ENZIMAS

1. INTRODUCCIN
Las enzimas son protenas globulares que actan como biocatalizadores, es decir
facilitan y aceleran las reacciones qumicas del metabolismo, ya que
disminuyen la energa de activacin que se necesita para que tengan lugar
dichas reacciones, permitiendo que se produzcan a velocidades y temperaturas
adecuadas.

Cualquier reaccin qumica se inicia con la rotura de ciertos enlaces entre

tomos que constituyen las molculas de los reactivos, para formar,
posteriormente, los nuevos enlaces que originan las molculas de los productos.
Este estado en que los enlaces de los reactivos estn debilitados, pero en el que
an no se han formado los nuevos, se conoce como ESTADO DE TRANSICIN
O ESTADO ACTIVADO.
Para alcanzar el estado de transicin y, en definitiva, para que la reaccin
qumica tenga lugar, es preciso comunicar a los reactivos cierta cantidad de
energa, denominada ENERGA DE ACTIVACIN.
La diferencia entre las reacciones endotrmicas y exotrmicas radica en el
balance energtico global del proceso. Las primeras necesitan energa mientras
que las segundas la desprenden. Sin embargo, en ambos casos es necesaria
energa de activacin para alcanzar el estado de transicin.

La accin catalizadora de las enzimas consiste en rebajar la energa de

activacin necesaria para que las molculas reaccionen, y para ello se unen

temporalmente a dichas molculas, o sea, a los reactivos o sustratos. Esa unin

temporal se traduce en un acercamiento ntimo de las molculas que
reaccionan y puede debilitar sus enlaces qumicos, con lo que se facilita la
formacin de otros nuevos enlaces. Como consecuencia de todo ello, los
catalizadores al combinarse con los reactivos producen un estado de transicin
de menor energa de activacin que la reaccin no catalizada, as pues, es
menor la energa inicial que debe usarse para empezar la reaccin y, por ello,
habr una mayor proporcin de molculas activadas y la reaccin transcurrir
ms deprisa.

Caractersticas de las enzimas

No se consumen en la reaccin y al finalizar esta quedan libres pudiendo

utilizarse de nuevo, por eso se necesitan en pequeas cantidades.

Son muy especficas. Existe una individualizacin con respecto al tipo de

reaccin que catalizan y otra, con respecto al sustrato

Necesitan un medio de reaccin ptimo: tanto con relacin a la temperatura

como al pH. Por su carcter proteico, se desnaturalizan debido al calor o a
cambios de pH en el medio. Al hacerlo, pierden su estructura tridimensional
y, con ello, su funcin

No modifican el equilibrio de una reaccin, sino que aceleran la llegada del

mismo. Algunas aumentan la velocidad de la reaccin ms de un milln de
veces

2. COMPOSICIN
A excepcin de las ribozimas, todas son de naturaleza proteica y predominan las
de tipo globular.
Algunas no son protenas exclusivamente, sino que estn asociadas con otro
tipo de molculas que no son de naturaleza proteica y de las cuales depende su
actividad. Estas enzimas se denominan HOLOENZIMAS.
La pare proteica de la holoenzima se denomina APOENZIMA y a la parte no
proteica se le denomina COFACTOR.
El cofactor puede ser de distinta naturaleza:
Pueden ser cationes metlicos como: Fe++, Mg2+, Cu2+ etc. Ej la
citocromo oxidasa que tiene como cofactor un tomo de hierro y uno de
cobre.
Pueden

ser

molculas

orgnicas

complejas,

en

este

caso

se

denominan:
Coenzimas si se unen dbilmente y de forma temporal al
apoenzima, por ejemplo el NAD+, FAD, NADP+ etc., algunos de ellos
tienen en su composicin una vitamina.
Grupo prosttico si se unen mediante enlaces covalente y de
forma permanente al apoenzima, por ejemplo el grupo hemo del
citocromo c.
Tanto la apoenzima como el cofactor son inactivas por s mismas, han de estar
unidas para que la enzima (holoenzima) sea activa. El apoenzima determina la
especificidad de la reaccin, es decir determina el sustrato sobre el que puede
actuar, mientras que el cofactor presenta los grupos que permiten la
transformacin del sustrato. Un mismo cofactor puede ser constituyente de
diferentes holoenzimas.
En las holoenzimas, el cofactor se encuentra en el centro activo.

