PRACTICA 5 Comprobacin de clorofila y fotosntesis

La fotosntesis es un proceso en virtud del cual los organismos con clorofila, como las
plantas verdes, las algas y algunas bacterias, capturan energa en forma de luz y la
transforman en energa qumica.

Prcticamente toda la energa que consume la vida de la bisfera terrestre la zona del
planeta en la cual hay vida procede de la fotosntesis.

La fotosntesis se realiza en dos etapas: una serie de reacciones que dependen de la luz y
son independientes de la temperatura, y otra serie que dependen de la temperatura y son
independientes de la luz.

La velocidad de la primera etapa,

llamada reaccin lumnica, aumenta
con la intensidad luminosa (dentro de
ciertos lmites), pero no con la
temperatura. En la segunda etapa,
llamada reaccin en la oscuridad, la
velocidad aumenta con la temperatura
(dentro de ciertos lmites), pero no con la
intensidad luminosa.

Importancia biolgica de la
fotosntesis

La fotosntesis es seguramente el proceso

bioqumico ms importante de la bisfera
por varios motivos:
1. La sntesis de materia orgnica a partir de la materia inorgnica se realiza
fundamentalmente mediante la fotosntesis; luego ir pasando de unos seres vivos a otros
mediante las cadenas trficas, para ser transformada en materia propia por los
diferentes seres vivos.
2. Produce la transformacin de la energa luminosa en energa qumica, necesaria
y utilizada por los seres vivos
3. En la fotosntesis se libera oxgeno, que ser utilizado en la respiracin aerobia como
oxidante.
4. La fotosntesis fue causante del cambio producido en la atmsfera primitiva, que
era anaerobia y reductora.
5. De la fotosntesis depende tambin la energa almacenada en combustibles
fsiles como carbn, petrleo y gas natural.
6. El equilibrio necesario entre seres auttrofos yhetertrofos no sera posible sin la
fotosntesis.
 Se puede concluir que la
diversidad de la vida
existente en la Tierra
depende principalmente de
la fotosntesis.

Qu es la clorofila?

La clorofila es un
pigmento verde que
presentan los vegetales,
algunas algas y bacterias y que facilita la produccin de la fotosntesis, que es
la conversin de energa luminosa en energa qumica estable.

La clorofila fue descubierta en el ao 1817, por dos qumicos franceses, Caventou

y Pelletier, quienes consiguieron aislar a la misma de las hojas de las plantas.

La clorofila capta la luz solar, y provoca el rompimiento de la molcula de agua (H 2O),

separando el hidrgeno (H) del oxgeno (O); es decir, el enlace qumico que mantiene
unidos al hidrgeno y al oxgeno de la molcula de agua, se rompe por efecto de la luz.

El proceso genera oxgeno gaseoso que se libera al ambiente, y la energa no utilizada es

almacenada en molculas especiales llamadas ATP. En consecuencia, cada vez que la luz
est presente, se desencadenar en la planta el proceso descrito.

Cromatografa

La cromatografa es una tcnica de separacin de sustancias que se basa en las

diferentes velocidades con que se mueve cada una de ellas a travs de un medio poroso
arrastradas por un disolvente en movimiento. La cromatografa es un mtodo fsico de
separacin en el que los componentes que se han de separar se distribuyen entre dos
fases, una de las cuales est en reposo (fase estacionaria, F.E.) mientras que la otra
(fase mvil, F.M.) se mueve en una direccin definida.

Cromatografa plana
Se realiza sobre papel u otro material slido. Suele llamarse en capa fina o en capa
Cromatografa ascendente en delgada porque la fase estacionaria recubre
capa fina un soporte plano y rgido.

Factor De Retencin (Rf)

Mide la movilidad relativa de cada

componente con respecto al mximo posible,
la distancia recorrida por el frente de fase
mvil. Toma valores entre 0.0 y 1.0. Siempre
ha de indicarse el eluyente y el soporte en el
que se ha determinado. El Rf se calcula de la
siguiente manera:
Rf= distancia recorrida por el producto/distancia recorrida por la fase mvil

TASA FOTOSINTETICA

La tasa fotosinttica o la Fotosntesis neta se expresa como la cantidad de CO2 por unidad
de rea foliar y de tiempo y se define como la cantidad neta de carbono que se incorpora
al vegetal en un momento dado. Es el proceso que explica en ltima instancia el
crecimiento de un vegetal.La planta puede ser expuesta a diferentes
intensidades de luz y de colores. El
oxgeno se mide en el nmero de burbujas
producidas por la planta.

