Biotecnologia Ambiental i Os Protozoarios como Indicadores da Qualidade Biolégica das Lamas Activadas see ‘Ana Nicolau’, Nelson Lima’, Manuel Mota! e Paolo Madoni® ‘Cento de Engenharia Biol6gica *Departamento de Ciéncias Integradas e Lingua Materna Universidade do Minho 4709 Braga Codex - Portugal *Dipartamento di Scienzi Ambientali Universita degli Studi di Parma Parma - Italia eee 1. Consideragdes Gerais As estagdes de tratamento biolégico de aguas residuais podem set consideradas como ecossistemas criados pelo Homem, ¢ onde as condigées a que os organismos esto sujeitos so extremas. A componente bidtica que se desenvolve no tanque de arejamento é, essencialmente, representada pelos decompositores (bactérias e fungos que obtém energia directamente da matéria orginica dissolvida)e pelos consumidores (Alagelados heterott6ficos, ciliados, rizopédios © pequenos metazodrios que se alimentam de bactérias ¢ outros organismos). A componente abidtica € representada pela estrutura do tanque. ‘A importincia eo papel da microfauna nos processos_ de purificagio das dguas é bem conhecido desde hd varios anos (Curds, 1975; Curds & Cockburn, 1970a, b; Curds et al., 1968); estudos realizades nos iltimos anos demonstraram, inclusivamente, que estrutura da comunidade que se desenvolve no tanque de arejamento € um valioso instrumento de diagnéstico ¢ — avaliagio do desempenho da estagio de tratamento (Esteban et al, 1990; Madoni, 1994a, b). No tangue de arejamento das stages de tratamento por lamas activadas, estabelece-se. uma verdadeira rede wofica (Figura 1) Através da predagio da maior parte das bactérias dispersas na fracgio Hquida, e ainda de parte dos seus agregados, 0s protozodrios melhoram a qualidade da dgua. De facto, na auséncia de protozosrios, e sobretudo de protozodrios ciliados, os efluentes so caracterizados por elevadas CBO's ¢ grande turbidez Os protozoirios, e particularmente os ciliados, sao muito numerosos em todos 0s tipos de tratamento aerdbico das aguas, alcangando densidades da ordem das 10.000 células por mi no tanque de arejamento e representando cerca de 9% da biomassa em suspensio (Madoni, 1994¢), Foram identificadas cerca de 230 espécies de de protozodrios em estagdes Figura 1. Rede ws 14 Boletim de Biotecnologia Sb + Kase, $443 CILIADOS CARNIVOROS CILIADOS FILTRADORES MATERIA ORGANICA, tratamento bioldgico de aguas residuais, das quais 33 de flagelados, 25 de rizopédios, 6 de actinopédios 160 de ciliados, mas s6 um nimero restrito destas espécies ocorre com frequéncia (Madoni, 1994b). A maior parte dos ciliados presentes nestas estagdes alimenta-se de bactérias, mas uma pequena parte preda sobre outros ciliados ou flagelados, No que diz respeito aos ciliados bacteriéfagos das lamas activadas, eles so de trés tipos. de acordo com o seu comportamento) (1) nadadores ou “free-swimmers”. nadando na fracgdo iquida permanecendo suspensio no tanque de sedimentacio, (2) moveis de fundo ou “crawlers”, habitando a superficie dos flocos: (3) sésseis ou “attached”, que estio fixos por um pediinculo aos flocos, precipitando ro tanque de sedimentagio. Os processos de iratamento por lamas activadas baseiam-se na formagio de agregados bacterianos aes quais outros organismos se associam. Assim, uma popuiagio de corganismos com a capacidade de se associar aos flocos tém uma grande vantagem sobre outros que nadem na BACTERIASBiotecnologia Ambiental eee eee asaeee nee eterrrTeecaee_ AME fracelo liquide e que estéo, alm —§ ————— disso, sujeitos a serem expulsos do sistema através do efluente que drena gua continuamente para 0 exterior Por outro lado, nadadores € sésseis 100) competem pelo alimento, constituido elas bactérias disperses na fracgio | liquida: os designados méveis de =| fundo, tendo uma boca ventral com _ que raspam as bactériss aderentes & | 4 | ammmaaes |} superficie dos flocos, ocupam um nicho ecolégico exclusive, com todas as vantagens que dai advém. : | As rlagdes de competgio ¢ | predapio cram oscilagdes sucessées das populagées no sentido de se alcangar uma estabilidade dindmica (Figura 2). Podem distingur-se wés fases distinas que @ sc sucedem to inicio do funcionamenio dma estaso, nomeadamente no que diz respeito ae tanque de arejamento Figura 2. Dinimica de colonizagio das lamas activadas em estagdes