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Rev. Bras. Sade Prod. Anim., Salvador, v.13, n.4, p.938-953 out./dez., 2012 http://www.rbspa.ufba.

br
ISSN 1519 9940

Inovaes e desafios na avaliao de alimentos na nutrio de ruminantes1

Innovations and challenges in food evaluation in ruminant nutrition

CANESIN, Roberta Carrilho2*; FIORENTINI, Giovani2; BERCHIELLI, Telma


Teresinha2

1
Reviso apresentada no Congresso Brasileiro de Zootecnia (ZOOTEC 2011).
2
Universidade Estadual Paulista, Faculdade de Cincias Agrria e Veterinrias, Departamento de
Zootecnia, Jaboticabal, So Paulo, Brasil.
*Endereo para correspondncia: betacanesin@hotmail.com

RESUMO rather dynamic, always making use of new


technologies and strategies to improve the
utilization of food, always searching new
A avaliao de alimentos um dos principais methods as new answers to questions are
pontos a serem observados no setor de nutrio necessary. Thus, the establishment of
animal, a qual diz respeito utilizao de appropriate methodologies to obtaining the
mtodos para descrever alimentos ao seu answers is essential to achieve success in
pblico e sua capacidade de sustentar search. This way this review will address and
diferentes tipos e nveis de desempenho animal. discuss some of the main techniques used in
Atualmente, as pesquisas tm buscado feed evaluation applied to ruminant nutrition
relacionar o contedo de nutrientes dos
alimentos com seu aproveitamento digestivo e Keywords: chemical analysis, digestibility, gas
metablico. A nutrio animal uma cincia production, iNDF, n-alkanes.
bastante dinmica, sempre lana mo de novas
tecnologias e estratgias para melhorar o
aproveitamento dos alimentos e busca novas
metodologias para respondem s demandas INTRODUO
emergenciais.. Dessa forma, o estabelecimento
de estratgias apropriadas para obteno de
respostas essencial para que o sucesso na Durante a evoluo, os animais
pesquisa seja atingido. Assim, esta reviso ir ruminantes desenvolveram caractersticas
abordar e discutir as principais tcnicas
utilizadas na avaliao de alimentos aplicadas
anatmicas e simbiticas, que lhes
nutrio de ruminantes. permitem utilizar eficientemente
carboidratos estruturais como fonte de
Palavras - chave: anlise qumica, digestibilidade, energia e compostos nitrogenados no
FDNi, n-alcanos, produo de gs. proteicos como fonte de protena
(VALADARES FILHO & PINA, 2006).
Alm desse potencial, os ruminantes
SUMMARY possuem uma importante funo como
produtores de bens, em geral, para a
The food evaluation is one of the main points to humanidade.
be observed in the animal nutrition sector, A avaliao de alimentos um dos
which concerns the use of methods to describe principais pontos a serem observados no
animal feed as well its ability to support
different types and levels of animal
setor de nutrio animal, a qual diz
performance. Currently, researches have tried respeito utilizao de mtodos para
finding relationship between the nutrient content descrever alimentos ao seu pblico e
of foods and their digestive and metabolic sua capacidade de sustentar diferentes
exploitation. The animal nutrition is a science tipos e nveis de desempenho animal. A

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maior nfase dada determinao da bruta e extrato no nitrogenado. A


