TEMA 4.

ENZIMAS
Enzimas. Conceptos bsicos, clasificacin y propiedades generales. Principios de catlisis
enzimtica. Importancia clnica de las enzimas.

Conceptos bsicos
Las enzimas son biomolculas, protenas o RNAs, encargadas de catalizar las reacciones biolgicas
que se producen en las clulas vivas.

En la clula se producen una gran variedad de reacciones bioqumicas en las que se basan la
actividad biolgica, que en ausencia de enzimas van a ser normalmente lentas, debido a las
benvolas condiciones qumicas que hay en los medios biolgicos, por tanto, esta velocidad de
reaccin sera insuficiente para el mantenimiento de las actividades biolgicas que sustentan la vida
tal y como la conocemos.

La funcin de las enzimas es la de acelerar la velocidad a la que se producen las reacciones, la

catlisis enzimtica aumenta esta velocidad hasta 10 9 veces respecto a la misma reaccin no
catalizada.

Adems en las clulas existen una gran variedad de biomolculas distintas que pueden reaccionar
qumicamente entre s de diferentes formas, las enzimas al catalizar determinadas reacciones van a
canalizarlas nicamente hacia las rutas tiles, evitando la formacin de productos colaterales intiles
que suponen un gasto intil de materia y energa. Es decir, de la gran variedad de reacciones
posibles slo se van a producir aquellas que son interesantes (tiles) para la vida.

NOMENCLATURA Y CLASIFICACIN DE LAS ENZIMAS

Nomenclatura: el nombre de las enzimas consta de tres partes:

x la primera parte hace referencia al substrato preferente de la enzima, es decir, la molcula o

grupo de molculas sobre la que acta la enzima
x la segunda parte hace referencia a la accin cataltica que efecta la enzima, es decir que
reaccin va a sufrir el substrato
x y acabando con la terminacin asa que nos indica que esta molcula es una enzima (V.g.:
triosafosfato-isomer-asa; citrato-sint-asa; alanina-aminotransfer-asa).

Clasificacin: la Enzyme Comision (EC) de la International Union of Biochemistry and Molecular

Biology (IUBMB) es la encargada de clasificar y normalizar el nombre de las enzimas mediante una
cdigo numrico. Las enzimas se clasifican en 6 clases (EC-1 a EC-6), y dentro de cada clase se
subdividen en subclases (EC-1.1, EC-1.2 ...), y as sucesivamente (V.g.: hexoquinasa (glucosa ATP
fosfotransferasa): EC-2.7.1.1; (NADP) glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G6PDH): EC-1.1.1.49):

EC-1. Oxidorreductasas: son enzimas que catalizan reacciones de oxidacin-reduccin (reacciones

redox), es decir reacciones de transferencia de electrones o tomos de hidrgeno de un
substrato a otro
Ared. + Boxid. ' Aoxid. + Bred. AH2 + B ' A + BH2

EC-2. Transferasas: son enzimas que catalizan reacciones de transferencia de grupos funcionales
(GF), distintos del hidrgeno, desde un substrato a otro. Si el grupo transferido fuese el
hidrgeno sera una EC-1
A-GF + B ' A + B-GF

EC-3. Hidrolasas: son enzimas que catalizan reacciones de hidrlisis, es decir, reacciones de ruptura
de enlaces introduciendo una molcula de agua, y tambin la reaccin contraria, es decir, la
formacin de enlaces con el desprendimiento de una molcula de agua
AB + H2O ' AH + BOH
1
EC-4. Liasas: son enzimas que catalizan reacciones de ruptura de dobles enlaces mediante la
adicin de grupos funcionales (X e Y) y de formacin de dobles enlaces mediante la
eliminacin de grupos funcionales (X e Y).
-CH=CH- + X + Y ' -CHX-CHY-

EC-5. Isomerasas: son enzimas que catalizan reacciones de isomerizacin, es decir, reacciones de
reordenamiento de los tomos de la misma molcula transformndola en un ismero de la
misma
A ' $

EC-6. Ligasas: son enzimas que catalizan reacciones de formacin de enlaces utilizando para ello la
energa proporcionada por la hidrlisis del ATP.
A + B (+ ATP4- + H2O)  AB (+ ADP3- + Pi2-+ H+)

Centro activo de las enzimas

La funcin de las enzimas es catalizar las reacciones biolgicas para que ocurran a una velocidad
muy superior a la que ocurriran en ausencia de enzimas.

