Frutas, flores y aromas de aceites esenciales han encontrado su lugar en cosmticos,

jabones, velas y alimentos, entre muchos productos para el hogar comn. Con su creciente
demanda y la dificultad global en extraccin de la fuente natural, se estn buscando
mtodos alternativos de su produccin.

Un mtodo sostenible es el empleo de microorganismos para la produccin de estos

compuestos de alto valor. Con las herramientas de ingeniera metablica, los
microorganismos pueden ser modificados para producir compuestos tales como steres,
terpenoides, aldehdos y metil cetonas.

INTRODUCCIN

Los compuestos saborizantes y fragancias son parte de una industria en expansin con un
valor actual estimado de $ 27 mil millones.

Ms all de los alimentos y bebidas, la industria del sabor y la fragancia abarca perfumes,
productos de limpieza, jabones, detergentes y productos de higiene bucal.

En la naturaleza, muchos de estos compuestos sirven como una forma de comunicacin

entre las especies atrayendo socios simbiticos, as como disuadir a los depredadores.
Muchas molculas de sabor y de olor son metabolitos que sirven como insecticidas
naturales, feromonas, o molculas precursoras para diversos productos naturales.

Adems de su consumo humano, los compuestos sintetizados para sabores o fragancias

tambin pueden servir como combustibles de alta energa, disolventes, y los precursores
farmacuticos.

Histricamente, la extraccin de biomasa de la planta fue la primera fuente importante de

saborizantes y aromatizantes. El anlisis de estos extractos crudos permiti la identificacin
de los componentes individuales, allanando el camino para la produccin de estos va
sinttica. Los avances en biotecnologa han abierto la puerta a la produccin microbiana
como un medio viable de sntesis bioqumica, emergiendo como un medio alternativo para
una produccin eficiente, de bajo impacto y flexible de sabores y aromas. Mediante el
diseo de nuevas vas biosintticas, precursores baratos tales como glucosa, glicerol o
lignocelulosa pueden convertirse enzimticamente en productos bioqumicos valiosos.
La identificacin de una ruta biosinttica adecuado junto con un husped permite una
produccin eficiente que se puede ajustar mediante el control de flujo metablico, el diseo
de las bases genticas ptimas, y la regulacin de la expresin gnica. La produccin
biolgica puede satisfacer la preferencia de los consumidores por sabores y fragancias
"limpias" u "orgnicamente" producidas, y se observan importantes diferencias de precios
entre la produccin sinttica y la no sinttica.

Acetoina y diacetil

La acetona y el diacetilo son molculas que dan un sabor a mantequilla y se producen de

manera natrural. Ambos se presentan como intermedios en la fermentacin bacteriana
natural del 2,3-butanodiol (23BD). La biosntesis de acetoina comienza con la
condensacin de dos molculas de piruvato para formar acetolactato que es catalizado por
acetolactato sintasa (ALS). La descarboxilacin de acetolactato por acetolactato
descarboxilasa da acetoina. La produccin de acetoina en Escherichia coli a partir de
glucosa se ha establecido instalando estas dos enzimas de E. coli y Lactococcus lactis
respectivamente. Para mejorar el flujo de piruvato hacia la produccin, los genes que
codifican la fosfoenolpiruvato sintasa, piruvato deshidrogenasa, piruvato formiato liasa, y
piruvato oxidasa fueron retirados del genoma. Para asegurar que el acetolactato no se
desviara hacia valina, el gen que codifica la isomerasa de cido acetohidroxi tambin se
elimin. La cepa resultante produjo ttulos de hasta 870 mg / L acetona con un rendimiento
de 0,22 g acetona / g de glucosa.

La biosntesis alternativa de acetoina se puede encontrar nativamente en la levadura; El

piruvato es activado por piruvato descarboxilasa (PDC) formando un complejo de
acetaldehdo-tiamina difosfato (TPP). La condensacin entre este complejo y un
acetaldehdo libre produce acetoina. Una cepa de Candida glabrata se optimiz con el uso
de ingeniera para la produccin de acetoina insertando la piruvato descarboxilasa de
Saccharomyces cerevisiae.

El flujo metablico hacia acetoina se reforz mediante la supresin de los genes que
codifican para acetaldehdo deshidrogenasa y alcohol deshidrogenasa, los cuales actan
sobre el complejo acetaldehdo-TPP. Adems, para evitar la reduccin de la acetoina a
23BD, el gen de la deshidrogenasa 23BD se elimin. El anlisis in silico de estas cepas
manipuladas revel un desequilibrio redox que fue remediado por la introduccin de una
NADH oxidasa. Esto permiti la produccin de acetoina a 7,3 g/L, con un rendimiento
asociado de 0,07 g/g y una productividad de 0,11 g * L/h.

Una estrategia similar se aplic a la produccin de acetoina en Bacillus subtilis, que

naturalmente produce 23BD a travs de la va acetolactato / acetoina. Tras la eliminacin de
la 23BD deshidrogenasa, se encontr que la expresin de una NADH oxidasa mejoraba la
produccin de acetoina en un 35,3% a 56,7 g/L y la productividad a 0,64 g*L/h

La descarboxilacin oxidativa no enzimtica del acetolactato producir diacetilo en lugar

de acetoina. Con el fin de producir diacetil en Enterobacter cloacae subsp. dissolvens, el
gen que codifica acetolactato decarboxilasa fue eliminado para evitar la conversin a
acetoina. Posteriormente, los genes que codifican las diacetil reductasas, DR-I y DR-II,
fueron eliminados para evitar la reduccin a las especies de alcohol. Adems de estas
deleciones de genes, Fe3 + se utiliz en el medio de produccin para mejorar la
descarboxilacin oxidativa. Se obtuvo un resultado final de 1,5 g/L de diacetilo con una
productividad de 0,13 g *L / h.

La vinculacin de la fotosntesis con las vas bioqumicas de produccin proporcionan un

medio de sntesis qumica renovable y la captura de carbono. Las vas de acetoin y 23BD
utilizadas en E. coli se han transformado en el modelo cyanobacterium Synechococcus
elongatus sp. PCC 7942, acoplando la fijacin de CO2 con acetoina y la produccin de
23BD (203 mg / L y 2,4 g / L respectivamente).
Metil cetonas

Las metil cetonas ofrecen aromas que se encuentran en los aceites esenciales y saborizantes
en los productos lcteos. Tambin tienen aplicaciones como biocombustibles, debido a sus
cadenas de carbono reducidas. Metil cetonas de diferentes longitudes pueden producirse a
partir de la b-oxidacin de cidos grasos. La ruta de oxidacin beta nativa en E. coli
comienza con la conversin de cidos grasos en acil-CoAs por la acil-CoA sintasa, FadD.
Acil-CoA puede oxidarse a trans-2-enoil-CoA por la acil-CoA deshidrogenasa, FadE.