composio qumica especfica, embora matria seca (MS) representa a perda
as caractersticas fsicas dos alimentos da umidade do alimento, geralmente,
tambm sejam importantes. O objetivo realizada por secagem em estufa
prtico de avaliao de alimentos com circulao de ar forada a
otimizar a eficincia de utilizao de 60C (pressecagem) e 100C
alimentos para animais, produo (secagem definitiva), determinada,
animal e, finalmente, o retorno gravimetricamente, pelo resduo
financeiro ao produtor. Nesse contexto, remanescente aps a secagem. A matria
importante para estabelecer o mineral ou cinzas determinado pelo
potencial dos alimentos e a necessidade aquecimento da amostra 600C, at a
de suplementos apropriados, a fim de combusto total da matria orgnica, e o
superar as deficincias nutricionais e resduo ou cinzas pode ser usado para
elevar o nvel de desempenho. determinar o teor de elementos minerais
A pesquisa em nutrio animal exerce, individuais no alimento (SILVA &
dentro da rea de produo animal, QUEIROZ, 2002).
imprescindvel papel, visto fazer uso de O teor de protena bruta calculado a
metodologias que possibilitem fornecer partir do teor de nitrognio (N) e obtido
informaes a respeito dos ingredientes pelo mtodo Kjeldahl. Ocorre que, nos
utilizados na alimentao animal e dias atuais, est em voga o mtodo de
prever a maneira como a estrutura dos Dumas, cuja dinmica envolve a
alimentos ir afetar o seu desempenho. combusto da amostra, e a determinao
Atualmente, as pesquisas tm buscado realizada atravs do N gasoso
relacionar o contedo de nutrientes dos liberado. O contedo proteico
alimentos com seu aproveitamento determinado atravs da multiplicao do
digestivo e metablico. Dessa forma, teor de N pelo fator de converso de
o estabelecimento de metodologias cada alimento, ou atravs do fator
apropriadas para obteno de respostas universal 6,25 (assumindo que o N
essencial para que o sucesso na derivado de protena contm 16% N).
pesquisa seja atingido (BERCHIELLI et Na comparao dos mtodos de
al., 2011). Diante do exposto, nesta Kjeldahl e Dumas, Sader et al. (2004)
reviso sero apresentadas e discutidas verificaram que o desvio padro do teor
as principais tcnicas de avaliao de de N dentro e entre estes esto de
alimentos aplicadas nutrio de acorco com os intervalos permitidos
ruminantes. pela literatura. Se esse dado for
associado ao fato da metodologia de
Dumas consistir em uma tcnica no
MTODOS PARA AVALIAO DA poluente ao ambiente, esta metodologia
COMPOSIO BROMATOLGICA pode ser considerada capaz de substituir
DOS ALIMENTOS com vantagens o procedimento de
Kjeldahl, em anlises de rotina em
laboratrios de nutrio animal.
O denominado mtodo de Weende um Nas anlises e caracterizao das
dos mais utilizados na nutrio animal,, gorduras, os lipdios so especificados
desenvolvido, em 1864, por cientistas de uma maneira geral como extrato
alemes, que envolve a determinao da etreo (EE). No entanto, quando
matria seca, matria mineral ou cinzas, adicionado a estes, o ter extrai
protena bruta, extrato etreo, fibra pigmentos vegetais como clorofila,

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xantofila e caroteno, alm de traos de nitrognio, com a determinao do


diversas outras substncias. Remove nitrognio insolvel em detergente neutro
ainda certos leos essenciais que no (NIDN) e nitrognio insolvel em
so produtos lipdicos e que consistem detergente cido (NIDA), adotado em
basicamente de steres, aldedos e sistemas atuais de exigncias nutricionais.
teres. Assim, o teor de EE pode ser Segundo Berchielli et al. (2011) certos
superestimado em alimentos ricos em fatores podem ser considerados como
ceras e pigmentos (clorofila, xantofila e fontes de variao na determinao de
outros sem valor energtico) devido FDN e FDA, como a contaminao da
solubilidade destes compostos em ter. FDN por amido, para a qual se
Fibra bruta (FB) uma frao dos recomenda o uso de amilase estvel
alimentos composta por carboidratos alta temperatura; a contaminao da
estruturais resistentes ao tratamento FDA com pectina, sugere-se a anlise
sucessivo com cido e base diludos. sequencial, anlise seguida de FDN e
Uma amostra seca e desengordurada FDA em uma mesma amostra; e a
submetida digesto com uma soluo contaminao com minerais, propem-
cida e depois com uma soluo bsica se que os resultados de FDN e FDA
fraca. Essa metodologia subestima os sejam expressos como livres de cinzas,
reais valores de fibra, pois o tratamento pela ao da queima das amostras em
com lcali solubiliza pores de lignina mufla, a 600C. No entanto, determinadas
e hemicelulose. Por sua vez, a lignina modificaes realizadas na metodologia
solubilizada torna-se parte do extrato para obteno dos valores de FDN, no
no nitrogenado (ENN), o que resulta, so adotadas, de modo a resultar em
muita vezes, na digestibilidade da FB ausncia de padronizao e pouca
ser maior que a do ENN. confiabilidade na comparao de
O extrativo no nitrogenado (ENN) resultados.
corresponde, teoricamente, aos Com o objetivo de diminuir o tempo de
carboidratos no estruturais, possui erros anlises laboratoriais, Dechamps (1999)
acumulativos das demais determinaes, utilizou a autoclave (40 minutos a
uma vez ser obtido por meio do clculo temperatura 120o C) nas anlises de
de outras anlises (por meio de FDN. Essa inovao permitiu executar
informaes das demais anlises (ENN = at 120 amostras por operao, o que
100 (PB + EE + FB +MM)). O maior aumentou a produtividade no laboratrio,
desses erros decorrente da subestimao com sensvel economia de reagentes.
dos valores de FB por solubilizao de Atualmente, Senger et al. (2008) testaram
parte da celulose e da lignina em lcali, a diferentes tempos e temperaturas de
superestimar os ENN. autoclave para anlises de FDN e FDA a
O mtodo de Van Soest, desenvolvido fim de encontrar um procedimento
em 1967, na Cornell University, permite alternativo ao convencional e concluram
identificar os constituintes vegetais, em que as anlises de forragem ou
contedo e parede celulares , atravs da concentrado podem ser realizadas
extrao da biomassa da planta, com simultaneamente, em autoclave, por meio
detergente neutro, para deixar um de sacos de filtro e uma temperatura de
resduo fibroso, predominantemente, 110 C, durante 40 minutos.
hemicelulose, celulose e lignina ou com A determinao do teor de lignina feita
detergente cido para deixar resduos de a partir da FDA. Duas metodologias
celulose e lignina. Esse mtodo tambm podem ser utilizadas para esse fim: numa
utilizado no fracionamento do delas a determinao realizada por meio

