VIII Simpsio de Pesquisa dos Cafs do Brasil

16 a 19 de Setembro de 2013, Vitria da Conquista - BA

CUSTO DE PRODUO DE MUDAS CLONAIS DE CAF ARBICA PRODUZIDAS POR
EMBRIOGNESE SOMTICA
Carlos Henrique Siqueira de Carvalho1; Ana Carolina SR Paiva2, Danielle Silva Souza3, Elizani Quintino Silva4, Aline
Aparecida Custdio5, Paloma Bequima Borato6, Gabriella Alves Maral7, Bruna Nascimento Marques8
Trabalho financiado pelo Consrcio Brasileiro de Pesquisa e Desenvolvimento do Caf Consrcio Pesquisa Caf,
FAPEMIG e pelo Instituto Nacional de Cincia e Tecnologia INCT-Caf.
1
Pesquisador, PhD, Embrapa Caf/Fundao Procaf, Varginha-MG, carlos.carvalho@embrapa.br
2
Pesquisadora, Bela, Fundao Procaf, Varginha-MG, carolramia@hotmail.com
3
Bolsista do Consrcio Pesquisa Caf, daniellevga@hotmail.com
4,5
Bolsistas do Consrcio Pesquisa Caf, contato@fundacaoprocafe.com.br
6
Bolsista do Consrcio Pesquisa Caf, pyloma@hotmail.com
7
Bolsista do Consrcio Pesquisa Caf, gabialves_vga@hotmail.com
8
Bolsista do INCT-Caf, marquesbiomedicina@outlook.com
RESUMO: A produo de mudas clonais de caf pode ser feita de diferentes formas. Entretanto, a produo por
embriognese somtica a que tem despontado como a mais promissora. A embriognese somtica permite a produo
de mudas em larga escala a partir de folhas usadas como explantes. Plantas obtidas por esse processo apresentam
comportamento semelhante ao de plantas oriundas de sementes, no havendo limitao para a sua utilizao comercial.
A produo de mudas clonais de caf realizada em laboratrios de cultura de tecidos adaptados para a produo em
escala industrial, denominados de biofbricas. Todavia, a produo de mudas clonais via embriognese somtica uma
tcnica que ainda no foi explorada comercialmente no Brasil e no existe uma estimativa do custo de produo de
mudas clonais de caf arbica. Assim, o objetivo no presente trabalho foi calcular o custo de produo de mudas clonais
de caf em uma biofbrica de pequeno porte, tendo-se como base o protocolo desenvolvido pela Fundao
Procaf/Embrapa Caf, com a colaborao de pesquisadores da Embrapa Recursos Genticos e Biotecnologia e do
Centro de Cooperao Internacional em Pesquisa Agronmica para o Desenvolvimento, CIRAD, Frana. Este trabalho
apresenta tambm uma relao dos equipamentos e materiais necessrios para a produo de mudas de caf in vitro. O
custo de produo de uma muda foi de R$0,97 para uma produo anual de 400.000 mudas, utilizando-se o plantio de
embries pr-germinados diretamente em tubetes. Caso a etapa de produo de plntulas em potes in vitro seja
utilizada, o custo de produo passa a ser de R$1,34.
PALAVRAS-CHAVES: propagao vegetativa, propagao in vitro, mudas clonais.
SUMMARY: The production of clonal coffee can be done in different ways. However, production by somatic
embryogenesis is what has emerged as the most promising. Somatic embryogenesis allows plant production on a large
scale from leaves used as explants. Plants obtained by this process exhibit similar behavior to that of plants grown from
seeds, with no limitation for its commercial use. The production of clonal coffee is carried out tissue culture laboratory
adapted for industrial scale production. However, the production of coffee plants via somatic embryogenesis is a
technique that has not been commercially exploited in Brazil and there is no estimate of the production cost. The
objective of the present work was to calculate the cost of production of clonal coffee in a small commercial tissue
culture laboratory, taking as basis the protocol developed by the Procaf Foundation / Embrapa Caf, in collaboration
with researchers of Embrapa Genetic Resources and biotechnology and Center for International Cooperation in
Agronomic Research for Development, CIRAD, France. This paper also presents a list of the equipment and materials
necessary for the production of coffee plants in vitro. The production cost of a plant was US$0.50 for an annual
production of 400.000 plants, by using direct sowing of pre-germinated embryos directly into tubes. If the embryos go
through an in vitro phase before the nursery stage, then the production cost is R $ 0.70.
PASSWORDS: vegetative propagation, in vitro propagation, clonal plants.
INTRODUO
A produo de mudas clonais de caf pode ser feita de diferentes formas. Entretanto , a produo por embriognese
somtica a que tem despontado como a mais promissora. A embriognese somtica permite a produo de mudas em
larga escala a partir de folhas usadas como explantes. Plantas obtidas por esse processo apresentam comportamento
semelhante ao de plantas oriundas de sementes, no havendo limitao para a sua utilizao comercial (Ducos et
al.,2000; Etienne et al., 2001; Carvalho et al.,2011). A produo de mudas clonais de caf realizada em laboratrios
de cultura de tecidos adaptados para a produo em escala industrial, denominados de biofbricas. As biofbricas
podem produzir mudas prontas para plantio ou se especializar apenas na etapa in vitro, ou seja, na produo de
embries pr-germinados ou de plntulas e terceirizar as fases de aclimatizao dos embries ou plntulas e acabamento