Factor Efecto
Concentraci
n de CO2 A medida que aumenta la concentracin de CO 2 aumenta la
tasa fotosinttica hasta llegar a un nivel; en este punto la
RUBISCO se satura y la eficiencia deja de aumentar. Hasta
una determinada concentracin de CO2, el aumento de
concentracin aumenta la tasa de fotosntesis. Influye en la
apertura de los estomas.
Concentraci
n de O2 Influye en la fotorrespiracin, cuanto menor sea la
concentracin de oxgeno, mayor ser el rendimiento
energtico, ya que si hay mucho oxgeno la RUBISCO har el
proceso de fotorespiracin. La oxidacin de carbohidratos en
los peroxisomas en presencia de luz y O2 (sin produccin de
ATP ni NADPH) puede reducir en un 50% o ms la eficiencia
fotosinttica.
Disponibilid Si hay escasez de agua los estomas se cierran, la concentracin
ad de agua de CO2se reduce y la de O2 aumenta, por tanto disminuye el
rendimiento fotosinttico ya que se produce fotorrespiracin.
Temperatur
a Las enzimas son protenas y por encima de la temperatura
ptima se produce la desnaturalizacin de los enzimas,
disminuyendo el rendimiento. Tambin influye en el cierre de
los estomas,
Periodo de Guarda una relacin directa con el rendimiento fotosinttico.
luzo
fotoperiodo
Intensidad
luminosa La tasa fotosinttica aumenta con intensidad luminosa hasta
un cierto lmite, caracterstico de cada especie, en el que se
produce la fotooxidacin de los pigmentos.
Longitud de Las plantas slo aprovechan la luz perteneciente a un rango de
 onda de la longitudes de onda que corresponde a la luz visible (400-700 nm).
luz Las longitudes de onda inferiores, como la luz ultravioleta pueden
romper las molculas

LABORATORIO

MATERIALES: REACTIVOS:

Vaso precipitado 250 Solucin de bicarbonato de

Mortero con pistilo sodio 2%
Pipeta graduadas 2,5 y 10ml Etanol
Gotero Cloroformo
Papel filtro 2 x 10 cm Acetona
2 jeringas plsticas de 10ml Jabon liquido
Perforadora de un hoyo Agua destilada
3 vasos precipitados de 50 ml espinacas
Lmpara
Embudo de vidrio
Vidrio reloj

Procedimientos:

Identificacin de clorofila por

cromatografa

1) Se cortaron hojas de la espinaca y se pusieron en el mortero se molieron con 5ml de

acetona y despus se agregaron 5ml mas de acetona
2) Despus se coloco el embudo de vidrio dentro de un vaso precipitado de 50ml y se
filtro la espinaca con una gasa para obtener el filtrado
3) En el vaso precipitado de 250ml se puso un poco de etanol y se tapo con un vidrio
reloj para general el ambiente donde se realizara la prueba.

4) Se corto un pedazo de papel de filtro de 2 x 10 cm despus se marca con 2 lneas

en cada extremo, se puso unas gotas del filtrado en uno de los extremos del papel
filtro sobre la lnea
5) Se meti el papel filtro adentro del vaso precipitado quedando cerca del etanol pero
q no lo toque pegado en las pared del vaso
 6) Se observo que se expanda la muestra en el papel filtro
7) RF: DR/DM= 5.4/9.2= 0.586

Discos flotantes

1. En los vasos precipitados de 50ml se pusieron 20ml de agua destilada y en el otro

vaso precipitado 20ml de bicarbonato y 5ml de jabon liquido
2. Despus se perforo unas hojas de espinaca para obtener 10 discos de la hoja de
espinaca