El medio interno tiene unas condiciones muy poco favorables para las reacciones qumicas:

Solvatacin: es una disolucin acuosa en la que las molculas estn rodeadas de una red de
molculas de agua unidas entre ellas mediante enlaces de hidrgeno, denominada agua de
solvatacin, que estabiliza dichas molculas.

Concentracin: las molculas se suelen encontrar en concentraciones relativamente bajas en el

medio interno.

pH: Adems, en el medio interno el pH esta prximo al neutro lo que confiere una estabilidad
qumica.

Temperatura y presin: la temperatura que se encuentran en el interior de los seres vivos son
moderadas, e igualmente las presiones son bajas, por lo menos en los seres vivos areos y
terrestres lo que tampoco favorece las reacciones qumicas.

Es decir, las condiciones que se encuentran en el interior de las clulas son unas condiciones muy
suaves, nada favorables para que se produzcan las reacciones qumicas, que se veran favorecidas
justamente por las condiciones contrarias: un disolvente ms propicio, altas concentraciones de
reactivos, valores extremos de pH y presiones y temperaturas elevadas.

La base del funcionamiento de las enzimas est en que la enzima se une al substrato,
introducindolo en su interior, formando un complejo enzima-substrato que es el que experimenta la
reaccin, liberando el producto y quedando la enzima sin modificarse ya que es un catalizador (E +
S  ES  E + P). El sitio de unin de la enzima con el substrato es el centro activo.

Caractersticas del centro activo:

x tamao pequeo comparado con el tamao de la protena

x es una hendidura de naturaleza hidrofbica en la superficie de
la protena en la que no entra el agua a no ser que sea uno de
los substratos
x se forma como consecuencia del plegamiento terciario de la
protena (estructura terciaria) por la convergencia en el

2
 espacio de distintos residuos de aminocidos lejanos en la secuencia peptdica
x estos residuos de aminocidos actan como grupos catalticos, encargados de que se
produzca la reaccin, o como grupos de enlace y unin del substrato, encargados de
introducir el substrato en el centro activo
x (Forma del centro activo: el centro activo tiene una forma complementaria al substrato en
estado de transicin.) (se ver ms adelante: Mecanismo de catlisis enzimtica)

En el interior del centro activo el substrato se encuentra con unas condiciones totalmente diferentes
a las que haba en el medio.

x por su naturaleza hidrofbica, en el centro activo no entra el agua, por lo que se pierde el
agua de solvatacin que estabiliza las molculas, favoreciendo su reactividad qumica.
x en el centro activo puede haber grupos funcionales que actan como dadores o aceptores de
protones. Un grupo cataltico que ceda un protn al substrato producir el mismo efecto que
un valor bajo de pH, mientras que un grupo cataltico que acepte un protn del substrato
actuar igual que un valor alto de pH, aunque el pH exterior esta prximo al neutro.
x la velocidad de una reaccin qumica depende de la concentracin de los reactivos que en
ella intervienen, cuanto mayor sea la concentracin ms prximas estarn entre s las
molculas y por tanto, ms probabilidad habr de choque entre ellas y de reaccin. La
concentracin de los substratos suele ser baja, pero al entrar en el espacio limitado del centro
activo, estos quedan muy prximos entre s o con los grupos catalticos, por lo que el efecto
es como si hubiese una concentracin muy alta, es el llamado efecto de concentracin, lo
que favorece de forma notable que se produzca la reaccin.

Mecanismo de catlisis enzimtica

Durante el transcurso de las reacciones qumicas se produce una variacin de energa libre (G)
desde el nivel energtico del reactivo al nivel energtico del producto que tiene que ser inferior para
que la reaccin sea posible. A pesar de esta diferencia energtica (reaccin exotrmica o
exergnica) la reaccin no ocurre espontneamente.
Para que la reaccin se produzca el reactivo tiene
que alcanzar un estado de transicin, en el que se
produce la reaccin y se transforma en el producto,
Para alcanzar el estado de transicin hay que
suminstrale una energa, llamada energa de
activacin.
En las reacciones catalizadas por enzimas, se
alcanza un estado de transicin de menor energa por
lo que, para alcanzarlo, hay que suministrarle menos
energa de activacin. Al necesitar menos energa la
reaccin es mucho ms probable y por tanto se
produce a mayor velocidad. (Por qu?)