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das mudas para viveiristas especializados. Os viveiros poderiam se localizar mais prximos s regies de produtores de
caf, reduzindo o custo do transporte. Todavia, a produo de mudas clonais via embriognese somtica uma tcnica
que ainda no foi explorada comercialmente no Brasil e no existe uma estimativa do custo de produo de mudas
clonais de caf arbica. Assim, o objetivo no presente trabalho foi calcular o custo de produo de mudas clonais de
caf em uma biofbrica de pequeno porte, tendo-se como base o protocolo desenvolvido pela Fundao
Procaf/Embrapa Caf, com a colaborao de pesquisadores da Embrapa Recursos Genticos e Biotecnologia e do
Centro de Cooperao Internacional em Pesquisa Agronmica para o Desenvolvimento, CIRAD, Frana. Este trabalho
apresenta tambm uma relao dos equipamentos e materiais necessrios para a produo de mudas de caf in vitro.
MATERIAL E MTODOS
O custo de produo foi baseado no seguinte processo de produo de mudas clonais: 1) Induo de calos: inicia-se com
a coleta de folhas das plantas matrizes, as quais so levadas para a biofbrica, onde feita a desinfestao e
plaqueamento de explantes em placas de Petri, objetivando a obteno de calos embriognicos. Essa etapa tem durao
de cinco a seis meses. 2) Crescimento dos calos embriognicos: nessa fase os calos so multiplicados em Erlenmeyers
com meio de cultura lquido por um perodo de 45 a 60 dias. 3) Regenerao de embries globulares: aps a fase de
multiplicao, os calos so colocados novamente em placas de Petri para a regenerao de embries globulares. A
formao dos embries globulares requer de dois a quatro meses. 4) Maturao de embries em biorreator: os embries
globulares so ento transferidos para biorreatores de imerso temporria, para desenvolvimento e maturao, por um
perodo de trs a quatro meses. Ao final dessa fase, so obtidos cerca de 500 a 700 embries em estdio cotiledonar,
pr-germinados, por biorreator. Os biorreatores podem ser do tipo RITA ou de frascos gmeos, com capacidade de dois
a quatro litros. 5) Formao de plntulas: os embries pr-germinados podem seguir duas rotas: a) com formao de
plntulas in vitro (em potes de plstico): nesse caso os embries pr-germinados produzidos nos biorreatores so
transferidos para potes de plstico com meio de cultura, onde permanecem por dois meses ou at que plntulas com dois
a trs pares de folhas sejam formadas. Essa fase dura de dois a trs meses. b) plantio de embries pr-germinados
produzidos nos biorreatores diretamente em bandejas com substrato orgnico: os embries so plantados em bandejas
com substrato orgnico comercial, aclimatizados em casa de vegetao at que as plntulas formadas atinjam trs pares
de folhas e ento transferidos para tubetes ou sacolas plsticas e levados para um viveiro para o acabamento das mudas.
Durao: quatro a cinco meses. 6) Acabamento das mudas: as plntulas oriundas de potes de plstico ou de bandejas so
transplantadas para tubetes ou sacolas plsticas com substrato para mudas de caf, colocadas em uma estufa onde
permanecem at que estejam adaptadas nova condio e, a seguir, levadas para um viveiro, onde ser feito o
acabamento das mudas. Essa etapa tem durao de quatro a cinco meses. Todo o processo, desde o plaqueamento dos
explantes foliares at o momento em que a muda est pronta para o plantio, requer de 22 a 24 meses. O custo de
produo das mudas foi calculado para uma biofbrica de pequeno porte com capacidade inicial de produo de
400.000 mudas por ano. A Tabela 1 contm os coeficientes tcnicos utilizados para a produo de 400.000 mudas e a
Tabela 2 a relao de todos os equipamentos e materiais necessrios para o funcionamento da biofbrica, bem como a
durabilidade e o valor unitrio. Para o clculo do custo, considerou-se tambm a depreciao anual dos equipamentos e
materiais. Os valores em reais foram obtidos em novembro de 2012. Considerou-se que a biofbrica necessita de seis
tcnicos de laboratrio e um gerente em tempo integral (Tabela 3). A etapa final de acabamento das mudas em viveiro
foi terceirizada a um custo de R$0,40 por muda. A planilha de distribuio dos custos foi dividida em trs categorias: 1)
custos diretos: so os custos das operaes de cultivo in vitro realizados dentro da biofbrica, mais o valor pago para o
acabamento das mudas mediante a contratao de um viveirista especializado nessa etapa. 2) reposio: inclui o custo
de aquisio dos equipamentos, instrumental, vidraria, reagentes e produtos diversos, bem como a vida til e o custo de
reposio. 3) diversos: despesas com a manuteno da biofbrica, pagamento de pessoal (tcnicos e gerente), gua e
energia eltrica.
Tabela 1. Coeficientes tcnicos para a produo de 400.000 mudas clonais de caf
Especificao
Unid.
Qtd
Coeficientes
Esta fase inclui a desinfestao de folhas,
Etapa 1: Induo de calos.
plaqueamento dos explantes e o primeiro subcultivo
dos explantes. Durao: 5-6 meses.
Folhas
U
864
01 folha = 40 explantes
Explantes plaqueados
U
34.560
9 explantes/placa
30 placas/litro de meio
Explantes teis
U
24.192
Taxa de contaminao de explantes = 30%
Explantes com calo embriognico
U
7.258
Taxa de induo de calos = 30%
Produo de calos embriognicos
mg
290.320
40 mg de calo/ explante
Etapa 2. Crescimento dos calos
Multiplicao de calos em meio lquido com
embriognicos
Erlenmeyer. Durao: 45 a 60 dias.

