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DESEMPENHO E ESPERMATOGNESE DE ALEVINOS DE TILPIA 449

DESEMPENHO E ESPERMATOGNESE DE ALEVINOS DE TILPIA


ALIMENTADOS COM FARELO OU FARINHA DE SEMENTE DE ALGODO1

ANA LCIA SALARO2, LUIZ EDIVALDO PEZZATO3,


MARGARIDA MARIA BARROS4 e CARLOS ALBERTO VICENTINI5

RESUMO - Este trabalho avaliou o efeito do farelo e da farinha de semente de algodo no ganho de
peso e na atividade testicular de alevinos de tilpia-do-nilo (Oreochromis niloticus). Cento e cinqen-
ta alevinos com peso mdio inicial de 1,26 g foram mantidos em aqurios de 45 L, com renovao
contnua dgua, e alimentados por 120 dias com dietas isoproticas (28% PB) e isocalricas
(4.030 kcal EB/kg de rao) contendo 0%, 2%, 4% e 6% de semente de algodo descorticada e moda,
e 24% de farelo de algodo. Foi observado que os nveis avaliados interferem na atividade testicular,
diminuindo a espermatognese, embora no tenham comprometido de forma significativa o ganho de
peso dos alevinos.
Termos para indexao: ganho de peso, atividade testicular, gossipol, fator antinutricional, sistema
reprodutor, Oreochromis niloticus.

PERFORMANCE AND SPERMATOGENESIS OF NILE TILAPIA FINGERLINGS


FED WITH COTTONSEED MEAL OR COTTONSEED FLOUR

ABSTRACT - This experiment evaluated the effect of cottonseed meal or cottonseed flour on growth
and testis activity of Nile tilapia fingerlings (Oreochromis niloticus). One hundred and fifty
fingerlings with mean initial weight of 1.26 g were maintained in 45 L aquaria with continuous water
supply. Fish were fed in isoproteic (28% CP) and isoenergetic (4,030 kcal CE/kg of ration) diets
during 120 days. The experimental diets comprised a control diet, without cottonseed flour or meal,
and diets containing 2%, 4% and 6% of cottonseed flour and 24% cottonseed meal. The results indi-
cated that the use of seed flour or meal should be limited since at the tested levels they interferred with
testis activity although they had not adversely affected the weight gain of fingerlings.

Index terms: weight gain, testis activity, gossypol, antinutritional factor, reproductive system,
Oreochromis niloticus.

INTRODUO em dietas para peixes, a maioria deles contm fato-


res antinutricionais que, dependendo do
processamento ao qual foram submetidos, podem
Embora diversos subprodutos agroindustriais de
interferir no desempenho produtivo desses animais.
origem vegetal apresentem potencial para emprego
Conforme tendncia mundial, o farelo de algodo
tem sido amplamente utilizado na confeco de ra-
1 Aceito para publicao em 23 de julho de 1998. es para peixes, mesmo sendo escassas as infor-
Extrado da Tese de Doutorado apresentada pelo primeiro maes sobre o efeito do gossipol nos peixes tropi-
autor UNESP, Botucatu, SP. cais.
2 Biloga, Dra, Dep. de Biologia Animal, UFV, CEP 36571-000
Quando comparado aos outros monogstricos, os
Viosa, MG. peixes tm demonstrado maior tolerncia especfi-
3 Zoot., Dr., FMVZ, UNESP, Campus de Botucatu, Caixa
ca presena do gossipol nas suas dietas (Martin,
Postal 560, CEP 18618-000 Botucatu, SP. E-mail:
lpezzato@fca.unesp.br 1990). Em experimento realizado por Roehm et al.
4 Zoot., Dra , FMVZ, UNESP. (1967), estes concluram que trutas-arco-ris (Sal-
5 Bilogo, Dr., Dep. de Cincias Biolgicas, FC, UNESP, mo gairdineri) podiam ser alimentadas com dietas
Campus de Bauru, CEP 17033-360, Bauru, SP. contendo 250 ppm de gossipol livre/dia, sem que

