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3 UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO
4 FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
5 CARRERA PROFESIONAL DE ODONTOLOGIA
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12EFECTO INHIBITORIO INVITRO DEL ACEITE
13ESENCIAL DE MINTHOSTACHYS MOLLIS GRISEB (MUA) SOBRE
14MICROORGANISMOS PREVALENTES EN PATOLOGAS PERIAPICALES
15CRNICAS DE ORIGEN ENDODNTICO UNA PUNO 2016

16 PARA OPTAR EL TTULO PROFESIONAL DE:


17 CIRUJANO DENTISTA

18 DNIKA QUISPE HUMPIRI


19 JHONNY MAMANI ASCENCIO

20 PUNO - PER
21 2016
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24 UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO
25 FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
26
27 CARRERA PROFESIONAL DE ODONTOLOGIA
28 EFECTO INHIBITORIO INVITRO DEL ACEITE ESENCIAL DE MINTHOSTACHYS
29 MOLLIS GRISEB (MUA) SOBRE MICROORGANISMOS PREVALENTES EN
30 PATOLOGAS PERIAPICALES CRNICAS DE ORIGEN ENDODNTICO UNA
31 PUNO 2016

32 PARA OPTAR EL TTULO PROFESIONAL DE:


33 CIRUJANO DENTISTA

1 1

2
3
34 DNIKA QUISPE HUMPIRI
35 JHONNY MAMANI ASCENCIO

36 JURADO REVISOR CONFORMADO POR:

37PRESIDENTE: .
38 CD. Betsy Quispe Quispe

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40PRIMER MIEMBRO: .
41 CD. Nelly Beatriz Quispe Maquera

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43SEGUNDO MIEMBRO: .
44 CD. Milagros Molina Chicata

45

46DIRECTOR/ASESOR:
47 .
48 CD. Cesar Augusto Molina Chicata
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50 DEDICATORIA

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52A nuestros padres por su paciencia y comprensin, por su

53fuerza, su amor, su apoyo incondicional, por habernos

54ayudado econmicamente, moralmente y afectivamente

55durante cada uno de los das de la realizacin de este trabajo de

56investigacin.

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59 A nuestra querida hija Itzel por ser nuestra fuente de

60 inspiracin y superacin, por darnos tantas alegras y

61 por darnos ese amor tan tierno e inocente.

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71 AGRADECIMIENTOS

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73 A la Universidad Nacional del Altiplano Puno por permitirnos cumplir un gran anhelo

74 ser profesionales tiles al servicio de la nacin.


75 A la facultad de Ciencias de la Salud y a la plana de docentes que nos brindaron sus

76 conocimientos formando profesionales de la mejor manera posible.


77 A nuestro docente CD. Cesar Augusto Molina Delgado por su direccin y orientacin para

78 realizar el presente trabajo de investigacin.


79 A nuestra docente CD. Milagros Molina Chicata por su colaboracin con nuestro proyecto

80 de investigacin.

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81 A nuestra docente CD. Betsy Quispe Quispe por brindarnos sus conocimientos y por su

82 gran apoyo moral.


83 A nuestra docente Beatriz Quispe Maquera por su paciencia y colaboracin con nuestro

84 proyecto de investigacin.
85 A nuestros familiares por su apoyo incondicional.

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91 NDICE GENERAL
92 PAGINA
93 RESUMEN 11
94 1. INTRODUCCIN 13
95 2. REVISIN DE LA LITERATURA 15
96 II.1. JUSTIFICACION
97 15
98 II.2. ANTECEDENTES
99 16
100 II.3. MARCO TEORICO
101 20
102 II.3.1. Caractersticas Generales De Las Lesiones Periapicales
103 II.3.2. Clasificacin de las Lesiones Periapicales
104 II.3.3. Microbiologa Endodntica De Las Lesiones Periapicales
105 2.3.4. Microorganismos Prevalentes en Patologas Periapicales Crnicas
106 2.3.5. Plantas medicinales
107 2.3.6. Minthostachys Mollis Griseb (Mua)
108 2.3.7. Aceites esenciales

10 4

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109 2.4. OBJETIVOS DE LA INVESTIGACIN 51
110 2.5. HIPTESIS. 51
1113. MATERIAL Y MTODOS 52
112 3.1. DISEO Y TIPO
113 DE ESTUDIO. 52
114 3.2. POBLACIN Y
115 MUESTRA 52
116 3.3. OPERACIONALIZ
117 ACIN DE VARIABLES 53
118 3.4. MTOD
119 OS 54
120 3.4.1. Mtodo para la obtencin el aceite esencial de Minthostachys Mollis Griseb (mua)
121 mediante extraccin por arrastre a vapor
122 3.4.2. Mtodo de recoleccin y cultivo de muestra de conducto radicular
123 3.4.3. Metodologa para la identificacin de Staphylococcus Aureus
124 3.4.4. Mtodo para la identificacin de Enterococcus Faecalis
125 3.4.5. Mtodo para la identificacin de Cndida Albicans
126 3.4.6. Mtodos previos de laboratorio
127 3.4.7. Mtodo para determinar la concentracin mnima inhibitoria (CMI)
128 3.4.8. Preparacin de los discos de sensibilidad
129 3.4.9. Prueba de susceptibilidad microbiana
130 3.4.10. Determinacin de la concentracin mnima inhibitoria (CMI)
131 3.4.11. Recoleccin de datos

132RESULTADOS Y DISCUSIONES 62
133CONCLUSIONES 78
134RECOMENDACIONES 79
135BIBLIOGRAFA 80
136ANEXOS 83
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145 NDICE DE FIGURAS
146 Pg.
147Figura 1. Vas locales infecciosas de lesiones apicales ..........................................................
148Figura 2. Vas de acceso al sector apical.................................................................................
149Figura 3. Tincin de Gram: Cocos Gram positivo...................................................................
150Figura 4. Microfotografa, tomada con un microscopio electrnico de barrido......................
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178 INDICE DE TABLAS
179 Pg.
180Tabla 1. Anlisis estadsticos descriptivos de la accin del aceite esencial de
181 Minthostachys Mollis Griseb (mua) en sus diferentes concentraciones y
182 del Paramonoclorofenol Alcanforado sobre el Staphilococcus
183 Aureus...................................................................................
184Tabla 2. Anlisis de la varianza (ANOVA) unifactorial de la accin del aceite de
185 Minthostachys Mollis Griseb (mua) en sus diferentes concentraciones y
186 del Paramonoclorofenol Alcanforado sobre Staphilococcus Aureus........................
187Tabla 3. Prueba POST HOC a travs de HSD TUKEY, diferencias significativas entre los grupos
188de aceites esenciales de Minthostachys Mollis Griseb (mua) y sus efectos sobre el
189Staphilococcus Aureus.........64

190Tabla 4. Subconjuntos de homogneidad HSD TUKEY basados en las medias de los


191 aceites esenciales de Minthostachys Mollis Griseb utilizados en la
192 inhibicin del Staphilococcus Aureus.......................................................................
193Tabla 5. Anlisis estadsticos descriptivos de la accin de aceite esencial de
194 Minthostachys Mollis Griseb(mua) en sus diferentes concentraciones y
195 del Paramonoclorofenol Alcanforado sobre el Enterococcus Faecalis
196 ..................................................................
197Tabla 6. Anlisis de la varianza (ANOVA) unifactorial de la accin del aceite de
198 esencial de Minthostachys Mollis Griseb (mua) en sus diferentes
199 concentraciones y del Paramonoclorofenol Alcanforado sobre
200 Enterococcus Faecalis..........................................................
201 Tabla 7. Prueba POST HOC a travs de HSD TUKEY (comparaciones mltiples) diferencias
202 significativas entre los grupos de aceites esenciales de Minthostachys Mollis Griseb (mua y sus
203 efectos sobre Enterococcus Faecalis...69

204Tabla 8. Subconjuntos de homogneidad HSD TUKEY basados en las medias de los


205 aceites esenciales de Minthostachys Mollis Grise (mua) utilizados en la
206 inhibicin del Enterococcus Faecalis.......................................................................
207Tabla 9. Anlisis estadsticos descriptivos de la accin del aceite esencial de
208 Minthostachys Mollis Griseb (mua) en sus diferentes concentraciones y
209 del Paramonoclorofenol Alcanforado sobre Cndida
210 Albicans........................................................................
211Tabla 10. Anlisis de la varianza (ANOVA) unifactorial de la accin del aceite
212 esencial de Minthostachys Mollis Griseb (mua) en sus diferentes
213 concentraciones y del Paramonoclorofenol Alcanforado sobre Cndida
214 Albicans................................................................................
215 Tabla 11. Prueba POST HOC a travs de HSD TUKEY (comparaciones mltiples) diferencias
216 significativas entre los grupos de aceites esenciales de Minthostachys Mollis Griseb (mua) y sus
217 efectos sobre la Cndida Albicans..74

218Tabla 12. Subconjuntos de homogeneidad HSD TUKEY basados en las medias de


219 los aceites esenciales de Minthostachys Mollis Griseb (mua) utilizados en
220 la inhibicin de la Cndida Albicans....................................
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236 INDICE DE ACRNIMOS

237QS = quorum sensing

238PMN = polimorfonucleares

239PAA = periodontitis apical aguda

240PAC = periodontitis apical crnica

241AAA = absceso apical agudo

242AAC = absceso apical crnico

243LPS = lipopolisacridos

244EDTA = cido etilendiaminotetraactico

245NAOCL = hipoclorito de sodio


246CHX = clorexidina

247CA(OH)2 = hidrxido de calcio

248CO2 = dixido de carbono

249PMNF = paramonoclorofenol

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260 RESUMEN

261El objetivo de la presente investigacin fue determinar el efecto inhibitorio in vitro del
262aceite esencial de Minthostachys Mollis Griseb (mua) frente a cepas de Staphylococcus
263Aureus, Enterococcus faecalis y Cndida Albicans, microorganismos de alta prevalencia en
264patologas periapicales crnicas de origen endodntico. Se evalu la susceptibilidad
265utilizando el mtodo de difusin de discos o Kirby-Bauer. Se utilizaron 120 placas Petri
266con agar Muller-Hinton; 40 por cada especie, donde se sembraron las cepas de
267Staphylococcus Aureus, Enterococcus Faecalis y Cndida Albicans y se colocaron los
268discos con el aceite esencial de mua al 100% y en dilucin etanlica al 75%, 50 % y 25%.
269Las placas se incubaron a 37C en estufa, se evalu las placas midiendo el halo de
270inhibicin de cada disco a las 12 horas utilizando una regla de Vernier. Se recolectaron los
271datos en la ficha matriz de recoleccin. Concluyndose que el aceite de Minthostachys
272Mollis Griseb (mua), present una gran actividad inhibitoria sobre las muestras de
273microorganismos en estudio: Enterococcus Faecalis, Staphylococcus Aureus y Cndida
274Albicans, esta actividad inhibitoria fue mayor a la del Paramonoclorofenol Alcanforado.

275Palabras claves: Mua, Aceite , Staphylococcus, Enterococcus, Cndida.

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291 ABSTRACT

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293The objective of the present investigation was to determine the in vitro inhibitory effect of

294the essential oil of Minthostachis mollis griseb (mua) against strains of Staphylococcus

295Aureus, Enterococcus faecalis and Candida Albicans, microorganisms of high prevalence

296in chronic periapical pathologies of endodontic origin. The susceptibility was evaluated

297using the disc diffusion method or Kirby-Bauer. 120 Petri dishes with Muller-Hinton 40

298agar per species were used where the strains of Staphylococcus Aureus, Enterococcus

299faecalis and Candida Albicans were planted and the discs were placed with the 100%

300essential oil and at 75% ethanolic dilution, , 50% and 25%. Plates were incubated at 37 C

301in an oven, plates were evaluated by measuring the inhibition halo of each disk at 12 hours

302using a Vernier rule. Data were collected on the collection matrix. It was concluded that

303minthostachys mollis griseb (mua) oil had a high inhibitory activity on the samples of
304microorganisms under study: Enterococcus Faecalis, Staphylococcus Aureus and Candida

305Albicans, this inhibitory activity was higher than that of Paramonochlorophenol

306Alcanforado.

307Key words: Mua, Oil, Staphylococcus, Enterococcus, Cndida.

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317 I. CAPITULO I: INTRODUCCIN


318

319En la actualidad un gran porcentaje de los tratamientos que se realizan en la odontologa


320son las terapias de conductos, que van desde el tratamiento de dientes vitales infectados,
321hasta el tratamiento de dientes necrticos; en donde la infeccin ha alcanzado tejidos
322perirradiculares, los tratamientos de conductos se realizan mediante la aplicacin de
323diferentes procedimientos para su tratamiento, cuyo objetivo principal es la eliminacin
324completa de los agentes biolgicos, sus subproductos causantes de la infeccin por medio
325de distintas tcnicas (instrumentacin, medicacin intracanal y obturacin). A pesar del
326avance en las tcnicas de tratamiento en algunas circunstancias se presentan agudizaciones
327entre citas as como reagudizaciones de tratamientos finalizados

328El proceso evolutivo de las infecciones de los conductos radiculares posee numerosos
329estudios a lo largo del tiempo. Y es as que a mediados del siglo XX, los diferentes
330estudios realizados ya describan a algunos microorganismos aerobios y anaerobios
331facultativos como los de mayor prevalencia en las infecciones de conductos radiculares.
332Recientemente se desarrollaron nuevas tcnicas de cultivo e identificacin de
333microorganismos, los cuales han realizado considerables progresos con respecto a la
334etiopatognesis de las infecciones endodnticas, demostrando la naturaleza polimicrobiana
335de sta, as como la prevalencia de microorganismos. Actualmente las investigaciones
336concernientes al sistema de conductos radiculares refieren la prevalencia, junto a los
337microorganismos anaerobios estrictos, de microorganismos facultativos, los cuales son
338Enteroccocua. Faecalis, Staphylococcus Aureus y Cndida Albicans responsables de la
339sintomatologa persistente. A si mismo se viene investigando numerosas opciones
340alternativas a los antibiticos tradicionales, tal es el caso del uso de plantas con
341propiedades medicinales aplicadas a diversas reas de la medicina, como una opcin
342alternativa, claro est que su uso no se remonta estrictamente a esta poca sino que viene
343desde hace siglos atrs, puesto que nuestros antepasados hacan uso de estas plantas para
344aliviar diversas dolencias que los aquejaban, esto es un motivo ms para revalorar estos
345recursos en beneficio de nuestra poblacin.
346
347La "Mua" es una planta oriunda de la sierra del Per que tiene mltiples usos: Para tratar
348malestares gastrointestinales, como condimento, para repeler insectos de los cultivos,
349proteger las cosechas de la putrefaccin, en tratamiento de tumores, inflamaciones, asma,
350halitosis, entre otros.
351En el presente estudio se investiga la efectividad antibacteriana del aceite esencial de
352Minthostachys mollis mua en distintas diluciones frente a bacterias relacionadas con la
353etiologa y desarrollo de patologas periapicales crnicas de origen endodntico; siendo
354ste un estudio pionero en la regin, para lo cual las ciencias bsicas se integran para
355obtener los conocimientos deseados a partir de esta investigacin.
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374 II. CAPITULO II: REVISIN DE LA LITERATURA