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Quantidade calo no incio cresc.

mg

290.320

Quantidade de calo ao final

mg

1.233.860

1.233.860

Etapa 3: Regenerao de embries

globulares
Nmero de embries globulares
Etapa 4. Maturao dos embries
em biorreatores RITA
Nmero de embries pr-germinados
produzidos
Etapa 5. Formao de plntulas.
Alternativa A: formao de
plntulas diretamente em bandejas
com substrato orgnico comercial
Produo de plntulas em bandejas
com substrato orgnico comercial
Alternativa B: formao de
plntulas em potes in vitro.
Plntulas formadas
Etapa 6. Acabamento das mudas.
Mudas prontas para plantio

400 mg de calo/Erlen. Perodo de cresc.: 45 dias

Perda de 15% por contaminao
Aumento da massa dos calos: 5X
Etapa realizada em placas de Petri. Durao: 2 a 4
meses.
900 mg de calo/Placa de Petri
1-5 embries/mg de calo
Durao: 3 a 4 meses.

1.240.000

496.000

682.000

400.000

300 mg de embries globulares/calos = 500 a 700

embries pr-germinados/ RITA
Nesta etapa existem duas opes: 5a/5b e 6a/6b.
O embrio pr-germinado transferido diretamente
para tubete ou sacola em casa de vegetao.
Durao: 3-4 meses
Taxa de converso de embrio pr-germinado para
plntula em bandeja = 40%
As plntulas so formadas in vitro. Esta opo
mais onerosa. Durao: 2 a 3 meses
Taxa de converso de embrio pr-germinado para
plntula em pote in vitro = 50%
Durao: 3-5 meses
Taxa de converso de plntula/muda = 70 a 80%

Tabela 2. Relao dos principais equipamentos e materiais, quantidade, valor unitrio, valor total e durabilidade
utilizados para calcular o custo de produo de mudas
Durab.
Item
Descrio
Desc.
Qtd
Valor unitrio Valor total
(anos)
1
Agitador (Corning)
equip.
15
1
450,00
450,00

2
Lupa (Tecnival )
mat.
30
1
1.543,00
1.543,00
3
Balana B3002 (COLLEGE)
equip.
20
1
3.124,00
3.124,00

4
Agitador magntico (ONDA )
equip.
15
1
1.044,00
1.044,00
5
Microondas 18 litros (Electrolux)
equip.
15
1
400,00
400,00
6
Barrilete 50 litros
equip.
40
1
423,00
423,00
7
Autoclave vertical (180 L)
equip.
25
2
4.100,00
8.200,00
8
Barrilete de 20 litros
equip.
40
1
208,00
208,00
9
Geladeira (Continental 460 litros)
equip.
15
2
2.100,00
4.200,00
10
Armrio de ao
equip.
40
2
450,00
900,00

11
Phmetro Digimed
equip.
15
1
710,00
710,00
12
Ar condicionado Elgin
equip.
15
1
899,00
899,00
13