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de soluo de cido sulfrico a 72% para determinao da ingesto e


(LAD ou lignina Klason) ou por meio digestibilidade da matria orgnica com
do permanganato de potssio (Lignina base na anlise de fezes ou forragens e
permanganato), conforme descrito confrontaram os resultados queles
por Silva & Queiroz, (2002). Na obtidos por tcnicas in vivo. Nesse
determinao pelo mtodo do cido sentido, os autores citam que a acurcia
sulfrico, ocorre a solubilizao da do modelo utilizado pelo NIRS
celulose e o resduo consiste de lignina semelhante, ou melhor, a outros mtodos
e cinzas insolveis em detergente cido. de estimativa, porm Decruyenaere et al.
Pelo mtodo do permanganato de (2009) destacam que o banco de dados
potssio, a lignina oxidada por meio utilizado na calibrao deve ser bastante
de soluo tamponada de cido actico amplo para garantir a confiabilidade nos
e permanganato de potssio, que contm resultados.
ferro trivalente e prata monovalente,
como catalisadores. Os xidos de ferro
e de mangans depositados so ESTIMATIVA DE CONSUMO E
dissolvidos numa soluo alcolica, EMPREGO DE MARCADORES
com cido oxlico e cido clordrico, de
forma a remanescer no cadinho apenas
celulose e minerais insolveis. Deve-se O consumo o componente que exerce
ressaltar que a escolha do mtodo papel de maior importncia na nutrio
depende do tipo de material a ser animal, pois determina o nvel de
analisado e da finalidade da pesquisa a nutrientes ingerido e, consequentemente,
ser realizada. o seu desempenho (BERCHIELLI et al.,
A espectroscopia de reflectncia do 2011). A estimativa acurada do
infravermelho proximal (NIRS) tambm consumo de matria seca por animais
tem sido adotada para determinao da criados em pastejo sempre foi um
composio dos alimentos. Em termos desafio para os pesquisadores, se
de exatido, preciso, velocidade e considerado o grande nmero de
custo por unidade de anlise, a tcnica variveis, atuantes no controle do
NIRS, desde que seja calibrada consumo, e as limitaes impostas pelas
corretamente, prefervel mtodos metodologias utilizadas para obteno
laboratoriais tradicionais. Entretanto, a dessas estimativas. Segundo Valadares
tcnica, em ltima anlise, consiste Filho et al. (2006), a tcnica dos
em um conjunto de anlises padres indicadores talvez seja a de maior
de amostras, cuja composio foi recorrncia e aceitabilidade para a
determinada por mtodos tradicionais estimao do consumo em bovinos.
(anlises qumicas). No estudo da Entre os indicadores externos disponveis,
tcnica NIRS, Fontaneli et al. (2004) o xido crmico (Cr2O3) tem sido o mais
observaram que o mtodo NIRS utilizado, principalmente para clculo da
apresentou elevada acurcia na produo fecal, devido a sua facilidade de
determinao dos teores de PB, FDA e incorporao s dietas, ao custo
FDN em cultivares de Cynodon sp. e, relativamente baixo e simplicidade de
ainda, mostrou ndices de calibrao anlise. Entretanto, Titgemeyer et al.
satisfatrios para determinao de (2001) ressaltaram que o cromo no
minerais. aprovado pelo Food and Drug
Atualmente, Decruyenaere et al. (2009) Admiministration (FDA) como aditivo
avaliaram a utilizao do NIRS alimentar.