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fossem constatados efeitos deletrios. Semelhantes Foram utilizados 25 aqurios de 45 L, com renovao
resultados foram obtidos com bagre-do-canal contnua de gua (0,25 L/min.), dotados de sistema de
(Icatulurus punctatus) por Dorsa et al. (1982), quan- alimentao e escoamento por vaso comunicante. Empre-
do observaram que estes podem receber at 900 ppm gou-se um lote de 150 alevinos de tilpia-do-nilo
(Oreochromis niloticus), com peso mdio inicial de
de gossipol livre/dia na dieta sem que sejam verifi-
1,26 g, numa densidade de seis peixes por aqurio. O
cados efeitos negativos no crescimento.
experimento foi realizado num delineamento inteiramen-
Demonstrando que algumas espcies so mais te casualizado, com cinco tratamentos e cinco repeties.
tolerantes presena de gossipol na dieta, Robinson Foram utilizadas raes isoproticas, com 28,0%
et al. (1984) no observaram efeitos adversos no de protena bruta; e raes isocalricas, com
desempenho da tilpia-aurea (Oreochromis aureus) 4.030 kcal EB/kg de rao (National Research Council,
alimentada com nveis de 1.800 ppm de gossipol 1993), constituindo tratamentos com 0% (controle), 2%,
livre. Entretanto, efeitos deletrios foram observa- 4% e 6% de farinha de semente de algodo descorticada e
dos por Oioli et al. (1992), quando empregaram di- 24% de farelo de algodo, constituindo, respectivamente,
etas isoproticas (24,0% de protena bruta) e os tratamentos 0-SA, 2-SA, 4-SA, 6-SA e 24-FA. Foi uti-
isocalricas (3.600 kcal de EB/kg de rao) no lizado farelo de algodo proveniente da extrao com
solvente hexana, e a semente descorticada no foi subme-
arraoamento de tilpia-do-nilo e concluram que
tida a tratamento. O tratamento 24-FA, se constituiu num
nveis maiores que 33,3% da frao protica da die-
controle positivo, em face dos resultados obtidos por Bar-
ta, quando substituda pelo farelo de algodo, resul- ros et al. (1995).
taram em menor ganho de peso alm de leses mi- As raes (Tabela 1) foram processadas para obteno
croscpicas nos rins e fgado, o que caracteriza de- de pletes de dois dimetros: 1,0 mm e 3,36 mm, destina-
generao, necrose e infiltrao peridural. Resulta- dos, respectivamente, s fases inicial e final do experi-
dos semelhantes foram obtidos por Barros et al. mento. As anlises qumico-bromatolgicas dos ingredi-
(1995) trabalhando com semente e farelo de algo- entes e das raes (Tabelas 2 e 3, respectivamente)
do em dietas iniciais para carpa comum. Segundo foram realizadas no Laboratrio de Bromatologia do
estes autores, o farelo de algodo pode ser utilizado Departamento de Melhoramento e Nutrio Animal da
em nveis de at 24,0%. Entretanto, a semente de FMVZ - UNESP - Campus de Botucatu, segundo as
normas recomendadas pela Association of Official
algodo descorticada e moda, ao nvel de 6%, re-
Analytical Chemists (1975).
sultou em leses macro e microscpicas subletais,
A temperatura da gua dos aqurios foi aferida s 8h e
menor crescimento, e pior converso alimentar. 14h. O controle do pH e do teor de oxignio dissolvido na
Assim, antes que se possa recomendar a utiliza- gua foi realizado a cada 15 dias, respectivamente atravs
o de produtos que contenham gossipol, faz-se ne- de peagmetro e pelo mtodo de Winkler modificado pela
cessrio conhecer as respostas biolgicas e os me- adio de azida sdica, conforme recomendado por
canismos fisiolgicos adaptativos dos peixes tropi- Boyd (1984).
cais ao composto, para que sejam garantidos resul- Os peixes foram alimentados ad libitum, duas vezes
tados zootcnicos positivos. ao dia, imediatamente aps a leitura da temperatura da
Este trabalho teve por objetivo avaliar o efeito gua dos aqurios, numa proporo que possibilitou a
da incluso do farelo e da farinha de semente de ingesto mxima sem que ocorressem perdas de rao.
algodo, no desempenho produtivo e atividade tes- Em dias alternados, foi realizada a limpeza dos aqurios
ticular de alevinos de tilpia-do-nilo. por meio de sifonagens, para evitar o acmulo de sobras
de rao e fezes. O experimento teve a durao de 120
dias, sendo os peixes pesados no incio e ao final, utili-
MATERIAL E MTODOS zando-se balana com preciso de centsimos de grama.
As pesagens eram feitas aps um perodo de 24 horas de
Esta pesquisa foi conduzida nos laboratrios de nutri- jejum. A qualidade nutritiva da farinha de semente e do
o de peixes do Departamento de Melhoramento e Nu- farelo de algodo foi avaliada pela determinao do
trio Animal (FMVZ - UNESP - Campus de Botucatu) e ganho de peso dos peixes nos diferentes tratamentos; a
do Departamento de Morfologia da Faculdade de Bauru - labo- comparao entre as mdias realizada pela anlise de
ratrios associados ao Centro de Aqicultura da UNESP. varincia de experimentos inteiramente casualizados

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TABELA 1. Composio percentual e caractersticas nutritivas das raes experimentais.