Carrinho de ao
equip.
30
1
850,00
850,00
14
Carrinho de plstico
equip.
30
1
675,00
675,00
15
Ar Condicionado Gree
equip.
15
1
899,00
899,00
16
Computador
equip.
5
1
1.200,00
1.200,00
17
Impressora
equip.
5
1
449,00
449,00
18
Mesa para computador
equip.
15
2
150,00
300,00
19
Arquivo
equip.
40
1
440,00
440,00
20
Armrio de ao (guarda volumes)
equip.
40
1
410,00
410,00
21
Mesas agitadoras Tecnal
equip.
10
3
4.299,00
12.897,00
22
Mesas agitadoras Inova 2300
equip.
25
3
18.800,00
56.400,00
23
Mesa agitadora G10 Gyratory Shaker
equip.
15
1
5.500,00
5.500,00
24
Prateleira de ao
equip.
40
4
210,00
840,00
25
Springer Maxiflex (cont. de temp.)
equip.
15
2
1.200,00
2.400,00

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29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54

Insuflador de ar
equip.
1
1.415,00
Prateleiras c/ 4 reparties
equip.
2
436,00
Prateleira c/ 3 reparties
equip.
1
310,00
Bancada das mesas agitadoras)
equip.
590,00
1

Capela de fluxo laminar (Filtracon )

equip.
1
10.100,00
Capela de fluxo laminar Pachane 230)
equip.
1
11.200,00

Capela de fluxo laminar (Pachane )

equip.
1
1.000,00
Capela de fluxo laminar (Veco)
equip.
1
1.450,00
Ar condicionado da Gree
equip.
1
1.200,00
Ventokit
equip.
1
420,00
Esterilizador Filtracon
equip.
2
1.450,00
Esterilizador Marconi
equip.
1
1.320,00
Carrinho de inox
equip.
1
675,00

Biorreatores (Rita )
equip.
1000 210,00
Unidade filtrante Millex
equip.
500
10,00
Compressor
equip.
1
2.100,00
Mangueiras transparentes para rita 0,8 cm mat.
1,5
16,00
Mangueiras transparentes para rita 0,5 cm mat.
15
11,20
Mangueira azul
mat.
19
7,00
Painel com timers
equip.
1
2.200,00
Painel controle da luz
equip.
1
350,00
Lmpada florescente 60 cm (20W)
mat.
32
20,00

Lmpada florescente Golden

mat.
92
11,00
Vlvulas solenides
equip.
6
80,00
Conexo preta
mat.
356
2,20
Deionizador de gua
equip.
1
20.000,00
Suporte p/ 96 ponteiras (200 l)
equip.
2
8,20
Suporte p/ 100 ponteiras (1,0 ml)
equip.
1
8,20
Suporte p/ 54 ponteiras (1,0 ml)
equip.
2
5,00
Materiais diversos, reagentes, vidraria e
55
produtos de limpeza e assepsia.
TOTAL
Obs.: Para os materiais includos no item 55 considerou-se uma reposio de 10% a cada
uma durabilidade de 30 anos. Alguns materiais so consumidos em menos de um ano.
Fonte: elaborado pelos autores.

