5.1.

LABORATORIO:
5.1.1. BIOLOGIA Y BIOECOLOGIA DE LA ESPECIE:
5.1.1.1. TAXONOMIA: Clasificacin Cientfica

Reino: Animalia
Filo: Arthropoda
Subfilo: Crustacea
Clase: Malacostraca
Orden: Decapoda
Suborden: Dendrobranchiat
a
Familia: Penaeidae
Gnero: Penaeus
Especie: P. vannamei
Nombre binomial
Litopenaeus vannamei (Boone,
1931)

5.1.1.2. ANATOMIA Y MORFOLOGIA:

5.1.1.2.1. ANATOMIA GENERAL
El cuerpo de un langostino est dividido en dos partes, el
caparazn, que es el escudo sobre el cefalotrax y el abdomen.
El caparazn es conocido como la cabeza y el abdomen como
la cola. El caparazn contiene la cabeza y los rganos vitales,
incluyendo el estmago. La cresta en lo alto de la cabeza y el
rostrum que en muchas especies se extiende por delante de la
cabeza son estructuras muy importantes para distinguir
especies. El abdomen est dividido en seis segmentos, el
ltimo segmento termina en una estructura puntiaguda llamada
telson. (Anexo 1)

5.1.1.2.2. MORFOLOGIA EXTERNA

 Penaeus vannamei (Boone, 1031) Una de las caractersticas
de los crustceos decpodos, y por lo tanto de los langostinos,
es que los 6 segmentos ceflicos y los 8 torcicos estn unidos
en un solo bloque, protegido por un caparazn rgido, en el que
se encuentran 13 pares de apndices: los 5 ceflicos (2 antena
y 3 mandbulas) y los 8 torcicos (3 maxilpedos y 5
pereipodos). En el cefalotrax encontramos los 2 ojos,
pedunculados y mviles, el rostro, bien desarrollado y con
dientes en sus mrgenes superior e inferior, las 2 antnulas,
con dos flagelos largos cada una, las 2 antenas, con su
escafocerito bien desarrollado, las piezas bucales, mandbulas
y maxilpedos (pediformes el 2 y 3 par) y los pereipodos, con
el 1 y 2 par acabados en pinzas (ms largo el 2 par y con una
pinza ms robusta) y los otros 3 pares acabados en una ua.
(Anexo 2) 10

5.1.1.2.3. MORFOLOGIA INTERNA (Bibliografa D)

Los langostinos peneidos poseen un sistema circulatorio

abierto con un corazn muscular dorsal localizado en el
cefalotrax. Se denomina hemolinfa a la sangre y a las clulas
de la sangre y hemocitos respectivamente. (Anexo 3) Los vasos
sanguneos (con vlvulas) dejan el corazn y se ramifican
varias veces antes de que la hemolinfa llegue a los senos
sanguneos ubicados por todo el cuerpo y donde el intercambio
de gases se produce. Despus de pasar por las branquias la
hemolinfa retorna al corazn por medio de tres aberturas sin
vlvulas ubicadas en las paredes del corazn. Gran parte del
cefalotrax est ocupado por el hepatopncreas. Esta glndula
digestiva est formada por divertculos del intestino. Los
espacios entre los tbulos son senos de hemolinfa. La principal
funcin del hepatopncreas es la absorcin de nutrientes,
 almacenaje de lpidos y produccin de enzimas digestivas. Uno
de los vasos sanguneos que dejan el corazn termina en el
rgano linfoide, en donde la hemolinfa es filtrada. Este rgano
est localizado ventro-anteriormente al hepatopncreas. Los
hemocitos son producidos en el tejido hematopoytico. Este
rgano est disperso en el cefalotrax y mayormente presente
alrededor del estmago y en la base de los maxlipedos.

5.1.1.2.4. CICLO VITAL (Bibliografa 1) (Bibliografa 2)

El ciclo vital de un peneido tpico como las especies que se

hallan en Ecuador, Brasil, costa atlntica de Estados Unidos y
Mxico; costa pacfica de Per, y Asia se muestra en el - Anexo
4. La maduracin y reproduccin de estas especies se realiza
en aguas profundas, entre 15 y 60m; las hembras fecundadas
ponen huevos en cantidades variables de acuerdo con la
especie (entre 10.000 y 1.000.000). Al cabo de un tiempo, estos
eclosionan en una serie de estadios denominados postlarvas,
cada uno de los cuales tiene caractersticas morfolgicas
determinadas y diferentes requerimientos nutricionales.