Energa de fijacin

La causa de este comportamiento de las reacciones catalazidas por enzimas est en que la enzima
se une al substrato formando un complejo enzima-substrato, y es este complejo enzima-substrato el
que sufre la reaccin originado el producto y la enzima libre (E + S o ES o E + P).

La unin entre la enzima y el sustrato se hace mediante enlaces dbiles transitorios entre grupos del
centro activo de la enzima y grupos funcionales del substrato. Estos enlaces pueden ser de varios
tipos: enlaces de hidrgeno, enlaces inicos, interacciones hidrofbicas y fuerzas de Van der Waals.
Son fuerzas dbiles del mismo tipo que las que mantienen la estructura terciaria de las protenas
globulares.

3
Al establecerse algunos de estos enlaces entre el centro activo de la enzima y la molcula del
substrato se genera una energa que es la energa de fijacin.

La energa de fijacin procedente de la unin enzima substrato es la que hace que disminuya la
energa de activacin y se consiga un estado de transicin de menor energa. La energa de fijacin
paga (aporta) parte de la energa de activacin.

Teora de Pauling: La teora de Pauling postula que el centro activo de la enzima tiene forma
complementaria a la forma que tiene el substrato cuando este
alcanza el estado de transicin.
En la reaccin catalizada por una enzima, el centro activo
posee una serie de grupos de enlace que se unen al substrato
y lo introducen en el centro activo. Al principio slo se
producen algunos de estos enlaces para introducir el substrato
en el centro activo, y una vez el substrato dentro del centro
activo se formara el resto de enlaces y al formarse estos
obligan al substrato a adaptarse a la forma del centro activo,
como sta es la complementaria al estado de transicin, el
substrato se aproximara o alcanzara el estado de transicin y
se producira la reaccin o estara prxima a producirse.
Es decir, ha sido la energa de fijacin, o lo que es lo mismo,
los enlaces que se han establecido entre el centro activo y el
substrato para formar el complejo enzima-substrato, los que
han llevado al substrato al estado de transicin.

Especificidad enzimtica

Cada enzima acta slo sobre determinado tipo o grupo de molculas catalizando una reaccin
concreta, y esta especificidad se basa en el propio mecanismo de unin entre enzima y substrato.
Esta unin se basa en la formacin de enlaces entre grupos del centro activo y grupos funcionales
del substrato que introducen el substrato en el centro activo y lo llevan a sufrir la reaccin, por lo que
el substrato tiene que poseer en su molcula todos los grupos necesarios.
x si a la molcula le falta alguno de estos grupos podra llegar a unirse peor, por lo que habr
enlaces que no se formen y no se podr llevar el substrato al estado de transicin y no se
producir la reaccin al no haber suficiente energa de fijacin para que esto ocurra
x si la molcula posee los mismos grupos y en la misma posicin que el substrato especfico y
algn grupo de ms. En principio se podran formar todos los enlaces necesarios pero este
grupo de ms producira un impedimento estrico para el acople de la molcula a la forma del
centro activo y por tanto no se podr producir la reaccin
x adems de los grupos funcionales implicados en el enlace y unin, el substrato tiene que
poseer un enlace susceptible en la posicin adecuada que pueda ser atacado por los grupos
catalticos del centro activo para que se produzca la reaccin

CINTICA ENZIMTICA

La cintica enzimtica estudia la velocidad con que se producen las reacciones catalizadas por
enzimas. Estudiaremos el efecto del pH, la temperatura, [Enzima] y [Sustrato].

Efecto del pH sobre la cintica enzimtica:

La unin de la enzima con el substrato depende de enlaces dbiles entre los que se encuentran los
enlaces inicos entre grupos del centro activo y grupos funcionales del substrato con cargas
elctricas opuestas.
Por otro lado, la enzima tiene una estructura terciaria que se estabiliza y se mantiene por distintos
tipos de enlaces entre los que tambin intervienen los enlaces inicos.
4
Tanto en el mantenimiento de la conformacin espacial como en la unin enzima-substrato
intervienen enlaces inicos, que a su vez dependen de la carga de los grupos que forman el enlace.
La carga de estos grupos depende de su estado de ionizacin, y este depende del pH como se ve
en la curva de valoracin de un par cido-base conjugado. El pH influye de forma diferente a los
grupos que intervienen en los enlaces inicos, as el valor de las cargas positivas (V.g. -NH3+)
disminuye conforme aumenta el valor del pH, mientras que el valor de las cargas negativas (V.g. -
COO-) aumenta al aumentar el pH. Por tanto el valor de pH va a determinar la carga de los grupos
que mantienen la estructura terciaria de la protena y tambin en los que intervienen en la unin
enzima-substrato.

