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Capilar
Medina Romero Amisaddai
Jasubi
Historia
El desplazamiento de
sustancias bajo la accin
de un campo elctrico
fue citado por Reuss en
1809 en las memorias de
la Sociedad Imperial
Natural (Moscow) (1809).
All se observa el
comportamiento
migratorio de pequeas
partculas de arena en un
mbito de agua
transparente contenido
en un recipiente de vidrio
con un lecho de arena
fina en su fondo y dos
tubos conteniendo
electrodos de una
batera.
Historia
El pasaje de la corriente produce un
enturbiamiento en las proximidades del polo
positivo producido por la migracin de
partculas de arena muy pequeas que se
movilizan por su carga elctrica negativa.
Este experimento puede ser considerado
como el primer aporte bibliogrfico que
revela la polarizacin de la slice, pues la
arena es dixido de silicio y fundida permite
obtener los capilares que se emplean en la
electroforesis capilar.
Historia
En 1816, fue observado el transporte
del agua por accin de la corriente
galvnica generada por la
polarizacin negativa del capilar
que une los dos recipientes
electrdicos.
La pared del capilar, sabemos hoy,
adquiere carga negativa (al pasaje
de la corriente elctrica)
producindose la polarizacin del
agua, la que por consiguiente tiende
a desplazarse hacia el polo
negativo.
Esta corriente lquida que se
desplaza en sentido opuesto a la
direccin de la corriente elctrica, se
designa con el nombre de Fuerza
electroendosmtica (FEO)
La electroforesis en solucin en medios libres sin
elementos soportes (agar, almidn, geles de
poliacrilamida), fue desarrollada por Tiselius el que
resolvi mezclas de protenas en un tubo aplicando
un campo elctrico de corriente continua, no
pulsante, estudios que lo hicieron acreedor al Premio
Nobel en Qumica.
El empleo de capilares para la separacin de
sustancias neutras o iones cargados elctricamente,
apareci en 1967 en una experiencia desarrollada
por Hjerten empleando capilares milimtricos, los
que eran rotados a travs de su seccin longitudinal
para evitar los efectos de la conveccin.
Electroforesis
Movimiento o desplazamiento diferencial
de especies cargadas (iones), sustancias
neutras o migracin pasiva, por atraccin
o repulsin en un campo elctrico a
travs de una matriz porosa, la cual,
finalmente las separa por tamaos
moleculares y carga elctrica,
dependiendo de la tcnica que se use.
La tcnica clsica utiliza una tira recubierta de una sustancia
porosa impregnada de un electrolito. Sus extremos se sumergen
en dos depsitos independientes que contienen ambos al
electrolito y estn unidos a los electrodos del generador de
corriente. La muestra se deposita en forma de un pequeo trazo
transversal en la tira. La distancia de migracin se mide en
relacin un marcador interno. Las placas son reveladas con sales
de plata, azul de Coomassie, o reactivos en particular.
Medios de soporte para
realizar la electroforesis
Lamuestra debe situarse en o sobre un
medio soporte, principalmente para
evitar perturbaciones mecnicas y
corrientes de conveccin durante la
separacin. En algunos soportes (papel o
similares) la muestra queda sobre la
superficie y avanza a lo largo de ella, con
escasa friccin, por lo que el mecanismo
principal de separacin es la magnitud
de la carga de cada componente de la
muestra.
Medios de soporte para
realizar la electroforesis
Otrosmedios de soporte (geles, medios
semislidos o gelatinosos) estn formados
por polmeros que forman una malla,
matriz o red tridimensional a travs de la
cual deben avanzar las molculas de la
muestra, que queda embebida en el
medio de soporte electrofortico. Como
consecuencia, la friccin es notable y los
factores de forma y tamao adquieren
una alta relevancia en la separacin.
Medios de soporte para
realizar la electroforesis
Medios de baja friccin Medios de elevada friccin