375
376 II.4.................................................................................................JUSTIFICACIN
377La patologa pulpar y periapical son enfermedades inflamatorias de etiologa microbiana,
378los microorganismos y sus productos desempean un papel relevante en la induccin, la
379progresin y la perpetuacin de tales patologas;1 las bacterias presentes en la pulpa dental
380necrtica y en los tejidos radiculares infectados, son un nmero reducido de especies a
381comparacin con la flora oral total, esto es debido a que existen condiciones especiales de
382tal manera que ciertas bacterias sean ms patgenas que otras en dichas zonas.2 Es
383conocida la estrecha relacin existente entre microorganismos y patologa de origen
384endodntico.3

385Ms de 150 especies microbianas se han aislado de canales infectados, generalmente en


386infecciones mixtas que consisten en cuatro a siete diversas especies y con predominio de
387bacterias anaerobias facultativas,4 que es el tipo de microflora responsable de la alteracin
388a nivel periapical, entre los que se destacan Staphylococcus Aureus, Enterococcus
389Faecalis, entre otros.5 Asimismo tenemos casos de presencia de hongos como la Cndida
390Albicans en la pulpa dental infectada y en tbulos dentinarios de pacientes sanos.6

391El objetivo principal de la Endodoncia es devolver al diente la normalidad clnica y


392ausentar los signos y sntomas patolgicos, que permanecen en el sistema intracanal
393otorgando un ptimo estado para su obturacin y consecuentemente, la reparacin de los
394tejidos periapicales.7 Para cumplir este objetivo existen sustancias qumicas que eliminan e
395inhiben el crecimiento bacteriano y la liberacin de sus toxinas, dentro de estas sustancias
396tenemos a irrigantes, detergentes, quelantes y medicamentos intraconductos, dentro de este
397ltimo grupo destaca la presencia del paramonoclorofenol alcanforado y el hidrxido de
398calcio.8

399A pesar de todos los alcances que ofrece la endodoncia todava hay casos en que ocurren
400infecciones persistentes post tratamiento endodntico, estudios demostraron que ciertas
401bacterias penetran profundamente en los tbulos dentinarios del conducto radicular que
402hace muy difcil su eliminacin a la hora de la instrumentacin biomecnica, desinfeccin
403con los irrigantes antispticos o colocacin de medicamento intracanal.6

404En diversos trabajos de investigacin que se realizan en la actualidad en diversas partes del
405mundo, se destaca que cada vez se est dando mayor importancia al estudio de las plantas
406medicinales como una alternativa al tratamiento de diversas patologas, y las afecciones
407bucodentales no son la excepcin. El Per, considerado el tercer pas con mayor diversidad
408del planeta, ha efectuado importantes aportes de especies y variedades para el mundo
409gracias a los diversos pisos ecolgicos y microclimas que presenta, contando con 84 zonas
410de vida de las 103 conocidas donde habra 50 mil especies vegetales (20% de las existentes
411en la Tierra) de las que 2,000 han sido utilizadas con fines curativos.9

412Estudios realizados demuestran que Minthostachys Mollis Griseb mua, planta


413medicinal que crece en nuestra sierra, tiene una marcada efectividad sobre microrganismos
414orales9; plantendonos con esos resultados la posibilidad de que dicha sustancia sea
415efectiva en la eliminacin de microrganismos prevalentes en patologa periapicales de
416origen endodntico y con antecedentes de resistencia al tratamiento normal,
417constituyndose en el motivo del presente trabajo de investigacin.

418

419 II.5................................................................................................ ANTECEDENTES


420 II.5.1. Antecedentes internacionales
421 Aigaje A. (2016) Efectividad antimicrobiana del aceite esencial de
422 Minthostachys Mollis al 25, 50, 100 % frente a Porphyromonas Gingivalis
423 estudio in vitro.
424 El propsito de esta investigacin fue determinar la actividad antibacteriana de la
425 Minthostachys Mollis frente a la Porphyromonas Gingivalis que es uno de los
426 principales periodontopatgenos. Se elabor un aceite esencial utilizando la
427 tcnica de destilacin por arrastre de vapor de agua, obteniendo 10ml luego del
428 procedimiento, el mismo que fue diluido para obtener tres concentraciones al
429 25%, 50% y 100%, se utiliz Clorhexidina al 0,12% y Ampicilina de 10ug como
430 control positivo y agua como control negativo. Al realizar las pruebas de
431 sensibilidad in vitro, se obtuvo los siguientes resultados: la efectividad
432 antibacteriana en la concentracin al 25% obtuvo un halo promedio de 11,2 mm,
433 al 50% la efectividad alcanz un halo promedio de 9,6 mm y al 100% logr un
434 halo promedio de 13,6 mm siendo esta concentracin la ms efectiva. Los
435 controles positivos estuvieron en un rango de muy sensibles y sumamente
436 sensibles y el control negativo no obtuvo efectividad.10
438 Pellegrini M.C. y Col. (2014) Deteccin anti- qurum y la actividad
439 antimicrobiana de las especies aromticas de Amrica del Sur
440 La deteccin de qurum (QS) es un mecanismo de comunicacin bacteriana que
441 depende de la densidad de poblacin. La interrupcin de QS es un ejemplo de un
442 efecto antipatgeno. Investigamos el anti-QS y las propiedades antimicrobianas de
443 los aceites esenciales de Argentina: Salvia Officinalis, Mollis Minthostachys,
444 Satureja Odora, Schinus Molle, Floribunda Lepechinia y Artemisia Annua. La
445 actividad anti-QS se determin midiendo la produccin de violacena en
446 Chromobacterium Violaceum a travs de espectrofotometra UV-visible y la
447 mnima concentracin inhibitoria QS (MQSIC) se calcul. La actividad
448 antimicrobiana se determin utilizando Escherichia Coli, Listeria Innocua Y
449 Staphylococcus Aureus como indicadores. concentracin mnima inhibitoria
450 (MIC) y la concentracin mnima bactericida (MBC) se determinaron mediante la
451 realizacin del ensayo de microdilucin en caldo. Minthostachys Mollis mostro
452 estadsticamente significativas propiedades de inhibicin de QS. Este aceite
453 esencial reduce la produccin de pigmentos en un 90% cuando se aplic a una
454 concentracin subletal (/ v 0,02% v). Por el contrario, la mayor actividad
455 bacteriosttica y bactericida se exhiba por el aceite esencial de Minthostachys
456 Mollis es un buen candidato para el desarrollo de productos anti-QS con una
457 potencial aplicacin en el control de enfermedades bacterianas mediadas por QS.
458 Como esta estrategia interfiere con la expresin de rasgos patgenos en lugar de
459 matar el microorganismo o impedir el crecimiento microbiano, que evita el
460 problema de la resistencia11.
461
462 II.5.2. Antecedentes Nacionales
463 Alaba W., Jimnez C. (2014) Efecto inhibitorio in vitro del aceite esencial de las
464 hojas de Minthostachys Mollis (mua) sobre colonias de Enterococcus faecalis
465 ATCC 29212.
466 El objetivo de la presente investigacin fue determinar y comparar el efecto
467 inhibitorio in vitro del IKI al 2% y el aceite esencial de Minthostachis Mollis
468 (mua) frente a cepas de Enterococcus Faecalis. Se evalu la susceptibilidad
469 utilizando el mtodo de difusin de discos o Kirby-Bauer. Se utilizaron 7 placas
470 Petri con agar Muller-Hinton donde se sembraron las cepas del E. faecalis y se
471 colocaron los discos con el IKI al 2 % o con el aceite esencial de mua al 100% y
472 en dilucin etanlica al 50 %. Las placas se incubaron a 37C en estufa, se evalo
473 las placas midiendo el halo de inhibicin de cada disco a las 24, 48 y 72 horas
474 utilizando una regla milimetrada. A las 24 horas todos los discos produjeron un
475 halo de inhibicin, donde el mayor registrado fue el del aceite esencial al 100%, y
476 el de menor promedio fue el del IKI al 2 % los halos disminuyeron de tamao en
477 la lectura a las 72 horas. Por lo cual se concluy que el aceite esencial de
478 Minthostachys Mollis (mua) al 100% posee mayor actividad inhibitoria in vitro
479 sobre el crecimiento del Enteroccocus Faecalis que el IKI al 2% y la dilucin
480 etanlica de aceite esencial al 50%.12
481
482 Azaa I. (2010) Efectividad in vitro del aceite esencial de Minthostachys Mollis
483 Griseb (mua) sobre bacterias prevalentes en patologas periapicales crnicas
484 de origen endodntico.
485 El objetivo de la presente investigacin fue determinar la efectividad
486 antibacteriana in vitro del aceite esencial de Minthostachys mollis Griseb Mua
487 tanto cuantitativamente como cualitativamente, mediante el mtodo de difusin en
488 agar con disco, frente a tres cepas de bacterias prevalentes de patognesis
489 periapical crnica: Fusobacterium Nucleatum ATCC 25586, Prevotella
490 Melaninognica ATCC 25845, Enterococcus Faecalis ATCC 29212 y muestras de
491 conducto radicular con Periodontitis Apical Crnica. Se obtuvo el aceite esencial
492 de principios activos totales de las hojas secas, talluelos y flores de la planta
493 mediante arrastre por vapor de agua. Posteriormente, el aceite se diluy en alcohol
494 etlico al 70 en las concentraciones de 25% y 50%. Estas diluciones, junto a la
495 dilucin pura, fueron comparadas con Paramonoclorofenol alcanforado como
496 control positivo y con alcohol etlico al 70, como control negativo. Al realizar las
497 pruebas de sensibilidad in vitro se obtuvieron los siguientes resultados: el aceite
498 esencial de Minthostachys mollis mua puro y en sus diluciones present
499 efectividad antibacteriana tanto cuantitativamente como cualitativamente mayor al
500 alcohol etlico al 70 y menor al Paramonoclorofenol alcanforado frente a las
501 muestras bacterianas en estudio.13
503 II.5.3. Antecedente Local
504 Molina M.(2007) Estudio in vitro del efecto antibacteriano de la Minthostachys
505 Mollis Griseb (Mua) comparado con la amoxicilina frente a la placa
506 supragingival, en la clnica odontolgica UNA Puno 2007.
507 La investigacin tuvo por objetivo determinar in vitro el efecto antibacteriano de
508 la Minthostachys Mollis Griseb (Mua), comparado con la amoxicilina, frente a
509 bacterias de la placa supragingival. La poblacin para este estudio fue de 36
510 muestras. La tcnica incluyo el uso de fichas de observacin estructuradas
511 mediante las cuales se registr la medicin del halo de inhibicin de la
512 amoxicilina y Minthostachys Mollis Griseb, cuyos indicadores estadsticos a las
513 24 horas se observ 22.133mm para amoxicilina y 23.75mm para Minthostachys
514 Mollis Griseb y a las 48 horas 21.777 mm para amoxicilina y 21.61 mm para
515 Minthostachys Mollis Griseb. Por lo cual se concluy que el efecto antibacteriano
516 de la Minthostachys Mollis Griseb es positivo y en menor grado que la
517 amoxicilina frente a bacterias de la placa supragingival a las 24 y 48 horas.14

II.6.
532 MARCO TERICO
533
II.6.1.
534Caractersticas Generales De Las Lesiones Periapicales
535
536 Espacio Periapical
537 La regin periapical tiene una casi ilimitada fuente de clulas indiferenciadas, que
538pueden participar en el proceso inflamatorio, as como tambin en el proceso reparativo.13
539 Los tejidos periapicales son tambin ricos en suplemento sanguneo colateral y
540drenaje linftico, esto lo diferencia de los tejidos pulpares. Tambin estas caractersticas le
541permiten, a los tejidos periapicales, contrarrestar los elementos destructivos relacionados
542con los irritantes de los conductos y de la inflamacin resultante.13
544 Patognesis de las lesiones periapicales

545 Las lesiones periapicales pueden ser consideradas lesiones infecciosas endgenas
546multifactoriales, con el husped que juega un rol significativo en el proceso inflamatorio.
547El egreso de microorganismos, sus derivados, y los tejidos alterados de los canales
548radiculares hacia los tejidos perirradiculares pueden iniciar la formacin y/o perpetuacin
549de estas lesiones.13
550
551 Dependiendo de la fase de desarrollo, una evaluacin de estas lesiones revela
552numerosas clulas inflamatorias como neutrfilos polimorfonucleares (PMN), macrfagos,
553linfocitos, clulas plasmticas, clulas mastoides, basfilos, y eosinfilos. Una interaccin
554entre los irritantes exgenos y estas clulas defensivas del hospedador, pueden producir
555una expulsin de varios mediadores qumicos endgenos como neuropptidos, pptidos
556fibrinolticos, pptidos, quininas, fragmentos del complemento, aminas vasoactivas,
557enzimas lisosomales, citoquinas y mediadores de reacciones inmunolgicas. Una de las
558caractersticas ms relevantes del desarrollo de las lesiones periapicales es la resorcin
559sea, aunque el proceso patognico an no ha sido muy bien establecido.13

II.6.2. Clasificacin de las Lesiones Periapicales


563
564 Las lesiones periapicales de origen pulpar son clasificadas sobre la base de
565descubrimientos clnicos e histopatolgicos. Esta seleccin comprende periodontitis apical
566aguda, periodontitis apical crnica, absceso apical agudo y absceso apical crnico.13