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Nesse contexto, o dixido de titnio dois indicadores para ambos parmetros


(TiO2) surge como alternativa ao cromo avaliados, tampouco houve influncia
na funo de indicador em estudos de do perodo de infuso sobre a excreo
digesto, visto poder ser adicionado dos indicadores.
legalmente ao alimento em quantidades Outro indicador que tem sido utilizado na
que no excedam 1,0% do produto final. estimativa do consumo e digestibilidade
Dessa forma, Titgemeyer et al. (2001) so os n-alcanos. Os n-alcanos so
compararam as recuperaes fecais em hidrocarbonetos alifticos saturados, cuja
novilhos, por meio do TiO2 ou do frmula geral CnH2n+2, e que
Cr2O3, misturados aos concentrados representam entre 3% e 20% do total dos
base de milho, em diferentes perodos compostos das ceras insaponificveis da
de coleta, e verificaram que as cutcula em diversas gramneas estudadas.
recuperaes fecais do TiO2 e do Cr2O3 O uso da tcnica dos alcanos para
foram baixas, durante o primeiro estimar ingesto e digestibilidade, com
perodo de coleta de fezes (2 a 6 dias a associao ou no de outras
aps a aplicao do indicador) e no substncias, tem se consolidado como
diferiram entre si nos outros trs uma metodologia consistente e de
perodos de coletas, que foram de 7 a potencial para auxiliar no entendimento
11; 12 a 16; e 17 a 21 dias aps o incio das relaes entre os herbvoros e o
da aplicao dos indicadores. ambiente pastoril (CAVALHO et al.,
Com o mesmo intuito de desenvolver 2007). Esse mtodo exige cuidados
um indicador externo eficaz, a semelhantes aos necessrios em
Universidade Federal de Minas Gerais qualquer outra tcnica baseada em
desenvolveu a LIPE (lignina de indicadores, isso inclui a obteno de
madeira moda extrada do Eucaliptus uma amostra representativa da forragem
grandis) que um hidroxifenil propano consumida e das fezes, cuidadosa
modificado e enriquecido, isto , um administrao do indicador externo e
indicador de digestibilidade e consumo padro diurno de excreo fecal
(SALIBA, 2005). A degradao da (OLIVN et al., 2007). Alm disso, tem
lignina um processo oxignio- se observado que as caractersticas da
dependente que impossibilita a sua dieta, em termos de valor nutritivo
ocorrncia no rmen, o que a torna ou nmeros de componentes, podem
capaz de ser usada com sucesso como influenciar a recuperao fecal dos
indicador. A LIPE foi inicialmente alcanos sintticos ou naturais
aplicada em estudo de consumo e (FERREIRA et al., 2005).
digestibilidade comparada coleta total Essa tcnica tem sido validada em
em coelhos, sunos, ovinos, e equinos experimentos realizados em gaiolas de
com diferentes dietas (SALIBA et al., metabolismo, tanto em ovinos (DOVE
2003a; SALIBA et al., 2003b). Oliveira et al., 2002; LEWIS et al., 2003;
et al. (2005) compararam a estimativa VALIENTE et al., 2003; FUKOMOTO
de excreo fecal e consumo de matria et al., 2006; KELI et al. 2008), como em
seca obtidos pela LIPE e pelo Cr2O3, bovinos (HENDRICKSEN et al., 2002;
de bovinos da raa Nelore em pastejo de MOLINA et al., 2004; OLIVN et al.,
Brachiaria brizantha cv. Marandu. Os 2007) e em caprinos (DOVE &
autores avaliaram tambm a estimativa MAYES, 1991; FERREIRA et al.,
obtida a partir do terceiro dia de infuso 2005). Recentemente, Morais et al.
do indicador e a partir do stimo dia. (2011) validou o mtodo n-alcanos para
No foi observada diferena entre os estimar o consumo e digestibilidade de

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bovinos Nelore, alimentados com quantidade excretada em determinado