APOENZIM
A

HOLOENZIM
A

CATIONES
METLICO
S
COFACTOR
COENZIMA
S

MOLCULA
S
ORGNICA

GRUPO
PROSTTICO

TIPOS DE COENZIMAS

Aunque existen muchos tipos de coenzimas los 2 grupos ms importantes son:

1) Coenzimas que intervienen en las reacciones de xidorreduccin.
Actan transfiriendo H+ y e- de unos sustratos a otros. Aqu se incluyen:
Piridn-nucletidos.

Tienen

en

su

composicin

vitamina

P-P

(nicotinamida). En este grupo se incluye:

NAD

(nicotinamida-adenina-dinucletido

nicotn

adenn

dinucletido)
NADP (nicotinamida-adenina-dinucletido-fosfato o nicotn-adenndinucletido fosfato).
Flavin-nucletidos: Tienen en su composicin riboflavina o vitamina B2.
Aqu se incluyen:
FMN (flavn - mono nucletido)
FAD (flavn - adenn dinucletido).

2) Coenzimas que intervienen en reacciones de transferencia de grupos

qumicos.
Los ms importantes son:

Nucletidos trifosfatos. El ms importante de todos es el adenosn

trifosfato (ATP) hay otros como CTP, UTP, etc.
Estos coenzimas transfieren grupos fosfato, adems son importantes por la
gran cantidad de energa que acumulan en los enlaces que unen a las
molculas de fosfrico, esta energa se libera cuando estos enlaces se
rompen.
Coenzima A (CoA-SH). Interviene en la transferencia de grupos acetil de
unos sustratos a otros. Contiene en su composicin cido pantotnico o
vitamina B5.

3. MECANISMO DE LA ACCION ENZIMATICA

En toda reaccin enzimtica se diferencian dos fases:
1. El sustrato (reactivos) se fija especficamente al enzima, formndose el
complejo enzima-sustrato.
La unin entre el enzima y el sustrato se debe a enlaces dbiles (puentes de
hidrgeno, atracciones electrostticas etc), que se rompen fcilmente una vez que
el enzima ha realizado su accin. La unin se produce en una zona del enzima
denominado centro activo.
El centro activo es una pequea regin de la superficie del enzima que tiene
forma de hueco o repliegue, y cuya estructura tridimensional se adapta
perfectamente a la estructura complementaria del sustrato. Este centro activo
est formado por:
Aminocidos de unin que son los que le unen al sustrato
Aminocidos catalticos que son los que realizan la transformacin del S
en P (accin enzimtica).
Estos aminocidos pueden encontrarse muy alejados en la secuencia de la
protena enzimtica, pero se encuentran muy prximos entre s debido a la

estructura terciaria de la protena enzimtica; por eso si la protena enzimtica se

desnaturaliza el centro activo se destruye y el enzima dejara de realizar su
funcin.

Una vez que el enzima se une al sustrato mediante los aminocidos de unin,
actan sobre l los aminocidos catalticos que sern los que producen la ruptura
de enlaces y la formacin de otros nuevos, transformando el sustrato en producto.
2. Liberacin de los productos. Una vez producida la accin enzimtica, el
complejo enzima-sustrato se desintegra quedando libre por un lado el enzima, el
cual podr volver a ser utilizado de nuevo y, por otro lado el sustrato pero ya
convertido en producto.

E + S

ES
E + P

4. ESPECIFICIDAD ENZIMATICA
Una de las caractersticas ms importantes de los enzimas es su alta
especificidad con respecto al tipo de reaccin que catalizan y otra, con respecto
al sustrato.
Esta especificidad se debe a la complementariedad que debe existir entre el
sustrato y el centro activo del enzima.