567 Las lesiones agudas son aquellas que presentan dolor y los signos ms serios, y las
568lesiones crnicas son aquellas que no tienen sintomatologa relevante. Es evidente que en
569el tratamiento de estas lesiones, el factor ms importante es la medicacin antibacteriana.13
570
571 Periodontitis Apical Aguda (Sintomtica).- Es una inflamacin circunscrita del
572 ligamento periodontal en la regin apical. Las principales causas son irritantes que se
573 difunden desde una pulpa inflamada o necrtica, la salida de irritantes como
574 bacterias, toxinas bacterianas, medicamentos desinfectantes, residuos empujados
575 hacia los tejidos periapicales o irritacin fsica de los tejidos periodontales puede
576 ocasionar periodontitis apical sintomtica.15 La sensibilidad a la percusin es la
577 principal caracterstica clnica, el dolor vara desde la hipersensibilidad leve hasta el
578 dolor intenso. La liberacin de los mediadores de la inflamacin ocasiona
579 degradacin del ligamento periodontal y resorcin del hueso alveolar.15
581 Periodontitis Apical Crnica (Asintomtica).- Puede ir precedida de Periodontitis
582 apical sintomtica o Absceso apical. Sin embargo, la lesin a menudo se desarrolla y
583 crece sin signos y sntomas subjetivos. El tratamiento inadecuado de conductos
584 radiculares tambin origina el desarrollo de estas lesiones. En general, una pulpa
585 necrtica gradualmente libera agentes nocivos de escasa patogenicidad o en
586 concentraciones bajas que dan origen al desarrollo de una Periodontitis apical
587 asintmatica (PAC). Por lo general se acompaa de una resorcin sea perirradicular
588 que es visible en las radiografas.15
589 El paciente por lo general no refiere dolor importante y las pruebas revelan dolor
590 mnimo o nulo a la percusin. No obstante, si la Periodontitis apical asintomtica
591 perfora la lmina cortical del hueso, la palpacin de los tejidos superpuestos
592 ocasionar malestar. El diente asociado tiene una pulpa necrtica y por tanto no
593 responder estmulos elctricos o trmicos.16
594
595 A la periodontitis apical crnica se le asocia a:
596 Granuloma perirradicular: Desde el punto de vista histolgica consta
597 predominantemente de tejido inflamatorio de granulacin con capilares
598 pequeos, fibroblastos, mltiples fibras de tejido conectivo. Este tejido
599 reemplaza al ligamento periodontal.15
600
601 Quiste perirradicular: Histolgicamente es una cavidad central, revestida de
602 epitelio escamoso estratificado. La luz del quiste contiene un lquido plido
603 eosinfilo y en ocasiones algunos residuos celulares.15
604
605 Absceso Apical.- Es una concentracin circunscrita de pus en una cavidad
606 formada por la desintegracin de los tejidos. Segn el grado de formacin y
607 excresin de exudado, la intensidad del dolor y la presencia o ausencia de signos y
608 sntomas generales, los abscesos pueden dividirse en:15,16
609
610 Absceso apical sintomtico: Es un proceso inflamatorio en los tejidos
611 perirradiculares de los dientes, que se acompaa de la formacin de exudado
612 dentro de la lesin. Una causa frecuente es una afluencia rpida de
613 microorganismos o sus productos, desde el sistema de conductos radiculares.
614 El paciente puede o no mostrar tumefaccin que puede ser localizada o difusa.
615 Al exmen clnico el diente revela diversos grados de sensibilidad a la
616 percusin y a la palpacin. No existe reaccin al fro, el calor o los estmulos
617 elctricos, ya que la pulpa del diente afectado esta necrosada.15,16
618 La diseminacin de la respuesta inflamatoria hacia el hueso esponjoso ocasiona
619 resorcin sea apical. Debido a la presin causada por la acumulacin de
620 exudado dentro de los tejidos limitantes, el dolor es intenso. Con mayor
621 frecuencia la tumefaccin permanece localizada, aunque puede tornarse difusa
622 y diseminarse de forma amplia (celulitis).17
623 El lugar del rea de la tumefaccin es determinado por la relacin del pice del
624 diente afectado con las inserciones musculares. El proceso de supuracin busca
625 lneas de menor resistencia, y con el tiempo perfora la placa cortical. Cuando
626 llega a los tejidos blandos, la presin sobre el periostio se libera, y por lo
627 general se reducen los sntomas.15,16
629 Absceso apical asintomtico: Est relacionado con la salida gradual de
630 irritantes del sistema de conductos radiculares hacia los tejidos perirradiculares
631 y la formacin de un exudado. Se asocia con un trayecto fistuloso que drena en
632 forma continua o intermitente. Esto se manifiesta como un estoma sobre la
633 mucosa bucal o, en ocasiones, sobre la piel de la cara. El exudado tambin
634 puede drenar a travs del surco gingival del diente afectado, imitando una
635 lesin periodontal conbolsa.15
636 Si se obstruye el trayecto de la fstula, se producir diversos grados de dolor.
637 Al examen clnico se presentar sensibilidad a la percusin y a la palpacin,
638 dependiendo si la fstula est abierta y drenando o cerrada. Las pruebas de
639 vitalidad son negativas, debido a que las pulpas estn necrosadas. Al exmen
640 radiogrfico revelar prdida sea a nivel del pice del diente afectado. Estos
641 trayectos fistulosos, tengan o no revestimiento, se resuelven tras el tratamiento
642 del conducto radicular, con el que se elimina la causa.15
643

644

645

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650

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653

654

655 Cuadro n1. CLASIFICACIN DE LAS LESIONES PERIAPICALES 13

Periodontitis apical Periodontitis apical Absceso apical Absceso apical


aguda(PAA) crnica (PAC) agudo (AAA) crnico
(AAC)


Causado por la Consecuencia de Resulta cuando General ente
primera extensin necrosis pulpar y egresa un nmero asociado una PAC.
de la inflamacin generalmente se grande de Este absceso ha
ETIOLOGIA
en los tejidos presenta como una bacterias a travs perforado a travs
periapicales. continuacin de la del pice y de la mucosa o
Pulpitis PAA. provoca una incluso la piel
irreversible o respuesta como una fstula.
necrosis pulpar. inflamatoria
severa.
Dolor de leve a Generalmente Dolor moderado Generalmente
severo a diversos asintomtico o con severo. asintomtica,
estmulos como: una molestia Existen debido a la
fro, caliente, mnima. manifestaciones liberacin de la
SIGNOS Y masticacin. Respuesta negativa a sistmicas: presin
SINTOMAS Existe una respuesta estmulos temperatura, establecida por
positiva a pruebas provocados. tumefaccin, la fstula.
de la palpacin. Un ligero dolor a la Siempre responde El resto de las
Radiogrficamente prueba de a la percusin y caractersticas
existe un ligero percusin. palpacin. clnicas y
ensanchamiento del Radiogrficamente es Radiogrficamente radiogrficas son
espacio periodontal. imposible hay un similares a los de
Generalmente normal. diagnosticar un ensanchamiento PAC.
quiste. del espacio
periodontal.

Presencia de PMN y Clasificado en quistes Tejidos con Caractersticas


macrfagos. y granulomas. necrosis por histopatolgicas
Existen reas El granuloma licuefaccin. similares a las de
CARACTERSTI PAC.
pequeas de consiste en tejido Exudado
CAS A veces existen
necrosis de granulomatoso purulento.
clulas epiteliales
HISTOLOGICAS licuefaccin y infiltrado por Se observa tejido
resorcin sea clulas granulomatoso que rodean el tracto
radicular. inflamatorias. que rodea la fistuloso.
lesin.
La remocin de los La remocin de los La remocin de Un tratamiento
irritantes locales, el irritantes locales y irritantes, el endodntico es
alivio de la oclusin la teraputica drenaje, la apropiado ya
TRATAMIENTO
o cualquier convencional son terapia rutinaria y que siempre
teraputica tiles. la medicacin alivia los
convencional es El uso de CaOH2 antibitica, son sntomas.
conveniente. tambin. tiles en estos
casos.
656

657

6582.3.3. Microbiologa endodntica de las lesiones periapicales

659 2.3.3.1. Flora microbiana involucrada en las lesiones periapicales

660 Las diferentes caractersticas de los elementos constituyentes de la cavidad bucal


661favorecen a la aparicin de microsistemas bacterianos. Los tejidos duros dentarios tienen la
662propiedad de actuar como barreras mecnicas que impiden la invasin microbiana hacia la
663pulpa y es as; que las enfermedades pulpares y periapicales, puede ser resultado de la
664presencia de bacterias y otros microorganismos, causantes del fracaso endodnticos a pesar
665del tratamiento. La pulpa se ve comprometida cuando los microorganismos invaden los
666tbulillos dentinarios, suceso que ocurre si la zona dentinaria queda expuesta en la cavidad
667bucal, ocasionada por caries dental, tratamientos de operatoria dental mal realizados a
668procesos periodontales, fisuras de esmalte o dentina y traumatismo. 18

669 Caractersticas para que los microorganismos puedan sobrevivir en los conductos
670 radiculares:
671 o El ambiente de los conductos radiculares, tiene que permitir la supervivencia
672 crecimiento y desarrollo del microorganismo.
673 o El microorganismo debe estar localizado a nivel de las redes dentarias; de tal
674 manera que, sus factores de patogenicidad puedan llegar a tejidos que rodean al
675 diente.
676 o Debe poseer factores de virulencia.
677 o Tiene que presentar en un nmero propicio para originar y mantener la lesin
678 perirradicular.18

679 En los estados tempranos de la infeccin, la cantidad de oxgeno en los canales


680radiculares es amplia debido a que proviene de la microcirculacin de la sangre y de la
681cavidad expuesta, esto podra explicar la prevalencia de las bacterias facultativas. A medida
682que el tiempo pasa, el potencial de oxidoreduccin baja en los canales, debido a la necrosis
683de los tejidos y el consumo del oxgeno por las bacterias facultativas. Este ambiente es
684ideal para los anaerobios estrictos.19

688

689 2.3.3.2.Presencia y rol de las bacterias en el desarrollo de las lesiones periapicales

690 En nuestros das, ha sido ampliamente demostrado que las bacterias y sus productos
691patognicos, juegan un rol importantsimo en el desarrollo y el mantenimiento de las
692lesiones pulpares y periapicales. Tambin se sabe que las infecciones de los canales
693radiculares y los tejidos periapicales son polimicrobian0s y que tienen una predominancia
694de microorganismos anaerobios.20

695 Invasin bacteriana a la cmara pulpar y los canales radiculares

696 Cuando agentes irritantes o microorganismos que se originan del contenido de los
697conductos radiculares llegan a la zona periapical, ya sea a travs del foramen apical
698principal, o a travs de conductos laterales, producen sucesos inflamatorios que afectan los
699tejidos del peripice.21

700 Los agentes irritantes pueden tener distintas vas de acceso al sector apical como
701 son:21
-
702 Por va de la Pulpa Radicular: Debido a un sin nmero de agentes irritantes
703 principalmente la caries, la pulpa puede verse afectada. Los productos de la
704 degeneracin de la pulpa ante un estmulo irritante se diseminan por los
705 conductos radiculares y llegan al tejido periapical, en el cual desata una serie de
706 reacciones inflamatorias en el tejido del peripice que tuvieron origen
707 endodntico. El foramen apical, es el principal medio de comunicacin por el
708 cual microorganismos y sus productos de desecho pueden llegar a diseminarse
709 por los tejidos del peripice, ocasionando una inflamacin local que conduce a
710 la reabsorcin del hueso y de la raz. En resumen mediante la va de la pulpa
711 radicular distintos agentes irritantes en especial microorganismos pueden llegar
712 al sector apical.21
714 - Por va Periodontal: Existen vas de comunicacin entre el periodonto y la
715 pulpa a travs del foramen apical y de los canales laterales, lo que permite el
716 paso de agentes nocivos de una zona a la otra cuando alguno de los dos, o
717 ambos, se encuentran alterados. Tambin pueden ocurrir procesos degenerativos
718 en los dientes, o incluso tratamientos periodontales como raspados radiculares
719 pueden ocasionar la migracin de bacterias a la zona apical o incluso puede
720 ocasionar la exposicin de los tbulos dentinarios. La estrecha relacin que
721 existe entre el periodonto y la pulpa dificulta en muchas ocasiones el
722 diagnstico diferencial de las lesiones que tienen lugar en ambos.21

723 Como se observa en la (figura 1) las vas principales de infeccin a la zona apical son
724la necrosis pulpar o por va pulpar y la va periodontal:

725

726

727

728

729

730

731 Figura 1. Vas locales infecciosas de lesiones apicales (1) Necrosis pulpar (2)
732Enfermedad periodontal. 21

733 - Por va Endgena: Distintos factores endgenos son vas para que agentes
734 nocivos lleguen al sector apical como son los traumatismos, ya que en caso de
735 un accidente pueden migrar bacterias u otros factores y ocasionar inflamaciones
736 de los tejidos periapicales, adems tambin se conoce que la compresin que
737 originan los quistes en el tejido periapical al igual que los tumores pueden
738 producir gran dao a los tejidos periapicales.21
739
740 - Por va Sangunea: En esta va los microorganismos se diseminan a travs del
741 torrente sanguneo hacia la pulpa de un diente que no est infectado pero que
742 presenta una inflamacin pulpar.21

743

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752

753 Figura 2. Vas de acceso al sector apical. (I) Por va pulpar (II) Por va periodontal
754(III) Por va endgena (IV) Por va sangunea.21

755 Patogenicidad de la flora microbiana de canales radiculares y tejidos periapicales


756 infectados

757 La sola presencia de bacterias en los canales radiculares o en los tejidos periapicales,
758no implica que se vaya a producir una infeccin y sus consecuencias sintomatolgicas.
759Esto depender de la interaccin de los siguientes factores: nmero de clulas bacterianas,
760virulencia de las bacterias, duracin de la agresin y la resistencia del hospedador.13

761 Los componentes estructurales que son considerados como factores de virulencia
762son: lipopolisacridos (LPS), cpsula, peptidoglicano, fimbrias, lipoprotenas y cidos
763lipoproteicos. Las bacterias Gramnegativas contienen LPS en su estructura y son causantes
764de actividades biolgicas tales como: induccin febril, reaccin de Shwartzman, actividad
765adyuvante y citotoxicidad.13

766 Las enzimas que son consideradas como factores de virulencia y que provienen de
767bacterias aisladas de conducto radiculares y tejidos periapicales infectados son: colagenasa,
768hialuronidasa, condroitinsulfatasa, cido fosfatasa, fibrinolisina, hemolisina, coagulasa y
769otras proteasas. Existen muchos productos del metabolismo de las especies bacterianas que
770estn involucradas en su patogenicidad. cidos grasos de cadena corta, amoniaco,
771compuestos sulfurados, indol, poliaminas, etc. Las bacterias tienen que atravesar muchas
772fases para producir una infeccin. Estos son: adherencia, colonizacin, invasin,
773sobrevivencia y dao tisular.13

774 Diseminacin de bacterias a travs de los canales radiculares hacia los tejidos
775 periapicales y otros tejidos

776 Una infeccin endodntica de larga duracin puede permitir que las bacterias se
777propaguen por todo el sistema de los canales radiculares, incluyendo canales accesorios,
778deltas apicales e itsmos. Esto provoca que el tratamiento de estas infecciones sea difcil. La
779acumulacin de las bacterias en los tbulos dentinales, a veces no permite el ingreso de
780clulas de defensa al sitio de la infeccin.13

781 En algunos casos las alteraciones periapicales agudas y la instrumentacin de los


782canales radiculares infectados, pueden hacer llegar bacterias al torrente sanguneo y
783provocar una bacteremia. Los microorganismos que ingresan y circulan en el torrente
784sanguneo son usualmente eliminados por el sistema retculo endotelial en pocos minutos
785(bacteremia transitoria), y como regla general estos no conllevan a sntomas clnicos
786mayores sino solo a pequeas elevaciones de temperatura. Si las bacterias encuentran
787condiciones favorables, puede ser que produzcan una infeccin secundaria.13