gramneas tropicais (Brachiaria brizantha perodo de tempo. Para isso, leva-se em
cv. Marandu). Os autores relataram considerao a avaliao do consumo e
que a correo das concentraes da da produo fecal que pode ser feita
recuperao fecal dos n-alcanos, por meio atravs de dois mtodos: o convencional,
de valores individuais para cada alcano, com animais diretamente em gaiolas de
parece melhorar estimativas de consumo metabolismo para coleta total de fezes; ou
de matria seca e digestibilidade. pela estimativa da produo fecal, com o
Os autores tambm destacaram a uso de indicadores.
importncia de uma correo exata de as A partir disso, podem ser determinadas a
concentraes de alcanos nas fezes, a fim digestibilidade aparente, na qual frao
de serem obtidos resultados precisos de endgena ou perdas por secrees no
estimativas de consumo de matria seca. so consideradas, e a digestibilidade
Tambm possvel se estimar o consumo real ou verdadeira evidenciada nas
individual do suplemento com uso descamaes do sistema digestrio
dos alcanos, quando a composio de (LANA, 2007). O nitrognio metablico
alcanos do suplemento suficientemente fecal varia entre espcies de acordo com o
diferente da composio do pasto, e a taxa tipo de alimentao consumida. A
de recuperao do alcano conhecida digestibilidade real maior ou igual
(DOVE & MAYES, 1996). Com tal digestibilidade aparente, com exceo da
finalidade, pesquisas que utilizam cera de celulose, na qual este modelo de
abelhas tm sido desenvolvidas (DOVE digestibilidade igual quela, pois no
et al., 2002; ELWERT & DOVE, 2005), existe perda endgena de celulose.
cujo contedo abriga uma composio O perodo do ensaio em experimentos,
distinta de alcanos, para marcar o em delineamento inteiramente
suplemento e, assim, se proceder com casualizado ou de blocos ao acaso, deve
estimativas mais acuradas de consumo ser de aproximadamente 20 dias para
de suplemento de animais em pastejo. ruminantes, com 15 dias de adaptao
De acordo com dados observados na gaiola metablica e dieta, no intuito de
literatura, a realizao de trabalhos de provocar mudanas na populao
estimativa de consumo de forragem, microbiana ruminal. Enquanto a
atravs do mtodo dos n-alcanos, parece determinao do consumo voluntrio
uma ferramenta bastante promissora. atravs da coleta de alimentos, sobras e
Todavia, o custo alto. A LIPE fezes deve ser de pelo menos 5 dias. Em
tem apresentado bons resultados contrapartida, Ferreira et al. (2009)
na determinao do consumo e avaliaram o perodo de coleta total de
digestibilidade e pode ser uma opo fezes, para estimativa da digestibilidade
legtima de indicador para uso em da matria seca, cuja variao foi de 3 a
pesquisas na rea de nutrio animal. 5 dias para bovinos de corte e leite, e
no observaram diferenas significativas.
Isso os levou a recomendar 3 dias de
METODOLOGIAS EMPREGADAS NA coleta total.
AVALIAO DA DIGESTIBILIDADE O clculo da digestibilidade da matria
seca (DMS) dado pela frmula:
DMS (%) = [(MSingeridaMSexcretada
O objetivo de experimentos de nas fezes)/MSingerida] x 100, onde
digestibilidade obter de forma acurada MS=matria seca.
a quantidade de alimento fornecido e a

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No clculo da digestibilidade de um proposto por Blaxter e Martin em 1962,


ingrediente participante de uma dieta citados por Fujihara et al. (1987), e
composta, considera-se que no ocorre demonstrou relao direta entre a
efeito associativo entre os ingredientes. excreo urinria de metablitos de
fundamental conhecer antecipadamente purinas e a produo de nitrognio
a digestibilidade dos demais componentes microbiano em ovelhas. No entanto,
da dieta, para se proceder com o clculo maiores progressos no estabelecimento
pelo mtodo da diferena. Nesse caso, a dessa tcnica tm sido obtidos em
digestibilidade do alimento dada pela bovinos e ovinos (CHEN et al., 1995).
frmula: Para o uso da tcnica de derivados
DMS = [MSingerida teste de purinas, assume-se que o
(MSexcretada x MSexcretada do fluxo intestinal dos cidos nuclicos
alimento conhecido)]/MSingerida do predominantemente de origem
alimento teste. microbiana e que, aps a digesto
Apesar de ser considerado como intestinal, as bases purinas (adenina e
metodologia mais confivel, apresenta o guanina) so absorvidas, catabolizadas e
inconveniente de exigir maior nmero excretadas, proporcionalmente, na
de animais, controle rigoroso da urina. Os derivados de purinas so
quantidade ingerida e excretada e excretados como hipoxantina, xantina,
instalaes adequadas. Normalmente, o cido rico e alantona (YU et al.,
custo da implantao das instalaes ou 2002).
aquisio de gaiolas metablicas Em bovinos, alantona e cido rico so
muito alto, o que inviabiliza o uso da os principais derivados de purinas
metodologia (BERCHIELLI et al., presentes na urina, em razo da alta
2011). atividade no sangue e nos tecidos da
A quantificao da sntese de protena enzima xantina oxidase, que converte
microbiana mais que necessria, xantina e hipoxantina em cido rico
devido grande importncia que os antes da excreo. Caprinos, ovinos e
microorganismos bacterianos exercem sunos, no entanto, excretam quantidades
na digesto e degradao da fibra, alm substanciais de xantina e hipoxantina,
de conferir ao animal protena microbiana em virtude da menor atividade da
de alto valor nutricional. A estimativa de enzima xantina oxidase no plasma
sntese microbiana ruminal pode ser (BELENGUER et al., 2002).
obtida atravs de marcadores internos O uso da tcnica de derivados de purina
bacterianos como, por exemplo, cidos na urina requer a coleta total de urina,
nuclicos, purinas totais ou cido mas resultados promissores tm sido
diaminopimlico (DAPA). Para isso, se obtidos com coleta de amostras spot de
utilizam animais canulados ps- urina (CHEN et al., 1995), o que pode
ruminalmente e o fluxo duodenal de simplificar a estimativa da produo de
protena microbiana determinado. urina em condies de campo. A
Porm, essas tcnicas so trabalhosas e creatina uma substncia sintetizada
podem comprometer o bem-estar nos msculos e seu metablito (a
animal, portanto, seria mais adequado o creatinina) pode ser excretado pela
desenvolvimento de mtodos no urina, em funo relativamente
invasivos para tais fins. constante ao peso vivo (RENN et al.,
O uso dos derivados de purinas como 2000). Por isso, a excreo urinria de
indicador para estimar a sntese creatinina tem sido usada para obter-se
microbiana no rmen foi, primeiramente, a estimativa da produo diria de