Por estas razones existe un valor de pH en el cual la carga de

estos grupos y la interaccin entre estos grupos es la ms
adecuada para la funcin de las enzimas, tanto a nivel de la
conformacin tridimensional como de la interaccin enzima-
substrato. A este valor de pH, llamado pH ptimo, la actividad
de la enzima es mxima, por encima y por debajo de este valor
de pH la actividad de la enzima es menor.

Representando grficamente la actividad de la enzima en

funcin del pH obtenemos una curva en forma de campana que es reflejo de la interaccin de los
grupos ionizables que intervienen en la funcin de la enzima.

El pH ptimo no tiene que ser prximo al pH neutro (pH = 7,0) sino que depende de la enzima, V.g.
la pepsina tiene un pH ptimo de |2, debido a que su funcin la ejerce en el interior del estmago.
Por otro lado, la estructura nativa de la protena se desnaturaliza a partir de ciertos valores de pH,
tanto a valores altos como bajos, ya que la desnaturalizacin va aparejada a la prdida de la
actividad de la enzima. Estos valores no tienen que ser necesariamente excesivamente alejados del
pH fisiolgico, sino que en muchos casos, dependiendo de la sensibilidad de la enzima, pueden
bastar valores moderadamente altos o bajos para que se produzca la desnaturalizacin.

Efecto de la temperatura sobre la cintica enzimtica:

Un aumento en la temperatura produce un aumento en la velocidad de las reacciones qumicas en

general, este fenmeno se expresa con el valor Q 10 que indica el factor de aumento de la velocidad
de una reaccin qumica cuando se produce un aumento de 10C de la temperatura, este valor en
las reacciones qumicas esta alrededor de 2 (Q10 2). Es decir que con cada incremento en 10C de
la temperatura la velocidad aumenta al doble por lo que, grficamente, se reflejar en una curva
exponencial ascendente.

En las reacciones catalizadas por enzimas la temperatura tiene dos efectos:

x por un lado tiene un efecto positivo igual al que ocurre en cualquier reaccin qumica con una
Q10 medida entre 25 y 35C que muestra un valor medio de aproximadamente de 2 (1,7-2,5)
x pero por otro lado la temperatura tambin tiene un efecto negativo, ya que a partir de una
cierta temperatura se empieza a producir la desnaturalizacin de las molculas de la protena

Este doble efecto de la temperatura produce una grfica

bifsica.
x por debajo de las temperaturas desnaturalizantes
slo se observa el efecto positivo de la
temperatura y la curva muestra un comportamiento
exponencial ascendente
x pero al llegar a la zona de temperaturas
desnaturalizantes se producen los dos efectos al
mismo tiempo, por un lado sigue el efecto positivo,
5
 a mayor temperatura mayor velocidad, pero por otro lado empieza a manifestarse el efecto
negativo, empiezan a desnaturalizarse algunas molculas de la enzima perdiendo su
actividad. Al seguir aumentando la temperatura cada vez quedan menos molculas de enzima
activas, ya que se van desnaturalizando, pero las que quedan cada vez son ms activas, por
lo que la actividad que se observa es la suma de los dos efectos, el positivo y el negativo. La
curva sufre una inflexin en su comportamiento entrando en una segunda fase en la que deja
de ser exponencial disminuyendo su pendiente, hasta que llega un momento en que todas las
molculas de la enzima se desnaturalizan y la actividad cae bruscamente hasta cero.

Por otro lado, a bajas temperaturas baja la actividad de las enzimas llegando a detenerse esta
actividad con la congelacin.

