UNAD

ECBTI- BIOTECNOLOGA -305689

ECBTI

BIOTECNOLOGA_305689
PRODUCCIN DE ENZIMAS DE INTERS INDUSTRIAL
FEDRA LORENA ORTIZ B.
Directora de curso
 Propsitos de formacin
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Qu el estudiante aplique los conocimientos de la

unidad 1, en la resolucin de un problema especfico

Qu el estudiante argumente cientficamente la

solucin al problema planteado.

Qu el estudiante indague los temas de la Unidad 1,

con el fin de ponerlos a consideracin en la resolucin
de un problema.
 Observaciones generales
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Con el fin de que los estudiantes cumplan con los

propsitos de formacin es necesario que estudien
los siguientes temas:

Biotecnologa de las fermentaciones

Sistemas de Fermentacin
Biocatalisis.

Recursos Didcticos.
Ova Sobre fermentacin
Laboratorio virtual 2.
Artculos del tema.
 Qu son las enzimas? son molculas proteicas, que actan como
catalizadores de una reaccin bioqumica, es decir aumentan la
velocidad cataltica de dicha reaccin sin alterar los productos que se
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generen al final de dicho proceso.

 CARACTERSTICAS DE LAS ENZIMAS

Son catalizadores muy activos en medios

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acuosos y cada enzima acta bajo

condiciones especficas de temperatura,
pH, entre otros .
Son catalizadores muy especficos:
pueden modificar un nico substrato en
una mezcla de substratos muy similares.
Son catalizadores muy selectivos:
pueden modificar un nico enlace o un
nico grupo funcional en una molculas
que tenga varias posiciones modificables.
 ENZIMAS COMO PRODUCTOS BIOTECNOLGICOS
VENTAJAS :

Transforman rpidamente los sustratos a temperaturas moderadas y

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a valores de pH cercanos a la neutralidad.

Alta especificada respecto al sustrato que distingue una mezcla

compleja as como respecto a la transformacin qumica que lleva
acabo.

Su actividad puede ser fcilmente controlada mediante un ajuste en

las condiciones de la reaccin (Inmovilizacin de la enzima)

Mejora las caractersticas de un proceso y su aceleracin.

Mejora el producto: Se puede utilizar un proceso enzimtico para

cambiar el sabor o la textura de un alimento.
 FUENTES DE ENZIMAS

Las enzimas pueden ser de origen vegetal, animal y

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microbiana

Entre las enzimas de tipo vegetal, se encuentran las proteasas,

carbohidrasas ( las cuales descomponen residuos de azcares
de carbohidratos superiores, a-amilasas y b-amilasa)

Entre las enzimas de tipo animal estn la esterasa ( Lipasa se

produce en la mucosa gstrica, el pncreas; fosfotasas, que se
obtiene de tejidos animales seo, muscular, tripsina, y la
quimotripsina que se produce en el pncreas )

Las enzimas del tipo microbiano provienen de bacterias,

arqueas y de hongos.
 ENZIMAS DE ORIGEN MICROBIANO, DE INTERS INDUSTRIAL
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Bacterias productoras
de alfa amilasa

La alfa amilasa es una enzima que se utiliza en la

industria del almidn, el alcohol y el papel, por lo
tanto tiene una alta importancia a nivel comercial, lo
que ha llevado a realizar diversas investigaciones en
Biotecnologa que permita optimizar su produccin.
 Los microorganismos que utilizan el almidn comnmente
denominados amilo lticos, pueden utilizar este polmero
porque tienen enzimas como la alfa amilasa la cual se
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encarga de degradar el almidn hasta las molculas de

glucosa. El yodo se utiliza como indicador de presencia de
almidn, por lo tanto al colorearse de color oscuro, indica la
presencia del polisacrido.

En la caja petri, se puede observar las

colonias de bacterias, cuyo halo no esta
coloreado por el yodo, es decir no detecta
presencia de almidn y que por lo tanto se
puede decir que stas bacterias degradaron
el almidn a compuestos ms sencillos
 Los procesos de produccin de enzimas
microbianas se realizan mediante
cultivos aerbicos.
En general las enzimas se producen en
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pequeas cantidades durante la fase de

crecimiento activo, pero se acumulan en
grandes cantidades en la fase
estacionaria del crecimiento.
Las enzimas inducibles como la alfa
amilasa se producen slo cuando en el
medio se encuentra el inductor
(sustrato)

La Amilasa, se produce mediante fermentacin de sustratos.

Durante la produccin es importantes el control de la temperatura , pH y la
presencia de compuestos qumicos inactivantes.
 La alfa amilasa.
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Puede clasificarse segn su origen:

amilasa bacteriana o fngica Es una
enzima termoestable, es decir
funciona mejor y resiste altas
temperaturas, el promedio de
temperatura operativo es de entre
55 y 800C, adems trabaja con un pH
menor de 6 y con una concentracin
de calcio de entre 50 ppm y 100
ppm para su mejor rendimiento.
 PROBLEMA A RESOLVER
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La bsqueda continua de microorganismos ms eficientes en la

produccin de alfa amilasa es una alternativa, para optimizar la
produccin de esta enzima de importancia comercial.
Para ello, se ha aislado tres cepas de microorganismos amiloliticos,
sin embargo se desea saber cul de las tres cepas es ms eficiente
en la degradacin de ste polisacrido. Para ello se ha realizado un
procedimiento de laboratorio (Remtase al laboratorio 2, del
laboratorio virtual del curso de Biotecnologa) y responda la siguiente
pregunta:
Pregunta 1. Cul de los microorganismos es ms efectivo?.
Fundamente su respuesta de acuerdo al experimento realizado.
 PROBLEMA 2.

Con los resultados anteriores se obtuvo la Cepa ms eficiente

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en degradar el almidn, ahora se pretende optimizar las

condiciones para esta produccin. Para ello se desea
comparar dos medios de cultivo, los cules se prepararon as:

SUSTRATO MEDIO 1 MEDIO 2

Fuente de Carbono Harina de Yuca (10 g.L-1) Harina de trigo (10 g.L-1)

Fuente de Nitrgeno Harina de Frijol (5 g.L-1) Harina de Sangre (5 g.L-1)

Mezcla de K (1 ml.L-1) K (1 ml.L-1)

micronutrientes
 PROBLEMA 2.
Las Condiciones de cultivo en los dos casos fueron: 5
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das de fermentacin en medio lquido y agitacin constante

de 120 rpm. Se realizaron 2 fermentaciones para cada medio.

Al finalizar el experimento se obtuvieron los resultados que se

muestran en la tabla adjunta, la cual muestra la actividad
enzimtica, obtenida para cada medio.

Tabla. Resultados

Temperatura pH final UA/enzimtica

M1 55 5,2 5.4
M1 57 5,7 4.6
M2 57 5,2 13.3
M2 55 5,4 14.2
 PROBLEMA 2. Para explicar los resultados anteriores, es
necesario presentar una hiptesis de estudio. Para ello, Ud.
debe escoger una de las hiptesis que se propone a
continuacin y fundamente su posicin con evidencia terica y
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emprica, socialcela en su grupo de trabajo y desarrolle la

Gua de actividades.

Hiptesis 1: Las variaciones en la actividad enzimtica se

debe a las diferencias en la concentraciones de almidn en
la fuentes de carbono

Hiptesis 2. Las diferencias en la actividad enzimtica se

debe a la presencia de inhibidores en el medio de cultivo 1

Hiptesis 3. Las variaciones en la actividad enzimtica se

debe a las diferencias del pH final del medio de cultivo
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MUCHOS XITOS