Ingrediente Tratamento 1
0-SA 2-SA 4-SA 6-SA 24-FA
Premix (vitaminas e minerais) 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00
Farinha de peixe 5,00 5,00 5,00 5,00 5,00
Amido de milho 5,00 5,00 5,00 5,00 5,00
Fub de milho 38,17 38,50 38,78 39,44 36,06
Farelo de soja 48,16 46,65 45,14 43,56 28,27
Farinha de semente de algodo - 2,00 4,00 6,00 -
Farelo de algodo - - - - 24,00
leo de soja 0,92 0,70 0,50 - 0,40
Casca de arroz 1,75 1,15 0,58 - 0,27
Total 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00
Protena bruta (%) 28,00 28,00 28,00 28,00 28,00
Fibra bruta (%) 5,48 5,47 5,49 5,50 5,49
Extrato etreo (%) 3,02 3,58 4,17 4,42 2,33
Energia bruta (kcal/kg de rao) 4012 4030 4052 4058 4039
Clcio (%) 0,48 0,48 0,48 0,48 0,47
Fsforo (%) 0,27 0,27 0,27 0,28 0,29
1 0-SA: 0% de semente de algodo; 2-SA: 2% de semente de algodo; 4-SA: 4% de semente de algodo; 6-SA: 6% de semente de algodo;
24-FA: 24% de farelo de algodo.

TABELA 2. Composio qumico-bromatolgica dos ingredientes utilizados para confeco das dietas experi-
mentais1.

Ingrediente PB (%) FB (%) EE (%) EB 2 Ca (%) Pd (%)


Farinha de peixe 57,42 0,22 6,00 4344 6,00 3,00
Amido de milho 0,55 - 0,13 3631 - -
Fub de milho 8,61 1,80 3,30 3950 0,02 0,09
Farelo de soja 45,30 6,30 1,10 4187 0,36 0,18
Farinha de semente de algodo 32,90 33,98 38,91 4630 0,30 0,32
Farelo de algodo 38,20 11,60 0,92 4140 0,28 0,26
leo de soja - - 100,00 9730 - -
1 Valores expressos em porcentagem da matria seca.
2 Energia bruta (kcal/kg).

TABELA 3. Anlise qumico-bromatolgica das dietas experimentais.

Tratamento1 PB (%) FB (%) EE (%) EB2 Ca (%) Pd (%)


0-SA 27,60 5,10 3,50 4003 0,50 0,26
2-SA 27,50 5,65 4,01 4015 0,50 0,25
4-SA 27,48 5,75 4,44 3986 0,57 0,25
6-SA 27,82 5,47 4,11 4011 0,55 0,26
24-FA 27,55 5,88 3,88 4022 0,42 0,23
1 0-SA: 0% de semente de algodo; 2-SA: 2% de semente de algodo; 4-SA: 4% de semente de algodo; 6-SA: 6% de semente de algodo;
24-FA: 24% de farelo de algodo.
2 Energia bruta (kcal/kg de rao).