788 La propagacin ms comn de las infecciones de los canales radiculares son los
789tejidos osteomielitis, sepsis, angina de Ludwig, meningitis y abscesos intracraneales.13

7902.3.8. Microorganismos Prevalentes en Patologas Periapicales Crnicas

791 Los nuevos conceptos de resistencia bacteriana en endodoncia estn mostrando el


792importante papel del Enterococcus faecalis y de la Cndida albicans. Cuando analizada la
793microbiota de canales radiculares con infecciones persistentes, los Enterococcus fueron
794encontrados con mayor frecuencia. El hidrxido de calcio puede ser ineficiente contra ese
795grupo de bacterias, por eso se ha sugerido el uso de antibiticos como la tetraciclina para
796tratar infecciones persistentes relacionadas a esta bacteria. Sin embargo, la vancomicina y
797la eritromicina tambin son efectivas contra estos microorganismos a pesar de que ya estn
798surgiendo Enterococcus vancomicino-resistentes.22
799
800
801
802
803
8042.3.8.1. Enterococcus faecalis
805
806 Taxonoma y caractersticas generales de Enterococcus faecalis
807 La especie Enterococcus engloba un conjunto de especies semejantes al
808estreptococos y cuyo hbitad suele ser el el aparato gastrointestinal y genitourinario. La
809ms aislada en clnica son E. faecalis (80-90%) y E: faecium (5%), fue introducida en la
810taxonoma a mediados de los aos 80s. Con anterioridad, los enteroccocus pertenecan a la
811especie Streptococcus.13 Los enteroccocus se agrupan en pares o cadenas cortas.23Segn su
812clasificacin, son cocos Gram positivos, anaerobios facultativos, inmviles y catalasa
813negativos.13
814 Enterococcus Faecalis normalmente coloniza el sistema digestivo (intestino),
815formando una gran parte de la flora aerobia. Son oportunistas clsicos, con frecuencia, se
816cultivan enterococos en infecciones nosocomiales. Entre las infecciones causadas
817frecuentemente por Enterococcus Faecalis, destacan las infecciones urinarias e infecciones
818de heridas abdominales. Es especialmente grave la endocarditis por enterococos. Tambin
819han sido implicados en infecciones de endodoncia.13 Una caracterstica importante
820Enterococcus Faecalis, que permite diferenciarlo de los estreptococos, es, por ejemplo, la
821capacidad de crecer a 45 C en presencia de NaCl al 6,5% o bilis al 40%, as como a un pH
13,23
822de 9. A menudo, Enterococcus Faecalis es resistente a numerosos antibiticos como
823penincilinas, cefalosporinas de diferentes generaciones. En general, es sensible a
824aminopenicilinas, aclureidopenicilinas, piperacilina y carbapenems.13
825
826 Factores de Patogenicidad
827 Enterococcus Faecalis puede ser encontrado en el tejido pulpar dentario necrtico y
828est directamente relacionado al fracaso en endodoncia. Presenta resistencia a sustancias
829irrigadoras y medicamentos intracanales. Bastante relacionado a infecciones persistentes,
830es decir, est ms relacionado a casos asintomticos que en casos de sintomatologa
831clnica.13,24
832 Autores como Pinheiro, colaboradores, Siqueira y Rocas (2004) investigaron la
833identificacin de microorganismos existentes en los canales de tratamiento endodntico
834fallidos, Enterococcus Faecalis fue la especie ms aislada (45% y 77% respectivamente). 25
835Pero tambin hay estudios que demuestran lo contrario, y nos dan a conocer que el
836Enterococcus Faecalis tambin se pueden encontrar en infecciones endodnticas primarias.
837Ferrari, y Bombana Cai, investigaron la presencia de microorganismos: el gnero
838Enterococcus, Enterobacterias y levaduras en infecciones endodnticas primarias. Entre los
839diversos microorganismos encontrados, Enterococcus Faecalis estuvo presente en todas las
840etapas de evaluacin que demuestra su resistencia a la preparacin de la raz y a la
841medicacin intracanal.13
842 La capacidad de adhesin, el crecimiento y el poder de invasin en los tejidos son
843caractersticas pertinentes para Enterococcus Faecalis. Estudios in vitro han demostrado la
844capacidad de invasin de los tbulos dentinarios por Enterococcus Faecalis y su resistencia
845a los antibiticos, el efecto antimicrobianos de hidrxido de calcio y los cambios de pH. 13
846Love evalu la capacidad de crecimiento y penetracin intratubular de tres
847microorganismos: Streptococcus gordonni, Streptococcus mutans y E. faecalis. Para
848evaluar la penetracin intratubular de esos microorganismos se utiliz seis dientes
849unirradiculares humanos, que se cortaron en direccin longitudinal produciendo dos
850muestras con cemento intacto. Suero humano y el colgeno tipo 1 se insertaron en los
851medios durante el experimento. El autor consider que la invasin intratubular fue
852significativa para los tres microorganismos. La insercin de colgeno en el medio inhibe
853completamente la penetracin de S. mutans y S. Gordonni descendi, pero no impidi la
854penetracin de Enterococcus Faecalis. Evans y colaboradores, encontraron que el
855mecanismo de la bomba de protones que se encuentran en la membrana citoplasmtica de
856Enterococcus Faecalis sera la razn de su resistencia a los cambios en el pH. Para ello,
857usaron un inhibidor de este mecanismo, el carbonilo ciandrico clorofenilhidrazona
858(CCCC) y puso las bacterias en contacto con hidrxido de calcio con pH 11,1. Hubo una
859disminucin de clulas viables despus de estos perodos.
860La capacidad de sobrevivir al sistema de defensa innata del hospedero y competir con otras
861bacterias constituye importantes factores de virulencia de esta bacteria. Tambin son
862estudiados los factores de patogenicidad del Enterococcus Faecalis como son: sexo
863feromonas, cido lipoteico, produccin de superxido extracelular, gelatinasa,
864hialuronidasa, y citolisina (hemolisina).13
865
8662.3.8.2. Staphylococos Aureus
Taxonomia
867
868 Los miembros del gnero Staphylococcus y Micrococcus son catalasa positivos y
869hasta hace poco formaban parte de la familia Micrococacceae junto a los gneros
870Planococcus y Stomacoccus. Estudios genticos han demostrado que Staphylococcus y
871Micrococcus no estn relacionados. Los estafilococos son cocos Gram positivos, catalasa
872positivos y el diamino cido en el peptidoglicano es la L-lisina. El gnero Staphylococcus
873posee alrededor de 30 especies, de las cuales destacaremos S. aureus, S. saprophyticus y S.
874epidermidis.23
Caractersticas generales
875
876 Los estaphylococcus, son cocos gram positivos de 0,5 a 1,5 um de dimetro, con
877 agrupacin irregular que semejan racimos de uvas como consecuencia de su divisin
878 irregular en los tres planos de espacio. Si bien se trata de microorganismos inmviles
879 y no esporulados, figuran entre los microbios no esporulados ms resistentes. Estos
880 grmenes pueden tolerar bastante bien la desecacin, el calor, las altas
881 concentraciones salinas e incluso algunos antispticos.27

882 Los estafilococos son microorganismos aerobios facultativos catalasa-positivos.


883Aunque en los exmenes microscpicos del material de cultivo no se visualiza una capsula,
884se cree que in vivo puede presentar esta estructura estos microorganismos se desarrollan
885bien en diferentes medios de cultivo con una amplia variacin trmica, fermentan azcares
886con produccin de cido lctico pero no de gas.26

887

888 Figura 3. Tincin de Gram: Cocos Gram positivo, agrupados en racimos


889 irregulares.27
891

892 Figura 4. Microfotografa, tomada con un microscopio electrnico de barrido. Se


893observa morfologa de coco, carencia de flagelo y asociacin en racimos.27

Factores de patogenicidad
894

895 Cualquier enfermedad infecciosa es el resultado de la interaccin entre el


896microorganismo causal y el husped. Primero analizaremos los factores de patogenicidad
897con que cuenta S. aureus. Estos pueden ser divididos en tres grupos :

898 Enzimas:

899 - Catalasa: podra funcionar inactivando algunos sistemas de ingestin de los


900 PMN.
901 - Coagulasas: tanto la coagulasa libre como el llamado clumping factor actan
902 cubriendo a la clula de fibrina y por tanto hacindola ms resistente a la
903 opsonizacin y fagocitosis.
904 - Estafiloquinasas: degradan la fibrina y contribuyen a la invasin de tejidos
905 vecinos.
906 - Hialuronidasa: hidroliza la matriz intracelular de mucopolisacridos de los
907 tejidos y por tanto contribuye a la diseminacin a tejidos adyacentes.
908 - Lipasas: las cepas de S. aureus productoras de forunculosis crnica son potentes
909 productoras de lipasas que ayudan al microorganismo a diseminarse por los
910 tejidos cutneo y subcutneo.
911 - Fosfolipasa C: esta enzima est asociada con cepas recuperadas de pacientes
912 con distrs respiratorio del adulto y coagulacin intravascular diseminada.
913 Aparentemente los tejidos afectados por esta enzima se vuelven ms
914 susceptibles al dao y destruccin por componentes bioactivos del
915 complemento y sus productos durante su activacin.23
916 - Toxinas: S. aureus puede producir toxinas de accin general como las
917 hemolticas (, , y ) y la leucocidina, y tambin toxinas especializadas como
918 las exfoliatinas, toxina del shock txico y enterotoxinas. Las hemolisinas son
919 importantes toxinas citolticas sobre una variedad de clulas.
920 - hemolisina o toxina: tiene efecto letal sobre una variedad de membranas
921 celulares eucariotas, incluyendo la de PMN.
922 - hemolisina: es una esfingomielinasa activa sobre diferentes clulas:
923 leucocitos, eritrocitos, fibroblastos.
924 - y hemolisinas: se encuentran en algunas cepas de S. aureus y lisan una
925 variedad de clulas diferentes.
926 - Leucocidina: es una exotoxina con efecto txico directo sobre las membranas
927 de los PMN humanos, causando degranulacin del citoplasma, hinchamiento
928 celular y lisis. El modo de accin de esta toxina comprende la formacin de
929 poros que alteran la permeabilidad celular para el potasio y otros cationes. Una
930 inyeccin de esta toxina en modelos animales produce una disminucin severa
931 del nmero de leucocitos.
932 - Exfoliatinas o toxinas epidermolticas: son producidas por algunas cepas de S.
933 aureus y consisten en dos protenas, bioqumica e inmunolgicamente
934 diferentes, pero con funciones biolgicas similares. La exfoliatina A es un
935 producto de genes cromosmicos, termoestable y es inactivada por el EDTA,
936 mientras la exfoliatina B es de origen plasmdico, es inactivada por el calor y
937 estable frente al EDTA. Ambas tienen actividad proteoltica, actan como
938 superantgenos y disuelven la matriz mucopolisacrida.23
939
940
941
942
943
944 Cuadro 2. DETERMINATES DE LA PATOGENICIDAD DE S.aureus23

Determinantes de la patogenicidad Propiedades


Componentes de la Pared Celular Activacin del complemento
Peptidoglicano Antifagoctica
cidos teiticos Antifagoctica
Protena A Adherencia
Cpsula mucoide
Enzimas Formacin del absceso
Coagulasa Destruccin del cogulo
Estafiloquinasas Invasin hstica
Hialuronidasa Colonizacin
Lipasas
Toxinas Rotura de la membrana celular
Hemolisinas Alteracin de la permeabilidad
Leucocidina
celular de fagocitos
Toxina exfoliativa
Epidermlisis
Toxina de shock txico
Shock
Enterotoxinas
Intoxicacin alimentaria
946

9472.3.8.3. Cndida Albicans

948Taxonoma
949Los microorganismos involucrados como agentes etiolgicos de la Candidiasis, se
950encuentran actualmente clasificados taxonmicamente de la siguiente forma: 28

Reino: Hongo
Divisin: Deuteromycota
Clase: Blastomycetes
Familia: Cryptococcaceae
Gnero: Cndida
Especies Albicans
952El Gnero Cndida comprende ms de 150 especies, cuya principal caracterstica es la
953ausencia de forma sexual, con excepcin de algunas especies micticas. Son clasificadas
954como levaduras, las cuales corresponden a hongos con un modo de desarrollo
955predominantemente unicelular.28

956Solamente una docena de las especies pertenecientes al gnero Cndida poseen la facultad
957de adaptarse a una temperatura de 37C, y pueden ser ocasionalmente patgenas para el
958hombre, estas son entre otras: C. albicans, C. tropicalis, C. kefyr (pseudotropicalis), C.
959krusei, C. guillermondi, C. parakrusei, C. zeylanvides, C. stellatoidea y C. brumptii.28

Caractersticas Generales
961
962 Las especies cndida crecen como clulas de levaduras tpicas de 4-6 micras
963redondas u ovaladas con gemacin en la mayora de las condiciones y en casi toda las
964temperaturas, crecen en condiciones de anaerobiosis en medios de cultivo a pH con rango
965entre 2,5 y 7,5 y la temperatura oscila entre 20 y 38, el crecimiento de colonias se puede
966detectar entre 48 y 72 horas despus de la siembra.29
967 Los microorganismos del genero cndida son oportunistas se encuentran como
968comensal en la cavidad oral, intestino, vagina, secrecin bronquial y piel del hombre. Las
969colonias de esta especie se observan macroscpicamente: color crema cerosa, hmedas,
970redondas. Y microscpicamente son blastosporas redondas ovales.28,29

Factores de Patogenicidad
971

972 La Cndida Albicans tiene varios factores de virulencia para colonizar al hospedero y
973ocasionar daos de forma directa al activar, resistir o desviar los mecanismos de defensa
974del mismo. Esto atributos que contribuyen a la patognesis de Candida albicans incluye la
975morfognesis, ansicin entre las clulas lavaduras unicelulares y las formas de crecimiento
976filamentosas), las enzimas secretadas aspartil proteasas (SAP) y fosfolipasas y las
977biomolculas de reconocimiento del hospedero (adhesinas), que le permiten iniciar el
978proceso de formacin de biopelculas. As mismo, el cambio de fenotipo se acompaa por
979alteraciones en la expresin de antgenos, morfologa colonial afinidades de Cndida
980Albicans a los tejidos.29

981
982Especies de Cndida pueden tambin bloquear la actividad de neutrfilos polimorfo
983nucleares llegando a producir radicales libres y des granulacin, adems puede causar la
984muerte de moncitos. Este hongo tambin es capaz de evadir clulas de defensa del
985husped a travs de la produccin de proteinasas que degradan factores del complemento
986causando cambios en la permeabilidad vascular y en las imunoglobulinas IgG, IgA,
987tambin ocurre estimulacin de la sntesis de citocinas pro-inflamatorias, estimulando
988macrfagos, clulas endoteliales y fibroblastos.22