de tatamento biokégico de dguas residuais desde o inicio do seu funcionamento, (2) a fase inicial € caracterizada por espécies que sio tipicas no liquido a tratar: flagelados e —_ciliados nadadores, independentes das lamas activadas e que esto continuamente entrar; (2) a segunda fase surge com a formagio das lamas activadas, dando-se 0 répido declinio das espécies pioneiras, apresentando a comunidade um maximo de riqueza especffica; as formas nadadoras so rapidamente substituidas plas formas sésseis e méveis de fundo; (3) finalmente, a terceira fase caracteriza-se por uma microfauna cuja composigao e estrutura reflecte as condigdes estiveis decorrentes do balango entre carga orgénica e lamas produzidas, removidas e recicladas. Uma estagio de tratamento a funcionar em pieno no deve albergar, em niimero_significativo, espécies caracteristicas da fase de colonizagio, mas tal pode acontecer transitoriamente no caso de, falta de oxigenagio, carga excessiva ov muito variével no tempo, _variagdes significativas dos tempos de etengio, etc, De um modo geral, as Tabela 1. Algumas situagées particulares do funcionamento de estagdes de tratamento biolégico de aguas residuais por lamas activadas (segundo Madoni, 1994b). Grupo dominante Eficiéncia Causa possivel Pequenos flagelados ma lamas pouco oxigenadas, entrada de substéncias em vias de fermentagao Pequenas amebas nuas e flageladas ma carga elevada e/ou dificilmente degradavel Pequenos ciliados nadadores (< 50 um) | mediocre} permanéncia breve; lamas pouco oxigenadas grandes ciliados nadadores (> 50 um) mediocre | carga demasiado alta cliados sésseis baixa fenémenos transitérios ciliados méveis do fundo boa ciliados sésseis + méveis do fundo boa ‘amebas com teca boa carga baixa e/ou difulda; boa nitrificagao Boletim de Biotecnologia 15Biotecnologia Ambiental lamas activadas devem apresentar: (1) densidade elevada da microfauna, isto 6, pelo menos 10° cétulas por Titzo; (2) composigdo especifica baseada em formas sésseis € méveis de fundo, estando 0s flagelados quase ausentes; (3) uma _comunidade particularmente diversificada, onde enum grupo ou espécie domine rumericamente outros(as) em mais ddo que um factor de 10 (Madoni 1994b). Quando tal ndo acontece, a identificagéo do grupo dominante permite 0 diagnéstico da sitwacdo panicular do funcionamento da estacio (Tabela 1). De um modo geral, densidades de protozodrios inferiores a 10* por litro indicam uma mé depuragio; neste caso, observam-se —_elevadas densidades bacterianas, um elevado CBO e uma turbidez também importante, Grande quantidade de ciliados (densidades supericres @ 10° células por litro) indicam, pelo contrério, uma boa depuragio e um ptimo desempenho da estagdo em causa (Curds, 1975; Madoni, 1984) Para além da densidade, 2 diversidade da comunidade de protozosrios também tem valor indicador do funcionamento da stage; uma comunidade dominada por uma espécie ou grupo € quase sempre indicadora de uma disfungao ‘wofica ditada pela presenga de substincias tGxicas, caréncia de oxigénio, perda de lamas devido a remogio exagerada, carga excessiva ou insuficiente, Esteban ef al (1991) demonstraram, com ajuda de métodos estatisticos, que a densidade ¢ a diversidade da microfauna so fluenciadas significativamente pela qualidade do esgoto que entra na estagdo e pela sua gestio. © estudo de quarenta © quatro estagbes de tratamento bioldgico de Aguas residuais por lamas activadas, abrangendo uma ampla gama de condigdes de —_funeionamento (Madoni, 1994a), confirmou as observagées anteriores permitiu a caracterizagiio de alguns grupos funcionais de ciliados ¢ da sua relagio com os factores fisico- 16 Boletim de Biotecnologia quimicos prevalecentes no tanque de arejamento ¢ com o funcionamento da estagao, 2. Os Protozoarios nas lamas activadas 2.1, Fiagelados Os pequenos _flagelados heterotréficos entram continuamente com 0 afluente, onde se encontram em grandes quantidades. Alimentam- se de bactérias dispersas na fracedo liquida, © com 0 tempo sio substitudos pelos _—_ciliados bacteriéfagos, quer devido a competigio que estabelecem com aqueles, quer por serem sujeitos a predagdo pelos ciliados carnivores. ‘Nas lamas activadas aparecem em densidades menores do que 5x10 por litro (isto € menos do que 10 individuos contados na