1 Sntesis de ATP

El modelo quimiosmtico propuesto por Peter Mitchell es el paradigma de este

mecanismo, la energa electroqumica inherente a la diferencia en la concentracin de
protones y a la separacin de cargas a travs de la membrana mitocondrial interna
impulsa la sntesis de ATP a medida que los protones fluyen de manera pasiva de vuelta
hacia la matriz a travs de un par asociado a la ATP sintasa.

Mitchell utiliz el trmino quimiosmtico para describir las reacciones enzimticas

en las que intervienen una reaccin qumica y un proceso de transporte. En sta
figura se muestra la definicin operativa de acoplamiento

La teora quimiosmtica explica fcilmente la dependencia de la transferencia

electrnica de la sntesis de ATP en la mitocondria

Cuando se rompen mitocondrias intactas mediante tratamiento con detergente o

corte mecnico, los fragmentos membranosos resultantes an puede catalizar la
transferencia electrnica desde el succinato o el NADH al O 2 pero no hay sntesis
de ATP acoplada a esta respiracin.

Entre los desacopladores qumicos se encuentra el 2,4-dinitrofenol DNP y el

carbonilcianuro p-trifluorometoxifenilhidrazona FCCP

Prediccin de la teora quimiosmtica es que dado que el papel de la transferencia

de electrones en la sntesis mitocondrial de ATP es simplemente bombear
protones para crear el potencial electroqumico de la fuerza protn-motriz un
gradiente de protones creados artificialmente debera poder reemplazar la
transferencia de electrones como impulsor de la sntesis de ATP.

3 En la superficie de Fi el ATP est estabilizado en la reaccin al ADP.

Los experimentos isotpicos con Fi (Protena perifrica membrana) purificado muestran

en la superficie de la enzima, la reaccin

ADP + Pi ATP+ H 2 O facilmente reversible;

la energa libre de la sntesis de ATP es cercana a 0, cuando Fi hidroliza ATP en agua

marcada con 18 el Pi formado contiene, no un tomo de 18O, si no 3 o 4 tomos de 18O.
Esto indica que el enlace pirofosfato terminal del ATP se rompe y rehace repetidamente
antes de que el Pi abandone la superficie de la enzima con el Pi libre cada hidrlisis
pueden insertar 18O al azar en una de las 4 posiciones del Pi.

La ATP sintasa estabiliza el ATP respecto al ADP y al Pi uniendo el ATP ms fuertemente

liberando la energa suficiente para contrarrestar el efecto de hacer ATP, ya que F0F1
unen ATP con una afinidad muy alta y el ADP con una afinidad mucho menor, debido a
una diferencia de energa de unin de unos 40 kJ/mol, misma energa que impulsa el
equilibrio a la formacin de ATP.
6 La catlisis rotacional es la clave en el mecanismo de unin y cambio de la
sntesis de ATP

Sobre la base de detallados estudios cinticos y de unin de las reacciones catalizadas

por F0 F1, Paul Boyer propuso un mecanismo de catlisis rotacional en el que los tres
sitios activos situados sobre Fi alternan en la catlisis de la sntesis de ATP.

Fig. 19-26 Modelo de cambio de unin para la ATP sintasa.

El complejo F, tiene tres sitios de unin de nucletidos de adenina no equivalentes, uno
por cada par de subunidades y . En un momento determinado, uno de estos sitios

est en la conformacin -ATP (que une ATP fuertemente), un segundo est en la

conformacin) -ADP (unindbil) y un tercero est en la conformacin -vaca

(unin muy dbil). La fuerza protn-motriz hace que el eje central subunidad ,
mostrada como una flecha verde, rote y que se ponga en contacto con cada par de
subunidades de forma sucesiva. Ello produce un cambio de conformacin

cooperativo en el que el sitio -ATP se convierte en la conformacin -vacia y el

ATP se disocia; el sitio -ADP se convierte en la conformacin -ATP, que

promueve la condensacion del ADP y Pi unidos para formar ATP; y el sitio - vaco se

convierte en un sitio -ADP, que une dbilmente ADP y Pi que difunden desde el
disolvente.
Este modelo, basado en observaciones experimentales, requiere que al menos dos de los
tres sitios catalticos alternen en actividad; el ATP no se puede liberar de uno de los sitios
hasta que se fijen ADP y Pi al otro.

FIGURA 19-27 Rotacin de F0y demostrada experimentalmente.

F1rediseado por tcnicas de ingenieragentica para contener una serie de residuos His
se une fuertemente a un portaobjetos de microscopio recubierto con un complejo de Ni; se
une biotina covalentemente a una subunidad c de F0. La protena avidina, que se une
muy fuertemente a la biotina, est unida covalentemente a largos filamentos de actina
marcados con una sonda fluorescente. La unin de biotina-avidina une ahora los
filamentos de actina a la subunidad c. Cuando se aporta ATP como sustrato de la
actividad ATPasa de F,, se observa como el filamento marcado gira continuamente en una
direccin, demostrando que el cilindro Fo de subunidades c rota. En otro experimento, el
filamento de actina se uni directamente sobre la subunidad y. La serie de micrografas de
fluorescencia (ledas de izquierda a derecha) muestra la posicin del filamento de actina a
intervalos de 133 ms. Observe que a medida que gira el filamento, se produce un salto
discreto cada once marcos. Probablemente el cilindro y el eje se mueven como una
unidad.
9 Sistemas de lanzadera envan indirectamente NADH citoslico a la mitocondria
para su oxidacin.

Lanzadera del malato-aspartato: Esta lanzadera para transportar equivalentes

de reduccin desde el NADH citoslico a la matriz mitocondrial se utiliza en hgado, rin
y corazn.

Paso 1. Para empezar tenemos que el NADH del citosol pasa dos equivalentes de
reduccin al oxalacetato, produciendo lo que viene siendo el malato por la accin de la
malato deshidrogenasa citoslica. Paso 2. El malato formado atraviesa la membrana
interna con la ayuda de malato a-cetoglutarato. Paso 3. En la matriz el malato pasa dos
equivalentes de reduccin NAD+; el NADH resultante es oxidado por la cadena
respiratoria; el oxalacetato formado a partir del malato no puede pasar directamente al
citosol. Paso 4. Primero debe transaminarse a aspartato. Paso 5. Para que pueda salir de
la vida el transportador de glutamato-aspartato. Paso 6. Y por ltimo, en el citosol se
regenera el oxalacetato, con lo que se completa el ciclo.

Lanzadera del glicerol 3-fosfato: Este medio alternativo para transportar

equivalentes de reduccin desde el citosol a la matriz mitocondrial acta en el musculo
esqueltico y en el cerebro. En el citosol, la dihidroxiacetona fosfato acepta dos
equivalentes de reduccin del NADH en una reaccin catalizada por la glicerol 3-fosfato
del espacio intermembrana a la ubiquinona. Esta lanzadera no necesita de transporte de
membrana.