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Mthodes de Sparation 2010-2011 Nathalie Younan

Srie 1: Gnralits sur la chromatographie

Exercice 1

a) Dfinir les concepts suivants :


- Temps de rtention
- Temps mort
- Temps de rtention net
- Facteur de rtention
- Efficacit dune colonne
- Hauteur efficace dun plateau thorique
- Rsolution chromatographique
- Facteur de sparation

b) Evaluer les proportions des soluts 1 et 2 dans la phase mobile et la phase


stationnaire.
c) Calculer les facteurs de sparation des deux soluts.
Dans le cas o  = 1 , que se passe-t-il ?
d) Calculer la rsolution des soluts 1 et 2.
e) Calculer le nombre de plateaux thoriques du solut lu en dernier.

Exercice 2

Deux substances A et B ont des temps de rtention respectivement de 16.40 min et


17.63 min sur une colonne de 30 cm de long. Le temps mort de la colonne est de 1.30
min. Les largeurs de pic la base sont respectivement 1.11 et 1.21 min.
a) Calculer la rsolution de la colonne, le nombre de plateaux thoriques et la
hauteur de plateau thorique quivalente.
Mthodes de Sparation 2010-2011 Nathalie Younan

b) Pour amliorer les performances de la sparation, on peut allonger la colonne


ou amliorer le pouvoir de rtention de la phase stationnaire. Afin de
quantifier ces deux approches, effectuer les calculs suivants :
La longueur de colonne quil faudrait utiliser pour avoir une
rsolution de 1.5 ?
Le temps de rtention quaurait B sur cette nouvelle colonne ?
La HETP ncessaire pour obtenir une rsolution de 1.5 avec une
colonne de 30 cm et les temps de rtention donns ci-dessus ?

Exercice 3

Quatre soluts A, B, C et D sont spars par HPLC (High Pressure Liquid


Chromatography). Leurs facteurs de rtention sont les suivants :

ka = 0.75
kb = 1.54
kc = 2.38
kd = 3.84

Est-ce que la sparation de ces quatre soluts peut galement tre accomplie basse
pression avec une colonne de seulement 300 plateaux, avec le mme systme de
phase et une rsolution minimale de 1 ? Justifier.

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