diagonal da Camara de Fuchs-Rosenthal). A sua presenca em elevadas densidades indica um decréscimo da efi depurativa, geralmente devida a um deficiente arejamento das lamas, a uma carga demasiado alta ou ainda 2 entrada de substincias em vias de fermentago (Tabela 1). Quando atingem nimeros da ordem dos 100 na diagonal da Camara de Fuchs- Rosenthal, isto é, densidades a partir dos 5x10" individuos por litro, so mnsiderados dominantes na amostra em questio. Os flagelados maiores, Eugiena ¢ Peranema, si0 pouco frequentes nas lamas activadas ¢ a sua presenga esta ge associada A entrada de liquido com baixa carga organica, 2.2, Ciliados nadadores Os ciliados —_nadadores bacteri6fagos so muito abundantes na fase inicial do funcionamento da estagéo, dominando entdo 0 tanque de arejamento (Figura 2). Os flocos comegam a formar-se e 0s ciliados sésseis, filtrdores muito mais ieientes. do que os ciliados Figura 3. Colpidium sp, Ciliado adador. Observagio microszdpica com ‘icrtsmo (ampliago: 200), nadadores, ganham a competic pelas bactérias dispersas na frac¢io liquida, havendo, por isso, uma substituigo gradual destes sltimos. Quando os ciliados nadadores sto dominantes, a qualidade do efluente produzido &, geralmente m&; Curds & Cockburn (1970b) associam-nos a elevadas no tanque de arejamento, Os pequenos ciliados, como Colpidium (Figura 3), Cyelidium, Tetrahymena ¢ Uronema, dominam a microfauna quando a permanéncia no tanque de arejamento é muito breve ou quando ‘a oxigenagdo é deficiente (Tabela 1) estes pequenos ciliados precisam de clevadas densidades bacterianas para sobreviver, mas, por outro lado, apresentam maior resistencia 3 caréncia de oxigénio ou 3 introdugio de compostos téxicos do que out componentes da microfauna. 2.3, Ciliados méveis de fundo e ciliados séss Sto. estes dois grupos geralmente mpartilham a domindncia da microfauna nas lamas activadas. Como ocupam diferentes nichos ecoldgicos. nao hé entre eles competiggo © a convivéncia ¢ possivel, apesar da relagio entre as suas abundincias variar com a carga do afluente; os méveis de fundo, de que sio exemplos as espécies Chilodonella uncinata, Aspidisca cicada, Aspidisca lynceus (Figura 4), Euplotes affinis ¢ Euplotes moebiusiBiotecnologia Ambiental tendem a apresentar uma diminuicao das suas densidades na presenga de elevada carga organica, apresentando (0 organismos —sésseis__ maior resisténcia, 24. iados sésseis Quando sé 0s ciliados sésseis so dominantes no tanque de arejamento, a situagdo € diferente da anterior (Tabela 1), e varidvel com a espécie cu espécies presentes. Trés espécies. do género Opercularia sio frequentes nas lamas activadas: 0. coarcata, 0. microdiscus ¢ O. minima, ©, se dominam a microfauna, so geralmente indicadoras de elevados CBOfs do afluente ou cargas demasiado elevadas no tanque de arejamento (Curds et al.. 1968, Curds & Cockburn, 1970b Esteban et al. 1991); 0. coarcata pode ser a tinica espécie presente em estagdes que fwatam esgotos__contendo sais, metilicos. A simples presenca destas espécies, s6 por si, ndo € contudo indicadora de mau funcionamento da estagio ou baixa qualidade do efluente Vorticella microstoma (Figura 5) 6 uma espécie frequente na primeira fase de colonizagio das lamas activadas sendo—_geralmente substitufda por V. convallaria (Figura 6). Vorticella microstoma € boa indicadora de caréncia de oxigénio no tanque de arejamento (Esteban et igura 4, Aspudisca cicada, cilisdo ével de fondo Figura 5, Voricella microtioma,cliads séssil. Observagio mic contrast de fase (ammliagl0: 200%). al, 1990, 1991; Madoni & Antonietti, 1984) e a alterincia entre as duas espécies nas lamas activadas indica geralmente uma Gristica e prolongada reducio da concentragio de Oxigénio nc tanque de arejamento, V. convailaria é muito menos resistente 2 deplegio em oxigénio. 