11 a. Desarrollo larvario El siguiente cuadro muestra los

distintos estadios larvales, forma de alimentacin y
comportamiento. (Anexo 4)
ESTADIO ALIMENTACION COMPORTAMIENT
PRINCIPAL O
Huevo - Flota, tendencia a
depositarse en el
fondo
Nauplius Sus propias Locomocin por
reservas antenas,
planctnicas
Protozoea Filoplancton Planctnicas,
natacin por
apndices ceflicos
Mysis Zooplancton Planctnicas,
natacin por
apndices del trax
Postlarvas Zooplancton y Los primeros
posteriormente estadios son
alimentacin planctnicos, luego
omnvora de hbitos
bentnicos,
natacin por
plepodos

11 a. Desarrollo larvario

El siguiente cuadro muestra los distintos estadios larvales,

forma de alimentacin y comportamiento. (Anexo 5)

Como se puede observar en el - Anexo 4, las postlarvas y/o

juveniles migran hacia la costa, a aguas menos profundas y de
baja salininidad: por ejemplo, zonas de manglar, esteros,
lagunas, ricas en materia orgnica, donde crecen hasta
alcanzar estadios de adulto o pre-adulto migrando luego a mar
abierto para madurar y reproducirse. El siguiente cuadro
muestra los distintos estadios larvales y sus principales
caractersticas.
ESTADIO PRINCIPALES
CARACTERISTICAS
Huevo -
Nauplius Presenta un cuerpo periforme con tres
apndices. Primeras antenas, segundas
antenas y mandbulas con funcin
natatoria. Presenta fototactismo positivo
y, dependiendo de la especie que se
trate, comprende de 5 a 6 sub-estados,
Miden desde 0,32mm de longitud en
nauplio I y hasta 0,58mm en nauplio VI
Protozoea Presenta 3 subestados que se
caracterizan por cambios morfolgicos y
sus respectivas mudas. El cuerpo se
divide en dos partes principalmente: un
caparazn con forma hexagonal irregular
y la porcin posterior dividida en un trax
con seis segmentos y un abdomen no
segmentado.
Mysis El cuerpo se alarga y adquiere una
apariencia similar a la post-larva. Uno de
los rasgos particulares del estado de
mysis es la forma de nadar. Esta se
produce en su mayor parte con la
cabeza, hacia abajo y avanzando hacia
atrs, con el abdomen hacia adelante.
Postlarvas El paso de misys a post-larva va
acompaado de cambios poco notorios.
Lo ms importante es la desaparicin de
los exopoditos de los pereipodos y el
desarrollo de setas en los plepodos,
que su vez se convierten en los
apndides natatorias.
MUDA (Bibliografa 1)

El hecho importante que relaciona la muda con el

crecimiento es que cuando el animal pierde su viejo esqueleto,
inmediatamente comienza a absorber agua aumentando su
volumen con lo cual la nueva cutcula se expande; luego el
volumen ocupado por el agua es reemplazado por tejidos y en
esa forma el langostino crece. El perodo de muda es crtico,
porque el langostino se encuentra desprotegido, es fcil presa
de predadores, siendo sta la etapa en la cual se observa una
mayor mortalidad. Drach en 1939, determin los estadios de
muda de Crustceos Decpodos Braquiuros, sobre la base de
cambios tegumentarios, extendiendo este trabajo a todos los
decpodos en 1944, dividiendo el ciclo en 4 estadios

ESTADIOS CAMBIOS
TEGUMENTARIOS
Post-muda Perodo de turgencia
debido a la absorcin de
agua; los animales no se
alimentan.
Intermuda Perodo de actividad
secretora de la epidermis,
crecimiento de los tejidos, el
animal se alimenta
Premuda Se inicia la reabsorcin
del antiguo exoesqueleto y
comienza a formarse una
nueva cutcula, el animal no
se alimenta.
Exuviacin o ecdisis Prdida del viejo
 esqueleto.
En general los animales ms pequeos tienen un ciclo de
muda ms breve por acortamiento del perodo de intermuda.
Este fenmeno ha sido mencionado tambin para otras
especies de langostinos peneidos y relacionado no slo con
factores internos, sino tambin con factores ambientales como
la temperatura y el fotoperiodo.

5.1.1.2.5. DISTRIBUCIN GEOGRAFICA

Esta especie se encuentra distribuida desde el golfo de

California, atravesando las aguas costeras del Ocano Pacfico,
hasta Tumbes, Per

5.1.1.2.6. PARAMETROS FISICOS QUIMICOS (Bibliografa 1)

El langostino para reproducirse y desarrollarse

adecuadamente necesita aguas cuyos parmetros fsicos y
qumicos flucten dentro los rangos siguientes.