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(Banzato & Kronka, 1989), e as concluses extradas des- Os valores mdios de ganho de peso (gramas)
te trabalho foram obtidas a 5% de significncia estatsti- aos 120 dias experimentais esto apresentados na
ca. Tabela 4. A anlise de varincia de experimentos
Aos 60 dias, os peixes de uma das cinco repeties, e, inteiramente casualizados (teste F) no revelou di-
aos 120 dias, todos os peixes, foram sacrificados e desti- ferenas estatisticamente significativas (p>0,05)
nados para estudos histolgicos. Os testculos foram fi- entre os tratamentos (CV=18,2%).
xados com Bouin, e includos em parafina. Corte de 7 m A literatura demonstra a existncia de limites para
foram corados com hematoxilina/eosina (H/E) de acordo a presena desses produtos nas dietas dos peixes.
com metodologia recomendada por Luna (1968). Para Os resultados obtidos com o bagre-do-canal por
caracterizao da atividade testicular foi realizado diag- Robinette (1981), e com o salmo por Fowler (1980),
nstico do estdio de maturao gonadal de acordo com limitam o uso do farelo de algodo a 20,0% e 22,0%,
os tipos de clulas germinativas presentes nas gnadas, respectivamente, e Martin (1990) alerta para o efei-
como proposto por Alexandrino et al. (1985), Gonalves to antinutricional do gossipol nos peixes. No pre-
(1993) e Narahara (1995). sente estudo, a no-deteco de diferenas estatsti-
cas significativas entre tratamentos est de acordo
RESULTADOS E DISCUSSO com os resultados obtidos com a tilpia-aurea por
Robinson et al. (1984), enquanto Oioli et al. (1992),
Ganho de peso demonstraram a possibilidade de se empregarem na
dieta nveis de farelo de algodo de at 33,33%, sem
A temperatura mdia da gua de todo o perodo prejudicar o ganho de peso de tilpia-do-nilo.
experimental foi de 21C e 22C, respectivamente A aparente alta capacidade da tilpia-do-nilo em
para os perodos da manh e tarde, cujas oscilaes receber dietas contendo gossipol, aqui demonstra-
registradas podem ser consideradas pequenas, tanto da, confirma a afirmao feita por Jauncey & Ross
no perodo matutino (mnima de 19,5C e mxima (1982), sobre o potencial de emprego do algodo
de 23C), como no perodo vespertino como fonte protica em dietas para a espcie.
(mnima de 20C e mxima de 24C). Desta forma, Esses resultados confirmam ainda a tese de que
a temperatura da gua no deve ter influenciado o os peixes podem ser alimentados com dietas con-
desempenho dos peixes submetidos aos diferentes tendo nveis de gossipol superiores aos nveis dos
tratamentos, pois manteve-se na faixa trmica de demais monogstricos, como anteriormente demons-
conforto para a espcie, segundo Castagnolli & trado por Dorsa et al. (1982), que alimentaram
Cyrino (1986). O mesmo foi observado para a con- alevinos de bagre-do-canal com dietas contendo
centrao de oxignio dissolvido (5,0 mg/L) e com 900 ppm de gossipol livre/dia sem que o ganho de
o pH (6,5). peso da espcie fosse afetado significativamente, e,

TABELA 4. Valores mdios de ganho de peso (gramas) de alevinos de tilpia-do-nilo alimentados com dietas
contendo diferentes concentraes de farinha de semente de algodo e farelo de algodo.

Repetio Tratamento 1
0-SA 2-SA 4-SA 6-SA 24-FA
1 6,510 8,072 4,435 5,385 6,756
2 6,548 6,890 4,453 6,878 8,365
3 7,501 6,360 7,220 5,805 7,205
4 8,386 5,119 7,200 6,788 6,555
Mdia 7,236 6,610 5,827 6,214 7,220
1 0-SA: 0% de semente de algodo; 2-SA: 2% de semente de algodo; 4-SA: 4% de semente de algodo; 6-SA: 6% de semente de algodo;
24-FA: 24% de farelo de algodo.

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ainda, por Roehm et al. (1967), que estabeleceram a tozides livres na luz tubular (Fig. 3). Assim sendo,
possibilidade de empregar 34,0% de farelo de algo- observa-se que este grupo apresentava-se em fase
do em dietas de truta-arco-ris. inicial de maturao gonadal. Uma explicao para
o quadro acima est baseada nos resultados obtidos
Anlise microscpica das gnadas em mamferos por Randel et al. (1990), que verifi-
caram imotilidade e diminuio do nmero de
espermatozides e danos ao epitlio germinativo,
A anlise microscpica dos testculos dos peixes
acarretando uma reduo do processo de
do grupo-controle (60 dias) revelou fase adiantada
espermatognese. Tais problemas reprodutivos fo-
do processo de maturao. Foi observada prolifera-
ram atribudos por Chase et al. (1990) degenera-
o celular em todas as fases do processo de
o do tecido do parnquima testicular.
espermatognese, destacando-se espermatozides
No foram realizadas anlises de gnadas aos 60
livres no lume tubular e ducto testicular (Figs. 1 e
dias em relao aos peixes do tratamento 4-SA, por-
2). Nas gnadas observou-se um dinamismo no pro-
que todos os indivduos sorteados para anlise eram
cesso de espermatognese, conforme descrito por
fmeas. As anlises dos peixes do tratamento 6-SA
Silva (1987) na mesma espcie estudada no presen-
revelaram gnadas com cistos de espermatozides,
te trabalho.
mas no foram encontrados espermatozides livres
A anlise microscpica dos testculos dos alevinos
no lume tubular (Fig. 4). Essa caracterstica, con-
que receberam o tratamento 2-SA revela grande
forme descrito por Alexandrino et al. (1985), indi-
nmero de espermatognias, e, no seu interior, cis-
cou que os peixes se encontravam em fase interme-
tos de espermatcitos primrios e um nmero mui-
diria de maturao. Desta forma, podemos inferir
to reduzido de espermtides redondas. Quando com-
que os peixes alimentados com rao 6-SA apre-
parados ao grupo-controle, no foram encontrados
cistos de espermatozides, e tampouco esperma-

