GOVERNO DO ESTADO DE RONDNIA POP N.

SECRETARIA DE ESTADO DE SADE

HOSPITAL REGIONAL DE SO FRANCISCO DO GUAPOR 008
DATA DE
AO: LAVAGEM DE HEMCIAS EM TUBO EMISSO:
21/11/2016
DATA DE
LOCAL DE
AGNCIA TRANSFUSIONAL REVISO:
EXECUO:
-----------------
EXECUTANTE: SERVIDORES LOTADOS NA AGNCIA TRANSFUSIONAL VALIDADE: 1 ANO

1- Identificar um tubo com o nmero da amostra do paciente e preparar uma

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suspenso de hemcias a 5% (19 gotas de salina + 1 gota do concentrado de

hemcia). 2- Identificar 7 tubos com o nmero da amostra do paciente e as
seguintes identificaes AntiAB, AntiA, AntiB, AntiD, Controle(Ctrl), ReversaA (RA),
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RervesaB(RB). 3- Colocar uma gota dos anti-soros correspondentes Anti-AB, Anti-A,

Anti-B, Anti-Rho(D), Ctrl Rh em cada tubo. 4- Adicionar uma gota da suspenso de
hemcias do paciente aos tubos com os anti-soros.
5- Nos tubos RA e RB, colocar duas gotas de soro/plasma em cada e adicionar uma
gota de suspenso do reagente de hemcias A1 e B, respectivamente.

6- Homogeneizar todos os tubos e centrifug-los por 15 segundos de 3000 a 3600

rpm. Agitar levemente os tubos, realizando a leitura, um a um, sobre um fundo
branco ou aglutinoscpio. Ler e anotar a intensidade da aglutinao (de 0 a 4+).

7- Comparar os resultados de aglutinao obtidos nas provas direta e reversa e

classific-los conforme tabela abaixo:

Observaes: os resultados das provas direta e reversa devem ser concordantes,

caso eles se apresentem discrepante, deve-se repetir o procedimento completo. Se a
discrepncia no for solucionada, comunicar o laboratrio de referncia. O
controle (-C) do reagente deve ser feito em paralelo com o teste de tipagem Rh
(inclusive ambos devero ser do mesmo fabricante), para evitar falsos resultados Rh
positivos. Se o controle for positivo, o resultado da tipagem Rh deve ser revisto.
Normalmente indivduos que possuem anticorpos aderidos s hemcias (Coombs
Direto positivo) apresentam controles positivos. As amostras com discrepncia
ABO devero ser encaminhadas aos centros de pesquisa. Em relao ao Rh, os
indivduos podem ser: Rh positivo/ Rh negativo CDE positivo/ Rh negativo CDE

Elaborado por: Revisado por: Aprovado pela CCIH em:

Tatiana Montenegro de Lima Ana Paula Santos da Silva
(Farmacutica Bioqumica/ (Assessora da Direo Clnica)
Assessora Tcnica) Cristiano Ferreira da Silva
(Enfermeiro)
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EXECUTANTE: SERVIDORES LOTADOS NA AGNCIA TRANSFUSIONAL VALIDADE: 1 ANO

negativo. todos os resultados de Tipagem Rh D negativo se aplica a pesquisa de

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D fraco.

1. OBJETIVOS
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Determinar a tipagem sangunea ABO e RhD em amostras de pacientes e doadores

de sangue.

2. PRINCPIO

Atravs da tcnica de aglutinao em gel verificar a presena/ausncia de antgenos

e anticorpos do sistema ABO e do antgeno D do sistema Rh.

3. AMOSTRAS

Amostras de sangue coletadas em tubos com anticoagulante EDTA.

4. EQUIPAMENTOS E REAGENTES

- Centrfuga para amostras; - Centrfuga para cartes; - Pipeta semi-automtica; -

Ponteiras; - Carto A, B, D, ctl, A1, B para tipagem sangunea; - Soluo de baixa
fora inica LISS .

5. CALIBRAES

Os equipamentos devem ter certificado de calibrao anual.

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6. CONTROLE DE QUALIDADE

Todos os cartes e reagentes devem ser submetidos inspeo visual antes de seu
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uso, observando a data de validade, sinais de hemlise, contaminao bacteriana,

formao de bolhas e outros sinais que possam interferir nos testes a serem
realizados.

7. DESCRIO

Todos os cartes devem estar centrifugados e os reagentes e amostras devem

permanecer em temperatura ambiente no mnimo 15 minutos antes do incio dos
testes. Realizar ento os seguintes passos: - Centrifugar a amostra de sangue
durante 5 minutos a 3400 rpm; - Retirar o lacre do carto; - Dispensar uma gota de
hemcias A1 no microtubo A1 e uma gota de hemcias B no microtubo B; -
Dispensar 50uL de plasma/soro do paciente/receptor nos microtubos A1 e B; -
Preparar suspenso de hemcias a 1% diluindo 12,5uL de concentrado de hemcias
do paciente/receptor em 1mL de LISS, homogeneizando adequadamente; Dispensar
50uL da suspenso nos microtubos A, B, D, ctl; Centrifugar de acordo com
instrues do fabricante.

Tipagem direta do grupo sanguneo ABO:

1.2.1. Identificar 03 tubos A, B e AB;
1.2.2. Pingar 01 gota de soro anti-A no tubo A, 01 gota de soro anti-B no tubo B e 01
gota de soro anti-A, B no tubo AB;
1.2.3. Pipetar 01 gota (50 microlitros) da suspenso de hemcias a 5% em cada tubo;
1.2.4. Agitar lentamente;

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1.2.5. Centrifugar 15 segundos entre (1000 1500G);

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1.2.6. Ressuspender delicadamente o boto de hemcias;

1.2.7. Fazer a leituraDERIA DO HRSFG.
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