2.5. Amibas com teca Trés géneros so frequentes nas lamas activadas: Arcella, (Figura 7) Difflugia e Euglypha. Indicadoras de boas condigdes de nitrificaao (Drakides, 1978; Sasahara & Ogawa, 1983, Madoni, 1994a, 1994b), as amibas com teca aparecem sobretudo em lamas com grandes tempos de retengo, pouca matéria orginica © celevada concentragio de oxigénio no tanque de arejamento. Figura 6, Voricella convalaria cilisdo séssil Figura 7. Arcella, amiba com tea. 3. indice Bidtico das Lamas 0 Indice Bistico das Lamas (SBI, “Sludge Biotic Index") surge com Madoni (Madoni, 19942), inspirado no “Extended Biotic index" de Woodiwiss (1980). © método baseia- se na abundancia e na diversidade ‘specifica da comunidade nas diferentes sensibilidades reveladas por alguns grupos da microfauna aos factores fisico-quimicos prevalecentes no sistema, O Indice € calculado com base numa tabela da duas entradas (Tabela 2); 0 ingresso vertical € feito considerando-se a riqueza especifica da amostra ¢ 0 rnuimero de pequenos flagelados na da Camara de Fuchs- Rosenthal, Na coluna da direita estio distribuidos os diversos grupos da microfauna associados. uma decrescente qualidade biolégica das lamas, Para o ingresso horizontal ¢ tomado em considerac3o 0 grupo dominante no tanque de arejamento e, depois, a densidade total da microfauna (maior ou menor do que 10° individuos por litro); se dois ou mais grupos compartiham dominancia da amostra, escolhe-se 0 grupo que ocupa a posigio mais baixa na tabela, © valor do {indice Bistico das Lamas € — determinado pela imtersecgio da coluna ¢ da linha seleccionadas, obtendo-se um valor numérico entre 1 € 10; os valores do {ndice Biolégico das Lamas sdo Boletim de Biotecnologia 17Biotecnologia Ambiental Tabela 2 Tabela de duas entradas para 0 célculo do indice Biético das Lamas ("Sludge Biotic Index’, SBI). S - numero de espécies da microfauna (excluindo os flagelados); F - nimero de pequenos flagelados na diagonal da Camara de Fuchs-Rosenthal; * Opercularia spp e Vorticella microstoma néo dominantes. (segundo Madoni, 1994a) RUPO DENSIDADE S>10 | 8sS<10 | S[-[ele[>[: ciuaoos sésseiss | 210° e{7[elel7]s][e6|s« eo <10° 8 6 7 , 5 6 4 5 | 3 io | 4 2 Opercularia spp eee a 2 y a J al <1 | 8 4 8 3 4 | 2 aaa ea Vorticella microstoma oy lease 4s a 4 g i | [ae [Tefsl-lzle|[7l2/e CILIADOS 210° 5 3 4 2 3 f 4] 2 ° eS <10° 4 2 6 1 2 oO 1 ° PEQUENOS 210° 4 3 | 2 1 | FLAGELADOS . ~ 1 Leo ei : z ot qualidade biol6gica das lamas que permitem, por sua vez, quatro diferentes graus de eficiéncia pare avaliagio do funcionamento do sistema (Tabela 3), A aplicabilidade do método as stages de tratamento biolégico de aguas residuais por lamas activadas lestada, antes da sua apresentagiio, em 45 _estagdes, durante um ano (Madoni, 1994a), ‘Uma das suas vantagens reside 10 facto da avaliagdo ser feita através de valores numéricos, © que permite 20 operador comparar a qualidade bioldgica das lamas no tanque de arejamento ao longo do tempo, € consequentemente as condigoes operacionais da estagdo em causa. Nao deve esquecer-se, contudo, 0 facto do indice Biol6gico das Lamas 1 Boietim de Biotecnologia estagio a0 nivel do tanque de arejamento, no permitindo inferir sobre a qualidade do tratamento a0 nivel do tanque de sedimentagi secundéria, por exemplo, mesmo se eventuais problemas a este nivel a causar variagSes na esirutura da microfauna (Madoni, 19946). A microfauna utilizada neste indice tem uma distribuigo cosmopolita permitindo a sua utilizagdo em estagdes de tratamento biolégico de Aguas residuais por lamas activadas de diferentes sreas eograficas. Agradecimentos Os autores agradecem financiamento da Junta Nacional de Investigagio —_Cientifica a Bolsa Praxis XXI BD/SO80/95 para Ana Nicolau, Bibliografia Curds, C. R, 1978, Protozoa. Ecological Aspects Used Water Treaament, Curds. CR. & H. A. Hawkes (Eds), Academic Press pp: 203 » 268 Curds, C. R. & A. Cockburn, 1970, Protozoa in biological sewage-tretment processes, I. 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S., 1980, Biological Proposta de sécios colectivos A Sociedade Portuguesa de Biotecnologia aémite sécios colectivos que, além de Feceberem o boletim da SPBT. podem utiiza-lo para divulgar os seus produtos ou ublicar noticias intemas, inserir antincios, inserever pessoas gratuitamente ov 2 Dregos especiais nas realizapbes da SPBT e auferir de redugées nas exposigdes de Dodutos © equipamentos cm congressos e simpésios organizades pele sociedade. Podem utilizar a lista de endregos de sécios para comumicagSes ditectas, A quota anual é de 20 000800, Declaro que desejo entrar para sécio colective da Sociedade Portuguese de Biotecnologia Instituigdo ou Firma Morada para cobranga de quotas _ (Assinatura) ane Boletim de Biotecnologia 19