1.415,00
872,00
310,00
590,00
10.100,00
11.200,00
1.000,00
1.450,00
1.200,00
420,00
2.900,00
1.320,00
675,00
210.000,00
5.000,00
2.100,00
24,00
163,41
131,25
2.200,00
350,00
640,00
1.012,00
480,00
783,20
20.000,00
16,40
8,20
10,00

20
40
40
40
30
30
30
30
15
30
10
10
40
6
3
25
15
5
20
25
15
3
3
8
20
30
15
15
15

36.373,62
418.205,08
trs anos, ou o mesmo que

Tabela 3. Necessidade de pessoal e salrios com os encargos sociais

Pessoal
Quantidade
R$/pessoa/ms

R$/ms

R$/ano

Tcnicos de laboratrio

1.400,00

8.400,00

100.800,00

Gerente
Fonte: elaborado pelos autores.

2.500,00

2.500,00

30.000,00

RESULTADOS E DISCUSSO
O custo de produo de uma muda foi de R$0,97 para uma produo anual de 400.000 mudas, utilizando-se o plantio de
embries diretamente em tubetes (Tabela 2). Caso a etapa de produo de plntulas em potes in vitro seja utilizada, o
custo de produo passa a ser de R$1,34 (Tabela 3). A etapa de produo de plntulas in vitro foi a de maior custo de
todo o processo, sendo responsvel por quase 30% do custo total (Tabela 3). Isso ocorre porque em cada pote so
produzidas somente 20 plntulas. Devido ao custo mais elevado, essa etapa s deve ser utilizada caso no haja
instalaes adequadas (casa de vegetao ou tnel com controle de umidade relativa do ar) para a aclimatizao de
embries pr-germinados diretamente em tubetes ou sacolas plsticas. Apesar do custo mais elevado, a produo de
mudas com a etapa de produo de plntulas in vitro usualmente realizada por laboratrios de cultura de tecidos que
visam multiplicao de clones para fins experimentais. O acabamento da mudas em viveiro, uma etapa terceirizada,

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representou 41,1% do custo total da muda, e a parte da produo in vitro, 58,9% (Tabela 2). Os biorreatores do tipo
RITA representam uma parcela considervel do custo de reposio dos equipamentos. Isso ocorre, porque embora os
biorreatores RITA sejam bastante eficientes para o crescimento e maturao dos embries, devido ao seu pequeno
volume de apenas um litro, so produzidos somente 500 a 700 embries por biorreator. Caso sejam utilizados
biorreatores de frascos gmeos com volume de dois a quatro litros, pode-se aumentar consideravelmente a produo de
embries por biorreator com consequente reduo do custo de produo.
Tabela 2. Custo de produo de 400.000 mudas clonais de caf com o plantio dos embries diretamente em bandejas
com substrato comercial
CUSTO UNITRIO
PARTICIPAO
ETAPA
(R$/muda)
TOTAL (R$)
(%)
Custos Diretos
0,49
196.513,58
50,5
Induo de calos
0,02
7.324,74
1,9
Crescimento de calos
0,00
807,48
0,2
Regenerao de embries
0,01
2.228,24
0,6
Maturao de embries
0,07
26.153,12
6,7
Acabamento das mudas
0,40
160.000,00
41,1
Reposio
0,12
48.108,08
12,4
Equipamento
0,11
44.662,42
11,5
Material
0,01
3.445,65
0,9
Diversos
0,36
144.560,00
37,1
Manuteno
0,01
2.360,00
0,6
Energia eltrica
0,02
9.000,00
2,3
gua
0,01
2.400,00
0,6
Tcnicos de laboratrio
0,25
100.800,00
25,9
Gerente
0,08
30.000,00
7,7
Total geral
0,97
389.181,66
100,0
Fonte: elaborado pelos autores.
Tabela 3. Custo de produo de 400.000 mudas clonais de caf incluindo a etapa de produo de plntulas em potes in
vitro
CUSTO UNITRIO
ETAPA
(R$/muda)
TOTAL (R$) PARTICIPAO (%)
Custos Diretos
0,86
343.997,94
64,1
Induo de calos
0,02
7.324,74
1,4
Crescimento de calos
0,00
807,48
0,2
Regenerao de embries
0,01
2.228,24
0,4
Maturao de embries
0,07
26.153,12
4,9
Produo de plntulas in vitro
0,37
147.484,36
27,5
Formao de mudas
0,40
160.000,00
29,8
Reposio
0,12
48.108,08
9,0
Equipamento
0,11
44.662,42
8,3
Material
0,01
3.445,65
0,6
Diversos
0,36
144.560,00
26,9
Manuteno
0,01
2.360,00
0,4
Energia eltrica
0,02
9.000,00
1,7
gua
0,01
2.400,00
0,4
Tcnicos de laboratrio
0,25
100.800,00
18,8
Gerente
0,08
30.000,00
5,6
Total geral
1,34
536.666,02
100,0
Fonte: elaborado pelos autores.

