Solucin

1. La cromatografa se divide en categoras con base en el mecanismo de

interaccin del soluto con la fase estacionaria:

Tipo de Fase Fase mvil Tipo de interaccin Ejemplo

separacin estacionaria
Cromatografa Slida Lquido o gas El soluto es Cromatograf
de absorcin adsorbido en la a en
superficie de las columna o
partculas slidas. en placa
Cromatografa Lquida Usualmente El soluto se separa Cromatograf
de particin anclada en gas por equilibrio entre a de gases
una el lquido
superficie estacionario y el gas
slida mvil.
Cromatografa Resina con Lquido Iones con carga Separacin
de grupos opuesta presentes de iones de
intercambio cargados en la fase mvil son una fuente
inico positivament atrados a la fase de agua
e (-N(CH3)3+) estacionaria por
o fuerzas
negativamen electrostticas.
te (-SO3-)
Cromatografa Gel poroso Lquido o gas Separacin de Filtracin en
de exclusin molculas por gel
(filtracin en tamao. Las
gel) molculas ms
grandes pasan ms
rpidamente al no
ser capaces de
entrar en los poros
de la fase
estacionaria.
Cromatografa Slido Lquido Emplea Separacin
de afinidad interacciones de protenas
especficas entre usando fase
una molcula estacionaria
especfica y una con
 segunda molcula anticuerpos
que es anclada especficos.
covalentemente a
una fase
estacionaria.

2. a) La celulosa se usa en cromatografa de particin, en donde la fase

mvil y la fase estacionaria son lquidos. La fase estacionaria consiste
en el agua retenida en las fibras de celulosa.
b) Ya que la muestra es acuosa, la sacarosa se disolvera y no funcionara
como fase estacionaria.

3.
posicin de la sustancia
Rf =
frente del solvente
posicin de la sustancia
0.5=
9 cm
4.5 cm= posicin de la sustancia

Se espera que la mancha se encuentre a 4.5 cm desde la lnea de siembra.

4. El hecho de que el alcohol tenga un Rf menor significa que est ms
retenido en la fase estacionaria. Esto se debe a que el alcohol puede
actuar como aceptor y donor de puentes de hidrgeno, por lo que
presentar una unin ms fuerte que la cetona.
Ni el alcohol ni la cetona tienen uniones covalentes con esta fase
estacionaria, por lo que no se espera retencin por quimisorcin.

5. Para separar mejor los componentes se requiere aumentar ligeramente

la polaridad de la fase mvil. Por lo que queda descartado el uso de
pentano puro. Por otro lado, el metanol el demasiado polar, lo que hara
que ambos compuestos se eluyeran con el frente del disolvente. Las
mezclas c y d presentan polaridad similar, por lo que la eleccin
depender de las propiedades especficas de los compuestos.

6. a) En cromatografa de capa delgada, la resolucin est dada por:

1
 x 1.27 cm
R= = =3.39
0.5( d 1+ d2 ) 0.5(0.35 cm+ 0.4 cm)

b) Para aumentar la separacin entre las manchas se debe sembrar

menos cantidad de la muestra problema, o cambiar la fase mvil, por
alguna de polaridad similar, pero que facilite la interaccin de uno de los
compuestos con la fase estacionaria.

7. a1) Cuando se visualizan aminocidos rociando con un spray de

ninhidrina se est usando una tcnica destructiva, ya que se sta
reacciona con los aminocidos para formar un compuesto coloreado de
tonalidad violeta intenso.
a2) El agua podra reaccionar con los steres formando el alcohol y el
cido correspondientes, por lo que funcionara como tcnica destructiva.
a3) La deteccin de compuestos inorgnicos con cido sulfrico depende
en gran medida de la identidad de los mismos. En general, no existen
cadenas carbonadas que se carbonicen, por lo que la mancha no se
visualiza. Sin embargo, existen ciertos compuestos que pueden
reaccionar con cido para formar productos coloreados.
a4) La radiacin ultravioleta es usualmente no destructiva, pero algunos
compuestos son sensibles a este tipo de radiacin.

b) En una cromatografa preparativa es necesario el uso de una tcnica

de revelado no destructiva, ya que lo que se pretende es aislar y purificar
la mayor cantidad de compuesto puro posible.

8. a) Que el compuesto A es ms pequeo (de peso molecular menor) que

el compuesto B.

b) El compuesto A es menos polar que el compuesto B.

9. a)

Suministro Puerto de Columna Detector Recoleccin

de gas inyeccin de datos

Desechos

2
b) La derivatizacin permite diferenciar analitos que de otra manera tendran
tiempos de retencin muy similares, lo que conllevara a una baja resolucin.
Adicionalmente, es posible utilizar la derivatizacin para aumentar la
volatilidad del compuesto o para aumentar la respuesta del detector.

c) En cromatografa de gases se utiliza el gradiente como un cambio de

temperatura de la columna, lo que aumenta la velocidad de elucin de los
analitos. En cromatografa lquida, se habla de gradientes de solventes, por lo
que cambia el poder de elucin del mismo.

d) Debido a que la fase estacionaria es un lquido, si sta no est ligada, tiende

a movilizarse con la fase mvil a altas temperaturas. Este proceso se llama
sangrado y afecta el desempeo de la columna para prximos anlisis.

e) Debido a que el detector de conductividad trmica toma al gas portador

como lnea base contra la cual compara todas las fracciones que salen de la
columna.

f) En las columnas empacas, la fase estacionaria lquida est anclada sobre

partculas slidas que ocupan todo el volumen interior de la columna, mientras
que las columnas tubulares huecas, la fase estacionaria est compuesta
nicamente por la pared interior de la columna. Las columnas empacadas, en
general, poseen mayor capacidad (se puede inyectar ms muestra), pero
producen picos ms anchos, tiempos de retencin ms largos, y menor
resolucin, lo que conlleva mayores tiempos de anlisis.

10.

'
a) t r=t rt m
benceno: t 'r=103=7 min
hexano: t 'r=113=8 min

b)

3
 2
16 t r
N= 2
w
Benceno: N = 1322.314
Hexano: N = 987.755
El nmero de platos promedio es 1155

c)
tr 1110 1
R= = = =0.8
1 1 1.25
(w +w ) (1.1+1.4)
2 1 2 2
La separacin es completa cuando se tiene una resolucin mayor 1.5, por lo
que en este caso, no se logra la separacin eficientemente.

d)
Compuesto tr (min) w (min)
no retenido 3
benceno (PE 80 C) 10 1.1
hexano (PE 68 C) 11 1.4

seal
tr(A) Z

WA WB

3 10 11 tiempo

e) Para mejorar la resolucin, es posible usar una columna ms larga, una

columna de menor dimetro, una fase estacionaria con menor espesor u otra
fase estacionaria. Duplicando la longitud de la columna se duplica el nmero
de platos y la resolucin aumenta en 2 , pero se duplica el tiempo de
retencin. Usando una columna ms estrecha o pelcula de fase estacionaria
ms delgada, aumenta la resolucin sin la penalizacin de aumento en el
tiempo de retencin. Si se cambia la fase estacionaria, cambia completamente

4
la retencin relativa de los compuestos y se puede modificar la separacin de
los picos.