En 1894, Emil Fischer propuso la hiptesis de la

llave y la cerradura para explicar la especificidad
enzimtica. Segn esta hiptesis la especificidad entre
la enzima y el sustrato es como la que existe entre una
llave y su cerradura, se pensaba que el centro activo
tena una forma tridimensional
determinada y el sustrato sera
complementario a l y encajara
perfectamente.
En 1958 Daniel Koshland propuso la hiptesis del
ajuste inducido o de la mano y el guante que es la que se
acepta en la actualidad. Dice que la especificidad radica en
los aminocidos de unin del centro activo, que son los
encargados de establecer enlaces dbiles con el sustrato.
Realizada la fijacin el enzima posee libertad para cambiar su forma y amoldarse
al sustrato de tal manera que el centro activo quede correctamente situado. Esta
teora afirma que no hay una adaptacin predeterminada como ocurre en el
modelo de la llave-cerradura, sino una adaptacin inducida por los aminocidos
de unin.
La especificidad se establece a dos niveles:
Especificidad de accin: Es decir un enzima solo puede catalizar un
determinado tipo de reaccin: hidrlisis, xido-reduccin, etc.
Especificidad de sustrato: Esto significa que cada enzima slo puede actuar
sobre un sustrato, o sobre un reducido nmero de sustratos. Esta especificidad
puede ser:
Absoluta. El enzima acta sobre un nico sustrato. Ej. ureasa acta sobre
la urea y la desdobla en CO2 y NH3.

De grupo. El enzima acta sobre un grupo de sustratos que presentan un

determinado tipo de enlace (las descarboxilasas eliminan un grupo CO 2 de
los aminocidos).
Estereoqumica. La enzima acta sobre un estereoismero y no sobre el
otro (la aspartasa acta sobre el L-asprtico y no sobre la forma D).

5. FACTORES QUE INFLUYEN EN LA ACTIVIDAD ENZIMATICA

La eficacia de un enzima se mide por la velocidad de transformacin del sustrato
en producto. La actividad de las enzimas se ve afectada por diversos factores
entre los que destacan los siguientes:

CONCENTRACION DEL SUSTRATO

En toda reaccin catalizada por un enzima, si se mantiene constante la
concentracin del E, la velocidad de la reaccin aumenta exponencialmente al
incrementarse la concentracin del sustrato, ya que al existir ms molculas de
sustrato es ms probable el encuentro con el enzima y la formacin del complejo
E-S.
Este aumento de velocidad es rpido para concentraciones bajas de sustrato y, a
medida que este aumenta, se va haciendo ms lento hasta que la concentracin
del sustrato alcanza un cierto valor, a partir del cual, aunque aumente la
concentracin del mismo, no aumenta la velocidad de la reaccin. Esto es debido
a que la enzima est saturada por el sustrato; es decir, todas las molculas del
enzima estn unidas al sustrato formando el complejo E-S. Cuando ocurre esto, se
dice que la reaccin ha alcanzado la velocidad mxima.
En 1913 Leonor Michaelis y Maud Menten estudiaron la variacin de la
V es la velocidad
de la reaccin
para una determinada
de
velocidad de una reaccin enzimtica
en funcin
de la concentracin
del concentracin
sustrato
sustrato.
y propusieron la siguiente ecuacin:
Vmax es la velocidad mxima de la reaccin.
[S] es la concentracin del sustrato.
KM es una constante denominada constante de Michaelis-Menten, es
caracterstica de cada enzima.

Para un valor de V = Vmax y despejamos KM obtenemos lo siguiente:

[S]
Vmax/2 = Vmax .

[S]
;

K M + [S]

= 2[S] ; KM = [S]
KM + [S]

KM + [S]

KM. Se puede definir como la concentracin de sustrato necesario para que la

velocidad de la reaccin sea la mitad de la velocidad mxima. Se mide en
unidades de concentracin.
La KM nos indica la afinidad de un enzima por su sustrato:
Si KM es alta indica que el enzima tiene poca afinidad por el sustrato ya que se
necesita una concentracin de sustrato elevada para alcanzar la mitad de la
velocidad mxima.