Cndida Albicans en lesiones periapicales


989
990La Cndida albicans, dentro de la amplia variedad de hongos presentes en la microbiota
991oral, es la ms comn, siendo que los conductos radiculares tambin son un local de
992colonizacin de estes hongos. Su participacin ya fue demostrada en infecciones
993endodnticas, teniendo participacin como organismo oportunista en infecciones
994perirradiculares. La adaptabilidad a variados ambientes as como la adhesin a varios tipos
995de superficies, produccin de enzimas hidrolticas (proteinasas, fosfolipasas,
996aminopeptidasas, glucosaminidasas, hialuronidasa), formacin de biopelicula y la inmuno-
997modulacin de la defensa del husped son los principales mecanismos que justifican la
998patogenicidad de estos hongos. La Cndida albicans tambin tiene capacidad de congregar
999a bacterias bucales como Fusobacterium, Actinomyces, Eubacterium e Enterococcus
1000faecalis formando comunidades mixtas extremamente daosas a la cavidad oral.22
2.3.9.
1001Plantas medicinales
1002 El empleo de plantas como tratamiento de diversos males (Fitoterapia), se registra
1003desde tiempos muy remotos, basndose en creencias populares y conocimientos
1004tradicionales, transmitidos de generacin en generacin. A pesar de los avances en la
1005produccin de la medicina moderna, las plantas medicinales no han perdido su
1006importancia. Por el contrario el desarrollo de los medicamentos modernos ha sido resultado
1007de las formas cada vez ms complejas de aprovechar las plantas medicinales y su
1008produccin sigue dependiendo en gran parte del uso de plantas como materia prima por lo
1009tanto hoy en da, muchas propiedades teraputicas de diversas plantas han sido
1010demostradas cientficamente, en base a la extraccin de sus principios activos, con diversas
1011actividades biolgicas. As tenemos por ejemplo que una de las sustancias ms comunes la
1012aspirina se saca de la corteza del sauce.30
1013 El valor medicinal de las plantas curativas, se debe a la presencia de una sustancia
1014qumica (principio activo) que produce un efecto fisiolgico. Mucho de los principios
1015activos son sumamente complejos, desconocindose an su naturaleza qumica; otros han
1016sido purificados, sintetizados o imitados. Por lo general pertenecen a una de estas
1017categoras: aceites esenciales, alcaloides, glcidos, taninos, sapgeninas, fenoles, quinonas,
1018terpenos, carotenoides, cumarinas, flavonoides, resinas.13
2.3.10.
1019Minthostachys Mollis Griseb (Mua)

10202.3.8.1. Taxonomia

1021 Dominio: Eukarya


1022 Reino : Vegetal
1023 Sub reino : Embryophyta
1024 Divisin : Magnoliophyta
1025 Clase : Magnoliopsida
1026 Sub clase : Methachlamydeae
1027 Orden : Tubiflorae
1028 Familia : Lamiaceae (Labiatae)
1029 Gnero : Minthostachys
1030 Especie : mollis
1031 Nombre vulgar : Mua

10322.3.8.2. Descripcin general de Minthostachys mollis (mua)

1033 La mua es una planta arbustiva leosa oriunda del Per su nombre cientfico es
1034Minthostachys mollis. Es una especie cuyo cultivo es muy difundido en las regiones
1035andinas, especialmente en Apurmac, Ayacucho, Cuzco, Huancavelica y Puno siendo muy
1036empleada por las comunidades nativas y campesinados de Sudamrica. Adems es
1037conocida como peperina en Argentina y organo en Colombia, encontrndose tambin en
1038Venezuela, Brasil, Ecuador y Bolivia, habita en los diferentes pisos ecolgicos de nuestra
1039serrana, se denomina en la lengua Quechua mua, y en la Aymara tiene 2 nombres:
1040Coa y Huaycha. Debido a sus caractersticas semejantes al pleo y organo, los
1041espaoles la denominaban poleo silvestre. Otros nombres vulgares con los que se le conoce
1042a esta planta son: "Mua negra", "Polco silvestre", "coz", "mua-mua", "arash mua",
1043"kon", "Orcco-mua".31
1044 Alcanza una altura de 1.50 m., desarrollndose en forma difusa y muy ramificada,
1045crece en lugares cercanos a acequias, manantiales sin tener grandes requerimientos de
1046agua. Se desarrolla en suelos arenosos, ricos en materia orgnica, bien drenados, con buena
1047retencin de humedad, con un pH entre 5 - 8 y un clima con elevada luminosidad, florece
1048en poca de lluvia, se multiplica por semilla y por codo. As como es una planta
1049hemicriptfila que durante la poca ms fra del invierno y seco desaparecen sus rganos
1050areos para brotar nuevamente con las primeras lluvias de la primavera.31
1051
10522.3.8.3. Caractersticas Botnicas de Minthostachys mollis (mua)
1053 Es una planta arbustiva, leosa, frondosa en la parte superior, de aspecto general
1054 glauco, erecta y pubescente, su tallo es ramificado desde la base. La hoja es el
1055 elemento vegetativo simple ligeramente aserrado, carece de estpulas, cortamente
1056 pedunculares de filotaxia opuesta. Su peciolo mide entre 4 y 6 mm de largo,
1057 pubescente acanalada en la parte superior y convexo en la parte inferior, es aqu
1058 donde se deposita la mayor cantidad de aceite, que al estrujarlos dejan sentir su
1059 aroma caracterstico.31
1060
2.3.8.4.
1061 Principales molculas con accin bactericida presentes en el aceite esencial
1062de Minthostachys mollis (mua)31
Pulegona
1063
1064 Uno de los componentes ms importantes del aceite esencial de Minthostachys
1065mollis y tambin de muchos aceites, pero es mejor conocido por pulegium poleo (Mentha).
1066Es altamente txico en grandes cantidades, daa el hgado y puede provocar el aborto. Su
1067toxicidad probablemente explica algunos de los efectos del aceite de Minthostachys mollis
1068contra las plagas y parsitos. La sustancia tambin se usa en perfumera y saborizantes.31
Carvacrol
1069
1070 Se han encontrado para ser componentes dominantes en una menor proporcin de los
1071estudios de los aceites de Minthostachys mollis. Carvacrol tambin se encuentra en varias
1072hierbas conocidos como el organo (Origanum vulgare), la ajedrea de verano (Satureja
1073hortensis) o tomillo (Thymus serpyllum), y es sobre todo un valor para sazonar.31
Linalol
1074
1075 Empleado como condimento y como insecticida, linalol es ms conocido de cilantro
1076(Coriandrum sativum) de la familia Apiaceae. A menudo es uno de los componentes
1077menores del aceite de Minthostachys mollis.31
Timol
1078
1079 Como su nombre lo sugiere, esta sustancia es bien conocida de los aceites de
1080distintas especies de tomillo. Acta como antisptico y contra el dolor de garganta y tos. A
1081veces se encuentra como un componente menor en el aceite de Minthostachys mollis.31
2.3.8.5.
1083 Propiedades y usos de Minthostachys mollis (mua)
1084 La medicina popular no poda dejar de beneficiarse con tantas virtudes curativas y
1085alimenticias. Se sabe que es una especie de mltiples aplicaciones, muchas de las cuales
1086permanecen an en el misterio. Los mdicos de una sociedad grafa como la Inca, los
1087galenos amautas, se las llevaron por lo visto consigo; su empleo como infusin o mate
1088(hojas y flores) es imprescindible para aliviar malestares estomacales, flatulencias,
1089afecciones diarreicas, vmitos y afecciones reumticas, adems posee propiedades sedantes
1090y hemostticas.En casos de soroche o mal de altura ayuda a liberar los bronquios y disipar
1091el mareo, estimula la prevencin de la mayora de problemas respiratorios y ayuda a
1092descongestionar las vas respiratorias, es excelente contra la halitosis y para combatir
1093jaquecas .31 Asimismo ayuda a eliminar los parsitos intestinales. Tambin se emplea como
1094saborizante y aromatizante en la elaboracin de licores y bebidas amargas.31
1095 Los indgenas del Per la emplearon como resolutiva de tumores y sus hojas
1096mezcladas con chilca eran recomendadas en fracturas de huesos. Es as como las hojas de
1097mua contribuyen en la curacin de fracturas, luxaciones y tumores ocasionados por golpe.
1098Actualmente tambin los hueseros logran recuperaciones asombrosas aplicando su aceite
1099esencial en luxaciones y frotaciones antirreumticas.31
1100 Sus poderosas propiedades bactericidas han sido tiles, durante milenios, para
1101conservar la papa contra las plagas en la germinacin de sus semillas y tambin, durante su
1102almacenamiento porque tiene un fuerte efecto repelente sobre los "gusanos de tierra" que
1103devoran los tubrculos, tallos, hojas y es antimoho; de igual manera protege al maz, col y
1104cebolla.31 En algunos lugares de Colombia la emplean en el campo pecuario para controlar
1105los ectoparsitos y endoparsitos de los animales domsticos y ganado, adems para curar
1106sarna en equinos y camlidos. Es recomendable como repelente contra las pulgas y podra
1107igualmente utilizarse para el control del gorgojo del frijol, tambin para la fumigacin de
1108insectos molestos como zancudos y moscas .31
11102.3.11. Aceites esenciales
1111 Los aceites esenciales son productos voltiles de naturaleza compleja, elaborados por
1112ciertos vegetales a los que confieren un aroma agradable. Oficialmente, se denominan
1113aceites esenciales a los productos que se pueden obtener por arrastre con corriente de vapor
1114de agua o por expresin del pericarpio de ciertos frutos. 31
1115
1116 Los aceites esenciales son generalmente lquidos a temperatura ambiente aunque
1117algunos solidifican a baja temperatura como, por ejemplo, la esencia de ans. La mayora
1118son prcticamente transparentes, incoloros o ligeramente coloreados (amarillentos) con
1119excepciones como la esencia de manzanilla, que contiene camazuleno de un intenso color
1120azul. Algunos aceites esenciales son inflamables. Generalmente, son menos densos que el
1121agua aunque tambin hay excepciones como las esencias de clavo y de canela, que son ms
1122densas. Los aceites esenciales suelen ser insolubles en agua. Los aceites esenciales son
1123lipfilos y solubles en disolventes orgnicos apolares (hexano, eter etlico, etc.). La
1124solubilidad en alcohol es variable y suelen ser solubles en alcoholes de alta graduacin. Se
1125oxidan con facilidad y polimerizan dando productos resinosos.31
1126
11272.3.11.1. Localizacin del aceite esencial en las plantas
1128
1129 Se producen y se almacenan en clulas glandulares, que tapizan el interior de las
1130hojas y tallos, en pelos glandulares de las plantas o en otras clulas especializadas. Pueden
1131estar ubicados en diferentes partes de la planta; por ejemplo, en las conferas esta en todo
1132el tejido; en la rosa solo en el ptalo; en el comino en las semillas; en el clavo de olor en el
1133brote o yema; en la lima en los frutos, en la lima en los pelos glandulares de las ramas y
1134hojas.31
11362.3.11.2. Composicin qumica de los aceites esenciales
1137
1138 Los aceites esenciales son generalmente mezclas complejas de varias sustancias (a
1139veces ms de 200) que a su vez pueden tener estructuras muy diversas. Respecto a la
1140formacin y evolucin de los aceites esenciales en las plantas es necesario tener en cuenta
1141algunos aspectos externos, que pueden afectar la composicin qumica de las esencias de
1142manera cualitativa y cuantitativa, entre ellos, se pueden destacar los siguientes:
1143
1144 - Condiciones geobotnicas: clima, altitud, tipo de suelo, pluviosidad.
1145 - Labores culturales: uso de fertilizantes, abonos y pesticidas.
1146 - Parte y estado de desarrollo fenolgico de la planta.
1147 - poca de recoleccin.
1148 - Modo de almacenamiento y manejo del material vegetal: fresco, seco,
1149 fermentado, tratamiento post cosecha.
1150 - Modo de obtencin del aceite: destilacin o expresin.
1151Los compuestos presentes en los aceites esenciales se pueden clasificar en: terpenoides y
1152no terpenoides.
1153
Terpenoides: Los compuestos terpnicos proceden de la condensacin del isopreno (C5) y
1154
1155pueden tener o no oxigeno. Los que carecen de oxigeno son hidrocarburos: monoterpenos
1156(C10) y sesquiterpenos (C15), que pueden ser aromticos o alifticos. Los que poseen
1157oxigeno son terpenos funcionalizados con funcin alcohol, fenol. aldehdo, cetona, ter,
1158ster o perxido.31
1159
1160
No terpenoides:
1161
1162
1163 - Sustancias voltiles alifticas.
1164 - Sustancias voltiles aromticas.
1165 - Sustancias con estructura C6 C1.
1166 - Sustancias con estructura C6 C3.
1167 - Derivados cumarnicos.
1168
1169 Las sustancias C6-C1 y C6-C3 son sustancias voltiles de bajo peso molecular,
1170generalmente oxigenadas con funciones alcohol, fenol, cido o ter. 31
1171 Sustancias nitrogenadas: son poco frecuentes. Hay aminas alifticas voltiles
1172(metilamina, etilamina, etc.) que tienen olor a pescado y derivados del indol que tiene olor
1173fecal (heces). 31
1174 Sustancias con azufre: son todava menos frecuentes que las sustancias nitrogenadas.
1175Ciertas especies contienen isotiocianatos (R-N=C=S) y otras contienen sulfuros (R-S-R) o
1176disulfuros (R-S-S-R).31
2.3.11.3.
1177 Propiedades biolgicas de los aceites esenciales
1178
1179 Desde la antigedad, las especies aromticas y sus aceites esenciales se han
1180empleado en preparaciones culinarias no slo como agentes saborizantes y aromatizantes,
1181sino tambin como conservantes naturales inhibiendo el deterioro oxidativo y los daos
1182causados por bacterias, hongos u otros microorganismos; de esta manera, actualmente, las
1183industrias de alimentos y cosmticos han disminuido el uso de conservantes sintticos,
1184reemplazndolos por sustancias de origen natural, por tal motivo, el conocimiento de las
1185actividades antimicrobianas, antioxidantes y citotxicas son importantes para la aplicacin
1186de los aceites esenciales en las diferentes industrias.
1187
1188 Las acciones farmacolgicas son muy variadas tanto en su utilizacin por va tpica
1189como por va interna. Las acciones ms frecuentes son:
1190
Antispticos: Frente a microorganismos gram positivos y gram negativos e incluso frente a
1191
1192hongos productores de micosis y ciertas levaduras. El poder antisptico es variable segn
1193las caractersticas estructurales de los componentes del aceite esencial, en cual puede
1194tener:31
1195 - Elevado poder antisptico: aceites que poseen componentes con un grupo
1196 fenol.
1197 - Poder antisptico medio: aceites que poseen componentes con funcin alcohol.
1198 - Bajo poder antisptico: aceites que poseen componentes con funcin cetona.
1199
Antiespasmdicos: Disminuyen los espasmos gastrointestinales y aumentan las secreciones
1200
1201gstricas, por lo que se usan sobre el aparato digestivo como eupcticos (facilitan la
1202eliminacin de gases), digestivos, estomacales, colagogos (facilitan la salida de bilis de la
1203vescula biliar al duodeno) y colerticos (facilitan la secrecin de bilis por parte de las
1204clulas hepticas). Suelen aumentar las ganas de comer (aperitivos) porque aumentan las
1205secreciones salivares y gstricas.31
1206
Sedantes: Algunos componentes de los aceites esenciales tienen acciones sedantes en
1207
1208estados de nerviosismo o ansiedad.31
1209
Accin irritante: Algunas esencias aplicadas por va tpica tienen un efecto rubefaciente,
1210
1211es decir, aumentan la circulacin capilar y epidrmica y producen un enrojecimiento. Otros
1212aceites son cicatrizantes y vulnerarios. Aplicados por va interna actan sobre el rbol
1213bronquial, fluidificando las secreciones respiratorias y facilitando su eliminacin, y son por
1214tanto expectorantes; tambin pueden actuar sobre el aparato renal ejerciendo una accin
1215diurtica que generalmente no suele aprovecharse porque, como efecto indeseable, suelen
1216producir hematuria (emisin de orina con sangre) .31
1217
Analgsicos: Ciertas esencias aplicadas por va tpica presentan una accin analgsica
1218
1219frente a dolores musculares, dolores en las articulaciones, etc. Tambin surten un efecto
1220antiinflamatorio.31

