fundamentalmente un proceso metablico de transferencia de
electrones. La energa necesaria para el crecimiento microbiano se obtiene durante el proceso
de oxidacin de materiales reducidos, donde las enzimas microbianas catalizan la transferencia
de los electrones (57). Este proceso se denomina respiracin microbiana, y se basa en que
en la cadena respiratoria, o transportadora de electrones de las clulas, producen una serie de
reacciones de xido-reduccin cuyo fin es la obtencin de energa. La cadena la inicia un
sustrato orgnico (compuestos hidrocarburados) que es externo a la clula y acta como dador
de electrones, de modo que la actividad metablica de la clula acaba degradando y
consumiendo dicha sustancia. Los aceptores ms utilizados por los microorganismos en
general y particularmente por las Pseudomonas spp, son el oxgeno y los nitratos (14,57, 58).
Cuando el oxgeno es utilizado como aceptor de electrones la respiracin microbiana se
produce en condiciones aerobias, los microorganismos convierten en ltima instancia los
contaminantes en dixido de carbono, agua y masa celular microbiana de las Pseudomonas
(mineralizacin) por enzimas oxigenasas (3). Sin embargo, s utiliza los sulfatos o el dixido de
carbono, se produce en condiciones reductoras o anaerobias (14,33,34,59).
El proceso de biorremediacin aerobia y anaerobia puede esquematizarse de la siguiente
manera (10):
Degradacin aerobia:
Sustrato + O2 = biomasa + CO2 + H2O
El oxgeno generalmente es el mejor aceptor de electrones, es decir, el que produce la mayor
energa libre en una reaccin completa. En consecuencia, para un mismo substrato orgnico,
los microorganismos que emplean el oxgeno como agente oxidante pueden generar mayor
energa que aquellos que emplean nitratos, sulfatos otros aceptores de electrones alternativos
logrando de esta forma crecer a mayor velocidad, lo que implica un mayor consumo del
sustrato. Por lo tanto la biorremediacin aerobia es tpicamente ms eficiente que la
biorremediacin de contaminantes orgnicos en forma anaerobia (60).
Para cuantificar el proceso se utiliza la medicin del CO2
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producido por unidad de tiempo en
HIDROCARBUROS
un rea determinada. Esta es una medida indirecta del proceso biodegradativo, cuyo objetivo es
evaluar a travs de mtodos como el de respirometra, la actividad metablica de los
microorganismos del suelo durante el proceso de degradacin de los compuestos orgnicos (14,
61,62).
El flujo de oxgeno es vital para la viabilidad del microorganismo. Se estimula drenando y/
volteando el suelo no saturado, para incorporar el oxgeno atmosfrico en el sistema (63). Entre
otras tcnicas encontramos la biorrecuperacin, que consiste en la ventilacin forzada, mediante
la inyeccin a presin de oxgeno en la zona no saturada del suelo (63,64).
Debido a la aireacin del suelo se favorece la degradacin de los hidrocarburos por dos
motivos: por volatilizacin, facilitando la migracin de la fase voltil de los contaminantes, y por
biodegradacin, ya que al incrementar la oxigenacin del suelo se va a estimular la actividad
bacteriana (10).
Factores abiticos
pH
El pH es un factor qumico importante que influye en la recuperacin de suelos contaminados
por hidrocarburos, ya que puede afectar principalmente a las poblaciones de Pseudomonas y la
biodisponibilidad de las fuentes de carbono y energa. Este factor se constituye como uno de los
indicadores del proceso de biorremediacin y aunque las Pseudomonas se pueden adaptar
fcilmente a condiciones extremas, estas cepas microbianas tienen un determinado rango de
tolerancia (50,65).
A pH extremadamente alcalinos o extremadamente cidos la biodegradacin se hace lenta
(66). Generalmente los suelos contaminados por hidrocarburos tienden a ser cidos, lo cual
limita el crecimiento y la actividad de las Pseudomonas El rango ptimo para la biodegradacin
est entre 68 pH (33). Sin embargo, para mantener una mejor capacidad degradante, por
periodos de tiempo prolongados, el pH debe ser neutro, entre 7.47.8, evitando al mximo las
fluctuaciones (3,50).
Es necesario tener en cuenta que la variacin del pH, adems de afectar la actividad
microbiana, tambin afecta la solubilizacin, adsorcin y absorcin de los contaminantes y de
los iones (67).
Humedad y temperatura
Las Pseudomonas spp son bacterias que requieren unas condiciones mnimas de humedad
para su crecimiento; el agua es importante para su desarrollo porque acta como medio de
transporte de nutrientes y oxgeno a la clula ya que forma parte de su protoplasma bacteriano.
Es conveniente mantener una humedad del orden del 25 - 75 % de la capacidad de campo, la
cual se define como la masa de agua que admite el suelo hasta la saturacin, que depende de
cada tipo de suelo
Pgina 23
HIDROCARBUROS
BIBLIOGRAFIA.
Bibliografa
Ambiental, V. M. (2014). Guia para la elaboracion de planes de descontaminacion de suelos.
Biorremediacion: Una estrategia para eliminar contaminantes respetuosa con el medio ambiente. (2006). Obtenido
de https://oldearth.wordpress.com/microbios-en-accion/biorremediacion-i-una-estrategia-para-eliminarcontaminantes-respetuosa-con-el-medio-ambiente/
biotecnologia, E. c. (s.f.). Biorremediacion: Organismos que limpian el ambiente.
Mesa, J. B. (s.f.). Biorremediacion de suelos contaminados con hidrocarburos derivados del petroleo.
http://www.unicolmayor.edu.co/invest_nova/NOVA_12/NOVA9_ART8_PSEUDO.pdf
Pgina 24