5.1.1.2.7. PARAMETROS FISICOS:

- Temperatura: 25 35C.
- Transparencia: 30 45 cm
- Color: Verde Claro

5.1.1.2.8. PARAMETROS QUIMICOS

- Alcalinidad: >80,0 ppm
- Amonio: <0,10ppm
- pH: 7,0 8,0
- Oxgeno disuelto: >4,0 ppm
- Salinidad: 28 35

5.1.1. ANALISIS MICROBIOLOGICOS

Los anlisis microbiolgicos se basan habitualmente en el cultivo y

recuento de los microorganismos. Para ello es necesario preparar y
 conservar adecuadamente los medios de cultivo, realizar una siembra y
observar los resultados; una tcnica habitual en microbiologa es la
tincin. Hay que recordar que para trabajar con microorganismos
potencialmente peligrosos deben utilizarse las cabinas de seguridad
biolgica.

5.1.1.1. Los medios de cultivo:

Dado el pequeo tamao de los microorganismos, la cantidad de

informacin que puede obtenerse de un individuo es muy limitada.
Por ello es necesario el estudio de poblaciones, que contienen
miles o millones de individuos. Estas poblaciones se obtienen al
hacer crecer los microorganismos bajo condiciones ms o menos
bien definidas, como cultivos.

El estudio de estos cultivos permite detectar la presencia de

microorganismos en una muestra y su posterior identificacin,
efectuar pruebas de susceptibilidad de estos microorganismos a
antibiticos o a antispticos concretos, etc.

El cultivo es el crecimiento de poblaciones microbianas en

ambientes artificiales (medios de cultivo) y bajo condiciones de
laboratorio (temperatura, humedad, presin de oxgeno y pH
ptimos para el crecimiento del microorganismo concreto y sin
presencia de microorganismos contaminantes).

Se entiende por medio de cultivo la mezcla de sustancias,

naturales, sintticas o ambas, que permite el crecimiento y la
reproduccin de microorganismos o bien que permite mantener su
viabilidad.

Los medios de cultivo son otro de los productos que encontraremos

en los laboratorios de anlisis clnicos. La mayora de ellos pueden
prepararse en el propio laboratorio, pero cada vez es ms habitual
que se adquieran preparados listos para su uso.
5.1.1.2. Tipos de medios de cultivo.

Hay medios de cultivo generales y medios de cultivo selectivos:

Medios de cultivo generales. Permiten el crecimiento de una gran

variedad de microorganismos. Pertenecen a esta categora las
infusiones de extractos de carne y peptona, una mezcla de
composicin similar a la de los lquidos orgnicos, que se utiliza
para muchas bacterias patgenas (causantes de enfermedades).

Medios de cultivo selectivos. Favorecen el crecimiento de un

gnero o de una especie concreta de microorganismos. Son muy
tiles para aislar ciertos microorganismos a partir de una poblacin
mixta. Por ejemplo, si a un cultivo se le aade un inhibidor del
crecimiento de bacterias Gram +, como el cristal violeta, nos
aseguramos de que en ese cultivo slo van a crecer bacterias
Gram-.

Pertenecen a esta categora el caldo lactosa bilis verde brillante o

el agar Salmonella-Shiwella.

Segn el procedimiento que se utiliza para favorecer el

crecimiento de microorganismos concretos, podemos distinguir
entre medios de cultivo diferenciales y medios de enriquecimiento.

- Medios de cultivo diferenciales. Utilizan propiedades

diferenciales del crecimiento microbiano. El medio de cultivo
con agar sangre diferencia las bacterias hemolticas de las no
hemolticas, el medio de cultivo de McConkey diferencia a las
que son lactosa (+) de los lactosa (-).

- Medios de enriquecimiento. Deberan llamarse medios

enriquecidos porque lo que se hace es aadir aditivos, que
favorecen el crecimiento de un grupo determinado de
microorganismos, y neutralizantes que inhiben el crecimiento
 de otros microorganismos que interferiran con el que estamos
buscando. Se puede adicionar sangre, suero o extractos de
tejidos animales o de plantas. Por ejemplo el caldo selenito
cistina o el caldo agar sangre.

5.1.2. ANALISIS MICROBIOLOGICOS EN AGUA Y SUELO DE ESTANQUE

DE CULTIVO.

Los sistemas integrados de plantas de tratamiento de aguas servidas y

acuicultura son relativamente recientes y su desarrollo es promovido a
nivel mundial por el PNUD y el Banco Mundial, especialmente en pases
en desarrollo como el Per, ya que representan alternativas de bajo
costo para el tratamiento de las aguas servidas y la produccin de
alimentos. En la reunin de expertos en la materia, efectuada en
diciembre de 1988 en Calcuta, India, se formularon las siguientes
conclusiones respecto a esta tecnologa:

a) Los sistemas integrados, si se disean y administran

adecuadamente, representan una alternativa viable de bajo costo en
comparacin con las tecnologas convencionales.
b) La produccin neta de 5 a 7 t/ha/ao de pescado se reporta en
climas tropicales donde la produccin anual es continua y no se
recurre a la alimentacin suplementaria ni a la aeracin.
c) En climas templados se obtienen tasas similares de produccin de 15
a 20 kg/ha/da durante el perodo estival.
d) Aun cuando las lagunas de estabilizacin suelen disearse para
tratar cargas orgnicas de 200 a 300 kg de DBO/ha/da, la
acuicultura opera con niveles muchos menores del orden de 10 a 20
kg de DBO/ha/da para garantizar un adecuado equilibrio entre la
productividad, la demanda de oxgeno y el crecimiento de los peces.
Esta diferencia de magnitud en el nivel de carga orgnica manejada
por los sistemas de tratamiento de agua y acuicultura se logra
mediante prcticas adecuadas de operacin a fin de no perjudicar el
alcance de los objetivos de ninguna de estas actividades.
 e) En general, se utilizan tres tipos de sistemas integrados:
Un solo estanque de peces que recibe aguas servidas crudas
directamente.
Estanques de crianza precedidos por algn tratamiento primario.
Estanques de crianza donde se vierten aguas residuales tratadas
a las que se les ha eliminado agentes patgenos presentes en el
crudo.

5.1.3. ANALISIS POR PCR PARA DETECCION DE AGENTES PATOGENOS

EN LANGOSTINO DE CULTIVO
Los estudios en Sanidad Acucola, estn orientados a implementar
proyectos de investigacin cientfica, bsica y aplicada, para solucionar
los diversos problemas patolgicos que enfrenta el sector acucola y
brindar servicios de diagnstico eficiente, confiables y de calidad en
materia de sanidad en organismos acuticos.

Diagnstico de enfermedades virales y bacterianas mediante:

o Nested PCR para deteccin del Virus de la Mancha Blanca (WSV).

o PCR para deteccin del Virus de la Necrosis Hipodrmica y
Hematopoytica Infecciosa (IHHNV).
o PCR para deteccin de la Bacteria de la Necrosis del
Hepatopncreas (NHPB)
o PCR para deteccin de Baculovirus penaei (BP).
o RT-PCR para deteccin del Virus de la Cabeza Amarilla (YHV),
Virus de la Mionecrosis Infecciosa (IMNV), Penaeus
vannamei Nodavirus (PvNV) y Virus del Sndrome de Taura (TSV).

5.1.4. ANALISIS DE SENSIBILIDAD ANTIBACTERIANA.

Prueba de sensibilidad a los antimicrobianos (MIQ):
En las pocas actuales, esto cobra una mayor importancia, al observar
un incremento en la resistencia a los antibiticos por parte de las
bacterias

La finalidad primordial de una PSA, es la de predecir cmo se

comportar una cepa bacteriana al ser confrontada a un antibitico en
el paciente. Desde este punto de vista, un resultado de "sensible", se
interpreta como que es altamente probable que la bacteria sea
eliminada y que el paciente responde en forma adecuada a la terapia
con ese antibitico.

Un resultado "resistente" nos indica que el tratamiento de un proceso

infeccioso con un antibitico en especial, fallar y que la bacteria no
ser eliminada por dicha terapia antimicrobiana.

Debemos ser claros en el hecho de que una PSA es una prueba que
intenta predecir lo que puede pasar con el paciente y su respuesta a un
proceso infeccioso, ayudado por la administracin de un antibitico.
Esta prueba es solo una prediccin de un hecho que est influenciado
por una serie de factores extra. En este proceso, no se toman en cuenta
factores como aquellos derivados del proceso de preparacin de un
antibitico, el de importacin de dicho antibitico, el de la dosificacin y
preparacin para la administracin al paciente y el aspecto propio del
individuo con sus niveles de protenas plasmticas, as como la
adecuada o no respuesta inmune que muestre el sujeto en estudio.

El reporte de sensibilidad que se realiza en un laboratorio

microbiolgico debe ser una gua para que el clnico escoja la terapia
antimicrobiana ms adecuada y como gua que es, debe ser lo ms
fidedigna posible. Al clnico le compete escoger el antibitico basado en
esta gua pero sopesando los factores propios del paciente y el cuadro
clnico que presente.
Adicional a esto, la PSA, puede ser usada para confirmar o negar la
terapia hecha "a priori", antes de un reporte de sensibilidad
antimicrobiana. Esta escogencia "a priori" de un antibitico debe ser
apoyada en los patrones de sensibilidad propios del centro de trabajo y
en el tipo de muestra de donde se sospeche se encuentra el foco
infeccioso.

Hay que recordar, que los laboratorios microbiolgicos, pueden efectuar

pruebas de susceptibilidad antimicrobiana cuando internacionalmente,
se encuentren mtodos aprobados y sea posible comparar los
resultados obtenidos con los estndares internacionales. Si no existen
estas reglas internacionales o estndares, la PSA no debe ni puede
realizarse.