2.3.11.4.
1221 Actividad Antimicrobiana De Los Aceites Esenciales
1222 Los aceites esenciales, compuestos extrados de varios tipos de plantas y usados para
1223preservar alimentos y bebidas, tienen un efecto inhibitorio sobre el desarrollo de
1224microorganismos. En su estudio Walton y col. demostr que el extracto destilado del ajo
1225tiene efectos bactericidas y bacteriostticos. Se conoce de la actividad antimicrobiana de
1226varias especies vegetales en forma de extractos o hierbas aromticas en los alimentos,
1227inhiben la formacin vegetativa de esporas, detienen el crecimiento de elementos
1228patgenos y levaduras.13

2.3.11.5.
1230 Mecanismo De Accin Del Aceite Esencial Sobre Los Microorganismos
1231 Este mecanismo de accin hacia los microorganismos es complejo y an no ha sido
1232del todo entendido y explicado. El modo de accin de los aceites esenciales tambin
1233depender del tipo de microorganismos y est principalmente relacionado con la estructura
1234de la pared celular y la membrana externa de los mismos. Kakrani y col. establecieron, in
1235vitro, la actividad antimicrobiana, antiparasitaria y antimictica de los aceites esenciales
1236de Agliaodoratissima. Las investigaciones plantean que los aceites esenciales interferiran
1237la fase del metabolismo intermedio de los microorganismos inactivando enzimas de
1238reaccin.13

12402.3.11.6. Extraccin del aceite esencial


1241 Para obtener la fraccin cromtica del material vegetal, a lo largo de los aos, se
1242usaron diferentes procesos. Motle en su estudio consideraba los siguientes mtodos:
Extraccin por expresin
1243

Extraccin por solucin


1244

1245 - Con grasas slidas y fras


1246 - Con grasas lquidas y calientes
1247 - Con solventes voltiles
Extraccin por destilacin
1248

Extraccin por destilacin con agua caliente


1249

Extraccin por arrastre de vapor


1250

1251 Extraccin por destilacin por arrastre de vapor


1252 Esta tcnica resulta una de las ms simples y econmicas para obtener el aceite
1253esencial de este tipo de planta y en general para cualquier otro. Las ventajas de este mtodo
1254son su simplicidad, bajo costo y el hecho de poder maniobrar grandes volmenes de
1255materia prima. 13
1256Este mtodo se fundamenta en que los aceites esenciales son arrastrados por la corriente de
1257vapor de agua que se genera en la fuente de vapor, luego esta mezcla (vapor de agua y
1258aceite) es condensada mediante su paso por un refrigerante de vidrio, para luego separar el
1259aceite del agua por simple diferencia de densidades. La destilacin es una operacin
1260farmacutica que tiene por finalidad separar los principios voltiles (contenidos en una
1261mezcla compleja) de los que no lo son. El equipo de destilacin est compuesto por un
1262sistema de destilacin de doble baln, en el cual solo uno de los balones que contiene agua,
1263es sometido al calor directo; mientras que el segundo baln que contiene la planta licuada
1264recibe los vapores de agua, para luego liberar el vapor mixto (agua-aceite esencial) hacia el
1265condensador.13

1268
12692.4. OBJETIVOS DE LA INVESTIGACION
1270
1271 3.4.12. Objetivo General
1272 Determinar el efecto inhibitorio in vitro del aceite esencial de Minthostachys Mollis
1273 Griseb (mua) frente a microorganismos prevalentes en patologas periapicales
1274 crnicas de origen endodntico.
1275
1276 3.4.13. Objetivos especficos
1277
1278 Determinar el efecto inhibitorio in vitro del aceite esencial de Minthostachys Mollis
1279 Griseb (mua) puro y en diluciones del 75%, 50% y 25% frente al crecimiento
1280 bacteriano de la cepa Staphylococcus aureus.
1281 Determinar el efecto inhibitorio in vitro del aceite esencial de Minthostachys Mollis
1282 Griseb (mua) puro y en diluciones del 75%, 50% y 25% frente al crecimiento
1283 bacteriano de la cepa Enterococcus Faecalis.
1284 Determinar el efecto inhibitorio in vitro del aceite esencial de Minthostachys
1285 Mollis Griseb (mua) puro y en diluciones del 75%, 50% y 25% frente al
1286 crecimiento de Cndida albicans.
1287
1288 3.5. HIPTESIS.
1289
1290 Hi: El aceite esencial de Minthostachys Mollis Griseb (mua) tiene efectividad
1291 inhibitoria in vitro frente a cepas de Staphylococcus Aureus, Enterococcus Faecalis
1292 y Cndida Albicans.
1293 Ho: El aceite esencial de Minthostachys Mollis Griseb (mua) no tiene efectividad
1294 inhibitoria in vitro frente a cepas de Staphylococcus Aureus, Enterococcus Faecalis
1295 y Cndida Albicans.
1296
1297
1298

1299
1300 III. CAPITULO III: MATERIALES Y MTODOS
1301
1302 III.1. DISEO Y TIPO DE ESTUDIO
1303
1304 Experimental debido a que se cont con un grupo control positivo representado por
1305 los discos de papel filtro embebidos con Paramonoclorofenol alcanforado, un grupo
1306 control negativo representado por discos de papel filtro embebidos en alcohol
1307 etlico al 70%; y un grupo experimental representado por discos de papel filtro
1308 embebidos con el aceite esencial de Minthostachys Mollis Griseb (mua) en
1309 concentraciones al 100%, 75%, 50% y 25%.
1310 In vitro porque el estudio se realiz en unos medios de cultivo que sirven para el
1311 desarrollo de los microorganismos, y se manej todo en un laboratorio.
1312 Prospectivo debido a que la recoleccin de los datos se realiz conforme la
1313 ocurrencia de los hechos.
1314 Transversal debido a que las variables fueron observadas en un solo momento de
1315 acuerdo a los objetivos de la investigacin.

13163.2. POBLACIN Y MUESTRA

1317 Poblacin: Especies del gnero: Staphylococcus aureus , Enterococcus Faecalis y


1318 Cndida Albicans, causantes de lesiones periapicales de origen endodntico.
1319 Muestra: Especies del gnero: Staphylococcus Aureus , Enterococcus Faecalis y
1320 Cndida Albicans, con una reproducibilidad de 40 repeticiones por especie
1321 haciendo un total de 120 muestreos.

1322

1323

1324

1325

1326

1327

1328

13293.3. OPERACIONALIZACION DE VARIABLES


VARIABLE DEFINICIN DIMENCIN INDICADOR ESCALA VALOR

Efecto Capacidad del aceite Cuantitativamente Dimetro de halo de cuantitativa 0 30 mm


inhibitorio in escencial de inhibicin (Medido en razn
vitro del Minthostachys Mollis mm)
aceite Griseb (Mua).
esencial de Consistente en inhibir
Minthostach el crecimiento de
ys Mollis microoganismos que
Griseb(Mu se desarrollan en un
a) medio dado.
Cepas estndares
Microorgani Especies que en Staphylococcus
smos desempean un papel Aureus,Enterococc Cualitativa Si
prevalentes preponderante en el us Faecalis y Crecimiento bacteriano Nominal No
en desarrollo de la Cndida Albicans. de la cepa
patologas patologa endodontica
peri apicales a nivel periapical
crnicas
Concentracin del Cualitativa
aceite esencial de ordinal Aceite puro
Dilucin del Minthostchys Mollis
aceite Dilucin del aceite Griseb mua puro
escencial de escencial de
Minthostach Minthostachys Mollis Concentracin del 100
ys Mollis Griseb en alcohol um aceite esencial de Cualitativa
Griseb etlico Mithostchys Mollis ordinal Aceite al 75%
Mua(cov Grisebmua en
ariable) solucin de alcohol al
70% en proporcin 4:1

Concentracin del 100


um aceite esencial de Cualitativa Aceite al 50%
Minthostchys Mollis ordinal
mua en solucin de
alcohol al 70% en
proporcin 1:1

Concentracin del 100 Cualitativa


um aceite esencial de ordinal Aceite al 25%
Minthostchys Mollis
Griseb mua en
solucin de alcohol al
70% en porcin 1:4
1330

1331

1332

1333
1334

13353.4. MTODOS

13363.4.1. Mtodo para la obtencin el aceite esencial de Minthostachys Mollis Griseb


1337(mua) mediante extraccin etanlica.

13383.4.1.1. Primera Etapa:

1339a. Recoleccin del material vegetal

1340Procedimiento:

1341 Se procedi a la recoleccin de la mua en horas de la maana en el


1342 distrito de Jayllihuaya, ubicado a 10 Km de la ciudad de Puno.
1343 Se cort los tallos con tijeras de podar, los que fueron colocados en
1344 bolsas de papel Kraft.
1345 Se traslad la planta para su posterior secado.

13463.4.1.2. Segunda Etapa:

1347a. Extraccin por arrastre de vapor del aceite esencial

1348 La mua se transport al laboratorio, se depur la muestra limitndose a flores, talluelos y


1349hojas frescas, enseguida se procedi a depositar el material orgnico en la cmara de
1350contencin de materia prima del equipo de extraccin de aceite esencial. La obtencin del
1351aceite esencial se efectu con el mtodo por arrastre de vapor de agua, que es el ms
1352recomendable por no usar ningn solvente. La cantidad total que entr en el equipo de
1353destilacin fue de 2.5 kg. de materia prima. Despus de la condensacin, el destilado de
1354aceite esencial de Minthostachys Mollis Griseb (Mua) se recibi en un depsito estril y
1355cerrado, mientras que el agua contino su camino en el equipo para su posterior
1356transformacin en vapor. El aceite se separ y se deposit en un frasco mbar estril y se
1357dej refrigerar.

13583.4.2. Mtodo de recoleccin y cultivo de muestra de conducto radicular

1359a. Pasos previos:

1360Se prepararon los medios de transporte y de cultivo (caldo tioglicolato y agar schaedler).

1361b. Procedimiento:

1362 Seleccin de muestra

1363Los pacientes que recibieron terapia endodntica presentaron piezas dentarias con
1364diagnstico de Periodontitis apical crnica. Se seleccion piezas dentarias sin tratamiento
1365endodntico previo: determinado clnicamente por presencia de una lesin cariosa, cambio
1366de coloracin y respuesta positiva a las pruebas de vitalidad pulpar al fro y al calor, existi
1367presencia de lesin periapical, que fue determinado por presencia de una imagen
1368radiolcida perirradicular en la radiografa periapical.

1369 Aislamiento y apertura cameral:

1370Luego de realizar el diagnstico se procedi a realizar el aislamiento absoluto de la pieza


1371dentaria 1.6 con dique de goma y uso de clamps; con la subsiguiente desinfeccin de la
1372misma (corona clnica y campo quirrgico) por medio de la accin bactericida del etanol
137370% para as evitar falsos positivos.

1374Despus se procedi a realizar la apertura cameral con el uso de fresa redonda mediana de
1375grano grueso, y a desinfectar la porcin coronal de la cmara pulpar con etanol 70%,
1376previo aislamiento de sta por medio de una bolilla de algodn.

1377 Toma de muestra

1378- Se emple 2 ml. de suero fisiolgico al 9% como solucin irrigadora en la cmara pulpar
1379y en el canal radicular por considerarla inocua para los microorganimos presentes.

1380- Se realiz un leve debridamiento por 30 segundos con una lima Kerr #10 y as se pudo
1381conseguir una mxima suspensin de bacterias en el medio.

1382- Luego se insert puntas de papel seco y estril dentro del conducto radicular por un
1383espacio de 3 segundos.

1384- La muestra que se obtuvo se coloc inmediatamente dentro de viales conteniendo el


1385medio de transporte (caldo de tioglicolato) y se transport la muestra al laboratorio para su
1386cultivo en medio agar Schaedler. Este paso se realiz en un tiempo no mayor de 15
1387minutos.

13883.4.3. Metodologa para la identificacin de Staphylococcus Aureus

1389La presente tcnica para la deteccin de Staphylococcus Aureus, se realiz de acuerdo a los
1390siguientes procedimientos:

1391 Preparacin del Agar Base

1392Se suspendi 40 g del polvo en un litro de agua destilada. Se dej reposar 5 minutos y se
1393mezcl perfectamente hasta obtener una suspensin homognea. Luego se calent con
1394agitacin frecuente y se puso a hervir 1 minuto. Se esterilizo 20 minutos a 121C. se dej
1395enfriar a 45-50C y se agreg sangre desfibrinada al 5%. Por ltimo se homogenizo y se
1396distribuy en las placas.

1397 Preparacin de la placa de Agar Sangre:

1398Se aadi en forma asptica un 5% de sangre estril desfibrinada a temperatura ambiente,


1399el agar estuvo a 45C.

1400 Siembra
1401Se realiz por inoculacin directa del material en estudio, sobre la superficie del medio de
1402cultivo por medio de un hisopo estril.

1403 Incubacin

1404El tiempo, temperatura y atmsfera de incubacin, fue de 37 por 18 horas.