FIG. 1. Corte histolgico de testculo de Oreochromis


niloticus (grupo-controle - 60 dias) durante o
processo de espermatognese. So observa-
dos cistos de clulas germinativas (cg) e FIG. 2. Detalhe de tbulos seminferos (grupo-con-
espermatozides livres no lume tubular (z) e trole - 60 dias) apresentando espermato-
no ducto testicular (dt), (H/E, 200X). zides livres (z) na luz tubular (H/E, 400X).

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sentaram atraso no processo de maturao gonadal, As gnadas dos peixes arraoados com dietas
quando comparados aos alimentados com a rao contendo 2% de semente de algodo apresentaram-se,
controle. aos 120 dias, semelhantes s do grupo-controle aos
A anlise microscpica dos testculos dos peixes 60 dias, sendo observados cistos de espermatozides,
do tratamento 24-FA mostrou a presena de cistos espermatozides livres no lume e no ducto testicu-
de espermatozides e poucos tbulos com lar (Fig. 5). Assim, verificou-se que o tratamento
espermatozides livres na luz tubular. Diante 2-SA atrasou em 60 dias a maturao sexual nos ma-
desses resultados, podemos inferir que o tratamento chos. Embora no existam outros resultados com
24-FA teve ao semelhante do tratamento 6-SA, peixes, estes confirmam os obtidos com outras es-
porm de forma menos acentuada. pcies de animais, conforme Randel et al. (1990,
Aos 120 dias de experimento, observou-se que 1992).
os testculos dos peixes do tratamento 0-SA encon- O mesmo pode ser observado com os peixes do
travam-se com clulas germinativas que caracteri- tratamento 4-SA, que apresentaram maturao
zam a fase adiantada de maturao com cistos de gonadal ainda mais atrasada que os peixes do trata-
espermatozides e espermatozides livres na luz. mento 2-SA. Aos 120 dias, pde-se apenas obser-
Com base nos resultados obtidos aos 120 dias, com- var cistos de espermatozides, poucos
parados aos observados aos 60 dias, pode-se sugerir espermatozides no lume e muitas espermatognias
que um novo ciclo de maturao estivesse ocorren- na periferia. Cabe destacar que os peixes submeti-
do, confirmando o descrito por Van Tienhoven dos a esse tratamento no apresentavam
(1983) em telesteos, e Silva (1987) como caracte- espermatozides no ducto testicular, o que refora a
rstica normal quanto tilpia-do-nilo. hiptese de que a presena de gossipol na dieta afe-
ta negativamente a maturao gonadal.
Observaes semelhantes revelaram efeitos ain-
da mais acentuados nos testculos dos peixes sub-
metidos ao tratamento 6-SA, onde foram observa-

FIG. 3. Testculo de alevinos (2-SA - 60 dias), com


espermatognias (go) na periferia tubular, FIG. 4. Testculo de alevinos (6-SA - 60 dias), desta-
cistos de espermatcitos primrios (cp) e au- cando cistos de espermatozides (cz) e ausn-
sncia de espermatozides livres na luz cia de espermatozides livres na luz tubular
tubular (asteriscos), (H/E, 200X). (asteriscos), (H/E, 200X).

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DESEMPENHO E ESPERMATOGNESE DE ALEVINOS DE TILPIA 455

FIG. 5. Testculo de alevinos (2-SA - 120 dias), apresentando cistos de espermatozides (cz), espermatozides
livres situados no lume tubular (z) e no interior do ducto testicular (dt), (H/E, 200X).

FIG. 6. Testculo de alevinos (6-SA - 120 dias). Observar cistos de espermatozides (cz) e ausncia de
espermatozides livres na luz tubular (asteriscos), (H/E, 200X).

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dos poucos cistos de espermatozides e ausncia de CASTAGNOLLI, N.; CYRINO, J.E. Piscicultura nos
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desses peixes revelaram predominncia de CHASE, C.C.; ARSHAMI JUNIOR, J.; RUTLE, J.L.;
espermatcitos primrios, classificados como mui- RANDEL, R.D. Histological characteristics of tes-
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o comparvel, em parte, com o grupo-controle
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aos 60 dias, o que permite inferir que 24% de farelo gossypol on growth of young channel catfish.
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