Efecto de la concentracin de enzima sobre la cintica enzimtica:

La actividad de una enzima es directamente proporcional a su concentracin. Representando

grficamente la actividad de la enzima en funcin de la concentracin de enzima se obtiene una
recta.
Esta relacin se utiliza en los anlisis clnicos para determinar la cantidad de una enzima en una
muestra biolgica, no se mide directamente la cantidad de enzima (protena) sino que se mide su
actividad en condiciones ptimas, y esta actividad es directamente proporcional a su concentracin.

Efecto de la concentracin de substrato sobre la cintica enzimtica:

La concentracin de substrato influye de forma diferente sobre la actividad de las enzimas

observndose dos tipos de cinticas enzimticas:
x Cintica de Michaelis y Menten: enzimas michaelianos, que estudiaremos a continuacin.
x Cintica alostrica: enzimas alostricos, que son enzimas reguladoras que van a estar
moduladas por distintos factores (Cintica similar a la unin de la hemoglobina (protena
alostrica) al oxgeno y su modulacin por factores como [H+], CO2 y BPG).

Concepto de velocidad inicial (V0): Como veremos ms adelante y de igual forma que en cualquier
reaccin qumica, la velocidad de una reaccin depende, entre determinados lmites, de la
concentracin de reactivos (substratos). En trmino generales, a mayor concentracin de reactivos
se obtiene mayor velocidad de reaccin, y a menor concentracin de reactivos se obtiene una menor
velocidad de reaccin. Al principio de la reaccin catalizada por una enzima, en el medio de reaccin
hay una determinada concentracin de substrato, pero como consecuencia de la misma actividad de
la enzima a medida que transcurre la reaccin disminuye la concentracin de substrato pues la
enzima lo esta transformando en producto, y a medida que disminuye la concentracin de substrato
tambin lo hace la velocidad de reaccin, por eso hay que hacer referencia a la velocidad inicial, es
decir la velocidad que se obtiene al Srincipio de la reaccin, cuando la concentracin de substrato
an no ha empezado a disminuir.

Cintica de Michaelis y Menten:

Propuesta por Leonor Michaelis y Maude Menten (1913) para explicar el mecanismo de la catlisis
enzimtica.

La reaccin catalizada por una enzima se produce en dos fases.

E + S o ES o E + P

Una primera fase en la que se produce la unin entre la enzima y el substrato de manera reversible
para formar el complejo enzima-substrato (E + S o ES), y esta fase ocurre de forma muy rpida.
Y una segunda fase en la que se produce la reaccin y se libera el producto (ES o E + P), y esta
fase es menos rpida. La enzima se vuelve a quedar libre y puede volver a comenzar una nueva
catlisis.

6
La concentracin de enzima se puede considerar constante, ya que no se modifica durante la
catlisis enzimtica, por lo que la nica variable es la concentracin de substrato. As, vamos a
estudiar la cintica de una reaccin catalizada por una enzima en funcin de la concentracin de
substrato.

La reaccin depende de que la E y S se encuentren, lo que depende de su concentracin, y de que

cuando se encuentren la enzima est libre. La velocidad de reaccin depende de la concentracin
de complejo enzima-sustrato ([ES]).

Cuando la concentracin de substrato es muy baja, hay una probabilidad muy baja de que una
molcula de enzima y una de substrato se encuentren, pero cuando se encuentran, hay una gran
probabilidad de que la enzima est libre y, por tanto, se forme el complejo enzima-substrato y se
libere el producto. ([S] baja o [ES] baja o velocidad baja)

Si, continuando a bajas concentraciones de substrato, se aumenta la concentracin de substrato, por

ejemplo, al doble (el doble de una concentracin muy baja sigue siendo una concentracin muy
baja), aumenta al doble al probabilidad de encuentro entre enzima y substrato y sigue habiendo una
gran probabilidad de que la molcula de enzima este libre, por lo que se formara aproximadamente
el doble de complejos enzima-sustrato y, por tanto la velocidad de reaccin aumentar
prcticamente al doble. Por tanto, para bajas concentraciones de substrato la velocidad del sistema
es directamente proporcional a la concentracin de substrato.

Al seguir aumentando la concentracin de substrato a valores ms altos, cada vez hay ms

probabilidad de encuentro entre enzima y substrato, formando complejos enzima-substrato,
disminuyendo, por tanto, la cantidad de molculas de enzima libre, por lo que, a su vez, va
disminuyendo la probabilidad de que las molculas de substrato encuentren una molcula de enzima
libre para poder formar el complejo enzima-substrato. Esto significa que la enzima empieza a
saturarse (concentracin de substrato subsaturante), la enzima est casi todo el tiempo unido al
substrato catalizndolo y apenas como enzima libre.