1405 Observacin del crecimiento bacteriano

1406Se desarrollaron colonias cremosas beta hemolticas en agar sangre. A la coloracin de


1407gram se observ cocos gram positivos. Estas colonias presentaron la morfologa colonial
1408tpica del gnero Staphylococcus.

1409 Procedimiento del Mtodo de Gram


1410 Con el asa de siembra se coloc una pequea gota de agua en el centro de un
1411 portaobjetos limpio.
1412 Se flame el asa de siembra y se dej enfriar. Se tom, en condiciones aspticas,
1413 una pequea cantidad del cultivo bacteriano en medio slido y transfiri a la gota
1414 de agua. Se removi la mezcla con el asa de siembra hasta formar una suspensin
1415 homognea para facilitar su secado.
1416 Se esperar hasta que el lquido se evapore.
1417 Se ti con cristal violeta agregando suficiente colorante y se dej actuar durante 1
1418 minuto.
1419 Se lav suavemente con agua.
1420 Se inund suavemente con el mordiente, yodo de Gram, y se dej actuar durante 1
1421 minuto.
1422 Se lav suavemente con agua.
1423 Se decoloro con alcohol etlico al 95%.
1424 Se lav suavemente con agua.
1425 Se agreg la safranina para la tincin de contraste.
1426 Se lav suavemente con agua.
1427 Se sec la preparacin.
1428 Por ltimo se examine al microscopio con el objetivo 100X de inmersin de aceite.

1429

1430 a. Identificacin en medio manitol salado.

1431Se trat de un medio altamente selectivo debido a su alta concentracin salina. Los
1432estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio; las colonias
1433aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante. Los estafilococos coagulasa negativos,
1434presentan colonias rodeadas de una zona roja o prpura. Las colonias sospechosas, se
1435repicarn en un medio sin exceso de cloruro de sodio para efectuarles, posteriormente, la
1436prueba de la coagulasa.

1437En el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, constituyen la fuente de


1438carbono, nitrgeno, vitaminas y minerales, el manitol es el hidrato de carbono fermentable,
1439el cloruro de sodio (que se encuentra en alta concentracin) es el agente selectivo que
1440inhibe el desarrollo de la flora acompaante, y el rojo fenol es el indicador de pH.

1441Las bacterias que crecen en un medio con alta concentracin de sal y fermentan el manitol,
1442producen cidos, con lo que se modifica el pH del medio y vira el indicador de pH del
1443color rojo al amarillo.

1444Los estafilococos crecen en altas concentraciones de sal, y pueden o no fermentar el


1445manitol. Los estafilococos coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan como
1446colonias amarillas rodeadas de una zona del mismo color.

1447Los estafilococos que no fermentan el manitol, se visualizan como colonias rojas, rodeadas
1448de una zona del mismo color o prpura.

1449 b. Incubacin

1450Se incubo durante 18-24 horas a 35-37 C, en aerobiosis.

1451 c. Identificacin

1452Se realiz la prueba de diferenciacin con el medio manitol salado, cuya caracterstica es
1453que el medio de color rosa virar a color amarillo por la presencia de la acidificacin y
1454confirmar la presencia del Staphylococcus aureus.18

1455

1456

1457

14583.4.4. Mtodo para la identificacin de Enterococcus Faecalis

1459Se procede al igual que para identificacin de Staphylococcus aureus, pero su


1460diferenciacin ser de acuerdo a la siguiente tabla:

1461

Catal Cade Raci Exige Aero Oxid PY Crecimi Escul Genero


asa nas o mos ntes bio asa R ento en ina
diplo al estric NaCl
s al gram to
gram
+ + - + + +a micrococc
us
+ + - - + +b staphyloco
ccus
- + - + +c + enterococc
us
- + +
1462+ reaccin positiva; - reaccin negativa
1463a crecimiento en presencia de 5% de NaCl
1464b crecimiento en presencia de 6,5% de NaCl
1465
14663.4.5. Mtodo para la identificacin de Cndida Albicans

1467a. Procedimiento

1468 Se suspendi un inculo de la cepa pura de Cndida con 24 horas de desarrollo en


1469 0,5 mL de suero humano o de conejo. Incubar a 35 37 C por 2h y 30 min.
1470 Se coloc 2 3 gotas de la suspensin en una lmina portaobjeto y se cubri con
1471 lmina cubreobjeto y se observ al microscopio con objetivo de 40X
1472 Interpretacin:

1473La prueba es positiva al visualizar una estructura elongada que se origina a partir de la
1474levadura.

1475 Preparacion Del Agar Sabouraud

1476Es un medio de cultivo muy utilizado para aislar hongos de animales. Sirve para el
1477aislamiento y mantenimiento de hongos en tubo inclinado. Debido a su composicin, los
1478hongos crecen exuberantemente y esporulan bien. Es el medio estndar para observar la
1479morfologa tpica de los hongos, pero no es el medio ideal de crecimiento o para estudiar la
1480esporulacin.

1481 Siembra
1482 Sembrar la cepa aislada en placa Petri que contenga agar papa dextrosa e incubar a
1483 42 C por 48 horas.
1484 Incubacin
1485

14863.4.6. Mtodos previos de laboratorio.

1487a. Esterilizacin de material de vidrio por calor seco.

1488 Procedimiento:

1489Se esterilizo con este mtodo el siguiente material: pipetas, tubos de vidrio, matraces,
1490probetas, placas petri de vidrio, tubos de ensayo.

1491b. Esterilizacin a vapor

1492 Procedimiento:
1493 Se esterilizo el siguiente material: medios de cultivo, medios de diferenciacin.
1494
14953.4.7. Preparacin de los discos de sensibilidad
1496
1497 Se obtuvo discos a partir de papel filtro Watman N 4 con 6 mm de dimetro con un
1498 perforador y se colocaron en frascos estriles.
1499 Las concentraciones del aceite esencial de mua se diluyeron en alcohol al 70%.
1500 Los discos se empaparon con 20 l del aceite esencial de mua preparados a
1501 diferentes concentraciones (100 mg/ml, 0,75 mg/ml, 0,50 mg/ml, 0,25 mg/ml),
1502 luego se dejaron secar. Posteriormente se colocaron en frascos estriles y se
1503 diferenciaron las concentraciones de los discos de sensibilidad para evitar
1504 confusiones.
1505 Se colocaron a Temperatura ambiente y en un lugar seco hasta su uso.
1506
15073.4.8. Prueba de susceptibilidad microbiana
1508
1509 a. Mtodo de difusin en agar segn Kirby Bauer
1510

1511 Procedimiento:

1512 Se prepar medio agar Mueller Hinton.


1513 Se verti el medio en placas Petri estriles aproximadamente 25 ml por placa, se
1514 dej endurecer y se coloc en la incubadora por 24 horas.
1515 Despus de 15 minutos siguientes al ajuste de la turbidez del inculo, siempre
1516 dentro del radio de 10 cm de esterilidad del mechero de alcohol se sumergi un
1517 hisopo estril en la suspensin.
1518 Se inoculo la superficie seca de la placa de Mueller Hinton, estriando con el hisopo.
1519 Se dej secar la placa a temperatura ambiente durante 3 a 5 minutos para excesos
1520 de humedad.
1521 Luego se coloc los discos de sensibilidad impregnados en aceite de mua en sus
1522 diferentes concentraciones. Con pinzas estriles se procedi a colocar en cada placa
1523 1 disco de papel de filtro embebido en 10 l de alcohol al 70% (control negativo),
1524 1 disco de paramonoclorofenol alcanforado (control positivo), 1 disco de papel de
1525 filtro embebido en el aceite esencial de Minthostachys mollis Griseb puro, 1 disco
1526 de papel de filtro embebido en el aceite esencial de Minthostachys mollis Griseb
1527 diluido al 75%, 1 disco de papel de filtro embebido en el aceite esencial de
1528 Minthostachys mollis Griseb diluido al 50%, y 1 disco de papel de filtro embebido
1529 en el aceite esencial de Minthostachys mollis Griseb diluido al 25%; entre los
1530 discos hubo una distancia no menor de 15 mm y de 1.5 cm del borde de la placa,
1531 presionndolos firmemente sobre la superficie del agar; todos estos discos se
1532 embebieron previamente en un recipiente por separado, para evitar que las
1533 sustancias difundan directamente en la placa.
1534 Se colocaron las 40 placas petri por especie a 37C en la incubadora por 48 horas.
1535
15363.4.9. Determinacin de la concentracin mnima inhibitoria (CMI)
1537
1538 Procedimiento:

1539Se procedi a la medicin de los halos inhibitorios del aceite de mua en sus diferentes
1540concentraciones con la escala Vernier o pie de rey.

15413.4.10. Recoleccin de datos

1542Se realiz una ficha de datos en la cual se anotaron los resultados de la prueba de difusin
1543en agar con discos, clasificndolos dependiendo del resultado. La recoleccin de los datos
1544se realiz de forma manual y visualmente. Para la medicin de los halos se utiliz una
1545regla correctamente calibrada. Se verific cada una de las fichas para evitar errores u
1546omisiones en los datos que pudieran perjudicar la investigacin.

1547

1548

1549

1550

1551

1552

1553

1554

1555

1556

1557 IV. RESULTADOS Y DISCUSIONES


1558
1559 IV.1. RESULTADOS

1560 Tabla n1 Anlisis estadsticos descriptivos de la accin del aceite esencial de


1561 Minthostachys mollis Griseb en sus diferentes concentraciones y del paramonoclorofenol
1562 alcanforado sobre el Staphylococcus Aureus.
1564Fuente: elaboracin personal

1565

1566Interpretacin:

1567Se presenta el valor medio del halo de inhibicin de las diferentes concentraciones del aceite
1568esencial de Minthostachys Mollis Griseb (mua) y del paramonoclorofenol alcanforado.
1569Encontrndose una media mayor del halo de inhibicin en el aceite esencial de mua al
1570100%(23,350) y una media menor del halo de inhibicin del aceite esencial de mua al
157125%(12,895).

1572

1573

1574

1575

1576

1577 TABLA N2 Anlisis de la varianza (ANOVA) unifactorial de la accin del aceite de


1578 mua en sus diferentes concentraciones y del Paramonoclorofenol Alcanforado sobre
1579 Staphylococcus Aureus
1581

1582

1583

1584

1585

1586Fuente: elaboracin personal

1587Interpretacin:

1588El ANOVA unifactorial indica que el p-valor o significancia asinttica es menor a 0,05, por
1589lo cual rechazamos la hiptesis nula y aceptamos la hiptesis alterna, la cual indica que
1590existe diferencias entre los 5 grupos de antibiticos, con respecto a los halos de inhibicin.

1591

1592

1593

1594

1595

1596

1597

1598

1599

1600

1601

1602

1603

1604

1605 Tabla n3: Prueba POST HOC a travs de HSD TUKEY (comparaciones mltiples)
1606 diferencias significativas entre los grupos de aceites y sus efectos sobre el Staphylococcus
1607 Aureus
1608
1609

1610Fuente: elaboracin personal

1611

1612Interpretacin:

1613Existe una diferencia significativa del tamao del halo de inhibicin producido por los
1614aceites utilizados debido al nivel de significancia encontrado ya que para todos los casos es
1615< 0.05, por lo cual existe diferencia del efecto causado por los aceites sobre en
1616Staphylococcus aureus.

1617 Tabla n4: Subconjuntos de homogeneidad HSD TUKEY basados en las medias de los
1618 aceites esenciales de Minthostachys Mollis Griseb (mua) utilizados en la inhibicin
1619 del Staphylococcus Aureus

1620
1621Fuente: elaboracin personal

1623Interpretacin:

1624 Las medias de los halos de inhibicin de los aceites esenciales de Minthostachys Mollis
1625 Griseb (mua) utilizados presentan diferencias significativas entre s, por lo cual se ubican
1626 en subconjuntos de homogeneidad diferentes, as mismo los efectos causados por los
1627 aceites esenciales de Minthostachys Mollis Griseb (mua) sobre el Staphylococcus Aureus
1628 fueron diferentes.

1629

1630

1631

1632

1633

1634

1635

1636

1637

1638

1639 Grfico n1: distribucin de las medias de los halos de inhibicin del aceite esenciale de
1640 Minthostachys Mollis Griseb (mua) en sus diferentes concentraciones y del
1641 paramonoclorofenol alcanforado sobre Staphylococcus Aureus

1642
1643Fuente: elaboracin personal

1644Interpretacin:

1645Se observa la distribucin grfica de las medias de los diferentes aceites esenciales de
1646Minthostachys Mollis Griseb (mua) utilizados contra el Staphylococcus Aureus, es as que
1647la media ms elevada fue la alcanzada por el aceite de mua al 100%, seguida en segundo
1648el aceite de mua en concentracin del 75%. En tercer lugar se encuentra la concentracin
1649al 50%, en cuarto lugar se encuentra el Paramonoclorofenol Alcanforado y por ltimo el
1650aceite de mua en concentracin del 25%.

1651 Tabla n5: anlisis estadsticos descriptivos de la accin del aceite esencial de
1652 Mintostachys Mollis Griseb (mua) en sus diferentes concentraciones y del
1653 paramonoclorofenol alcanforado sobre el Enterococcus Faecalis
1655Fuente: elaboracin personal

1656Interpretacin:

1657Se presenta el valor medio del halo de inhibicin de las diferentes concentraciones del aceite
1658esencial de Minthostachys Mollis Griseb (mua) y del paramonoclorofenol alcanforado.
1659Encontrndose una media mayor del halo de inhibicin en el aceite de mua al
1660100%(15,828) y una media menor del halo de inhibicin del aceite de mua al 25%(9,884).

1661

1662

1663

1664

1665

1666

1667

1668

Tabla n6 anlisis de la varianza (ANOVA) unifactorial de la accin del aceite esencial de


Minthostachys Mollis Griseb (mua) en sus diferentes concentraciones y del
paramonoclorofenol alcanforado sobre Enterococcus Faecalis
1669

1670

1671

1672
1673

1674

1675Fuente: elaboracin personal

1676Interpretacin:

1677El ANOVA unifactorial indica que el p-valor o significancia asinttica es menor a 0,05, por
1678lo cual rechazamos la hiptesis nula y aceptamos la hiptesis alterna, la cual indica que
1679existe diferencias entre los 5 grupos de aceites esenciales, con respecto a los halos de
1680inhibicin.

1681

1682

1683

1684

1685

1686

1687

1688

1689

1690

1691

1692

1693Tabla n7 prueba POST HOC a traves de HSD TUKEY (comparaciones mltiples)


1694diferencias significativas entre los grupos de aceites y sus efectos sobre enterococcus
1695FAECALIS
1697Fuente: elaboracin personal

1698Interpretacin:

1699Existe una diferencia significativa de efecto del aceite esencial de mua al 100%, a
1700diferencia del aceite esencial de mua al 50% y 25%. Existe tambin una diferencia
1701significativa de efecto del aceite de mua al 75% a diferencia del aceite de mua al 25%.
1702Adems existe tambin una diferencia significativa de efecto del aceite de mua al 50% a
1703diferencia del aceite esencial de mua al 25%. Por ultimo existe tambin una diferencia
1704significativa de efecto del aceite esencial de mua al 25% a diferencia del
1705paramonoclorofenol alcanforado.