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urina, de derivados de purinas e de se no desaparecimento da amostra de


protena bacteriana a partir de amostras alimento acondicionada em sacos de
spot. nilon ou outro material sinttico,
No estudo da estimativa de produo de incubados no rmen por diferentes
urina, com base na excreo de perodos de tempo. As principais
creatinina em amostras pontuais, vantagens dessa tcnica esto
Kozloski et al. (2005) previram que esta relacionadas sua rpida e fcil
s ser confivel, se, pelo menos, num execuo, necessidade de pequena
dos animais representativos do quantidade de alimentos e ao fato de
experimento, for realizada coleta total permitir o contato ntimo entre o
de urina, de modo a ter a excreo alimento testado e o ambiente ruminal.
mdia de creatinina por unidade de peso Segundo Vanzant et al. (1998) tcnicas
corporal. Os autores sugeriram ainda in situ tm sido utilizadas intensivamente
que as amostras spot devam ser por mais de duas dcadas, primeiramente,
coletadas em diferentes horrios, ao para comparar caractersticas de
longo do dia, para ter assim uma degradao entre os alimentos e melhorar
amostra composta e representativa, num o conhecimento da digesto ruminal.
ciclo de 24 horas. Uma das limitaes Recentemente, as dietas so bem
seria em relao ao clculo, pois balanceadas e exigem conhecimento das
assume-se que praticamente no h caractersticas de degradao ruminal
contribuio de purinas totais dos dos alimentos a fim de melhorar a
alimentos disponvel para absoro performance animal.
intestinal, e utiliza uma relao Apesar da difuso, a tcnica ainda
constante entre purinas totais e apresenta problemas de padronizao
nitrognio total nas bactrias. Aliado a quanto ao seu uso, devido ao grande
isso, est o fato das equaes utilizadas nmero de variveis envolvidas, como
serem especficas para cada espcie porosidade do nilon, tamanho da
animal (ex: bovinos ou ovinos). partcula do alimento, tempo de
A estimativa de sntese microbiana por incubao e dieta dos animais. Torna-se
derivados de purinas tem demonstrado de fundamental importncia o
alta correlao com as medidas de fluxo conhecimento dos principais fatores que
de bases purinas no duodeno a influenciam e seus mecanismos de
(GONZLES RONQUILLO et al., controle. Dessa forma, reunir o maior
2004). Os autores tambm recomendaram nmero de informaes possvel, a fim
o uso de derivados de purinas para de estabelecer um padro de trabalho
estimar a produo de protena para que os valores obtidos sejam
microbiana, porm, observaram que corretos e passveis de aplicao
mtodo dos cidos nuclicos, (CAMPOS et al., 2004).
normalmente, possui coeficientes de Na preparao do saco de nilon
determinao mais elevados e recomenda-se a utilizao de tecido
coeficientes de variao mais baixos, com 100% de poliamida, resistente a
em relao aos derivados de purinas. temperaturas elevadas; no resinado;
A tcnica in situ propicia uma com porosidade na faixa de 40 a 60
estimativa rpida e simples da micra (NOCEK, 1988), no inferior a 30
degradao dos nutrientes no rmen, micra e no superior a 100 micra; que
alm de permitir o acompanhamento de permita a entrada dos microrganismos no
degradao ao longo do tempo interior dos sacos para degradao do
(MEHREZ & ORSKOV, 1977). Baseia- alimento, remoo dos produtos finais