VIII Simpsio de Pesquisa dos Cafs do Brasil

16 a 19 de Setembro de 2013, Vitria da Conquista - BA
Uma biofbrica de produo de mudas de caf para a produo de 400.000 mudas por ano deve contar
permanentemente em seu quadro de empregados com seis tcnicos de laboratrio e um gerente. A poca de maior
demanda de mudas estende-se de outubro a maro e, consequentemente, as operaes que mais necessitam de mo de
obra concentram-se em determinadas pocas do ano. Assim, para a melhor aproveitamento da mo de obra e
infraestrutura, interessante que a biofbrica se dedique tambm a produzir mudas de outras espcies, como banana,
morango, abacaxi e ornamentais. Atualmente o preo de venda de uma muda formada por semente de R$0,40. Caso a
margem de lucro de uma muda clonal seja de 40%, o preo da muda clonal ser de cerca de R$1,40, ou seja, trs a
quatro vezes mais que o preo de uma muda de sementes. Assim, cultivares clonais s sero plantadas por produtores
rurais caso tenham grande valor agregado ou caractersticas ainda no disponveis comercialmente e demandadas pelo
mercado, como por exemplo, resistncia ao bicho-mineiro e a nematoides e bebida diferenciada ou por apresentarem
produtividade bem mais elevada que as cultivares tradicionais. Os coeficientes tcnicos utilizados para calcular a
eficincia do processo de produo foram bastante conservadores, em geral utilizando a taxa de eficincia mais baixa do
processo. Assim, certamente o custo de produo comercial deve ser um pouco mais baixo que o calculado. Alm disso,
o custo de algumas atividades pode ser reduzido com pequenas alteraes no processo de produo. Por exemplo, na
etapa de induo de calos, o nmero de explantes pode ser reduzido se aps a retirada dos primeiros calos os explantes
forem deixados nas placas de Petri ou transferidos para placas com meio fresco, permitindo que os resduos de calos
deixados nas placas possam crescer novamente. Estima-se que esse segundo ciclo de produo possa produzir 60 a
70% da massa de calos produzida no primeiro ciclo. Durante a fase de crescimento dos calos, foi considerado apenas
um ciclo de crescimento de calos de 45 dias com um aumento final da massa de calos de cinco vezes. Caso seja
realizado um novo ciclo de crescimento de 45 dias, utilizando como inoculo os calos multiplicados no primeiro ciclo,
haveria um aumento de massa dos calos de 25 vezes, reduzindo a necessidade do plaqueamento de explantes. A taxa de
converso de calos embriognicos para embrio globular foi de somente um a dois embries globulares/mg de calo.
Todavia, comum a obteno de cinco embries/mg de calo.
CONCLUSES
O custo de produo de uma muda foi de R$0,97 para uma produo anual de 400.000 mudas, utilizando-se o plantio de
embries diretamente em tubetes. Caso a etapa de produo de plntulas em potes in vitro seja utilizada, o custo de
produo passa a ser de R$1,34.
REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
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