1706

1707 Tabla n8: Subconjuntos de homogeneidad HSD TUKEY basados en las medias de los
1708 aceites esenciales utilizados en la inhibicin del Enterococcus Faecalis
1709
1710

1711

1712

1713

1714

1715

1716 Fuente:
1717elaboracin personal

1718Interpretacin:

1719Las medias de los halos de inhibicin del aceite esencial de mua al 100%, 75% y del
1720paramonoclorofenol alcanforado, no presentan diferencias significativas por lo cual se
1721encuentran en un subconjunto, al igual que el aceite esencial de mua al 75%, 50% y el
1722paramonoclorofenol alcanforado que tambin se ubican en otro subconjunto, a diferencia
1723del aceite esencial de mua al 25% que difieren significativamente de los dems.

1724

1725

1726 Grafico n2: Distribucin de las medias de los halos de inhibicin del aceite esencial de
1727 mua en sus diferentes concentraciones y del paramonoclorofenol alcanforado sobre
1728 Enterococcus Faecalis

1729FUENTE: ELABORACION PERSONAL

1730

1731Interpretacin:

1732Se observa la distribucin grafica de las medias de los diferentes aceites utilizados contra
1733el Enterococcus faecalis, es as que la media ms elevada fue la alcanzada por el aceite
1734esencial de mua al 100%,seguida en segundo lugar por el paramonoclorofenol
1735alcanforado, en tercer lugar se encuentra la concentracin al 75%, en cuarto lugar se
1736encuentra el aceite de mua en concentracin del 50%.y por ltimo el aceite de mua en
1737concentracin del 25%.
Tabla n9 : Anlisis estadsticos descriptivos de la accin del aceite esencial de mua en
sus diferentes concentraciones y del paramonoclorofenol alcanforado sobre Candida
albicans

1739Fuente: elaboracin personal

1740Interpretacin:

1741Se presenta el valor medio del halo de inhibicin de las diferentes concentraciones del aceite
1742esencial de mua y del paramonoclorofenol alcanforado. Encontrndose una media mayor
1743del halo de inhibicin en el aceite esencial de mua al 75%(15,363) y una media menor del
1744halo de inhibicin del aceite esencial de mua al 25%(11,570).

1745

1746

1747

1748
1749

1750

1751

1752

1753

1754

1755

Tabla n 10: Anlisis de la varianza (ANOVA) unifactorial de la accin del aceite esencial
de mua en sus diferentes concentraciones y del paramonoclorofenol alcanforado sobre
Cndida Albicans

1756Fuente: elaboracin personal

1757Interpretacin

1758El ANOVA unifactorial indica que el p-valor o significancia asinttica es menor a 0,05, por
1759lo cual rechazamos la hiptesis nula y aceptamos la hiptesis alterna, la cual indica que
1760existe diferencias entre los 5 grupos de aceites esenciales, con respecto a los halos de
1761inhibicin.

1762

1763

1764

1765
1766

1767

1768

Tabla n11: Prueba POST HOC a travs de HSD TUKEY (comparaciones mltiples)
diferencias significativas entre los grupos de aceites y sus efectos sobre la Cndida Albicans

1769Fuente: elaboracin personal

1770Interpretacin:

1771Existe una diferencia significativa de efecto del aceite de mua al 100%, 75% y 50% a
1772diferencia del aceite de mua al 25% y el paramonoclorofenol alcanforado. Existe tambin
1773una diferencia significativa de efecto del aceite de mua al 25% a diferencia del aceite de
1774mua al 100%, 75%, 50% y el paramonoclorofenol alcanforado.

1775

1776 TABLA N12 SUBCONJUNTOS DE HOMOGENEIDAD HSD TUKEY BASADOS


1777 EN LAS MEDIAS DE LOS ACEITES UTILIZADOS EN LA INHIBICION DE LA
1778 CANDIDA ALBICANS

1779

1780Fuente: elaboracin personal

1781

1782Interpretacin:

1783Las medias de los halos de inhibicin del aceite de mua al 100%, 75%, 50% no presentan
1784diferencias significativas por lo cual se encuentran en un subconjunto, a diferencia del
1785aceite de mua al 25% y el paramonoclorofenol alcanforado que difieren
1786significativamente de los dems.

1787

1788

1789

1790
1791

1792

1793 Grafico n3: Distribucin de las medias de los halos de inhibicin del aceite esencial de
1794 mua en sus diferentes concentraciones y del paramonoclorofenol alcanforado sobre la
1795 Cndida Albicans

1796

1797

1798Fuente: elaboracin personal

1799Interpretacin:

1800Se observa la distribucin grafica de las medias de los diferentes aceites esenciales
1801utilizados contra la Cndida Albicans, es as que la media ms elevada fue la alcanzada por
1802el aceite de mua al 75%,seguida en segundo lugar por su concentracin al 50%, en tercer
1803lugar se encuentra la concentracin al 100%, en cuarto lugar se encuentra el
1804paramonoclorofenol alcanforado y por ltimo el aceite de mua en concentracin del 25%.
1805 IV.2. DISCUSIN

1806

1807El objetivo del presente estudio fue determinar el efecto inhibitorio invitro del aceite
1808esencial de Minthostachys Mollis Griseb (mua) sobre microorganismos prevalentes en
1809patologas periapicales crnicas de origen endodntico Una Puno 2016

1810Azaa I. en el 2010 en su estudio la efectividad antibacteriana in vitro del aceite esencial


1811de Minthostachys mollis griseb (mua) sobre bacterias prevalentes en patologas
1812periapicales crnicas de origen endodntico, Fusobacterium nucleatum, Prevotella
1813melaninognica, Enterococcus faecalis y muestras de conducto radicular con Periodontitis
1814Apical Crnica, Al realizar las pruebas de sensibilidad in vitro se obtuvieron los siguientes
1815resultados: el aceite esencial de Minthostachys Mollis Griseb mua puro y en sus
1816diluciones present efectividad antibacteriana menor al Paramonoclorofenol alcanforado
1817frente a las muestras bacterianas en estudio13. Estos resultados difieren de los encontrados
1818en el presente estudio, probablemente debido a la diferente procedencia del Minthostachys
1819Mollis Griseb que en el estudio anterior proceden de las alturas del Centro Poblado Menor
1820de Muruhuay, Distrito de Acobamba, ciudad de Tarma, Departamento de Junn y en nuestro
1821estudio las plantas son oriundas del centro poblado de Jayllihuaya provincia de Puno.

1822Alaba W. en el 2014 en su estudio. Efecto inhibitorio in vitro del aceite esencial de las
1823hojas de Minthostachys Mollis Griseb (mua) sobre colonias de Enterococcus faecalis
1824ATCC 29212, se evalu la susceptibilidad in vitro llegando a la conclusin que el aceite
1825esencial de Minthostachys Mollis Griseb (mua) al 100% posee mayor actividad
1826inhibitoria in vitro sobre el crecimiento del E. faecalis que el IKI al 2% y la dilucin
1827etanlica de aceite esencial al 50%. 12. Estos resultados son semejantes a los obtenidos en el
1828presente estudio, evidenciando asi la eficacia que posee el aceite de mua al 100% sobre
1829las cepas de Enterococcus faecalis.

1830

1831

1832

1833

1834
1835 V. CONCLUSIONES

1836

1837 V.1. Primera

1838El aceite de Minthostachys Mollis Griseb (mua), presento una gran actividad inhibitoria
1839sobre las muestras de microorganismos en estudio: Enterococcus Faecalis, Staphylococcus
1840Aureus y Candida Albicans, esta actividad inhibitoria fue mayor a la del
1841Paramonoclorofenol Alcanforado.

1842 V.2. Segunda

1843La actividad del aceite de Minthostachys Mollis Griseb (mua) sobre las cepas de
1844staphylococcus aureus, evidencio una mayor efectividad del aceite de mua al 100% por
1845encima de la actividad del paramonoclorofenol alcanforado el cual solo supera a la
1846efectividad del aceite de mua al 25%

1847 V.3. Tercera

1848La actividad del aceite de Minthostachys Mollis Griseb (mua) sobre las cepas de
1849Enterococcus Faecalis, evidencio una mayor efectividad del aceite de mua al 100% por
1850encima de la actividad del paramonoclorofenol alcanforado el cual supera a la efectividad
1851del aceite de mua al 75%, 50% y 25%

1852 V.4. Cuarta

1853La actividad del aceite de Minthostachys Mollis Griseb (mua) sobre las cepas de Cndida
1854Albicans, evidencio una mayor efectividad del aceite de mua al 75% seguida de la
1855concentracin del aceite al 50% y 100%, superando as la actividad del
1856Paramonoclorofenol Alcanforado, el cual solo supera la actividad inhibitoria de la
1857concentracin al 25% del aceite de Mua.

1858

1859

1860

1861

1862 VI. RECOMENDACIONES


1863 Replicar la investigacin in vivo a travs de la experimentacin en conductos
1864 radiculares infectados.
1865 Complementar el presente estudio con la identificacin de los componentes
1866 qumicos del aceite esencial de Minthostachys mollis griseb (Mua)
1867 Extender el estudio del aceite esencial de Minthostachys mollis griseb (Mua)
1868 incidiendo en la posible accin sinrgica entre este aceite esencial y los diferentes
1869 tipos de medicamento intraconducto que existen en la actualidad.
1870 Se recomienda ampliar el estudio del efecto antibacteriano del aceite esencial de
1871 Minthostachys mollis griseb (Mua) en cepas de diferentes bacterias de inters
1872 estomatolgico.
1873 Realizar estudios comparativos sobre el efecto antibacteriano del aceite esencial de
1874 las diferentes especies de Minthostachys mollis griseb (Mua) que existen en Puno
1875 y el Per
1876
1877
1878
1879
1880

1881

1882

1883

1884

1885

1886

1887

1888

1889

1890 VII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS


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ANEX
OS
1981

1982

1983

1984

1985

1986

1987

1988

1989

1990

1991

1992 FICHA DE RECOLECCION DE DATOS

1993

1994

1995

1996

1997

1998

1999

2000

2001

2002

2003
2004

2005

2006

2007

2008
2009
FOTOGRAFIAS

2010

2011

2012 1. CENTRO POBLADO DE JAYLLIHUAYA - PUNO

2014
2015
2016
2017

2018

2019 2. RECOLECCION DE MINTHOSTACHYS MOLLIS MUA


2020
2021

2022

2023

2024 3. CARGANDO CON MUA EL EQUIPO DE EXTRACCION DE ACEITES


2025 ESENCIALES
2027
2028
2029
2030
2031 4. EQUIPO DE EXTRACCION DE ACEITES ESENCIALES POR

2032 ARRASTRE DE VAPOR


2033

2034
2035
2036
2037
2038
2039 5. OBTENCION DEL ACEITE ESENCIAL DE MINTHOSTACHYS MOLLIS
2040 MUA
2042

2043

2044

2045

2046

2047

2048

2049

2050

2051

2052

2053

2054

2055 6. MUESTRAS DE CONDUCTOS RADICULARES CONTENIDOS EN


2056 VIALES CON AGAR NUTRITIVO
2057

2058

2059

2060 7. OBTENCION DE SANGRE


2061

2062

2063 8.
2064 8.
2065 8.
2066 8.
2067 8.
2068 8.
2069 8.
2070 8.
2071 8.
2072 8.
2073 8.
2074 8.
2075 8.
2076 8.
2077 8.
2078 8.
2079 SANGRE Y MEDIO BASE PREVIOS A SU MEZCLA
2064

2065

2066

2067 9. PLAQUEADO
2068

2069
2070 10. SIEMBRA
2071

2072

2073

2074

2075

2076 11. COLORACION GRAM Y PREPARACION PARA EL MICROSCOPIO


2077

2078

2079 12. CANDIDA ALBICANS MICROSCOPIO 100X


2080

2081

2082

2083

2084

2085

2086 13. STAPHYLOCOCCUS AUREUS MICROSCOPIO 100X


2087

2088

2089

2090 14. ENTEROCOCCUS FAECALIS MICROSCOPIO 100X


2091

2092

2093

2094

2095

2096 15.
2097 15.
2098 15.
2099 15.
2100 15.
2101 15.
2102 15.
2103 15.
2104 15.
2105 15.
2106 15.
2107 15.
2108 15.
2109 15.
2110 15.
2111 15.
2112 15.
2113 CEPAS AISLADAS DE CANDIDA ALBICANS
2097

2098
2099 16. CEPAS
2100 AISLADAS
2101 DE

2102 STAPHYLOCOCCUS AUREUS


2103

2104

2105

2106 17. CEPAS AISLADAS DE ENTEROCOCCUS FAECALIS


2107

2108 18. PREPARACION DEL MEDIO MUELLER HINTON


2109
2110

2111 19. PLACAS CON EL MEDIO ENDURECIDO

2112 20. PARAMONOCLOROFENOL Y ACEITE DE MUA


2113

2114

2115
2116 21. PREPARACION DE LAS CONCENTRACIONES DEL ACEITE DE MUA
2117

2118

2119 22. SIEMBRA DE LOS MICROORGANISMOS EN LAS PLACAS CON AGAR


2120 MUELLER HINTON
2121

2122

2123

2124

2125 23. PREPARACION DE LOS DISCOS DE SENSIBILIDAD


2127

2128 24. COLOCACION DE LOS DISCOS DE SENSIBILIDAD EN LAS PLACAS


2129

2130
2131 25. INCUBADORA 37 C
2132

2133 26.
2134 26.
2135 26.
2136 26.
2137 26.
2138 26.
2139 26.
2140 26.
2141 26.
2142 26.
2143 26.
2144 26.
2145 26.
2146 26.
2147 26.
2148 26.
2149 26.
2150 26.
2151 26. MEDIDA DEL
2152 HALO DE
2153 INHIBICION DEL
2154 ENTEROCOCCUS
2155 FAECALIS
2138

2139

2140

2141

2142

2143

2144

2145

2146

2147

2148

2149

2150
2151

2152 27. MEDIDA DEL HALO DE INHIBICION DEL STAPHYLOCOCCUS


2153 AUREUS
2154

2155

2156

2157

2158

2159

2160

2161

2162

2163

2164

2165

2166

2167

2168 28. MEDIDA DEL HALO DE INHIBICION DE LA CANDIDA ALBICANS


2169

2170

2171

2172

2173

2174

2175

2176

2177

2178
2179

2180

2181

2182

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2187