Para altas concentraciones de substrato, todas las molculas de enzima se pueden unir al substrato
y rpidamente formar el complejo enzima-substrato, y una vez formado, de una manera menos
rpida se produce la reaccin, libera el producto y quedando la enzima libre que rpidamente se une
a una nueva molcula de substrato formando el complejo enzima-substrato y as sucesivamente, por
lo que, en estas condiciones, la enzima est prcticamente siempre en forma de complejo enzima-
substrato. La enzima esta saturado y la velocidad que se alcanza es la velocidad mxima, ya que
si, en estas condiciones, se aumenta ms la concentracin de substrato estas molculas no van a
encontrar enzima libre y no puede aumentar la concentracin de complejos enzima-substrato y, por
tanto, tampoco la velocidad del sistema. En estas condiciones la velocidad de reaccin es
independiente de la concentracin de substrato.

Grfica de Michaelis y Menten: es la representacin grfica de la cintica enzimtica. Al representar

la velocidad inicial (V0) en funcin de la concentracin de substrato ([S]) obtenemos una curva en la
que para bajas concentraciones de substrato la curva
se aproxima mucho a una recta, es decir la velocidad
es proporcional a la concentracin de substrato (orden
1). Pero al aumentar la concentracin de substrato se
va perdiendo progresivamente esta relacin,
Curva Hiperblica
incrementos iguales en la concentracin de substrato
producen incrementos progresivamente menores en la
velocidad inicial, la curva va perdiendo pendiente
conforme la enzima se va saturando (orden mixto,
entre 1 y 0: la velocidad no es directamente
proporcional a la concentracin de substrato). Para
altas concentraciones de substrato, un incremento en
7
la concentracin de substrato no se produce un incremento en la velocidad del sistema, la enzima
est saturada (orden 0).

Velocidad mxima (Vmax): para altas concentraciones de substrato la velocidad se va acercando de

forma asinttica a un valor de la velocidad inicial que es la velocidad mxima, (Vmax). Aunque
aumente la concentracin de substrato la velocidad no va a aumentar pues la enzima est saturada.
La velocidad mxima de una muestra depende de la concentracin de enzima.

Constante de Michaelis (KM): se define como la concentracin de substrato necesaria para obtener
una velocidad inicial igual a la mitad del valor de la velocidad mxima.
Grficamente podemos calcular el valor de la KM tomando en el eje Y un valor de la velocidad inicial
igual a la mitad del valor de la velocidad mxima, entonces el valor de K M ser el valor de
concentracin de substrato que le corresponde en el eje X.
Significado biolgico de la KM: la KM es una medida inversa de la afinidad de la enzima por el
substrato. Cuanto ms pequeo sea el valor de la K M mayor ser la afinidad de la enzima por el
substrato, por tanto mayor tendencia tendr por unirse al substrato y mayor ser la efectividad de la
enzima.

Inhibicin enzimtica
La inhibicin es una de las maneras que tienen las clulas de controlar la actividad de las enzimas.
Consiste en que el inhibidor se une a la enzima y mientras que est unido la enzima no tiene
actividad cataltica.
La inhibicin puede ser de dos tipos:
x Inhibicin irrerversible
x Inhibicin rerversible

Inhibicin irrerversible:
El inhibidor irreversible forma un enlace covalente fuerte y permanente con el centro activo de la
enzima por lo que la enzima queda irreversiblemente inutilizado ya que el substrato no puede entrar
en el centro activo porque est bloqueado por el inhibidor.