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTN

Facultad de Ingeniera de Procesos

Mamani Salas Diana Noelia

1. BIORREMEDIACION DE CRUCOS CON ECAS.

1.1.1. ESTRATEGIA PARA EL ESTUDIO DE CARACTERIZACIN

para el aislamiento o contencin de los contaminantes, atenuacin natural monitoreada etc.).

Anlisis de sostenibilidad de alternativas

De ser el caso: Resultados de ensayos de laboratorio y/o ensayo piloto

Anlisis de costo/efectividad (opcional).

Seleccionada una alternativa de remediacin, para su ejecucin se requiere de, una

Plan de control y de monitoreo en la ejecucin

Plan de muestreo de comprobacin

Cronograma de ejecucin de actividades

Propuestas de medidas de seguimiento

En la elaboracin de las propuestas de acciones de remediacin, se debe considerar entre

Cuando las acciones de remediacin se lleven a cabo en el sitio de la contaminacin, se

Cuando en las acciones de remediacin se empleen mtodos o tcnicas que liberen

Los polvos y gases que se emitan como resultado de tratamientos trmicos en la

La adicin de microorganismos al suelo se realizar, nicamente, cuando se haya

2.2. Organismos que participan.

2.3. Qu tipos de contaminantes se pueden eliminar por biorremediacin?

Figura: Ejemplo del empleo de bacterias para la eliminacin de un contaminante en capas

2.4. Qu utilidad tienen los microorganismos usados en biorremediacin?

3.1. Degradacin enzimtica:

3.3. Remediacin con plantas (fitorremediacin):

FITORREMEDIACIN: Tipos de fitorremediacin, en donde se indica la zona de la planta en

Se conocen alrededor de 400 especies de plantas con capacidad para hiperacumular

selectivamente alguna sustancia. En la mayora de los casos, no se trata de especies raras,

4. BIORREMEDIACION CON PSEUDOMONAS.

corresponde a la biorremediacin referente a tratamientos que no requie- ren excavacin del

volatilizacin, adsorcin, biodegradacin y la reacciones qumicas que se pro- ducen en el

derivados son los rganoazufrados ms abundantes en el diesel primario. En Mxico,

hidrocarburos aromticos y poli aromticos, as como del pireno en estudios in vitro La P.

contaminantes comunes del ambiente, se ha observado que la biodegradacin de gasolina por

carbono, estas fueron taxonmicamente implicadas en diferen- tes subclases de las

5. Factores biticos y abiticos que condicionan la

material rocoso que no ha sufrido ninguna alteracin qumica o fsica (15).

En los derrames de petrleo la mayora de compuestos alifticos se pierden por volatilizacin,

producido por unidad de tiempo en

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