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da degradao e reduo das perdas de no tecido para que sua recomendao


amostras no degradadas (VAN possa ser realizada de forma
HELLEN & ELLIS, 1977). A quantidade generalizada. Casali et al (2009) ainda
ideal de amostra incubada deve fornecer apontam que a utilizao do nilon em
resduo suficiente para que, aps a procedimentos similares, embora resulte
degradao, seja possvel a execuo em maior preciso, conduz a estimativas
das anlises qumicas desejadas. Um no exatas, em decorrncia da perda
limite na relao entre quantidade de significativa de partculas fibrosas
amostra e rea superficial de 10- insolveis.
20mg/cm2 deveria ser utilizado para a A determinao do nmero de horrios
maior parte das forragens e de incubao depender do tipo de
concentrados. alimento a ser avaliado. De acordo com
Diante da perspectiva de utilizao de rskov et al. (1988), para a maioria dos
vrios tecidos, para realizao de suplementos proteicos, os tempos 2; 6;
procedimentos in situ de estimao das 12; 24 e 36 horas proporcionam
concentraes de resduos indigestveis, informaes adequadas para a descrio
gera-se demanda premente para da curva. No caso dos fenos, palhas e
avaliao desses materiais quanto a outros materiais fibrosos, geralmente, os
aspectos primrios de interferncia na tempos de incubao so mais
exatido e preciso dos resultados, e a prolongados e chegam a totalizar at
secundrios, que envolvem custos e 144 horas. De modo a visar
praticidade operacional. Casali et al. padronizao nos protocolos, para
(2009) analisaram a integridade fsica estimao dos teores de compostos
ps-incubao e ps-extrao com indigestveis em procedimentos in situ,
detergente e avaliaram as perdas de Casali et al. (2008) avaliaram a
partculas e as estimativas dos teores de influncia do tempo de incubao e do
FDNi de alguns alimentos para tamanho de partculas sobre as
ruminantes obtidas em procedimento in estimativas dos compostos indigestveis
situ, por meio de sacos confeccionados (MSi, FDNi e FDAi) em alimentos e
com os tecidos nilon (50m), F57 fezes de bovinos. Os autores sugeriram
(Ankom) e tecido no tecido (TNT a utilizao de partculas de 2mm, em
100g/m). Em suma, os autores protocolos in situ, por possiblitar maior
verificaram que a utilizao do tecido preciso das estimativas e ressaltaram
F57 (Ankom) recomendada para que a utilizao de sacos confeccionados
obteno dos teores de fibra em com TNT, em protocolos de estimao in
detergente neutro indigestvel pela situ, dos teores de MSi e FDNi, devem
tcnica in situ em funo da exatido ser utilizados tempos de incubao de
das estimativas obtidas. O tecido no 240 horas para obteno de estimativas
tecido (100g/m) pode constituir mais exatas das fraes indigestveis.
alternativa de menor custo ao F57, em Para avaliao da frao FDAi,
estudos para quantificao de sugeriram tempos de 264 horas.
compostos fibrosos indigestveis em Os mtodos in vitro so mais simples
alimentos, uma vez que apresentam, em e econmicos para se obter a
geral, estimativas com nveis similares digestibilidade dos alimentos e visam a
de exatido e preciso. Contudo, em reproduzir as condies favorveis
virtude de pequenas divergncias fermentao do rmen-retculo, com o
observadas no estudo, os autores uso de lquido ruminal ou enzimas
sugeriram novas avaliaes do tecido digestivas. A tcnica apresenta aplicaes

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e vantagens, tais como: a determinao dificulta a homogeneidade do material