Si KM es baja indica que el enzima tiene mucha afinidad por el sustrato ya que
se necesita una concentracin de sustrato baja para alcanzar la mitad de la
velocidad mxima.
TEMPERATURA:
La T influye en la actividad enzimtica. En general
por cada 10C que aumente la temperatura la
velocidad de la reaccin aumenta de 2 a 4 veces.
Esta regla se cumple hasta

que la temperatura

alcanza un valor mximo (T ptima) donde la

actividad es mxima. Esto se debe a que al
aumentar la T aumenta el movimiento de las
molculas y, por tanto aumenta la probabilidad de encuentro entre el S y el E.
Si la T aumenta por encima de la T ptima, disminuye e incluso cesa la actividad
enzimtica debido a que la enzima se desnaturaliza.
Cada enzima posee una T ptima, en las enzimas humanas suele estar alrededor
de 37C..

pH:
Las variaciones de pH del medio provocan un
cambio en las cargas elctricas superficiales de las
enzimas, alterndose su estructura terciaria y, por
tanto, su actividad. Cada enzima realiza su accin
dentro de un determinado intervalo de pH, dentro
de este intervalo habr un pH ptimo donde la
actividad enzimtica ser mxima. Por debajo del pH mnimo o por encima del
pH mximo el enzima se inactiva ya que se desnaturaliza. En la mayora de las
enzimas el pH ptimo est prximo a la neutralidad, aunque hay excepciones.

INHIBIDORES:
Son compuestos qumicos que se unen al enzima, en distintos puntos del mismo y
disminuyen o incluso impiden su actividad. Estos compuestos pueden ser de
distintos tipos: iones, molculas orgnicas y a veces el producto final de la
reaccin. A la accin que realizan se la denomina inhibicin.

La inhibicin puede ser:

Inhibicin irreversible: Cuando el inhibidor impide permanentemente la
actividad enzimtica, bien porque se une de forma permanente con grupos
funcionales importantes del centro activo o bien porque altera su estructura.
A estos inhibidores se les denomina venenos y a la inhibicin que realizan
se la denomina envenenamiento del enzima. Ej. La penicilina que inhibe
las enzimas que sintetizan la pared bacteriana. El in cianuro acta sobre la
citocromo oxidasa (enzima respiratorio).
Inhibicin reversible: El inhibidor se une al enzima de forma temporal
mediante enlaces dbiles e impide el normal funcionamiento del mismo,
pero no la inutiliza permanentemente.
Puede ser de dos tipos:
Competitiva: El inhibidor es similar al sustrato y se puede unir al
centro activo del enzima impidiendo que lo haga el sustrato. Es decir

ambos, inhibidor y sustrato compiten por unirse al centro activo del

enzima. La accin suele anularse aumentando la concentracin del
sustrato.
No competitiva: El inhibidor no compite con el sustrato, puede
actuar de 2 formas:

Sobre el enzima, unindose a l en un lugar diferente al

centro activo y modificando su estructura lo que dificulta

que el enzima se pueda unir con el sustrato.

Sobre el complejo E-S unindose a l y dificultando su
desintegracin y por lo tanto la formacin de los
productos.

6. ENZIMAS ALOSTRICAS

Son enzimas que presentan dos conformaciones diferentes, estables e

interconvertibles: una es la forma activa que tiene una gran afinidad por el
sustrato y la otra es la forma inactiva que presenta baja afinidad por el
sustrato.

Estas enzimas poseen adems del centro activo, otro centro llamado
centro regulador

o alostrico donde se puede unir un modulador o

regulador alostrico que, puede ser un activador o un inhibidor de la

enzima. Si el centro regulador est vaco la enzima acta a velocidad
normal; si est ocupado por el regulador se producen cambios en la
conformacin y dependiendo de que sea activador o inhibidor adoptara una
forma ms o menos activa.
El paso de la forma inactiva a la forma activa se produce al fijarse en el
centro regulador un activador alostrico o modulador positivo. El paso
de la forma activa a la forma inactiva se produce al fijarse en el centro
regulador un inhibidor alostrico o modulador negativo.