3. Se tomaron las jeringas se les quito el piston se colocaron la mitad de los discos de
hojas en cada jeringa y se coloco nuevamente el piston
4. Despus con cuidado se jalo un poco de las muestras de cada uno de los vasos
precipitados pero antes se jalo un poco de aire
5. Una jeringa fue de agua destilada la otra de la muestra de bicarbonato y jabn
6. Se tapo la jeringa con el dedo y se jalo nuevamente un poco de aire
7. Despus se expusieron las jeringas en la luz
Coleccin De Datos

minutos Discos que han flotado Observaciones

1 0
3 2 No hay cambios
5 5 Se observa un poco de
burbujas q no estaba al
inicio
6 8 Suben un poco lento pero
mas rpido
7 10 Ya es ms fcil q las hojas
suban

discos
minutos

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Cuestionario
1. Dibuje un cloroplasto con sus partes
 2. Cul es el principio de la cromatografa?
La cromatografa es uno de los principales mtodos para la separacin de especies
qumicas estrechamente relacionadas en mezclas complejas. La cromatografa es un
mtodo fsico de separacin basado en la distribucin de los componentes de una mezcla
entre dos fases inmiscibles, una fija o estacionaria y otra mvil.
3. Qu es el Rf y como se calcula?
Rf (factor de retencin), o la distancia que cada compuesto se desplaza Cada compuesto
tiene un Rf caracterstico que depende del disolvente empleado y del tipo de placa d
utilizada, pero es independiente del recorrido del disolvente. De esta manera se puede
ayudar a identificar un compuesto en una mezcla al comparar su Rf con el de un
compuesto conocido

4. Qu tipo de pigmentos fotosintticos se encuentran en los tejidos

vegetales y que colores los representan en la cromatografa en papel?
El trmino 'pigmento' es utilizado para describir una molcula que absorbe luz y presenta
un color. Las plantas contienen una gran variedad de pigmentos que dan lugar a los
colores que en ellas observamos. Los pigmentos fotosintticos son los nicos que tienen la
capacidad de absorber la energa de la luz solar y hacerla disponible para el aparato
fotosinttico. En las plantas terrestres hay dos clases de pigmentos fotosintticos: las
clorofilas y los carotenoides. La capacidad de las clorofilas y los carotenoides para
absorber la luz del sol y utilizarla de manera efectiva est relacionada con su estructura
molecular y su organizacin dentro de la clula.

Estructura A: Estructura Estructura B: Estructura molecular

molecular de la luteina, un de una clorofila.
 5. Qu relacin existe entre el ET50 y el tiempo?
ET50: Esta abreviacin denota el tiempo de exposicin requerido para producir un efecto
definido cuando una poblacin bajo prueba es expuesta a una concentracin fija o a una
dosis especfica de un txico. La relacin se da al momento los discos flotan y para ello
hay que medir el tiempo en que se llebo a cabo la accin que fue lo que se registro en la
tabla.
6. Qu factores podran influir en la tasa fotosinttica? Explique.

- La concentracin de CO2 atmosfrico. A mayor concentracin de CO2 mayor actividad

fotosinttica, hasta que se llega a un punto en el que se estabiliza. Al aumentar la
concentracin de O2 baja el rendimiento de la fotosntesis debido a la fotorrespiracin.
- La luz solar. La luz blanca contiene todo el espectro visible y la calidad de luz necesaria
para estimular los pigmentos fotosintticos.
- La disponibilidad de agua. este factor afecta cuando las clulas fotosintticas sufren
deficiencias. Corresponde principalmente al agua absorbida por las races.
- La temperatura. a mayor temperatura, mayor actividad fotosinttica, hasta que se llega
a un mximo, superado el cual se pueden desnaturalizar algunas enzimas. La temperatura
ptima variar de unas especies a otras.-
Existen plantas de zonas fras que pueden realizar fotosntesis a 0C y otras adaptadas a
altas temperaturas como las plantas del desierto o plantas C4) que producen fotosntesis
entre los 15 y 35 C.

7. Por qu es importante establecer un experimento control?

Se usa para comparar contra las modificaciones que se hacen se necesitan conocer los
resultados para poder comparar muchas veces ya se ha realizado y se conocen los
resultados Si haces tu experimento control en paralelo con tu nuevo experimento, puedes
determinar si los qumicos o el tratamiento del experimento est funcionando
apropiadamente.
8. Por qu es importante estudiar la tasa fotosinttica en vegetales?
Nos permite cuantificar la eficiencia de la energa capturada en diversos cultivos la
medida ms precisa es la del intercambio real del gas en la planta se puede medir
mediante unas formas. Una forma de estimar fotosntesis es mediante el contenido de
materia seca foliar entre la superficie foliar, cociente que se denomina peso especifico de
la hija (PHE). Este cociente es afectado por la intensidad y duracin de la luz