da taxa de digesto e da extenso de (SANTOS et al., 2003).
digesto, relacionada digestibilidade As questes metodolgicas relacionadas
da forragem, que afeta a taxa de com a tcnica de produo de gs
passagem e o consumo; e a estimativa in vitro incluem os diferentes
do consumo de forragem, que pode ser equipamentos utilizados (por exemplo,
obtida pela produo fecal dividida pela seringas versus transdutores de presso)
indigestibilidade do alimento (LANA, e os efeitos da origem e preparao do
2007). inculo, composio e preparao do
Baseada nas vantagens apresentadas, foi meio, bem como a preparao do
desenvolvida uma tcnica in vitro que substrato.
avalia a digestibilidade do alimento Em 2005, a revista Animal Feed Science
quanto produo cumulativa de gases. and Technology reconheceu o papel
A tcnica de produo de gs (MENKE crescente da tcnica de produo de gs
et al.,1979; PELL & SCHOFIELD, in vitro, e, por essa razo, publicou
1993; THEODOROU et al., 1994) artigos relacionados com metodologias,
consiste, basicamente, em medir a implicaes e aplicaes, e efeitos de
produo total de gs liberado pela diversos fatores que podem influenciar
fermentao de uma amostra incubada, o desenvolvimento dessa tcnica.
em lquido ruminal tamponado. As Rymer et al.(2005) concluram que o
vantagens dessa tcnica sobre as outras inculo obviamente uma fonte crucial
in vitro, como a de Tilley & Terry de variao, embora, quando fluido de
(1963), para a avaliao de alimentos, rmen usado, o principal assegurar
foram destacadas por Blmmel & que a atividade microbiana seja
rskov (1993) e Makkar et al. (1995). suficientemente alta para no afetar a
Outros mtodos in vitro so baseados taxa e a extenso da fermentao, sobre
em mensuraes gravimtricas que a qual a variabilidade oriunda do
seguem o desaparecimento do substrato inoculo relativamente pequena.
(componentes que podem ou no Outro ponto em destaque foi a produo
contribuir para a fermentao), enquanto de metano dos animais, por meio da
a mensurao de gs concentra-se no tcnica in vitro. Getachew et al. (2005)
surgimento de produtos de fermentao relataram que as estimativas da
(substncias solveis, mas no quantidade de metano (CH4) produzida a
fermentveis, sem contribuir para a partir do simples procedimento in vitro
produo de gs). Essa diferena no foram semelhantes aos previamente
princpio do mtodo faz com que essa determinados in vivo. Isso sugere que
tcnica apresente alta correlao com a esta pode ser usada para estimar a
digestibilidade in vivo. Alm disso, o produo de metano in vivo e, assim,
mtodo de produo de gs possui a avaliar a medida em que produo de
vantagem de determinar a cintica de metano pode ser alterada, quer por
fermentao em uma nica amostra, o mudanas nos ingredientes da dieta e/ou
que torna necessria uma quantidade incluindo aditivos para modificar o
relativamente pequena. Isso permite ambiente ruminal, por exemplo, para
que um maior nmero de amostras deprimir o crescimento de bactrias
seja avaliado, ao mesmo tempo, e metanognicas no rmen.
a capacidade de exercer controle Os recipientes de fermentao in vitro
experimental. E como desvantagem o formados por componentes idnticos
baixo peso da amostra incubada, o que como todos os outros, com excluso de

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qualquer substrato, so chamados de opes e, a depender do indicador,


"branco" e so rotineiramente utilizados facilidade de uso e baixo custo,
durante as incubaes de produo de possibilita a estimativa de consumo
gs, para corrigir os gases produzidos e e digestibilidade nos diferentes
a matria orgnica fermentvel residual, compartimentos gastrintestinais.
oriunda do inculo. Nesse sentido, Os mtodos in vitro e in situ so de
Araujo (2010) estudou o uso de grande utilidade, devido rapidez e ao
brancos com aditivos ou brancos baixo custo na avaliao do valor
sem aditivos na estimativa de produo nutritivo dos alimentos, para auxiliar na
de gs lquido e CH4 e verificou que o formulao de rao e outras questes
uso de brancos, sem aditivos, relacionadas nutrio de ruminantes.
superestimou o efeito dos aditivos
testados. Tal fato o levou a sugerir o uso
de brancos com aditivo quando forem REFERNCIAS
realizados estudos com incluso de
modificadores ruminais.
Os objetivos da tcnica de produo de ARAJO, R.C. leos essenciais de
gs devem ser examinados, se o plantas brasileiras como
objetivo simular o animal, ou a manipuladores de fermentao
fermentao in vitro do substrato ser ruminal in vitro. 2010. 178p. Tese
considerada como uma caracterstica (Doutorado em Cincias) - Escola
por si s. Diante disso, torna-se Superior de Agricultura, Universidade
importante realizar a padronizao dos de So Paulo, Piracicaba.
mtodos j existentes, e aceitar que a
fermentabilidade mxima de um BELENGUER, A.; YAEZ, D.;
substrato in vitro no pode imitar o que BALCELLS, J.; OZDEMIR BABER,
ocorre em animais, mas que uma N.H.; GONZALEZ RONQUILLO, M.
medida til para auxiliar na formulao Urinary excretion of purine
de rao e outras questes relacionadas derivatives and prediction of rmen
nutrio de ruminantes (RYMER et microbial outflow in goats. Livestock
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A literatura dispe de vrios mtodos 135, 2002.
para avaliao de alimentos para
ruminantes, no entanto, a escolha do BERCHIELLI, T.T.; VEGA-
mtodo adotado deve buscar maior GARCIA, A.; OLIVEIRA, S.G.
preciso das estimativas. Dessa forma, Principais tcnicas de avaliao
os recursos disponveis, financeiros e aplicadas em estudo de nutrio. In:
operacionais e, ainda, a possibilidade de BERCHIELLI, T.T.; PIRES, A.V.;
implantao da tcnica devem ser OLIVEIRA, S.G. (Eds). Nutrio de
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serem utilizadas e determina o sucesso e nylon bag degradability of roughages
credibilidade dos dados. O emprego de in predicting feed intake in cattle.
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