Estas enzimas estn formadas por varias subunidades, por lo que

tienen estructura cuaternaria.

Presentan efecto cooperativo entre la subunidades, es decir que si se

activa o inhibe una de ellas provoca el mismo efecto en las dems.

En las enzimas alostricas la cintica de las reacciones es diferente a la de

las dems enzimas, la grfica de la velocidad frente al sustrato es una
curva sigmoidea en lugar de hiperblica como ocurre en las dems
enzimas.

Los enzimas alostricos desempean un papel muy importante en la

regulacin de las reacciones metablicas, suelen actuar en puntos
estratgicos de las rutas metablicas como son: la primera reaccin de una
ruta metablica o los puntos de ramificacin de una ruta metablica. El
propio sustrato de la primera reaccin es el que acta como activador
alostrico, al unirse con el enzima produce el cambio que da lugar a la
conformacin activa. Tambin el producto final de la ruta metablica
puede actuar como inhibidor alostrico, produciendo la aparicin de la
conformacin inactiva. Este proceso se denomina retroinhibicin. Este
proceso supone un ahorro energtico para el organismo, ya que el exceso
de producto final inhibe su propia sntesis en una etapa temprana de la
misma.

VITAMINAS.
El termino vitamina significa "aminas necesarias para la vida" fue utilizado por
primera vez en 1912 por el bioqumico Funk, debido a que la primera que se
describi la B1 tena un grupo amino, hoy se sigue utilizando aunque se sabe que
no todas tienen grupo amino.
Son compuestos orgnicos de composicin variada, que son indispensables en
cantidades muy pequeas (mg o g diarios) para el correcto funcionamiento del
organismo.
Son sintetizadas por vegetales y microorganismos pero no por los animales salvo
algunas excepciones (aves sintetizan vitamina C), por ello tenemos que tomarlas
obligatoriamente en la dieta bien como tales vitaminas o en forma de
provitaminas (sustancias precursoras que en el organismo se transforman en
vitaminas).
Se destruyen fcilmente por el calor, la luz, las variaciones de pH, el
almacenamiento prolongado, etc.
Algunas actan como coenzimas o forman parte de ellas, y otras intervienen
en funciones especializadas.
Tanto su dficit como su exceso originan trastornos metablicos ms o menos
graves para el organismo. Estas alteraciones pueden ser de tres tipos:
Avitaminosis: Se produce por la ausencia total de una vitamina.
Hipovitaminosis: Se origina por el dficit de alguna vitamina.
Estas dos alteraciones dan lugar a las llamadas enfermedades carenciales, que
pueden resultar mortales.
Hipervitaminosis: Se produce cuando hay exceso de alguna vitamina, en el
caso de las vitaminas liposolubles A y D puede resultar txico por su dificultad
para ser eliminadas.

Nombre y clasificacin
Antes se las nombraba mediante letras maysculas A, B, C etc. y tambin por la
enfermedad que origina su deficiencia (antiescorbtica). Hoy, aunque todava se
utilizan estos nombres, se las designa por el nombre del compuesto qumico
que las constituye.
Atendiendo a su solubilidad se las divide en dos grupos:
Vitaminas liposolubles: Son de carcter lipdico y por lo tanto no son solubles
en agua y s lo son en disolventes orgnicos. Alguna como la A y D si se toman en
exceso pueden resultar toxicas, puesto que al no disolverse en agua no se
eliminan por la orina. No actan como coenzimas. Aqu se incluyen: el retinol (A),
el calciferol (D), la filoquinona (K) y el tocoferol (E).
Vitaminas hidrosolubles: Son de naturaleza polar y por lo tanto solubles en
agua, su exceso no resulta toxico ya que se eliminan por la orina. Actan como
coenzimas o forman parte de ellos. Aqu se incluyen: el cido ascrbico (C ) y el
complejo vitamnico B que comprende varias la tiamina (B1), la riboflavina
(B2), la niacina (B3), el cido pantotnico (B5), la piridoxina (B6), la biotina
(B8), el cido flico (B9) y la cianocobalamina (B12).