Inhibicin reversible:
El inhibidor reversible se une de forma transitoria con la enzima. Mientras que el inhibidor est unido
a la enzima, la enzima es inactiva, pero cuando el inhibidor se separa la enzima vuelve a ser activa.
Hay tres tipos de inhibiciones reversibles en funcin del modo de actuacin del inhibidor, y que
afectan de forma distinta a la cintica de la enzima: inhibicin competitiva, inhibicin no competitiva e
inhibicin acompetitiva

x Inhibicin competitiva: El inhibidor competitivo es similar estructuralmente al substrato y por

eso se puede unir a la enzima por el centro activo formando un complejo enzima-inhibidor que
es inactivo. Por tanto, slo se puede unir a la enzima libre pero no al complejo enzima-
substrato ya que en este el centro activo esta ocupado por el substrato. El complejo enzima-
inhibidor no se puede unir al substrato ni sufrir la reaccin. De esta forma substrato e inhibidor
compiten por la unin al centro activo de la enzima. El grado de inhibicin depende de la
concentracin relativa de ambas molculas, lo que a su vez condiciona la probabilidad de
unin de la enzima con cada una de ellas.

x Inhibicin no competitiva: El inhibidor no competitivo se une a la enzima por un sito diferente

al centro activo del substrato, por lo tanto se podr unir tanto a la enzima libre como al
complejo enzima-substrato ya que la unin del substrato no afecta a la unin del inhibidor no
competitivo, ni la unin del inhibidor afecta a la unin del substrato ya que se unen a la
enzima por sitios diferentes de este. Se puede formar un complejo enzima-substrato-inhibidor
que es inactivo y no sufre la reaccin.

8
 x Inhibicin acompetitiva: El inhibidor acompetitivo no se puede unir a la enzima hasta que sta
no se ha unido al substrato, por lo tanto slo se podr unir al complejo enzima-substrato y no
a la enzima libre. As, se forma un complejo enzima-substrato-inhibidor que es inactivo y no
sufre la reaccin.

Importancia clnica de las enzimas

En la prctica clnica podemos encontrar y utilizar las enzimas con distintas finalidades:
x como reactivos de anlisis en el laboratorio
x como elementos de diagnostico
x como tratamientos teraputicos

Las enzimas como reactivos de anlisis: el objetivo de muchos anlisis clnicos es medir la
concentracin de determinadas sustancias (V.g. glucosa, colesterol, etc) en muestras tomadas de
los pacientes (sangre, orina, etc.). El procedimiento ms habitual es la utilizacin de una enzima
especfica que catalice la sustancia que se quiere medir para, mediante un mtodo
espectrofotomtrico, determinar su concentracin. La ventaja de utilizar enzimas es que son ms
especficas que los reactivos qumicos.

Las enzimas como elementos de diagnstico: las enzimas estn, normalmente, en el interior de las
clulas por lo que en el plasma sanguneo slo se encuentran unas pocas enzimas denominadas
plasmoespecficas. Los procesos patolgicos frecuentemente destruyen clulas o aumentan la
permeabilidad de las membranas celulares, permitiendo la salida de las enzimas celulares que
acaban llegando al plasma sanguneo, por tanto, la presencia de enzimas en sangre seala un
proceso patolgico en alguna parte del organismo. Hay enzimas o isozimas que son especficas de
determinados rganos o tejidos, por lo que su presencia en plasma esta indicando dnde se est
produciendo la patologa lo que ayuda a diagnosticar determinadas patologas. Ejemplos: las
transaminasas aparecen en sangre cuando existe una patologa en el hgado (V.g. hepatitis); la
fosfatasa alcalina indica una patologa sea; la fosfatasa cida una patologa prosttica. La
presencia en sangre de la enzima lactato deshidrogenada (LDH) no permite aclarar el origen de la
patologa, ya que esta enzima esta presente en numerosos tejidos. Pero un anlisis de las isozimas
de la LDH (LDH-1, LDH-2, LDH-3, LDH-4 y LDH-5) permite distinguir si la patologa es en el corazn,
msculo, hgado u otros rganos.

Uso teraputico de las enzimas: la utilizacin de enzimas como frmacos para curar patologas
presenta serias dificultades:
x la va de administracin, si se administran va sangunea es muy difcil que lleguen a entrar en
las clulas en las que son necesarias, y por va oral, adems pueden se digeridas como
protenas que son
x la obtencin de enzimas en cantidad y pureza suficiente es difcil y costosa
x el organismo reconoce a la enzima como elemento extrao por lo que se pueden desatar
respuestas inmunolgicas e, incluso, alergias.

Se utilizan principalmente como terapia de reemplazamiento para tratar errores innatos del
metabolismo (enfermedad de Gaucher o enfermedad de Fabry), en el tratamiento de problemas
digestivos (amilasas, proteasas, lipasas) y, en muchas otras patologas (ej. gota) y situaciones.